异土木香内酯及土木香内酯的结构修饰研究

对土木香根中两个主要倍半萜内酯-异土木香内酯(1)和土木香内酯(2)进行结构修饰,研究结构修饰产物的体外抑制人肝癌细胞(HepG2)增殖的活性,并进行构效关系的研究.经结构修饰得到4,15β-环氧异土木香内酯(1b)、5α,6α-环氧土木香内酯(2b)、13α-甲氧基甲基土木香内酯(2d)等11个化合物,其中产物2d未见有文献报道.产物1b、2b对HepG2细胞的抑制作用均强于母体化合物,其他化合物的抑制活性均弱于母体化合物.推断11,13-去氢内酯基团是该类倍半萜内酯体外抑制HepG2肿瘤细胞增殖活性必需的活性基团,环氧基团的引入对化合物的抑制HepG2肿瘤细胞增殖活性具有促进作用.     

大孔吸附树脂分离纯化党参中苍术内酯Ⅰ和苍术内酯Ⅱ的工艺研究

采用大孔吸附树脂分离纯化党参药材中的主要活性成分苍术内酯Ⅰ和苍术内酯Ⅱ。以吸附量、吸附率、解吸附量、解吸附率为指标,筛选出较好的DM130型大孔树脂,并对苍术内酯Ⅰ和苍术内酯Ⅱ分离纯化的工艺条件进行了研究。结果表明用DM130型大孔吸附树脂对党参中的苍术内酯Ⅰ和苍术内酯Ⅱ进行分离纯化的最佳工艺条件为:30℃,供试品上样液的浓度为0.125 g/m L,上样液体积为200 m L,上样液流速为6 m L/min,95%乙醇作洗脱剂,洗脱剂流速为4 m L/min。经过纯化后,苍术内酯Ⅰ和苍术内酯Ⅱ的含量分别增加了32.3倍和25.6倍,表明DM130型大孔吸附树脂对党参中的苍术内酯Ⅰ和苍术内酯Ⅱ进行分离纯化的方法可行、有效。     

银杏雄株叶片萜内酯类化合物的HPLC检测分析

目的:银杏叶萜内酯类化合物具重要的药用与保健开发利用价值.方法:在银杏最佳采叶期随机采取银杏叶片,经超声波70%乙醇水溶液提取、石油醚与正己烷萃取,再经ADS-17大孔树脂柱与酸性氧化铝柱纯化,以水∶甲醇∶四氢呋喃=7∶2∶1(V/V)为流动相,采用Waters ODS C18 柱 (250mm ×416mm,5μm)进行HPLC分析:0.6ml/min流速、219nm检测波长、26℃检测温度、15μl进样量.结果: GA、GB、GC和BB分别在23～460μg/ml、21～420μg/ml、22～440μg/ml和27～540μg/ml范围内呈线性相关,最小检出量0.5μg,回收率90.74%～102.38%,RSD 1.63%～4.2%.GBE3得率1%,GA 、GB、 GC 、BB占GBE3的12 55%,超过GBE761的6% 国际标准.结论:该HPLC检测分析技术与方法适用于银杏叶片萜内酯类化合物的提取、纯化和检测.     

紫玉簪活性甾体皂苷的制备工艺研究

采用HPLC技术,对紫玉簪中具有抑制5α-还原酶、抗白色念珠菌的活性甾体皂苷进行了制备方法研究。经单因素考察、结合正交实验,确定甾体皂苷最佳提取方法为:紫玉簪根加14倍量水,回流提取2次,每次0.5h,得皂苷提取物。进一步经单因素考察,确定最佳纯化方法为:皂苷提取物按1∶20的量上D101大孔树脂柱,径高比为1∶12,先用40%乙醇洗脱10 BV(床体积)除去水溶性杂质后,80%乙醇洗脱12 BV得粗皂苷;粗皂苷再经D101柱层析,50%乙醇洗脱3 BV后,70%乙醇洗脱3 BV即得精制皂苷。所得精制皂苷纯度高、活性好,其中单一甾体皂苷含量即大于50%,具有显著抑制5α-还原酶活性(IC50=17.3μg/m L)以及抗白色念珠菌作用(IC50=29.1μg/m L)。     

