STAT3通路在肿瘤相关成纤维细胞调节肿瘤微环境中的作用

目前各种肿瘤的发病率和死亡率仍高居不下,肿瘤的治疗还是临床医学的一大难题。肿瘤的发展离不开它的“摇篮”,即肿瘤微环境,因此探索肿瘤与肿瘤微环境相互作用的调控机制有利于肿瘤治疗。研究显示, STAT3通路在肿瘤微环境的调控中发挥重要作用。因此,该文针对STAT3通路促进肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts, CAFs)激活,调节CAFs与肿瘤细胞, CAFs与免疫细胞的相互作用等方面进行了综述,并对靶向STAT3通路的肿瘤治疗药物进行了总结。     

RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌细胞增殖的影响

旨在研究RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响。针对STAT3基因mRNA设计合成5条短发夹DNA,构建重组SiRNA-ST3质粒(命名为SiRNA-ST3-1,2,3,4,N)。用重组质粒分别转染NCI-H460细胞,RT-PCR法检测转染24 h后STAT3 mRNA的表达;Western blotting法检测转染24 h和48 h后STAT3、pSTAT3蛋白表达;MTT法检测转染24 h、48 h、72 h后NCI-H460细胞增殖情况。结果显示,SiRNA-ST3载体构建成功。RT-PCR和Western blotting检测结果表明,NCI-H460细胞转染重组质粒SiRNA-ST3-2和SiRNA-ST3-3后STAT3基因mRNA转录和STAT3、pSTAT3蛋白表达都明显下降(P<0.05)。与未转染组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力24 h、48 h降低明显(P<0.05);与SiRNA-ST3-N组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力48 h降低明显(P<0.05)。由此证实,构建的重组质粒SiRNA-ST3-2、SiRNA-ST3-3能有效靶向沉默STAT3基因,并抑制人大细胞肺癌NCI-H460细胞的增殖能力。     

肺腺癌细胞中STAT3表达对细胞生长及药物敏感性的影响

目的:探讨STAT3表达变化对细胞生长及化疗药物敏感性的影响.方法:采用AG490处理细胞、SOCS3基因转染A549细胞后.Western blot检测STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平变化;MTT法检测细胞增殖情况;不同浓度泰素处理细胞后观察细胞对药物的敏感性.结果:AG490处理细胞、SOCS3基因转染细胞后,Western blot证实其能显著抑制STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平(P<0.01);MTT法结果示细胞增殖明显受到抑制;细胞对泰素敏感性显著增高.结论:STAT3能促进细胞增殖,AG490、SOCS3能显著抑制A549细胞中STAT3蛋白的活性,从而抑制A549细胞生长并增加其对化疗药物的敏感性.     

STAT3反义核酸对HL-60细胞周期及c-myc mRNA表达的影响

实验分反义组、无义组、脂质体组、空白组,转染后,应用四唑盐（MTT）比色法分析细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR检测细胞中STAT3 mRNA和c-myc mRNA的表达。探讨STAT3反义寡核苷酸对白血病细胞HL-60细胞周期及c-myc的影响。STAT3 ASODN抑制HL-60细胞增殖呈时间和浓度依赖性;反义寡核苷酸作用后,G0/G1期细胞明显减少,S期细胞增多,细胞周期进程受到明显阻滞;反义寡核苷酸作用48h后细胞内STAT3mRNA及c-myc mRNA的表达水平下降,与各对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。STAT3 ASODN能够明显抑制HL-60细胞增殖,并能阻滞HL-60细胞于G0/G1期、并下调c-myc mRNA的表达。     

