木兰科的分支分析

主要以形态学、解剖学、细胞学为依据,以德坚木属为外类群,用分支分析的方法探讨了木兰科属间的系统发育关系。有２３个分支单位,选取３２个性状,根据外类群比较原则和化石地层学资料,确定了性状的祖征和衍征。对数据矩阵的分支分析使用ＰＡＵＰ３．１．１和Ｈｅｎｎｉｇ ８６ ｖ．１．５分别在Ｍａｃｉｎｔｏｓｈ和ＩＢＭ机上运行,前者以启发法,后者以ＢＢ命令运算,经严格一致化处理,得到一致化分支图。结果表明：１）木     

中国第四纪孢粉植物群事件的记录

通过总结中国不同区域现有的孢粉资料,发现和民孢粉群的演化序列中明显地存在与演化趋势和周期不符的孢粉植物群事伯,归纳起来有三种类型,时间约万年的孢粉群突变事件,延续时间约千年的孢粉群贫乏事件和延时间几百年的孢粉群颤动,突变事件有４起,Ｂｅｔｕｌａ－Ａｅｍｉｓｉａ事件（２．５ＭａＢ．Ｐ）;Ａｒｔｅｍｉｓｉａ－Ｇｒａ,ｉｎｅａｅ事件（１．４Ｍａ．Ｂ．Ｐ．）;Ｅｐｈｅｄｒａ＝Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃｅａ事件     

细胞周期蛋白（cyclin）D在鼻咽癌中的表达及功能初？…

探讨了细胞周期蛋白（ｃｙｃｌｉｎ）Ｄ在ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ）潜伏膜蛋白１（ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＬＭＰ１）阳性和阴性表达的鼻咽癌细胞５系中的表达特征,利用流式细胞仪同时从ＤＮＡ及蛋白质水平初步分析了ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１在鼻咽癌细胞系中的功能。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹的结果发现ｃｙｃｌｉｎｈ Ｄ１在ＣＮＥ－ＬＭＰ１中过表达,在ＨＮＥ１中表达较弱;Ｃｙｃｌｉ     

应用荧光原位杂交和RFLP标记检测多小穗小麦新种质10—A中的黑麦染 …

利用ＡＰＡＧＥ,荧光原位杂交技术和ＲＦＬＰ标记,对导入黑麦（ＳｅｃａｌｅｃｅｒｅａｌｅＬ．）多小穗等性状创制的小麦新种质１０－Ａ进行了分子标记检测,ＡＰＡＧＥ分析发现,１０－Ａ与其他１ＲＳ／１ＢＬ易位系一样,含有１ＲＳ的醇溶蛋白标记位点Ｇｌｄ１Ｂ３。以黑麦基因组总ＤＮＡ作探针,用中国春（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｕｍｃｖ．ＣｈｉｎｅｓｅＳｐｒｉｎｇ）基因组ＤＮＡ作封阻,与１０－Ａ根尖细胞有丝分裂染     

Epstein－Barr病毒潜伏膜蛋白（LMP）基因在哺乳动物传代细胞中的表达

ＥＢ病毒潜伏膜蛋白（ＬＭＰ）是由病毒编码的主要的与病毒致宿主细胞潜伏感染有关的蛋白之一。我们用基因重组技术,把含有ＬＭＰ基因（ＢＮＬＦ１）３个外显子（ｅｘｏｎ）开放阅读框架（ＯＲＦ）的长１．８０ｋｂｐ的ＤＮＡ片段,和能分解ＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ的含有ＳＶ４０早期启动子和ＨｇｒｙｏｍｙｃｉｎＢ磷酸转移酶全基因（长１０２５ｂｐ）的ＤＮＡ片段（长１．６０ｂｐ）,同时重组于亚克隆载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（ｐＢＳ）中,并使该重组质粒ｐＢＳ－ＬＭＰ－Ｈｙｇ（长５７６７ｂｐ）在乳地鼠肾传代细胞（ＢＨＫ）中获得表达。ＢＨＫ细胞在经此重组质粒转染后,ＬＭＰ阳性细胞是２％,在ＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ的持续压力下,ＬＭＰ表达细胞率可达２０％。３个月后,ＬＭＰ表达细胞逐渐减少。５个月后,不能测到ＬＭＰ表达细胞。经免疫荧光和蛋白印迹（Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ）实验证实,人鼻咽癌、风湿性关节炎和正常人血清中不含有抗ＬＭＰ抗体。     

