苏云金芽孢杆菌增效物质回收工艺的改进

应用膜过滤技术对苏云金芽孢杆菌KN11增效物质回收工艺进行了改进,发现纳滤膜(200D)能完全截留KN11增效物质,通过3种膜过滤(0.1μm微滤膜、10000D超滤膜和200D纳滤膜)的总回收率达到85.5%;与常规回收比较,膜过滤回收工艺能显著提高浓缩液和粉的增效物质含量(分别为99.35U/mL,457.70U/g),同时除去了大部分的糖、氮等可溶性杂质,使浓缩液和粉保持了较好的理化性状。所配制的Bt高含量悬乳剂的效价在15645～19465IU/μL之间,含固量较低且流动性较好,Bt高含量原粉效价可达100646IU/mg。     

苏云金芽孢杆菌基因组研究概况

迄今为止,全球已有2个Bt株菌株完成了全基因组测序,1个Bt菌株正在拼接中,15个Bt菌株正在进行测序中.已有22个Bt质粒完成了全序列测定.Bt是作为生物农药使用最广泛的微生物菌株,也是最为成功地将其杀虫晶体蛋白基因应用于植物转基因的微生物.在基因组进化、新基因发现、基因表达调控等方面一直是科学家研究的热点,并取得了相当多的成果.本文概述了苏云金芽孢杆菌基因组测序现状、基因组特征及比较基因学等方面的研究进展.     

ERIC-PCR鉴别苏云金芽胞杆菌与蜡状芽胞杆菌的研究

利用ERIC-PCR技术对苏云金芽孢杆菌(Bt)、蜡状芽孢杆菌(Bc)和对照菌基因组DNA进行扩增,回收、标记BtPCR扩增片段,分别与各菌株的基因组DNA进行斑点杂交和Southern杂交,筛选Bt标识序列。结果显示:Bt各菌株均可扩增得到250bp的特异片段;Bt和Bc均可得到600bp的共有扩增片段;以筛选得到的569bp片段为探针,可特异性地与Bt基因组DNA杂交;ERIC-PCR技术可以在DNA指纹图谱水平区分鉴别Bt与Bc菌,正确反映出两者的亲缘关系。结果表明ERIC-PCR技术在Bt的检测及在Bt与Bc的鉴定中具有较强的实用性。     

苏云金杆菌生物农药生产和应用现状

苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）生物农药在全国乃至全世界都是被公认为最安全、最有效、工业化程度最高、最廉价因而也是应用范围最广、使用量最大的微生物杀虫剂,而中外专家和政府在设施害虫IPM计划和无公害农产品生产的推广杀虫剂首选就是Bt。因此,它在生物防治的作用和地位不可忽略。我国生产推广应用的Bt厂家一直对国内外Bt产品的应用状况十分关注。为此,本文就多年来国内Bt生产菌株及其防治对象,生产厂家及其生产能力、市场范围以及应用水平,存在问题以及发展前景等方面做综述。     

我国苏云金杆菌研究60年

综述了我国近60年来的苏云金杆菌研究进展,包括资源收集及分类鉴定、Bt新基因的发掘及组学研究、病理学与作用机制、毒力测定、产品标准化、产业化,并就Bt生物农药存在的问题及改善途径进行了探讨。     

害虫对苏云金杆菌的抗性研究进展

本文主要针对害虫对苏云金芽孢杆菌（Bt）的抗性机理和防治对策方面进行综述.深入研究昆虫对Bt毒素的抗性机理,将有助于建立虫害综合防治体系,实现无公害Bt农药的广泛及持续利用.     

苏云金杆菌毒素调控基因plcR的特性与表达

根据蜡状芽胞杆菌plcR基因和papR基因序列设计特异引物,对6个Bt菌株（WB1、WB7、WB9、HD98、8010、8311）及5个Bc菌株（6A1、6A2、6A3、6A4、6S1）进行了PCR检测.结果显示,3个Bt菌株及4个Bc菌株含有plcR-papR基因.克隆了Bt8010、Bc6A2和6A3的plcR、papR基因,核苷酸序列分析表明,三个菌株的plcR、papR基因与NCBI数据库中的Bt、Bc及Ba相应序列都有很高的相似性.Bt8010的plcR基因编码框由846个核苷酸组成,可编码282个氨基酸;papR基因的编码框由144个核苷酸组成,可编码48个氨基酸.推导的氨基酸序列分析表明,Bt8010 的PapR有21个氨基酸的信号肽序列,PlcR没有信号肽序列.与Bc6A2、6A3和Bc 569相比,Bt8010 的PlcR和PapR在氨基酸序列上与Bc 相应序列存在相对较大的差异.将plcR-papR基因连接到表达载体pHT304中,并转化至大肠杆菌JM109中成功进行了表达,为研究Bt plcR基因的功能奠定了基础.     

