GTW对小鼠骨髓细胞微核和精子畸形的影响

研究了雷公藤多甙(GTW)的抗生育剂量、中间剂量和治疗剂量对昆明种小鼠骨髓细胞微核和精子畸形的影响,并对用药后其体重变化和睾丸/体重的比例进行比较。骨髓微核试验和睾丸/体重比变化分析均显示中间剂量组和治疗剂量组有不同程度的遗传毒性,且存在剂量-效应关系,但小于阳性对照;精子畸形率呈下降趋势,生育力的可复性可能也是下降的;体重变化可见中间剂量组存在较高的代偿能力。     

低剂量三聚氰胺对小鼠精子质量影响的研究

采用灌胃法,研究了三聚氰胺在1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、4.0 mg/kg浓度下染毒35 d时,小鼠体重、精子运动参数和精子形态的变化.结果显示,4.0 mg/kg 处理组小鼠部分精子运动参数显著性降低(P＜0.05),1.0 mg/kg 和2.0 mg/kg 浓度组各项精子运动参数与对照比较变化不显著(P＞0.05);在染毒一周后,2.0 mg/kg 浓度组小鼠体重增长显著性下降(P＜0.05),4.0 mg/kg 浓度组小鼠体重极显著降低(P＜0.01);3个处理浓度组对小鼠精子形态影响均不显著.总之,食物中低浓度三聚氰胺对小鼠精子活性和形态无明显的影响.     

小鼠腹腔注射甲醛后骨髓细胞微核变化检测

本实验目的是检测不同剂量甲醛经腹腔注射染毒小鼠后,小鼠骨髓嗜多染红细胞数量和微核的数量与注射剂量之间的关系。结果甲醛剂量和嗜多染红细胞数、微核数、微核率(‰)均呈正相关。     

铅对小鼠精子形态影响的观察

通过精子畸形试验,观察了醋酸铅对小鼠雄性生殖细胞的影响。结果表明,随着醋酸铅浓度的增大,精子畸形率增加,提示了铅对哺乳动物的雄性生殖细胞具有潜在的诱变能力。     

小鼠附睾头精子获得与卵子质膜融合能力的物质基础研究

随着精子在附睾中的转运,它们与卵子质膜的融合能力逐渐增加。怩证明２附睾体和附睾尾的精子均具有相当高的膜融合能力,而附睾头中的精了奶少能与卵子质膜融合,这是还说明附睾头中的精子不具备与云透明带卵子融合的物质条件呢？利用附睾结扎留并延长体外获能时间,可使附睾头远端精子的融合能力明显地提高;在精子培养液中加入ＡＴＰ,并延长精卵共培养时间,也可使一少部分附睾头近端的精子获得与卵子质膜融合的能力。这表明附睾     

雷公藤多甙对小鼠生精功能相关基因Herc4、Ipo11和Mrto4表达的影响

文章从影响生精功能相关基因的角度探讨雷公藤多甙抑制小鼠生殖功能的机理,将小鼠随机分为对照组、雷公藤多甙组,应用雷公藤多甙灌胃造成雄性小鼠生殖功能障碍,通过与雌鼠(1:2)合笼观察怀孕率和睾丸组织变化,并采用基因芯片技术观察小鼠睾丸组织的基因表达.结果发现雷公藤多甙组小鼠较对照组怀孕率明显下降,尤其是在8周后怀孕率为0.睾丸曲细精管管壁上生精细胞数量减少,曲细精管内生精细胞部分或全部脱落,阻塞于管腔内,并发现有1932条基因表达出现异常,与生殖相关基因354条,上调112条,下调242条.其中有已经公认的与生殖密切相关的基因Herc4、Ipoll和Mrto4等的表达异常.提示雷公藤多甙引起的小鼠生殖功能障碍与其致生精相关基因的表达异常有关.     