人骨形态发生蛋白—7全长cDNA的克隆及序列测定

从人胎儿肾中提取总ＲＮＡ,反转录得ｃＤＮＡ,ＰＣＲ扩增获得１．３ｋｂ的骨形态发生蛋白－７（ＢＭＰ－７）的全长ｃＤＮＡ。克隆的ＢＭＰ－７基因编码的氨基酸序列与献报道相同。     

重组人骨形态形成蛋白2在家蚕幼虫中表达及产物纯化

将编码人ＢＭＰ２ｃＤＮＡ基因插入昆虫杆状病毒转移载体ｐＢａｃＰＡＫ１,与修饰的家蚕核形多角体病毒Ｂｍ－ＢａｃＰＡＫＤＮＡ共转染家蚕细胞,通过同源重组得到含有在多角体蛋白基因启动子控制下的ＢＭＰ２ｃＤＮＡ基因的重组病毒Ｂｍ－ＢａｃＰＡＫ－ＢＭＰ２。用重组病毒感染家蚕幼虫,第五天ＢＭＰ２表达率最高,每毫升蚕血淋巴中约１０μｇ表达产物;表达产物在在体内被加工成Ｃ－端１６ｋＤ片段,以二硫键连结成分子量为３０ｋＤ的同源二聚体;经纯化获得９０％以上纯度的成熟ＢＭＰ２,与骨基质胶原结合后植入大鼠皮下,７天后在局部诱导生成软骨组织。     

膜去极化和cAMP在胰岛细胞株HIT中活化CBPC端片段

在胰岛细胞株 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,用瞬时转染法观察高 Ｋ＋ 导致的膜去极化与ｃ Ａ Ｍ Ｐ对 Ｃ Ｂ Ｐ Ｃ端片段转录活性的影响．发现二者均可诱导 Ｃ Ｂ Ｐ Ｃ端片段的转录活性增强,并有协同效应; Ｃ Ｂ Ｐ Ｃ端片段的突变体（ Ｓｅｒ １ ７７２ 突变为 Ａｌａ）表现相同的诱导特性,但其基本转录活性降低．说明膜去极化和 ｃ Ａ Ｍ Ｐ对 Ｃ Ｂ Ｐ Ｃ 端片段转录活性的诱导作用与 Ｐ Ｋ Ａ 磷酸化位点 Ｓｅｒ １ ７７２ 无关,而该位点的磷酸化对调节 Ｃ Ｂ Ｐ Ｃ 端片段的基本转录活性起重要作用．蛋白激酶 Ｃ 通路对 Ｃ Ｂ Ｐ Ｔｉ的转录活性无影响．     

渤海晚冰期以来环境变化的化石介形类证据

对渤海中央盆地Ｂ９２－３孔（芯长４２０ｃｍ）、Ｂ９２－１孔（芯长４２０ｃｍ）以及莱州湾Ｂ９２－２孔（芯长３３０ｃｍ）柱状样进行了介形类属种、丰度和分异度分析,并将Ｂ９２－３孔和Ｂ９２－１孔的介形类划分出６个组合带。根据渤、黄海地区不同沉积环境中现代介形类的分布,将剖面中的介形类分成滨岸－河口区的Ｓｉｎｏｃｙｔｈｅｒｉｄｅａ组合和近岸区的Ｍｕｎｓｅｙｅｌｌａ组合。按照地层１４Ｃ年代以及剖面中Ｓｉｎｏｃｙｔｈｅｒｉｄｅａ组合分子和Ｍｕｎｓｅｙｅｌｌａ组合分子的相对丰度变化,讨论了渤海晚冰期后期以来的古环境演化历史：晚冰期为河流、湖沼环境;大约１００００ａＢ．Ｐ．开始海侵,早全新世属滨岸－河口沉积;８７００ａＢ．Ｐ．前后开始水深加大,盐度提高;２４００ａＢＰ以后水深逐渐降低。     

