静电场对苜蓿愈伤组织抗寒能力的影响

用正负高压静电场 (HVEF)处理苜蓿叶片来源的愈伤组织后 ,在4℃下暗培养。我们发现静电场处理可不同程度地提高愈伤组织的淀粉酶 ,过氧化物酶 ,和超氧化物岐化酶的活性和可溶性蛋白的含量 ,促进愈伤组织对冷害的防御能力。在冷处理过程中 ,细胞膜中饱和脂肪酸 (棕榈梭和硬脂酸 )和不饱和脂肪梭含量先升高然后降低 ,而高压静电场处理组的不饱和脂肪酸 (油酸、亚油酸、α -亚麻酸、β-亚麻酸 )含量高于对照组 ,脂肪酸不饱和指数 (UIFA)也高于对照组 ,这说明静电场处理可促进愈伤组织细胞抗寒能力提高。此外 ,丙二醛 (MDA)含量在静电场处理组低于对照组的测定结果也验证了前面的结果。     

高压静电场（HVEF）对苜蓿叶片愈伤组织诱导的影响

用一定强度的负高压静电场处理苜蓿叶片外值体,可显著促进外植体愈伤组织的发生和形成。处理组叶片愈伤化进程比对照组提前二天,愈伤组织诱导率平均提高了３６％,愈伤组织鲜重增长率提高了３３％,而且形成的愈伤组织质量较高。生理生化分析显示：静电场处理使愈伤组织诱导过程中培养物的可溶性蛋白质含量较对照高,且峰值来临较早;过氧化物酶（ＰＯＤ）,淀粉酶（Ａｍｙｌａｓｅ简称ＡＭＬ）,超氧物歧化酶（ＳＯＤ）活性和峰值也较对照组有不同程度的提高和提前,与观察结果一致。本文对其作用机理做了初步探讨。     

高压静电场对银杏愈伤组织生长的影响

银杏愈伤组织经１ ．０ｋＶ／ ｃｍ 强度的高压静电处理后, 愈伤组织生长速率提高, 超氧物歧化酶（ＳＯＤ） 活性和蛋白质及糖含量增加,过氧化物酶（ＰＯＤ） 和吲哚乙酸（ＩＡＡ） 氧化酶活性下降。实验表明,正高压静电场促进银杏愈伤组织细胞的生长,与ＨＶＥＦ 影响体内ＳＯＤ、ＰＯＤ 和ＩＡＡ 氧化酶活性以及蛋白质和糖含量的变化相关     

高压静电场(HVEF)对苜蓿叶片愈伤组织增殖的影响

苜蓿叶片来源的愈伤组织经一定的高压静电场处理后生长速率显著高于对照组,而且处理组愈伤组织的呼吸速率,元素吸收速率也高于对照组。进一步的测定结果比较表明：静电场处理组的愈伤组织中可溶性蛋白质含量、蔗糖酶活性高于对照组;而ＩＡＡ氧化酶和ＲＮＡ水解酶活性则低于对照组。显示静电场处理组愈伤组织有较高的代谢水平和旺盛的分裂生长状态。探讨了静电场处理剌激愈伤组织增殖的可能机理     

硝普纳处理对白刺愈伤组织膜脂过氧化及抗氧化酶活性的影响

以唐古特白刺（Nitraria tangutorum Bobr.）愈伤组织为材料,研究一氧化氮(NO)供体硝普钠（SNP）处理对其膜脂过氧化及抗氧化酶活性的影响。激光共聚焦扫描显微镜技术检测结果显示,白刺愈伤组织在SNP处理下细胞中NO含量显著增加,而N-硝基-L-精氨酸（L-NNA）处理使细胞中NO水平降低。低浓度SNP（10和25 μmol·L^-1）处理后,白刺愈伤组织中丙二醛（MDA）含量显著减少,而高浓度SNP（100 μmol·L^-1）和L-NNA(0.5 mmol·L^-1)处理后MDA含量明显高于对照。与对照比,SNP处理诱导白刺愈伤组织可溶性蛋白含量升高,却使脯氨酸含量减少。白刺愈伤组织在不同浓度SNP处理下过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性呈增加的变化趋势,低浓度SNP处理使过氧化物酶（POD）活性减弱,而50 μmol·L^-1 SNP处理后POD活性约增加为对照的119%。结果提示,外源NO可促进白刺愈伤组织可溶性蛋白的合成,诱导抗氧化酶活性升高,增强了白刺愈伤组织的抗氧化能力,从而表现出对细胞的保护作用。     