注射用高纯度蛋黄卵磷脂制备新工艺的研究

本文探索建立了一条以新鲜蛋黄为原料,以乙醇为唯一提取溶剂,制备高纯度注射用蛋黄卵磷脂的新工艺。首先,用4倍重量的96%(v/v)乙醇作为沉淀剂将新鲜蛋黄中的蛋白质沉淀为滤饼,得到初级提取液;然后,再用4倍重量的96%(v/v)乙醇对滤饼抽提3次,提取残余卵磷脂,得到次级提取液。合并提取液,置9℃下静置分层,除去大部分蛋黄油。所得上清液上硅胶柱,用86%(v/v)的乙醇作为洗脱剂,纯化蛋黄卵磷脂,经高效液相色谱检测纯度达98%。并对提取过程进行了优化,得到最佳工艺条件:35℃的96%乙醇溶液,添加量为1∶4(w/w)提取蛋黄液,180 rpm转速下搅拌10 min。抽滤后,用60℃的96%乙醇提取滤饼3次,料液比为1∶4,静置15 min。最佳工艺条件下,蛋黄卵磷脂的提取率可达93.38%。     

牡丹籽饼粕中芍药苷类成分及其大孔吸附树脂纯化研究

采用乙醇提取,树脂纯化,HPLC制备以及LC-MS和1H NMR鉴定,从牡丹籽粕的醇提物中分离纯化了4种主要成分,分别为6'-O-β-D-葡萄糖芍药内酯苷、芍药内酯苷、β-gentiobiosylpaeoniflorin和芍药苷。对大孔吸附树脂法纯化芍药苷类成分的条件进行了试验,从4类11种树脂中筛选出HPD-200A型大孔吸附树脂,其较优的吸附分离条件为:上样液浓度(芍药苷)8.0 mg/mL,上样体积为4.5倍床体积(BV),流速为1/16 BV/min,洗脱剂乙醇溶液浓度为50%(v/v),洗脱体积为4 BV,流速为1/16 BV/min。此条件下所得提取物中含芍药苷32.3%、芍药内酯苷16.5%、6'-O-β-D-葡萄糖芍药内酯苷8.02%、β-gentiobiosylpaeoniflorin 6.63%。     

土木香化学成分的研究

采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、制备高效液相、葡聚糖凝胶SephadexLH-20等方法进行分离纯化,根据光谱数据进行结构鉴定。从乙醇提取物中分离得到了8个化合物,分别鉴定为：异土木香内酯（1）,11,13-二氢异土木香内酯（2）,土木香内酯（3）,β-谷甾醇（4）,3-hydroxy-11,13-dihydroisoalantolactone（5）,macrophyllilae-toneE（6）,HIS-12-en-18-H-3-O-β-D-glucopyranoside（7）,caffeic acid anhydride（8）。化合物7和8系首次从该属植物中分离得到。     

超声波提取-树脂纯化多穗柯叶中甜味剂的工艺研究

以根皮苷和新橙皮苷二氢查尔酮(NHDC)纯度为指标,采用单因素和L9(34)正交设计,确定最佳超声波提取条件和AB-8树脂最佳纯化工艺。结果表明超声波最佳提取条件为:乙醇浓度为70%,固液比为1∶25,超声波时间为35 min;AB-8树脂最佳纯化工艺条件为:吸附流速为0.5 mL/min,洗脱乙醇浓度为90%,洗脱体积为1.875 BV,洗脱剂流速为1 mL/min。在此提取及纯化条件下,得到根皮苷的纯度为88.616%,新橙皮苷二氢查尔酮的纯度为71.823%。本提取及纯化方法简单可靠,有利于规模化利用多穗柯叶中的甜味剂。     

土木香和冷蒿中倍半萜内酯化合物抑制人乳腺癌细胞增殖活性及构-效关系研究

利用四唑盐(MTT)比色法检测菊科植物土木香和冷蒿中分离纯化的八种倍半萜内酯化合物对人乳腺癌细胞增殖活性的影响,探讨了倍半萜内酯化合物体外抑制人肿瘤细胞增殖作用以及化合物结构与活性之间的构-效关系.实验结果显示异土木香内酯和去氢-β-姜黄烯对人乳腺癌细胞的增殖均有明显的抑制作用,其他试验用倍半萜内酯即使在100 μmol/L的高浓度下,对人乳腺癌肿瘤细胞的增殖不显示抑制活性,倍半萜内酯化合物抑制人肿瘤细胞增殖活性与其直型和角型结构无关,不饱和内酯是抑制肿瘤细胞增殖活性的必需基团.     