畲族Gc、PGM1、AcP_1、6-ΡGD、ADA和AK1的遗传多态性

对畲族血浆组特异性成分（Ｇｃ）、红细胞磷酸葡萄糖变位酶１（ＰＧＭ１）、酸性磷酸酶（ＡｃＰ１）、６－磷酸葡萄糖酸脱氢酶（６－ＰＧＤ）、腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）、腺苷酸激酶（ＡＫ１）的遗传多态性进行了研究。Ｇｃ与ＰＧＭ１是用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分析的,ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ、ＡＤＡ及ＡＫ１是用淀粉凝胶电泳分析的。各基因座的基因频率分别为Ｇｃ＊１Ｆ０．４７２２、Ｇｃ＊１Ｓ０．２４２１、Ｇｃ＊２０．２７３８;ＰＧＭ１＊１Ａ０．５３５７、ＰＧＭ１＊１Ｂ０．１６２７、ＰＧＭ１＊２Ａ０．１５８７、ＰＧＭ１＊２Ｂ０．１４２９;ＡｃＰ＊１Ａ０．１８２５、ＡｃＰ１＊Ｂ０．８１７５;６－ＰＧＤ＊Ａ０．９６８３、６－ＰＧＤ＊Ｂ０．０２７８;ＡＤＡ＊１０．９８８１、ＡＤＡ＊２０．０１１９;ＡＫ１＊１１．００００。畲族Ｇｃ、ＰＧＭ１、ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ和ＡＤＡ基因为多态,而ＡＫ１基因为单态。发现１例带有６－ＰＧＤ＊Ｒ和３例带有Ｇｃ＊１Ａ２变异等位基因的个体,其中Ｇｃ＊１Ａ２基因频率为０．０１１９,达到多态水平。     

Bax基因cDNA的分子克隆研究

细胞编程死亡（ｐｒｏｇｒａｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ）是细胞生理性死亡的一种主要形式。Ｂａｘ具有抑制细胞编程死亡的作用。本研究采用ＰＣＲ方法,从人肿瘤细胞ＨＬ—６０ｃＤＮＡ文库中扩增出若干个ｂａｘｃＤＮＡ片段,然后将它们分别与ＰＧＥＭ—Ｔ测序质粒载体连接,并转化到大肠杆菌ＪＭ１０９中去。用蓝／白法筛选重组菌落,经酶切分析及ＰＣＲ鉴定,获得了插入片段大小约为０．４ｋｂ及１．１ｋｂ的ＢａｘｃＤＮＡ重组质粒ＰＢａｘｌ和ｐＢａｘ２。这些片段的测序及表达工作正在进行之中。     

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3A在鳞翅目特异菌株中的？…

将对鞘翅目昆虫有特异毒性的苏云芽孢杆菌ｃｒｙ３Ａ基因电转化到只对鳞翅目昆虫有毒性的苏云金芽孢杆菌野隆型菌株ＹＢＴ８０３－１中,获得转了ＢＭＢＹ－００１。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析及镜检结果表明,ｃｒｙ３Ａ基因可在该菌株中高效表达,但出发菌株中原有的ｃｙｒ１Ａｂ、ｃｒｙ１Ａｃ及ｃｒｙ２的表达则受到不同程度的影响。生物测定结果显示,转子ＢＭＢＹ－００１对柳蓝叶甲（鞘翅目）具有较高毒力,ＬＣ５０为０．４１３μ     