渗透胁迫对棉花根和下胚轴PM脂肪酸组分和ATPase的影响

实验结果表明：棉花根和下胚轴ＰＭ脂肪酸主要由棕榈酸（１６：０）,硬脂酸（１８：０）,亚油酸（１８：２）和亚麻酸（１８：３）组成。用－０．３ＭＰａ和－１．１ＭＰａ根际胁迫,棉花根和下胚轴ＰＭ饱和脂肪酸含量增加,不饱和脂肪酸和不饱和指数（ＩＵＦＡ）降低,这几种组分中棕榈酸含量上升较大,亚麻酸含量下降较大。胁迫处理使膜透性增高,脂肪酸组分发生变化,致使ＰＭ Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ,Ｃａ＾＋＋－ＡＴＰ－ａｓ     

尾巨桉不同类型愈伤组织抗性相关酶活性差异与不定芽分化关系研究

本实验以尾巨桉无性系32-29无菌苗的茎段为外植体,应用不同植物生物调节剂处理,诱导愈伤组织形成,分别测量4种类型愈伤组织的蛋白质含量及过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)等保护酶的指标活性,比较不同愈伤组织的酶活性强弱与不定芽分化的关系。结果表明:不同处理间愈伤组织诱导率差异达到极显著水平,且不同愈伤组织蛋白质含量及3种酶活力差异明显,POD、SOD活力高的愈伤组织不定芽诱导率也高,而PPO含量高的愈伤组织诱芽率低。     

尾叶桉的不同类型愈伤组织芽分化与某些相关生理生化指标的关系

切取8d苗龄的尾叶桉幼苗下胚轴,培养7d后愈伤组织的诱导率达100%。8周后,愈伤组织分化成褐色、白色和浅绿色3种类型。其中只有浅绿色愈伤组织能分化出不定芽,分化率达57%。浅绿色愈伤组织的过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和多酚氧化酶（PPO）的活性最高。除SOD外,浅绿色愈伤组织的POD、CAT和PPO活性与其他两类愈伤组织相比具有显著性差异（P〈0.05）。H2O2和丙二醛含量则是褐色愈伤组织的最高。     

荞麦愈伤组织分化与过氧化物酶活性及其同工酶关系的研究

在附加不同外源激素的培养基中,龙山荞的子叶愈伤组织表现出不同的分化状态：（１）不分化;（２）分化根;（３）分化芽;（４）分化全苗。四种愈伤组织的过氧化物酶活性的相对幽会为１：１．４７：５．９５：７．７８,并且过氧化物酶同工酶谱也存在明显差异。酶带４’为分化愈伤组织所特有;酶带２’为未分化和分化愈伤组织所共有;在分化根和未分化愈伤组织中缺少酶带１’;未分化愈伤组织比分化愈伤组织多出酶带３’。     

外源基因质粒pZFX2导入小麦半原生质体的研究

采用电脉冲法,转化大分子复合物ＩｇＧ－荧光素进入小麦部分酶解（１２０ｍｉｎ）愈伤组织的细胞即半原生质体中,在荧光显微镜下观察发现一些细胞有荧光发生,由此确定的较适宜脉冲转化条件如电场强度为２２５０－３０５０Ｖ／ｃｍ应用于转化外源基因ｐＺＦＸ２到小麦半原生质体,随后将其按愈伤组织的培养过程进行培养和抗ｋａｎａｍｙｃｉｎ筛选后获得成活愈伤组织团块,存活率为１１．３％￣１８．９％,这都说明已成功地将这两     

用RAPD法研究火炬松愈伤组织发生的遗传特性(英文)

体外培养对于植物的快速繁殖是非常有效的。和其它一些松果类硬木植物一样,火炬松的体外培养成功率却一直很低。本工作研究了不同的基本培养基和低温条件对于火炬松Ｊ－５６, Ｓ－１００３, ａｎｄ Ｅ－４４０等三个品系的成熟合子胚形成愈伤组织、分化出芽、成苗的影响。在不同的基本培养基条件下芽分化的程度差异很大。合子胚经过９－１２周培养,开始分化,形成具有器官发生的愈伤组织（Ｆｉｇ．２ａ）。分化后３周,开始诱导出芽（Ｆｉｇ．２ｂ）,芽的生长快慢不同（Ｆｉｇ．２ｃ,ｄ）。同一个愈伤组织上会生出几个芽来（Ｆｉｇ．２ｅ）。在添加有ＩＢＡ和ＢＡ的ＴＥ培养基上芽生长最快（Ｆｉｇ．１）。低温条件持续 １５天,能增加芽的数量和分化的程度（Ｔａｂｌｅ１）。上述培养基中增加ＧＡ３时表明,ＧＡ３对于根的诱导有决定性的作用。将９８株再生苗转移到特殊的混合土壤上;成活了７５株苗（Ｆｉｇ．２ｆ）。以这三种火炬松的再生苗尖为材料制备ＤＮＡ。用２０个引物进行ＲＡＰＤ分析,结果表明：这三种火炬松苗的扩增产物是相同的（Ｆｉｇ．２ｇ,ｈ＆ｉ）。这说明：用愈伤组织克隆植株的过程中没有引起植物遗传变异。     

