选择性入肝血流阻断应用于肝癌合并门脉高压手术中的疗效观察

目的：探究选择性入肝血流阻断（SPVE 法）在肝癌合并门脉高压手术中的临床应用效果。方法：选择我院2009 年10 月 ~2014 年10 月期间确诊为肝癌合并门脉高压的患者80 例,按照随机数字数表法分为观察组和对照组各40 例,观察组行SPVE 法进行血流阻断,对照组行全入肝血流阻断法（Pringle 法）进行血流阻断。对比两组手术时间、阻断血流时间、手术中出血量、输血 量、手术前后患者肝功能相关指标及术后并发症发生率。结果：两组手术时间和血流阻断时间对比差异无统计学意义（P>0.05）,而 观察组术中出血量及输血量均小于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;术后观察组血液中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶 （AST）和总胆红素（TB）水平均低于对照组,而血清蛋白（ALB）和血红蛋白（Hb）水平高于对照组,差异均有统计学意义（均P<0. 05）;观察组并发症发生率为22.5%,明显低于对照组的37.5%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：SPVE法应用在肝癌合并门脉 高压手术中,可以显著减少术中的出血量和输血量,有利于术后肝功能的恢复,有效地降低术后并发症的发生。     

不同入肝血流阻断方式对荷瘤小鼠肝功能影响的实验研究

目的:探讨不同血流阻断方式对荷瘤小鼠肝细胞功能的影响。方法:选择昆明小鼠24只随机分为三组,正常对照组(Suspe-nded operation,SO)、肝门阻断组(Occlusion of the portal triad,OPT)、保留肝动脉持续阻断门静脉(Occlusion of portal vein,OPV)各8只。采用门静脉注射肿瘤的方法建立肝癌模型,建模后3天采用阻断范围为左外叶和中叶、阻断时间为60分钟的入肝血流阻断方式,复流后5天后,通过测量3组对肝脏的缺血再灌注损伤程度以及病理学变化来评价不同血流阻断方式对肝细胞功能影响的程度。结果:门静脉注射小鼠肝癌细胞8天后,对照组测量小鼠正常丙氨酸氨基转移酶(ALT)值为66.5±22.3 IU/L,OPT组值为276.3±80.5 IU/L,OPV组值为89.6±28.4 IU/L,两组比较有统计学差异(P0.01);对照组测量小鼠正常天冬氨酸氨基转移酶(AST)值为301.3±126.7 IU/L,OPT组值为1126.4±285.5 IU/L,OPV组值为438.6±150.7 IU/L,两组比较有统计学差异(P0.01),病理组织学OPV组肝细胞损伤程度明显较OPT组轻。结论:保留肝动脉持续阻断门静脉可以减轻荷瘤小鼠肝脏的缺血再灌注损伤。     

大鼠肢体缺血预处理对肝缺血/再灌注损伤的保护作用

目的：研究肢体缺血预处理对大鼠肝缺血/再灌注损伤是否具有保护作用。方法：雄性SD大鼠32只,随机分为对照组（S组）;缺血/再灌注组（I/R组）;经典缺血预处理组（IPC组）;肢体缺血预处理组（远端缺血预处理组,RPC组）。S组仅行开腹,不作其他处理;IPC组以肝缺血5min作预处理;RPC组以双后肢缺血5min,反复3次作预处理,2个预处理组及I/R组均行肝缺血1h再灌注3h。取血用于血清谷丙转氨酶（ALT）与血清谷草转氨酶（AST）检测。切取肝组织用于测定湿干比（W/D）、中性粒细胞（PMN）计数及观察显微、超微结构的变化。结果：与I/R组比较,IPC组,RPC组ALT,AST,W/D值,及PMN计数均明显降低（P〈0.01）,肝脏的显微及超微结构损伤减轻。结论：肢体缺血预处理对大鼠肝脏I/R损伤有明显的保护作用,强度与经典缺血预处理相当,其机制可能与抑制肝脏炎症反应、减轻肝脏水肿、改善肝组织微循环有关。     