利用大孔树脂同时制备穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯

采用大孔吸附树脂色谱法,以不同体积分数乙醇水溶液进行洗脱,分离富集穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯,并配以HPLC进行同步监控.结果表明,穿心莲中这2种主要有效成分分别得到了富集.40%乙醇水溶液洗去目标物以外的杂质后,45%乙醇洗脱液中富含穿心莲内酯,含量为46.99%,55%乙醇洗脱液中富含脱水穿心莲内酯,含量为79.74%.     

树脂法提取纯化白藜芦醇的新工艺研究

对虎杖中的白藜芦醇先酶解再提取,提取液采用一种新树脂进行纯化分离。考察了酶解物、不同树脂、上柱量、洗脱量等因素对白藜芦醇提取纯化的影响,确立了白藜芦醇的最佳提取纯化条件:用酿酒曲于35~40℃将原药材先酶解24 h,再用75%乙醇提取,提取液经回收乙醇后上XC-7大孔树脂柱,先加10%乙醇洗脱,然后再用60%乙醇洗脱并收集洗脱液,浓缩,真空干燥即可,产品中白藜芦醇含量达85%,白藜芦醇转化率达85%以上。     

虎眼万年青总皂苷的纯化及抗氧化活性研究

对虎眼万年青总皂苷的纯化工艺及抗氧化活性进行研究。以比吸附量和比洗脱量为指标,筛选大孔树脂型号,进一步优化工艺条件。结果表明,AB-8型大孔树脂对虎眼万年青总皂苷具有良好的吸附和洗脱效果,最佳纯化条件为药材量与树脂用量比不超过7∶1,用水、30%乙醇除杂,70%乙醇洗脱,在此条件下得到的虎眼万年青总皂苷纯度为55.18%。对纯化后虎眼万年青总皂苷的抗氧化活性进行研究,发现虎眼万年青总皂苷对羟自由基、超氧自由基阴离子和DPPH自由基的IC_(50)分别为2.43、2.28和0.05 mg/m L,具有良好的抗氧化活性。     

丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的提取与纯化工艺研究

建立了同时提取丹参中丹参酮ⅡA与丹酚酸B两种主要活性成分的方法及丹酚酸B的纯化工艺。以丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量为评价指标,采用正交实验优化提取工艺,所得最优提取工艺为:用8倍量70%乙醇回流提取3次,每次1 h。丹参酮ⅡA的提取率在90%以上,丹酚酸B的提取率在80%以上。提取物浸膏用热水溶解,过滤,滤液浓缩为1 m L含约0.5 g生药的溶液,取150 m L以2 BV/h的速度上D101大孔树脂柱;然后用6 BV的水洗脱,再以4 BV/h的流速用8 BV的30%乙醇洗脱除杂,以2 BV/h的流速10 BV60%乙醇富集,得到纯度大于75%丹酚酸B,验证实验表明该工艺稳定可行;最后经过洗涤和甲醇重结晶,得到纯度大于99%的丹酚酸B,总得率为2.86%(以干燥根茎计算)。     

提取纯化大黄素的工艺研究

目的:为虎杖中大黄素的提取纯化工艺提供实验依据。方法:以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等条件为因素,分别设计了三个水平,对大黄素的提取工艺进行正交试验。结果:大黄素的最佳提取工艺为虎杖药材加85%的乙醇回流提取3次,每次8倍量的溶剂提取1.5 h。结论:应用该提取工艺得到的大黄素的质量分数不低于10%     