银杏叶愈伤组织和叶中超氧化物歧化酶、总黄酮类抗氧化活性剂活性的比较分析

以银杏（Ginkgo biloba L.）叶片为外植体进行愈伤组织的诱导和培养,筛选到适合银杏叶片愈伤组织诱导和继代的培养基。以此愈伤组织为研究材料,比较了叶片愈伤组织和叶片中两种活性成分超氧化物歧化酶（SOD）、黄酮的活性差异。结果表明,银杏叶片愈伤组织中SOD的活性明显比叶片中的SOD活性高,同时愈伤组织中SOD同工酶谱带也比叶中有更多表达,但愈伤组织中总黄酮含量却比叶片中的含量低。实验证实SOD和黄酮类物质具有清除超氧阴离子的作用,表明银杏叶片愈伤组织和叶片中具有不同的占主导作用的抗氧化活性的机制。     

盐胁迫下胡杨愈伤组织生理生化特性

目的：探讨胡杨愈伤组织的耐盐性与生理生化指标的关系。方法：不同浓度NaCl胁迫下,对胡杨愈伤组织的丙二醛（MDA）含量、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶、超氧化物歧化酶同工酶酶谱进行研究。结果：随着盐浓度的增加,丙二醛（MDA）含量逐渐升高;从三种保护酶活性来看,过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性均呈先上升后下降的趋势,在70mmol/L NaCl胁迫下达到最高值,POD、CAT酶活分别为2748u/g．min和152u/g．min,分别比对照高104％和72％;超氧化物歧化酶（SOD）活性则呈先降低后稍上升的趋势,总体均比对照低。过氧化物酶同工酶的第2、3条酶带在70mmol/L NaCl胁迫下颜色最深,且酶带较宽;超氧化物歧化酶同工酶的第1条酶带仅在未经盐胁迫时存在,说明该酶带所代表的酶对盐很敏感;第4条酶带随盐胁迫浓度加大先消失后出现,可能是愈伤组织逐渐适应盐胁迫的结果。结论：经盐胁迫的胡杨愈伤组织中,POD和CAT酶主要起保护作用;结合同浓度盐胁迫下愈伤组织的形态观察,总体上看,胡杨愈伤组织能较好地耐受70mmol/L NaCl。     

几种植物体细胞胚胎发生标记蛋白的研究

利用ＳＤＳ一聚丙烯酰胺凝胶电泳对西洋参（ＰａｎａｘｑｕｌｎｇｕｅｆｏｌｉｕｓＬ．）、香雪兰（Ｆｒｅｅｓｎｉｒｅ－ｆｒａＫｌａｔｔ．）、光棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｏｌｅｐｔｏｐｈｙｌｌａＬ．）和草木气（Ｍｅｄｌ’ｃａｇｏｓｕａａｖｅｏｌｅｎｓＬ．）４种植物的胚性、非胚性愈伤组织及胚状体的可溶性蛋白组成进行了分析。结果表明,在这几种植物的胚性愈伤组织中均存在非胚性愈伤组织中没有的特异蛋白质。在西洋参和光棘豆中,这些胚性蛋白质在胚状体中也能检测到。另外,在香雪兰和光棘豆的非胚性愈伤组织中还发现了胚性愈伤组织中没有的蛋白质成分。特异性的胚性蛋白质可以作为分子标记来鉴别潜在的胚性培养物,跟踪胚胎发育,并为进一步探讨体细胞胚胎发生的基因调控和分子机制提供基础。     

干旱对棉花根和下胚轴质膜脂肪酸组分及其相关酶活性的影响(简报)

棉花根和下胚轴质膜（PM）脂肪酸主要由棕榈酸（16：0）、硬脂酸（18：0）、亚油酸（18：2）和亚麻酸（18：3）组成。干旱胁迫后,PM脂肪酸论和度增加,不饱和脂肪酸和不饱和指数（IUFA）降低。其中棕榈酸含量上升和亚麻酸含量下降较大,膜透性增高,质膜H －ATPase和Ca2 －ATPase活力降低,脂氧合酶（LOX）活性增强。     