雷帕霉素联合紫杉醇对子宫内膜癌STAT3 表达的影响

目的:探讨雷帕霉素联合紫杉醇对子宫内膜癌STAT3表达的影响及其临床意义。方法:选取我院收治的子宫内膜癌患者90例,随机分为对照组及实验组,对照组采用常规化疗治疗,实验组采用雷帕霉素联合紫杉醇化疗治疗。观察并比较两组患者治疗前后细胞生长抑制率以及干扰素、生长因子、白细胞介素及STAT3水平的变化情况。结果:与治疗前比较,两组患者治疗后细胞生长抑制率、生长因子、白细胞介素及STAT3表达水平均降低,而干扰素水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,实验组患者治疗后细胞生长抑制率、生长因子、白细胞介素及STAT3表达水平较低,而干扰素水平较高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:雷帕霉素联合紫杉醇可改善机体免疫功能活性,增强肿瘤细胞免疫活性,阻断细胞恶性增殖有丝分裂进程,提高吞噬细胞对肿瘤细胞杀伤性,临床疗效较化疗优异,可作为临床有效治疗方案,并具有重要意义。     

大肠癌中STAT3和VEGF的表达及相关性研究

目的探讨信号转导子与转录活化子3(STAT3)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌组织中的表达与临床病理因素间的关系以及两者间的相互关系。方法应用免疫组织化学S-P方法检测STAT3和VEGF在62例大肠癌组织中的表达情况。结果 STAT3和VEGF蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率分别是64.5%(40/62)、75.8%(47/62),均明显高于大肠正常黏膜组织35%(7/20)、30%(6/20)。STAT3和VEGF蛋白表达与淋巴结转移及临床Duke’s分期有关,与患者年龄、性别、肿瘤分化程度及浸润深度无关。STAT3和VEGF蛋白在大肠癌组织的表达呈正相关。结论 STAT3和VEGF在大肠癌的发生发展中均具有重要作用,同时两者具有协同作用,提示联合检测较单一检测更有意义。     

EGCG通过STAT3抑制血管内皮细胞炎性因子表达

[目的]研究茶多酚EGCG对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞炎性因子表达的抑制作用及其机制。[方法]利用MTT和流式检测LPS和EGCG对血管内皮细胞的毒性作用,实时荧光定量PCR检测炎性因子mRNA的水平,多重液相蛋白定量技术检测炎性因子的蛋白表达,Western Blot检测STAT3及其磷酸化水平。[结果]EGCG最大浓度(100μmol/L)对血管内皮细胞无毒性;LPS处理可显著或极显著诱导炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8)在mRNA和蛋白水平的表达(P<0.05或P<0.01),LPS对炎性因子的促进作用具有剂量效应;25μmol/L或50μmol/L EGCG预处理能极显著抑制LPS诱导的血管内皮细胞炎性因子的表达(P<0.01),同时抑制LPS诱导的STAT3磷酸化;STAT3抑制剂能显著增强EGCG抗炎效果。[结论]EGCG通过STAT3通路抑制LPS诱导的血管内皮细胞炎症因子的表达。     

Wnt-5b在结肠癌中的表达及对结肠癌细胞的影响

Wnt-5b是Wnt信号转导途径中一个重要的成员,其与Wnt-5a具有80%的同源性,目前国内对于其在肿瘤的表达与功能尚不十分清楚.通过免疫组化检测70例不同分化程度结肠癌和30例正常结肠组织中Wnt-5b的表达揭示,其在结肠癌组阳性率表达低于正常组,随肿瘤分化程度减低,有下降的趋势;蛋白质印迹法检测表明,Wnt-5b在高分化人结肠癌细胞株Caco-2表达量低于低分化人结肠癌细胞株RKO和正常人结肠细胞株NCM460;Wnt-5b可减低Caco-2中β-Catenin的表达,抑制细胞运动能力,增加细胞凋亡率.以上结果提示,Wnt-5b在结肠癌中很可能扮演抑制肿瘤的角色,与抑制β-Catenin的表达和肿瘤细胞的运动能力及促进细胞凋亡有关.     