小鼠精子表面SBA结合糖复合物的形成与变化

用ＨＲＰ标记的大豆凝集素（ＳＢＡ）对睾丸与附睾切片,以及取自附睾和子宫（交配后）内的精子进行了标记,旨在认识精子在发生、成熟和获能过程中表面糖复合物的形成与变化规律。在睾丸内,精母细胞和早期精子细胞胞质内有一强阳性颗粒,处于精子形成期的精子细胞呈弱阳性标记。附睾管内的精子团呈强阳性,附睾管上皮则仅在游离缘呈弱阳性。交配后１．５小时自子宫内洗出的精子,其顶体区的标记增至强阳性,但随着在子宫内存留时间的延长,标记强度逐渐减弱或消失。结果表明,１）精子表面的ＳＢＡ结合糖复合物出现于精子形成期;２）在成熟和获能过程中精子表面的ＳＢＡ结合糖复合物发生明显的变化     

骨髓干细胞的可塑性研究进展

成体干细胞在体内特定的微环境或体外人工培养条件下具有极强的可塑性分化潜能,其主要功能是负责组织细胞的生理性更新和病理性修复．骨髓组织中包括产生所有成熟血细胞系的造血干细胞(HSCs)、多潜能成体祖细胞和能分化为骨、软骨、脂肪的间充质干细胞(MSCs),这些细胞时还有向造血和骨髓以外的其他类型的成熟细胞分化如神经、肌肉、皮肤、心、肝、肾、肺等分化的能力．对最近几年国内外关于骨髓干细胞可塑性的实验研究进展作简要综述．     

小鼠骨髓造血干细胞、外周血组成随年龄的变化趋势及其相关性分析

造血干细胞是具有自我更新能力并能分化为血液中各种血细胞组分的多能干细胞。近来研究显示,不同造血干细胞表面标志物标记的造血干细胞具有分化为不同血细胞的趋势,但是这种分化的内在关系仍不清楚。对小鼠CD34~-/Sca-1~+骨髓造血干细胞、外周血组成随小鼠年龄增长的变化情况进行了分析,结果显示:随着年龄的增长,骨髓中的CD34~-/Sca-1~+骨髓造血干细胞比率显著增加;而外周血各组分则随年龄变化呈现不同的趋势。对不同年龄段小鼠的骨髓造血干细胞及其他组分与外周血组分的同步分析发现,外周血中血小板密度变化趋势与CD34~-/Sca-1~+骨髓造血干细胞变化情况相关系数为0.804 8;外周血中淋巴细胞密度变化趋势与CD34~+/Sca-1~-骨髓细胞的变化情况相关系数为0.947 97;外周血中白细胞密度变化趋势与CD34~+/Sca-1~+骨髓细胞变化情况相关系数为0.763 1(大于0.9为极度相关,0.7到0.9为高度相关)。     

新型脂肽类辐射防护剂H6101对小鼠骨髓细胞基因表达谱的影响

目的：脂肽类化合物具有抗辐射活性,通过研究脂肽类辐射防护剂H6101给药后小鼠骨髓细胞基因表达谱的变化,揭示其可能的辐射防护机制。方法：6只ICR雄性小鼠随机分为PBS对照组和H6101给药组,每组3只,给药后1h分离骨髓细胞提取总RNA,经反转录和荧光标记后与小鼠基因表达谱芯片杂交,杂交信号经扫描仪捕获后用Genenomestudio软件进行统计分析。结果：在测定的26766个基因中,给药组与对照组之间的2倍差异表达基因为1738个,其中1041个基因表达上调,697个基因表达下调;TLR信号通路相关基因,炎性细胞因子、造血因子和细胞凋亡相关基因等的转录水平发生明显变化。结论：用基因表达谱芯片筛选出许多不同种类的与H6101辐射防护作用有关的重要基因,这为揭示脂肽分子辐射防护机制提供了研究方向。     

SD大鼠骨髓间充质干细胞钙离子波动的探究

本实验旨在通过化学药物促进或抑制骨髓间充质干细胞(BMMSCs)增殖以研究胞内Ca2+浓度在此过程中的变化规律.同步化于G1期的MSCs分别用10%胎牛血清(FBS)、15 ng/mL表皮生长因子(EGF)做短期(1 h)或持续(32 h)刺激,或用10 μg/mL丝裂霉素C(Mi C)短期(1 h)刺激和刺激2.5 h后除去,检测胞内Ca2+浓度变化.结果 表明在增殖相关的化学信号瞬时刺激下,MSCs胞内Ca2+信号瞬时增高,然后回复到一个稳态水平:促增殖时维持高稳态水平,抑增殖则低;持续的抑制导致胞内Ca2+波动弱.     