昆虫对苏云金杆菌的抗性

在害虫防治中,昆虫对化学农药的抗性已发展成为十分严重的问题。生物杀虫剂的抗性问题直到最近几年才有所察觉,今天仍有许多人认为Bacillus thuringensis(简称Bt)等生物制剂似乎不存在这个问题,事实上,最近越来越多的数据显示,Bt杀虫剂也存在抗性发展的趋向。在实验室条件下,目前已发现印度谷螟(Plodia interpunctella)、粉斑螟(Cadra cautella)、烟青虫(Heliothis virescens)对某些Bt杀虫晶体蛋白(ICP)产生明显抗性。Tabashnik等在夏威夷的田间应用中证实,小菜蛾(Plutell     

广谱重组苏云金杆菌的生产工艺研究

对既杀鞘翅目昆虫又杀鳞翅目昆虫的广谱重组Bt菌株LCJ 0 8,LCJ 12进行了摇瓶发酵和中试发酵。通过 2 .4吨罐发酵试验 ,优化了发酵培养基和发酵条件 ,发酵效价达到 140 0 - 170 0IU/μL(棉铃虫 )和 2 0 0 0CU/μL(柳兰叶甲 )。以直接喷雾干燥和加填充料后喷雾干燥方法生产的粉剂 ,效价分别达到 2 50 0 0 - 34 0 0 0IU/mg和 82 0 0IU/mg。以低倍浓缩工艺生产的悬乳剂 ,毒力效价 2 50 0IU/μL以上。     

苏云金杆菌发酵后处理技术与产量关系研究

本文采集并分析了苏云金杆菌Bacillus thuringiensis发酵后处理技术,揭示了Bt发酵后处理生产膜过滤数据分析、喷雾干燥数据分析和产量的关系,以期对Bt实际生产过程进行高效控制。     

苏云金杆菌发酵后处理技术与产量关系研究

本文采集并分析了苏云金杆菌Bacillus thuringiensis发酵后处理技术,揭示了Bt发酵后处理生产膜过滤数据分析、喷雾干燥数据分析和产量的关系,以期对Bt实际生产过程进行高效控制.     

苏云金芽孢杆菌HS66的转座因子分析

移动遗传因子普遍存在于苏云金芽孢杆菌(Bt)基因组中,而且大部分位于Bt毒素基因两侧附近,与Bt毒素基因进化和转移密切相关。本研究完成了一株对鳞翅目昆虫表现出很强的杀虫活性的Bt菌株HS66的基因组序列草图测定,并利用本地BLAST软件和ISFinder软件,进行了插入序列和转座子序列的查找及基本信息的汇总,结果表明Bt HS66基因组序列含有丰富的插入序列和转座子序列。转座因子分析是整个Bt HS66基因组分析过程中的重要的一环,后续工作中若定位移动因子在染色体及质粒序列的位置,对解析转座因子功能,帮助预测相关杀虫基因信息,以及全面理解Bt HS66基因组将有极大的帮助。     

杀蚊苏云金芽孢杆菌及其晶体蛋白研究进展

自从发现苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis(Bt)具有杀蚊活性以来,目前已发现多种Bt亚种或血清型对蚊虫具有杀虫活性,同时也发现了一些新的杀蚊晶体蛋白。在对杀蚊晶体蛋白的分子结构进行研究的基础上,对其的作用机理有了一定的了解。近年来利用DNA重组技术显著提高杀蚊晶体蛋白的合成和将不同菌种的杀蚊晶体蛋白进行联合表达,为有效控制蚊虫危害展示广阔前景。     