DLC-1基因表达对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响

目的:研究DLC-1基因对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响.方法:将DLC-1 shRNA(短发夹状RNA,short hairpin RNA)序列克隆到质粒pGCsi-U6/Neo载体,采用脂质体介导的转染方法将构建的DLC-1 shRNA表达质粒转入结肠癌细胞系LoVo细胞.采用RT-PCR技术和Western Blot技术分别检测LoVo细胞中DLC-1mRNA和蛋白表达水平的变化.Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验观察LoVo细胞侵袭迁移能力的改变.结果:结肠癌细胞系LoVo细胞表达DLC-1分子.所构建质粒表达载体能有效地干扰LoVo细胞DLC-1 mRNA和蛋白质表达水平;Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验结果显示,转染后LoVo细胞侵袭转移能力明显增强(p＜0.05).结论:结肠癌细胞系LoVo细胞表达DLC-1基因,应用RNAi技术可特异性降低其表达.DLC-1的表达水平与结肠癌细胞侵袭转移相关.     

pSTAT3和SOCS3在人乳腺癌组织中的表达及意义

目的 研究激活STAT3( pSTAT3)蛋白和SOCS3在人乳腺癌和乳腺良性病变组织中的蛋白表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学检测160例乳腺癌和36例乳腺良性病变组织pSTAT3和SOCS3蛋白的表达情况,分析它们与患者临床病理特征的关系.结果 人乳腺癌组织中pSTAT3和SOCS3蛋白表达阳性率分别为69.4％和40.0％,乳腺良性病变组织中pSTAT3和SOCS3蛋白表达阳性率分别为33.3％和22.2％,前者与后者相比具有统计学意义(P＜0.01和P＜0.05);乳腺癌pSTAT3蛋白表达与肿瘤的大小、淋巴结转移和临床分期均呈显著正相关(均P＜0.01),但与患者年龄、肿瘤的组织学分级、雌孕激素受体表达和c-erBb-2表达均无显著相关(均P＞0.05);SOCS3蛋白表达与肿瘤大小呈显著正相关(P＜0.05),但与患者年龄、淋巴结转移、临床分期、肿瘤的组织学分级、雌孕激素受体表达和c-erBb-2表达均无显著相关(均P＞0.05);乳腺癌pSTAT3和SOCS3表达呈显著正相关(r=0.237,P＜0.01).结论 乳腺癌pSTAT3和SOCS3表达状况与肿瘤生长、侵袭和转移等呈密切相关,提示STAT3和SOCS3可能在乳腺癌发生发展过程中发挥了重要作用.     

转录因子STAT5A、STAT5B在T淋巴母细胞淋巴瘤中的表达及临床意义

目的 探索信号转导和转录激活因子STAT5A及STAT5B蛋白在T淋巴母细胞淋巴瘤(T-cell lymphoblastic lym-phoma,T-LBL)组织中的表达情况,分析其与患者疾病发生、发展及生存预后的相关性.方法 应用免疫组织化学染色检测确诊的104例T-LBL组织和40例反应性增生淋巴结组织(对照)中的...     

新型抗癌药物分子靶标STAT3的研究进展

信号转导与转录激活因子(STATs)是一类发挥信号转导和转录因子调节作用的蛋白质家族,它们可以作为信号转导分子和转录调节因子参与到细胞因子和生长因子对于正常细胞的调控作用中。STATs的异常激活,特别是STAT3激活,和多种人类恶性肿瘤相关联。相关的分子生物学和药理学模型的研究也已确认STAT3在肿瘤发生中的重要作用,这些工作为抗癌药物研发和治疗癌症提供了新的靶标。此外,结构性活化的STAT3突变体就足以诱导瘤原细胞的转化,并且进一步在体内形成肿瘤。结构性激活的STAT3信号通路常常伴随着一些基因如cyclinD1,c-Myc和Bcl-x的上调,同时也会破坏正常细胞生长与生存的调控机制。体外和体内的实验研究结果也证明,对于STAT3信号通路结构性的阻断可以导致STAT3高表达肿瘤类型中的细胞生长抑制和凋亡。这种已被证实了的肿瘤细胞内的结构性激活和生长存活之间的相互联系,为癌症治疗提供了广阔的应用前景。近年来针对STAT3抑制剂的研究逐渐成为热点,本文就此作一综述。     