肝脏缺血预处理对肝细胞分离、冻存效果的影响

大量研究表明,对肝脏进行缺血预处理（ischemic preconditioning,IPC）对肝脏保护有重要意义,IPC能够提高肝脏对缺血再灌注损伤的耐受能力.但IPC对分离后的肝细胞是否具有同样的保护作用,目前尚无报道.本研究旨在明确在对大鼠肝细胞分离以前对大鼠肝脏进行缺血预处理是否可以提高肝细胞分离和冻存的效果.在本研究中,30只SD大鼠,随机分为3组（G1,G2,G3）,在对大鼠肝脏进行分离以前,对G2和G3组大鼠分别进行5和10min的缺血预处理,10min后再进行肝细胞分离,G1组大鼠则不进行特殊处理.分离后,比较各组肝细胞产量及存活率.将所得的肝细胞分别冻存14,28天后进行肝细胞的复苏,对各组肝细胞的存活率、细胞活性（四唑盐比色实验）、冻存液LDH漏出浓度3项指标进行对比分析.研究发现,缺血预处理组的大鼠肝细胞（G2,G3）在肝细胞的活率、MTT实验、冻存液的LDH浓度测定等方面均优于对照组.由此可见,在肝细胞分离之前,对肝脏实施缺血预处理能够明显提高所分离肝细胞的存活率,还可以提高肝细胞短期内的冻存效果.但相对大鼠肝脏进行缺血预处理的时间,5和10min并没有明显的统计学差异.     

精准肝切除术治疗原发性肝癌的临床效果分析

目的:探讨腹腔镜精准肝切除术的特点及效果,为普外科手术提供参考。方法:选取2011年10月-2013年7月我院收治的92例原发性肝癌患者的临床资料进行回顾分析。根据手术方式不同,将病例分为常规肝切除组和精准肝切除组,每组46例。观察并比较两组患者的评均术中出血量、手术时间、住院时间、手术前后的肝功能指标变化、并发症的发生率、肿瘤局部复发率及远期转移率等。结果:与常规肝切除组相比较,精准肝切除组患者的平均术中出血量少、住院时间短、术后并发症的发生率及肿瘤复发转移率低,但手术时间较长,组间比较差异显著,具有统计学意义(P0.05)。与手术前比较,两组患者手术后的血清TBIL、ALT及AST含量降低,ALB升高,精准肝切除组患者各项指标的变化程度更显著,肝功能优于常规肝切除组,组内及组间比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:精准肝切除术对于原发性肝癌的治疗具有良好临床的效果,不仅能够彻底清除病灶,而且降低了术后肝衰竭等并发症的发生率,值得推广应用。     

缺血（氧）预处理的普遍性及临床应用前景

预处理是机体抵抗缺血再灌注损伤的一种内源性保护现象,已在多种属动物心脏上得到证实。本文着重就心脏以外其他组织器官和细胞的预处理保护作用及预处理的临床应用前景进行综述。     

半肝阻断联合肝静脉阻断在复杂肝癌精准肝切除中的应用

目的:探讨半肝血流阻断联合肝静脉阻断技术在精准肝切除中的应用价值。方法:回顾性分析我科2013年1月至2014年12月共120例行半肝血流阻断联合肝静脉阻断的精准肝切除病例,作为治疗组。另选单用第一肝门阻断的复杂肝癌半肝切除患者318例为对照。结果:治疗组在控制术中出血和输血量方面优于单用半肝血流阻断的对照组,治疗组术中平均出血量为650±46 m L,平均输血量为410±76 m L,差别有统计学意义(P0.05);治疗组在平均手术时间和平均住院时间方面均少于对照组,但两组差别无统计学意义(P0.05)。结论:半肝血流阻断联合肝静脉阻断技术在复杂肝癌的精准肝切除术中合理使用能有效的减少术中出血,提高了手术安全,降低了术中输血量,最大限度保留剩余肝细胞体积,减少了缺血再灌注的损失。     