苏云金杆菌溶氧控制发酵

利用BIOSTATC10自控发酵罐 ,研究了Bt菌种Gc - 91进行间歇培养时氧的供需特性。研究表明 ,以生产培养基配方进行发酵时 ,生长高峰期的临界氧浓度在DO12 .0 %～ 17.5%之间 ,控制溶氧接近于临界氧浓度进行发酵 ,Bt晶体含量和毒力效价有大幅提高。     

苏云金杆菌Bt33发酵条件优化及应用于烟草粉螟防治的研究

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt33菌株是从736株野生型Bt菌中筛选分离的1株对烟草粉螟具有高效杀虫活性的菌株,鉴定为科尔默亚种。本研究对Bt33菌株进行了初始接种量、培养基及发酵条件优化,晶体蛋白质电镜观察和SDS-PAGE分析,在室内及烟叶仓库中进行了防治效果测定,对施用Bt33后的烟叶进行了化学成分分析及单体烟评吸。结果表明,应用Bt33防治烟草粉螟效果好;对烟叶的化学成分影响不大;单体烟评吸分显著高于对照,用Bt33防治烟叶仓库害虫烟草粉螟有一定的发展潜力。     

苏云金杆菌幕虫亚种菌株的特性研究

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt53菌株是一株对仓库害虫具有高效杀虫活性的菌株,为其能在生产上有效控制仓储害虫,作者分别采用液体培养法、SDS-PAGE、喷雾处理等方法就该菌株的培养、生化及杀虫活性进行了系统的研究。研究结果表明在摇瓶培养条件下菌株Bt53优化培养基：玉米粉0．5%、黄豆粉2．0%、酵母粉0．10%、蛋白胨0．75%、磷酸二氢钾0．75%、碳酸钙0．15%;硫酸镁0．035%,培养时间40h,pH7．5,转速180r/mim,温度30℃为该菌株最佳培养条件。通过生化测定初步确定Bt53菌株为幕虫亚种。Bt53菌株晶体有菱形、长椭圆形、不规则形晶体及镶嵌形晶体,晶体大小不均,可产生分子量为43kD、15kD、19kD的晶体蛋白质。菌株Bt53对烟草粉螟二龄幼虫的室内防效以9d后发酵原粉稀释100、300倍的防效最好,超过80%。烟叶仓库中使用烟叶均匀喷雾处理比烟包表面喷雾处理效果稍好,防效较高。Bt53菌剂对烟叶的化学成分影响不大。用Bt53菌株防治烟叶仓库害虫有巨大的发展潜力。     

叶面分离苏云金芽孢杆菌的研究进展

苏云金芽孢杆菌是一种在芽孢形成的同时能形成杀虫晶体蛋白的细菌,广泛存在于土壤、昆虫、贮藏物、仓库尘埃、植被等昆虫接触物上.植物叶片作为Bt分离的重要来源,目前对这方面的研究相对较少,国内刚刚起步.本文就叶面分离Bt的研究成果、叶片采样及分离方法进行阐述.     

表达苏云金杆菌内毒素的转基因植物(英文)

为防治一些重要农业害虫 ,转基因Bt作物已在许多国家商业化种植。在发展Bt作物的初期 ,未经改造的Bt基因被直接用来转化作物。但由于BtmRNA的不稳定 ,不适当的剪切以及译后变异 ,Bt在作物上的表达水平往往很低且不稳定。后来 ,科学工作者对Bt基因进行了一系列针对性的改造或人工合成 ,从而使其在植物细胞中得到高效表达。本文着重总结了这一转基因技术的发展过程。其内容包括未经改造的Bt基因在植物中表达低的原因以及改善Bt毒蛋白表达的有关技术。     

黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定

估,实验结果表明东北森林地区具有丰富多样的Bt菌株和杀虫基因资源.     

影响苏云金芽孢杆菌基因在转基因植物中表达的因素

苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）杀虫晶体蛋白基因是植物抗虫基因工程中应用最广泛的基因资源。影响Bt基因在转基因植物中表达的因素繁多,阐明这些因素的效应对于获得Bt基因在受体植物中的稳定高效表达具有重要意义。现对Bt基因表达的主要影响因子,如Bt基因表达单元、植物发育、外部环境条件、受体植物遗传背景、整合位点及Bt基因沉默现象等进行了综述。