赤牡妇炎胶囊中黄藤药材提取纯化工艺研究

考察赤牡妇炎胶囊中黄藤药材的提取纯化工艺的方法,优选最佳的提取纯化工艺条件。以盐酸巴马汀提取率为指标,采用单因素试验与正交试验优选黄藤提取工艺,以盐酸巴马汀提取率为指标,采用碱沉盐析法优选黄腾纯化工艺。黄藤最佳提取工艺为:加6倍量0.3%硫酸溶液浸泡提取3次,每次24 h,将提取液调pH至12,加氯化钠适量至盐析浓度为10%,静置24 h;最佳纯化工艺为:将黄藤粗提物粉碎,加30倍85%乙醇回流提取30 min,滤过,回收乙醇至15倍量,静置48 h,滤过,滤渣干燥即得。采用此工艺可达到黄藤药材提取纯化的目的,该方法操作简单,为其工业化生产应用奠定了科学的基础。     

欧亚旋覆花总黄酮提取与富集工艺研究

为研究欧亚旋覆花总黄酮的最佳提取与大孔吸附树脂富集工艺,采用不同溶剂、多种提取方法、L9(34)正交实验优化及AB-8大孔吸附树脂富集,结果表明其最佳提取工艺为用10倍量水为溶剂回流提取3次,每次1h,再结合AB-8大孔吸附树脂富集,以70%乙醇洗脱效果最佳,总黄酮回收率达90%,总黄酮含量达50%以上。此工艺简便可行,符合工业化生产要求。     

独一味总黄酮提取工艺优化

以独一味Lamiophlomis rotata总黄酮提取率为考察指标,比较乙醇回流法、水煎法、超声法三种提取方法优劣,并通过L9(34)正交试验优选出最佳提取条件。结果显示,乙醇回流法的黄酮提取率显著高于其他两种方法,其最佳提取工艺为用80%乙醇溶液回流提取3次,料液比为1∶50,提取时间25 min。     

复合酶预处理法对银杏叶总萜内酯提取率的影响

为研究复合酶预处理法对银杏叶总萜内酯浸出率的影响。本文采用单因素实验对银杏叶酶解预处理过程中的酶种类、酶用量、酶解时间、酶解温度、p H值五个关键因素进行探索,酶解后用20%乙醇-水溶液对银杏叶酶解液进行回流提取,LX-5型大孔吸附树脂对提取液进行纯化,浓缩干燥得银杏叶提取物产品。高效液相色谱法检测其总萜内酯含量。结果表明,银杏叶酶解预处理法的最佳工艺为:复合酶(纤维素酶∶果胶酶=1∶1),用量为银杏叶的1/300、酶解时间4.0 h、酶解温度50℃、初始p H值4.0。在该工艺条件下获得的银杏叶总萜内酯提取率为0.55%,银杏叶提取物中总萜内酯含量为8.96%,高于银杏叶提取物国际商务标准(总内酯含量≥6%)。说明复合酶预处理条件下银杏叶总萜内酯提取率高,研究为工业化生产高质量银杏叶提取物提供了理论依据。     

大孔吸附树脂分离富集苜蓿皂甙的研究

本项工作以对苜蓿皂甙的吸附量和解吸率为指标筛选大孔吸附树脂。研究结果表明,X-5吸附树脂具有较好的吸附性能和解吸效果。研究应用正交试验方法进一步对大孔吸附树脂分离纯化苜蓿皂甙的工艺条件进行试验分析,确定苜蓿皂甙分离富集的最佳操作条件为:上样浓度8mg/mL,色谱柱的径高比1∶7,药材-树脂比例1∶3;吸附完全后,先以水洗脱,除去杂质,再以50%乙醇洗脱,可以得到纯度较好的苜蓿皂甙。     

竹柏叶总黄酮不同提取方法比较

本研究采用正交试验设计分别优选回流提取和超声波提取竹柏叶总黄酮的最佳工艺条件。在单因素试验的基础上,以总黄酮得率为参考指标,选取液料比、乙醇体积分数、温度和时间4个影响因子,进行正交试验,分别确立回流提取和超声波提取最佳提取工艺条件。结果表明,回流提取优化工艺条件为:液料比30∶1(m L∶g),乙醇体积分数为70%,回流时间1.0 h,回流温度80℃;超声波提取优化工艺为:液料比25∶1(m L∶g),乙醇体积分数为70%,超声时间30 min,超声水浴温度60℃。两种提取方法的最终提取效果比较,回流提取的总黄酮得率为15.522%,超声波提取总黄酮得率为13.637%,回流提取法总黄酮得率高于超声波提取法。本实验结果为后续竹柏叶总黄酮的开发利用提供了参考。