人骨髓基质细胞体外分离及定向培养内皮细胞

用Ficoll(比重1.077 g/ml)从正常成人骨髓中分离骨髓基质细胞(BMSCs),DMEM-HG 培养基内含20?S、GM-CSF(100 u/ml)、VEGF(10 ng/ml)、FGF(5 ng/ml)、L-谷氨酰胺(2mmol/ L)、肝素(90 u/ml),以及抗生素液进行定向培养和扩增其中的内皮细胞(ECs),Ⅷ因子相关抗原的免疫组化法和透射电镜观察(TEM)鉴定其细胞的性质。结果5.0×105个BMSCs在体外经定向ECs 培养和扩增8代后,获得了6.0×109个ECs,扩增了约1.2×104倍。70%-80%的细胞对Ⅷ因子相关抗原免疫组化呈阳性反应;光镜下细胞呈典型的“鹅卵石”样;TEM下可观察到胞浆内有Weible- palade小体,证实为内皮细胞。实验表明,BMSCs在体外分离和定向培养的ECs,经扩增后可能是心血管组织工程所需种子细胞的又一个重要来源。     

不同浓度有机物对雷公藤不定根生长和次生代谢产物含量的影响

以NT为基本培养基,雷公藤(Tripterygium wilfordii)不定根为材料,研究了肌醇、VB1、烟酸、VB6、甘氨酸、叶酸、生物素等有机物质对雷公藤不定根生长及其次生代谢产物雷公藤甲素和总生物碱含量的影响。结果表明:NT培养基中原有浓度的肌醇、VB1含量即可使雷公藤不定根生长量、雷公藤甲素含量、总生物碱含量及产量达到最大值。在添加的其他有机物中,添加1 mg/L烟酸、1 mg/L VB6和5 mg/L甘氨酸适合不定根的生长;添加0.5 mg/L烟酸、0.5 mg/L生物素、1 mg/L VB6、1 mg/L甘氨酸和1 mg/L叶酸适合雷公藤甲素的积累;添加0.5 mg/L甘氨酸、1 mg/L VB6、1 mg/L叶酸和1 mg/L生物素则适合不定根中雷公藤总生物碱的合成。     

白僵菌、绿僵菌对雷公藤丽长角巢蛾的侵染力测定

经室内侵染力测定,球孢白僵菌Beauveria bassiana和金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae皆能侵染雷公藤丽长角巢蛾Xyrosaria lichneuta幼虫,不同菌株的侵染力存在显著差异。3株白僵菌中,Bb27菌株毒力最强,菌液为1×10^5～1×10^9个·mL^-1五个不同浓度梯度的孢子悬浮液时,害虫15d校正死亡率在58．3％-100％之间;LT50分别为9．36d,6．26d,3．89d、2．54d．2．10d;LC50为4．87×10^4个·ML^-1。3株绿僵菌中,MaZPTP01菌株毒力最强,5种孢子浓度15d校正死亡率分别为52．4％、69．0％、76．2、92．9％、95．2％;LT50分别为11．47d、6．89d、4．36d、2．68d、2．13d;LC50为7．39×10^4个·mL^-1。Bb27和MaZFIT01菌株可应用于林间作进一步防治试验。     

The Effect of Decalcification and Choice of Fixative on Histiocytic Iron in Bone Marrow Core Biopsies