水稻高脯氨酸愈伤组织变异体的选择及其耐盐性

以水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）品种双丰１号幼胚愈伤组织为材料,经５０ＣＯγ－射线诱变处理后,用羟基脯氨酸（Ｈｙｐ）作为选择压力,通过多次在含Ｈｙｐ（３．０ｍｍｏｌ／Ｌ）的选择培养基和无Ｈｙｐ培养基上交替培养,分离出耐Ｈｙｐ的愈伤组织变异体。该变异体以高脯氨酸含量为特征,其脯氨酸含量比原型高２．６倍;在ＮａＣｌ处理时,随着ＮａＣｌ浓度的提高,变异体愈伤组织脯氨酸含量的增加大大高于原型。这种高脯氨酸变异体的耐盐性较原型强,用相对鲜重估计其耐性比对照提高３９％。变异体在盐胁迫下可溶性糖含量比原型多,吸收较多的Ｎａ＋,并维持较高的Ｋ＋含量;但Ｋ＋／Ｎａ＋比与原型无差异。变异体含水量略有下降。这些性状的变化显示了变异体在盐胁迫下渗透调节的加强。     

激素对枸杞体细胞胚发生及可溶性蛋白质含量和组分的影响

以宁夏枸杞无菌苗叶片为材料,对体细胞胚发生过程中激素作用、可溶性蛋白质变化及体细胞胚发生频率进行了研究。发现不同激素处理、可溶性蛋白质含量、组分和体细胞胚发生频率均有一定的差异,三者之间存在着相关性。结果如下：（１）ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３三种培养基上继代的愈伤组织难以诱导形成体细胞胚,为非胚性愈伤组织;而从ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３分别转到ＭＳ＿０和ＭＳ＿４培养基上的愈伤组织体细胞胚发生频率高,属于胚性愈伤组织。其中以ＭＳ＿３转至ＭＳ＿０后的体细胞胚发生频率最高。（２）可溶性蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：非胚性愈伤组织有特异性蛋白质６７ｋＤ,胚性愈伤组织有特异性蛋白质３５ｋＤ和４４ｋＤ;蛋白质３３ｋＤ和６７ｋＤ受２,４－Ｄ调控,蛋白质４９ｋＤ、５７ｋＤ受６ＢＡ调控,而蛋白质３７ｋＤ、５１ｋＤ受２,４－Ｄ和６ＢＡ协同调控。     

陆地棉原生质体高频率分裂及植株再生

取陆地棉品种（系）３１１８、９５５４和晋棉４号种子无菌苗的下胚轴诱导的愈伤组织,从中挑选具有分化能力的黄色颗粒状愈伤组织,建立胚性细胞悬浮培养系。以纤维素酶和离析软化酶组成的酶液,由细胞悬浮培养物游离原生质体。采用含低融点脂糖的Ｋ３基本培基包埋原生质体的培养方式,获得愈伤组织。以液体－固体－液体轮回培养法改良晋棉４号的细胞悬浮系,原生质体的植板率从２％左右提高到９％以上。在原生质体再生愈伤组织的继     

提高小麦愈伤组织分化频率的因素

研究了影响小麦愈伤组织诱导、芽分化及其植株再生的一些因素。结果表明：在愈伤组织诱导和继代过程中添加ＡＢＡ（１．０ｍｇ／Ｌ）有利于小麦中晚期幼胚致密愈伤组织的诱导及再生能力的保持;外植体来源尤其是基因型对长期培养的愈伤组织再生能力有很大影响;不同的外源激素（ＫＴ、６－ＢＡ、ＩＡＡ、ＴＤＺ和玉米素等）也影响芽分化频率,其中ＴＤＺ可明显提高芽分化频率;在转入分化培养前对愈伤组织进行干燥处理可有效地提高其     

连香树胚性与非胚性愈伤组织生理生化差异及同工酶分析

本研究以连香树未成熟种子子叶胚诱导产生的胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织为原材料,测定了两者的可溶性蛋白质、可溶性糖及游离脯氨酸的含量,并利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(polyacrylamide gelelectrophoresis, PAGE)对两者的过氧化物酶(peroxidase, POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、淀粉酶(amylase, AMY)同工酶进行了分析。比较发现胚性愈伤组织在可溶性蛋白质和游离脯氨酸的含量上均极显著高于非胚性愈伤组织。在可溶性糖含量上,胚性愈伤组织也显著地高于非胚性愈伤组织。胚性愈伤组织具有较高的代谢活性,为进一步胚性分化提供物质和能量基础。POD、SOD和AMY同工酶在连香树胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织中酶带差异明显,表明这3种酶的活性与胚性愈伤组织的诱导密切相关,酶谱的差异可作为体细胞胚胎发生的参考标记。