STAT3及下游基因Cyclin D1在膀胱癌中的表达及意义

目的 探讨STAT3及下游基因CyclinD1在膀胱癌中的表达及临床意义.为膀胱癌的基因治疗提供理论依据.方法 收集武汉大学人民医院病理科2004-2006年膀胱移行细胞癌存档蜡块50例,其中男性38例,女性12例,平均年龄50.3岁,另取5例癌旁组织做对照.标本均经HE染色,光镜观察诊断,按WHO病理分级标准,G1:30例,G2:15例,G3:5例;运用免疫组织化学染色方法检测STAT3和CyclinD1在以上各组中的表达.利用HPIAS-2000图像分析系统测定STAT3和CyclinD1在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果 1.STAT3的表达:STAT3在膀胱移行细胞癌中呈高表达;STAT3在癌旁组织中呈低表达.膀胱移行细胞癌与癌旁组织比较,STAT3的表达差异有显著性(P＜0.05);2.CyclinD1的表达:CyclinD1在膀胱移行细胞癌中呈高表达;CyclinD1在癌旁组织中呈低表达.膀胱移行细胞癌与癌旁组织比较,CyclinD1的表达差异有显著性(P＜0.05).结论 1.STAT3可能参与了膀胱癌细胞的增殖分化、细胞周期等的调节;2.STAT3的活化促进了抗凋亡基因CyclinD1的表达;3.STAT3及其下游基因CyclinD1在膀胱癌的形成中起了一定作用.     

STAT3信号转导系统介导了CNTF对大鼠尾壳核出血后的神经保护作用

目的研究睫状神经生长因子(CNTF)在中枢神经元抗损伤中的作用及机制。方法对尾壳核出血大鼠进行CNTF治疗,观察海马信号转导和转录激活蛋白-3(STAT3)含量及阳性神经元分布的变化。结果CNTF能显增加尾壳核出血大鼠海马STAT3阳性神经元数量、海马STAT3含量。结论CNTF能通过促进STAT3的表达增强中枢神经元的抗损伤能力。     

MC3T3-E1前成骨细胞培养时间对矿化结节表达的影响

目的:观察MC3T3-E1前成骨细胞不同培养时间点矿化结节的形态,探讨一个既节省实验时间与经费,又便于观察矿化结节形态差异的实验方法。方法:将MC3T3-E1前成骨细胞按培养时间分为四组(14、21、28、35天组),各组实验结束时行茜素红染色,光学显微镜下观察矿化结节的形态变化。结果:各组均见红色的矿化结节形成,随培养时间延长,染色面积增大,密度增高,14天时结节轮廓清晰,结节间距较大,21天时结节面积增大,28天时结节边界超出视野,35天时视野内大片深染,结节轮廓不清。结论:在本实验周期内,MC3T3-E1前成骨细胞培养14至21天通过茜素红染色可以较清晰地观察矿化结节,其中培养14天时即可观察到结节大小、数量及形态,考虑到实验时间及经费的因素,我们认为MC3T3-E1前成骨细胞培养14天后行茜素红染色是观察不同因素对其矿化产生影响的适宜时间点。     

前列腺癌组织及PC-3细胞中STAT3及磷酸化STAT3的表达

目的　研究前列腺癌组织及前列腺癌细胞株PC- 3 中STAT3 蛋白及磷酸化STAT3 蛋白的表达。方法　常规石蜡包埋切片SABC免疫组化法检测45例前列腺癌组织、20例前列腺增生组织中STAT3 及磷酸化STAT3 表达, 细胞免疫化学法检测前列腺癌细胞株PC 3细胞STAT3及磷酸化STAT3表达。结果　STAT3在前列腺癌及前列腺增生组织表达阳性率分别为77. 8%和50. 0%, 两者间具有显著差异; 磷酸化STAT3在前列腺癌及前列腺增生组织表达阳性率分别为68. 9%和35. 0%, 两者间具显著差异(P<0 .05); PC- 3细胞中STAT3及磷酸化STAT3表达阳性。结论　STAT3蛋白在前列腺癌中高表达且持续激活, 可能与前列腺癌的发生具有密切联系。