Iron stains are often used for bone marrow core biopsies obtained by needle biopsy of the iliac crest. Because bone most be decalcified by brief treatment with acid, it is possible that an undetermined amount of stainable histiocytic iron may be lost. A study was carried out to determine whether decalcification results in loss of histiocytic iron and the effects of fixatives and the recovery of histiocytic iron in decalcified bone marrow tissue. Aspirates of bone marrow were stained for iron with Prussian blue. Because aspirate material does not require decalcification, it served as a control for the study. One hundred bone marrow biopsies and accompanying aspirates from 100 adult subjects were evaluated. Fifty bone marrow biopsies were fixed using a fixative containing mercuric chloride (B-5) and the remaining 50 were fixed in zinc-formalin. Histiocytic iron was graded as minimal, moderate or marked depending on whether less than 5, 6-10, or more than 10 iron positive histiocytes, respectively, were observed. When histiocytic iron was markedly present in aspirate material, at least moderate amounts of stainable iron were found in 22 of 25 B-5 fixed and 21 of 25 zinc-formalin fixed decalcified bone marrow. When aspirate histiocytic iron was minimal or moderate, 14 of 25 B-5 fixed and 7 of 25 zinc-formalin fixed decalcified bone marrow specimens revealed histiocytic iron. Decalcification results in decreased recovery of stainable iron, and where histiocytic iron is minimally or moderately present, B-5 fixation results in greater postdecalcification recovery. There was no significant difference in recovery when larger quantities of histiocytic iron were present prior to the decalcification step.     

同种异基因骨髓移植GVHD动物模型的建立及其病理生理学机制初探

目的：建立稳定的异基因骨髓移植GVHD（移植物抗宿主病）动物模型,并初步了解其病理生理学机制。方法：以BALB／c（H-2^d）雌性小鼠为受者,接受8Gy致死剂量的。Co全身照射后,输注雄性C57BL／6（H-2^b）供鼠的脾细胞和骨髓细胞,观察受鼠的体征、造血功能恢复及生存时间的变化,并进行病理学、嵌合体和T细胞亚群及相关细胞因子的检查。结果：模型组小鼠在移植后出现了典型的GVHD症状;肠、肝、脾、皮肤的病理学分析均属于Ⅳ度GVHD;嵌合体植入成功;以7、14和21d为检测时间点,发现模型组鼠体内T细胞亚群移植后较移植前CD3^＋CD4^＋T细胞数量减少,CD3＋CD8＋T细胞显著升高,CD4^＋和CD8^＋T细胞比例严重倒置,随着时间变化比值会逐渐升高,但仍然处于较显著的倒置水平;血清中IFN-γ、TNF-α在移植后＋7d表达显著增高,尤其是IFN-γ的表达在＋7d达峰值;IL-4和IL-10的水平在移植前后几乎没有变化。结论：建立了稳定的GVHD动物模型;此模型发病过程中,CD8^＋T细胞介导的CTL细胞毒性作用可能要大于CD4＋Th介导的细胞因子效应;IFN-γ、TNF-α炎症因子在GVHD的早期发挥重要作用;IL-4、IL-10的低水平分泌与急性GVHD的高发病率有关。     

低磷胁迫对雷公藤幼苗叶片生理生化特性的影响

为研究雷公藤的耐磷胁迫性,对雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）一年生和三年生同一无性系扦插苗采用土培的方法进行了控制条件下的低磷胁迫实验,以KH2PO4为磷源,土壤中P2O5浓度为0、5、10、15、20、25（CK）mg/kg,低磷胁迫3个月和6个月后取叶片测定其丙二醛（MDA）、脯氨酸（Pro）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性和酸性磷酸酶（APA）活性的变化。实验结果表明：低磷胁迫下一年生和三年生雷公藤叶片SOD、APA活性升高,MDA、Pro含量增加,并呈现随低磷胁迫加重和胁迫时间延长而上升趋势,低磷胁迫下各处理的一年生和三年生雷公藤叶片CAT、POD活性普遍低于对照,并随着低磷胁迫程度的加重而呈下降趋势。低磷胁迫下雷公藤幼苗叶片的几种保护酶活性、MDA、Pro含量以及APA活性响应都较为灵敏,保护酶系统在15、20 mg/kg处理下能够起到较好保护作用,表明雷公藤能通过自身生理调节来适应中度和轻度缺磷环境;综合各项生理指标,三年生雷公藤相对于一年生雷公藤显示了较强的抗氧化能力和渗透调节能力,具有较强的耐低磷能力,对磷较为缺乏的林地下套种雷公藤的苗龄选择有参考价值。