腹腔镜肝部分切除术中肝血流阻断方法的选择及对患者肝功能的影响

目的:探讨三种不同的肝血流阻断方法用于腹腔镜肝部分切除术的安全性及有效性,为肝胆外科手术提供参考。方法:对我院2011年7月至2013年9月收治的83例肝脏肿瘤行肝部分切除术患者的临床资料进行分析。根据肝血流阻断方式,将所选病例分为三组:间歇性断流组(22例),完全断流组(28例),选择性断流组(33例)。观察并比较三组患者的手术时间、断流时间、术中出血量、输血量、术后肝功能指标的变化及并发症的发生率。结果:三组的平均手术时间和断流时间无显著差异(P0.05);选择性肝血流阻断组患者的术中出血量和输血量均显著少于间歇性断流组和完全断流组(P0.05);三种断流方式术后均发生并发症,但选择性阻断术后并发症的发生率明显低于间歇性断流和完全断流术,差异具有统计学意义(P0.05)。三组患者术后的血清总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)的水平均呈现不同程度降低,血清白蛋白(ALB)的含量升高;选择性断流组各指标变化更明显,数值更接近于正常水平(P0.05)。结论:与传统断流方法比,选择性肝血流阻断法能够减少剩余肝脏的再灌注损伤,有利于提高手术效果。但该方法存在一定局限,应根据患者实际情况选择断流方式。     

p38 MAPK反义寡聚脱氧核苷酸阻断肢体缺血预处理诱导的脑缺血耐受

目的:观察p38MAPK反义寡聚脱氧核苷酸(As-ODN)对肢体缺血预处理(LIP)诱导的脑缺血耐受的影响。方法:48只永久凝闭双侧椎动脉的Wistar大鼠分为8组(n=6):sham组、LIP组、脑缺血损伤组、LIP+脑缺血损伤组、双蒸水+LIP+脑缺血损伤组、p38MAPKAs-ODN组和p38MAPKAs-ODN+LIP+脑缺血损伤组,p38MAPKAs-ODN的剂量又分为5nmol/5μl和10nmol/5μl。所有动物均在sham手术后或末次全脑缺血/再灌注后7天断头取脑,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡情况。结果:sham组和LIP组均未见延迟性神经元死亡(DND)。与sham、LIP组相比,脑缺血损伤组出现了明显的DND,表现为组织学分级(HG)升高和锥体神经元密度(ND)下降(P0.05)。LIP可显著抑制脑缺血损伤引起的DND。与LIP+脑缺血损伤组相比,p38MAPKAs-ODN+LIP+脑缺血损伤组出现了显著的DND,表现为HG升高、ND降低(P0.05),且此种变化与p38MAPKAs-ODN的注射剂量呈明显正相关。结论:p38MAPKAs-ODN可阻断LIP诱导的脑缺血耐受,进一步证实了p38MAPK表达上调参与了LIP诱导的脑缺血耐受。     

神经途径在肢体缺血预处理抗脑缺血/再灌注损伤中的作用

目的：探讨神经途径在肢体缺血预处理（limbi schemic preconditioning,LIP）抗脑缺血／再灌注损伤中的作用。方法：脑缺血采用四血管闭塞模型,重复短暂夹闭放松大鼠双侧股动脉3次作为LIP。将凝闭椎动脉的大鼠随机分为sham组、脑缺血组、股神经切断＋脑缺血组、LIP＋脑缺血组、股神经切断＋LIP＋脑缺血组。于Sham手术和脑缺血后7d处死大鼠,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡的变化。于Sham手术和脑缺血后6h心脏灌注固定大鼠,免疫组化法测定海马CAI区c-Fos表达的变化。结果：硫堇染色结果显示,与sham组比较。脑缺血组和股神经切断＋脑缺血组大鼠海马CAI区均有明显组织损伤。LIP＋脑缺血组CAI区无明显细胞缺失,神经元密度明显高于脑缺血组（P〈0．01）。而股神经切断＋LIP＋脑缺血组大鼠海马CA1区明显损伤,锥体细胞缺失较多,与LIP＋脑缺血组组比较,神经元密度显著降低（P〈O．01）,提示LIP前切断双侧股神经取消了LIP抗脑缺血／再灌注损伤作用。c—Fos免疫组化染色结果显示,Sham组海马CAI区未见明显的c-Fos蛋白表达。脑缺血组海马CAI区偶见c—Fm的阳性表达。LIP＋脑缺血组c—Fos表达增强,数量增加,与Sham组和脑缺血组比较。c-Fos阳性细胞数和光密度均明显升高（P〈0．01）。而股神经切断＋LIP＋脑缺血组c-Fos表达明显减少,仅见少量弱阳性e-Fos表达。结论：LIP可通过神经途径发挥抗脑缺血／再灌注损伤作用,而LIP诱导c—Fos表达增加可能是LIP诱导脑缺血耐受神经途径的一个环节。     

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We have established bilateral common carotid artery occlusion as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance to transient focal cerebral ischemia in C57Bl6/J mice. In this video, we will demonstrate the methodology used for this study.     