一种新的恒河猴T淋巴细胞活化抗原PTA1

本文应用抗人Ｔ细胞活化抗原ＣＤ２５和ＰＴＡ１ＭｃＡｂ对恒河猴ＰＢＭＣ进行间接免疫荧光染色和流式细胞仪分析,结果发现,恒河猴静止ＰＢＭＣＣＤ２５和ＰＴＡ１均为阴性,而ＰＨＡ活化后或经连续２个月注射ｒＨｕＴＮＦ－α恒河猴ＰＢＭＣ均表达高比率的ＣＤ２５和ＰＴＡ１阳性细胞。此结果表明,ＰＴＡ１抗原可作为恒河猴活化Ｔ淋巴细胞的一种有用标志,为ＰＴＡ１分子结构和功能研究以及采用恒河猴作为灵长类动物模型,观察细胞免疫功能状态提供了有用的资料。     

层粘连蛋白受体单克隆抗体抗原性质的鉴定

层粘连蛋白受体（ＬＮ－Ｒ）在癌细胞转移中具有重要作用。ＬＮ－Ｒ的单克隆抗体对于癌转移的基础研究及诊治应用都具有重要意义。本文旨在确定来自人肺巨细胞癌（ＰＧ）细胞ＬＮ－Ｒ的一种单克隆抗体（ＭｃＢ１）的抗原性质。经纯化的ＭｃＢ１能与完整细胞表面、细胞质膜提取物及纯化的ＬＮ－Ｒ制品特异性结合。实验证明经亲和层析纯化的ＬＮ－Ｒ制品中含有膜糖脂,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及转移电泳将其所复合的膜脂去除后,仍具有与ＭｃＢ１结合的活性,表明此ＭｃＢ１所针对的抗原与其复合的膜糖脂无关。将含ＬＮ－Ｒ的细胞膜提取物经ＰｒｏｎａｓｅＥ消化后,用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０分离出的糖肽具有与ＭｃＢ１结合的活性,而不含糖的肽则无此活性。含ＬＮ－Ｒ的细胞膜提取物经高碘酸氧化不同时间,其与ＭｃＢ１结合的活性随氧化时间的延长而逐渐减弱乃至完全丧失;而经还原性烷基化反应的ＬＮ－Ｒ仍保持了与ＭｃＢ１结合的活性。用衣霉素（ＴＭ）处理细胞,细胞则丧失了与ＭｃＢ１结合的能力。以上几方面的结果一致证明此ＭｃＢ１的抗原表位确为ＬＮ－Ｒ的糖链部分。     

pCMBS对完整红细胞膜阴离子通透性的影响

根据等渗ＮＨ４Ｃｌ溶血动力学,探讨了ｐＣＭＢＳ（对氯汞苯磺酸）对完整红细胞膜阴离子通透性的影响．０．０５ｍｍｏｌ／ＬｐＣＭＢＳ使阴离子通透系数Ｐｃｌ下降为对照的８６．５％;１．０ｍｍｏｌ／Ｌ以上浓度时Ｐｃｌ值反而变大。ｐＣＭＢＳ浓度高于０．３ｍｍｏｌ／Ｌ时,细胞悬浮液在１０ｓ之前光密度下降过快,偏离理论拟合方程且不受ＤＩＤＳ抑制．半胱氨酸对ｐＣＭＢＳ引起的效应有恢复作用。结果表明ｐＣＭＢＳ和股骨架蛋白上特殊－ＳＨ基相互作用,导致ｂａｎｄ３构象改变,致使改变膜时阴离子的通透性。     

膜去极化与cAMP在胰岛细胞株HIT中诱导CBP片段的转录活性

为了研究 Ｃ Ｂ Ｐ在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中调节基因转录的机制,将不同的 Ｃ Ｂ Ｐ片段瞬时转染到细胞中,观察其转录活性．实验表明,在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ 均可诱导 Ｃ Ｂ Ｐ３０（ Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）转录活性增强,并有协同效应． Ｐ Ｋ Ｃ对 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的转录活性无影响;与 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ有更强结合力的 Ｃ Ｂ Ｐ Ｋ Ｉ Ｘ Ｓ／ Ｂ（氨基酸序列短于 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）其基本转录活性及膜去极化、ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导下的转录活性均比 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 更强．反义 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ 的过度表达可降低 ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导的 Ｃ Ｂ Ｐ的转录活性．提示在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ对共转录因子 Ｃ Ｂ Ｐ转录活性的调节作用通过 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ介导．     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过NFκB促进Igκ表达