The Role of Nitric Oxide in the Neuroprotection of Limb Ischemic Preconditioning in Rats

Brief limb ischemia was reported to protect neurons against injury induced by subsequent cerebral ischemia-reperfusion, and this phenomenon is known as limb ischemic preconditioning (LIP). To explore the role of nitric oxide (NO) in neuroprotection of LIP in rats, we observed changes in the content of nitric oxide (NO) and activity of NO synthase (NOS) in the serum and CA1 hippocampus of rats after transient limb ischemic preconditioning (LIP), and the influence of N^G-nitro-l-arginine methylester (l-NAME), a NOS inhibitor, on the neuroprotection of LIP against cerebral ischemia-reperfusion injury. Results showed that NO content and NOS activity in serum increased significantly after LIP compared with the sham group. The increase showed a double peak pattern, in which the first one appeared at time 0 (immediate time point) and the second one appeared at 48 h after the LIP (P < 0.01). The NO content and NOS activity in the CA1 hippocampus in LIP group showed similar change pattern with the changes in the serum, except for the first peak of up-regulation of NO content and NOS activity appeared at 6 h after LIP. Pretreatment with l-NAME before LIP blocked the neuroprotection of LIP against subsequent cerebral ischemic insult. The blocking effect of l-NAME was abolished with pretreatment of l-Arg. These findings indicated that NO may be associated with the tolerance of pyramidal cells in the CA1 hippocampus to ischemia induced by LIP in rats.     

大鼠肢端缺血预处理对脑缺血后炎症反应的影响

目的通过观察肢端缺血预处理（1imbisehemicpreconditioning,LIP）对大鼠脑缺血性损伤后重要炎症因子表达的影响,探讨LIP诱导的脑缺血耐受与炎症反应之间的关系。方法选取72只SD大鼠,实验组（LIP组）30只、缺血组30只和对照组12只。实验组和缺血组设立5个时间点：6h、12h、24h、48h和72h,每点6只。通过线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（middlecerebralarteryocclusion,MCAO）的局灶性脑缺血模型及LIP法建立脑缺血耐受模型,采用HE观察每组大鼠的脑组织形态学改变、QRT—PCR和ELISA方法检测脑组织中炎症因子IL-17及IL-6的表达变化。结果实验组脑组织学病理改变明显轻于缺血组。与缺血组相比：实验组的IL-17和IL-6的基因和蛋白表达在整体水平均呈下降趋势;mRNA水平提示实验组在缺血12h、24h和48h后脑组织中IL-17、IL-6的表达量显著减少（P〈0．01）;蛋白水平提示实验组在缺血24h和48h后脑组织中的IL-6以及在缺血12h、24h和48h后脑组织中IL-17的表达量均降低（P〈0．05）。结论LIP诱导脑缺血耐受,可以减轻脑缺血后的炎症反应,对缺血性脑损伤有一定的保护作用。     

腹腔镜解剖性肝切除治疗肝细胞癌的临床观察

目的:探讨腹腔镜解剖性肝切除治疗肝细胞癌的临床效果及安全性。方法:选择2011年2月~2013年8月在我院进行诊治的肝细胞癌患者90例,将其随机分为治疗组与对照组,每组各45例。治疗组采用腹腔镜解剖性肝切除治疗,对照组采用开腹解剖性肝切除,两组术后都常规化疗3个月,观察和比较两组术中出血量、术后肛门排气时间和术后住院时间,并发症的发生情况及术前后血清谷氨酸转移酶(ALT)与天冬氨酸转移酶(AST)的水平。结果:与对照组相比,治疗组的术中出血量、术后肛门排气时间和术后住院时间均明显降低或缩短(P0.05),术后3个月的膈下积液、切口感染、肺部感染、胆漏的发生率明显降低(P0.05)。两组术前血清ALT与AST值对比差异无统计学意义(P0.05);术后1周,两组的ALT与AST值都明显升上(P0.05);术后3个月,治疗组的ALT与AST值明显低于对照组(P0.05)。所有患者随访到2015年8月,治疗组的中位生存期为(18.33±3.11)个月,而对照组为(12.46±2.19)个月,较治疗组明显缩短(P0.05)。结论:腹腔镜解剖性肝切除治疗肝细胞癌具有更好的微创性,能减少近期并发症的发生,促进肝功能的恢复,且能够延长患者的生存时间。     