利用已建立的受四环素调控ＬＭＰ１表达的鼻咽癌细胞系,用受ＣＭＶ启动子调控的ＮＦκＢ报道基因质粒ｐＮＦκＢ－ｌｕｃ的荧光素酶表达分析ＮＦκＢ的活性,并以核蛋白的Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法观察ＬＭＰ１表达前后核内ＮＦκＢ组分ｐ６５量的改变,用全蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析Ｉｇκ蛋白质的表达等方法,探讨在鼻咽癌中,ＥＢ病毒ＬＭＰ１蛋白是否通过核转录因子ＮＦκＢ促进免疫球蛋白κ轻链（Ｉｇκ）基因的表达。结果显示     

中国白菜RAPD分子遗传图谱的构建

以芜菁（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ．ｓｓｐ．ｒａｐｉｆｅｒａ Ｍｅｔｚｇ）和结球白菜（Ｂ．ｃａｒｎｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ．ｓｓｐ ．Ｐｌｋｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｏｉｓｓｏｎ）杂交的Ｆ２群体为试材,采用ＲＡＰＤ标记,用８４个１０核苷酸随机引物构建了白菜的ＲＡＰＤ遗传图谱。该图谱覆盖基因组的１６３２．４ｃＭ（ｃｅｒｔｉ Ｍｏｒｇａｎ）标记间的平均间隔为１６．５ｃＭ。其中最长的连锁群为     

小鼠金属硫蛋白ⅠcDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达

将质粒ＰＢＸ－ＭＴ上的小鼠ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ片段切下作为模板,通过ＰＣＲ方法删除该片段的非编码序列,将编码序列克隆到质粒ＰＢＳ－ＳＫ中,经ＤＮＡ序列测定后证明其克隆序列正确,再将ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ编码序列插入到转移载体ｐＢａｃＰＡＫ８的ＢａｍＨⅠ和ＥｃｏＲⅠ位点之间,通过磷酸钙／ＤＮＡ共转染方法将其导入昆虫细胞Ｓｆ９中,以Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和ＤｏｔＥＩＡ方法对表达产物进行了检测,表达量为１ｍｇ＝     

应用荧光原位杂交和RFLP标记检测多小穗小麦新种质10-A中的黑麦染色质

利用ＡＰＡＧＥ、荧光原位杂交技术和ＲＦＬＰ标记,对导入黑麦（ＳｅｃａｌｅｃｅｒｅａｌｅＬ．）多小穗等性状创制的小麦新种质１０＿Ａ进行了分子标记检测。ＡＰＡＧＥ分析发现,１０＿Ａ与其他１ＲＳ／１ＢＬ易位系一样,含有１ＲＳ的醇溶蛋白标记位点Ｇｌｄ１Ｂ３。以黑麦基因组总ＤＮＡ作探针,用中国春（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍｃｖ．ＣｈｉｎｅｓｅＳｐｒｉｎｇ）基因组ＤＮＡ作封阻,与１０＿Ａ根尖细胞有丝分裂染色体进行荧光原位杂交。结果表明,黑麦的１ＲＳ易位到１０＿Ａ中。用２５个ＲＦＬＰ探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析,进一步发现１０＿Ａ的１ＢＳ特异限制性片段发生丢失,代之以黑麦１ＲＳ的特异限制性片段,而位于其他染色体上的特异限制性片段未发生缺失。据此认为,多小穗小麦新种质１０＿Ａ属于１ＲＳ／１ＢＬ易位系。同时还讨论了１０＿Ａ在小麦遗传改良中的利用情况。