肢体远程预处理通过上调机体抗氧化酶活性诱导兔脊髓缺血耐受

目的:证实抗氧化酶活性上调是肢体远程预处理(remote preconditioning,RPC)诱导兔脊髓缺血耐受效应的主要机制之一。方法:60只雄性新西兰大白兔随机分成对照组、远程预处理组、缺血组及RPC 缺血组(对照组n=6,余组n=18)。RPC组行双下肢短暂缺血2次(每次10min,间隔10min);缺血组仅行脊髓缺血模型;RPC 缺血组在远程预处理后1h行脊髓缺血;对照组为假手术组。对照组于脊髓缺血再灌注后48h行神经功能评分后取脊髓,作为对照。余三组分别于再灌注后6h、24h及48h评分后取材,各时间点各取6只。所有动物于缺血前、缺血20min、再灌注20min及再灌注6h采动脉血测血清抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量;于取材后测定脊髓匀浆抗氧化酶活性和MDA含量。结果:再灌注后6h、24h及48h时对照组、远程预处理组及远程预处理 缺血组神经功能评分均明显高于缺血组(P<0.05)。血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性在每个时间点RPC组均高于对照组,RPC 缺血组高于缺血组(P<0.05);其中缺血20min时,缺血组血浆SOD、CAT活性低于对照组,RPC 缺血组低于RPC组(P<0.05);而与缺血前相比,缺血20min时缺血组及RPC 缺血组SOD和CAT活性显著下降(P<0.05)再灌注24h和48h时,脊髓匀浆SOD、CAT活性对照组低于RPC组,缺血组低于RPC 缺血组(P<0.01);而MDA含量再灌注24h时对照组高于RPC组,缺血组高于RPC 缺血组(P<0.05)。脊髓匀浆SOD、CAT活性与神经功能评分具有显著相关性。结论:RPC诱导脊髓缺血耐受的机制可能为上调抗氧化酶活性,增强机体在缺血再灌注过程中清除氧自由基的能力,从而减少氧自由基介导的损伤,发挥脊髓保护作用。     

腹腔镜胃癌根治术的研究进展

胃癌是全球发病率较高的恶性肿瘤之一,且发病率呈逐年上升的趋势。传统的治疗方法是开腹胃癌根治术,但该方法对患者机体造成的创伤较大,不利于患者术后恢复,在一定程度上影响了手术治疗的效果。随着医学技术的发展及"微创外科"理念的不断深入,腹腔镜手术以其创伤小、术中出血量少以及术后恢复快等特点被广泛应用于外科手术治疗中。近年来,3D腹腔镜技术的出现使手术视野更加清晰,术中操作更加简便,在一定程度上提高了手术的安全性,但临床对于进展期胃癌根治术的远期疗效一直存在争议。因此,本文对腹腔镜在胃癌根治术中的作用及意义作以综述,为胃癌的微创治疗提供理论参考。     

脾动脉结扎联合肝癌切除术治疗肝癌并门静脉高压症临床研究

目的:探讨脾动脉结扎联合肝癌切除术对肝癌并门静脉高压症的治疗效果和临床应用的价值。方法:对2008年10月至2013年10月期间我院收治的84例肝癌并门静脉高压症患者的资料进行回顾性分析,其中脾动脉结扎联合肝癌切除手术的患者50例为研究组,患者34例行肝癌切除及脾切断流术为对照组。比较两组治疗效果及患者术前、术后情况。结果:研究组术前白细胞计数、血小板计数、红细胞计数为(3.1±0.9)×109/L、(58.6±12.7)×109/L、(3.4±0.4)×109/L,术后2周白细胞计数、血小板计数、红细胞计数分别为(5.9±1.5)×109/L、(140.3±50.1)×109/L、(3.6±0.7)×109/L;对照组为术前白细胞计数、血小板计数、红细胞计数为(2.8±1.2)×109/L、(45.8±20.5)×109/L、(3.4±0.4)×109/L,术后2周白细胞计数、血小板计数、红细胞计数为(6.2±0.7)×109/L、(172.5±32.7)×109/L、(3.6±0.3)×109/L。研究组与对照组相比,术后2周白细胞计数、红细胞计数相比差异无统计学意义(P0.05),但术后2周血小板计数研究组低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组术前与术后的白细胞计数、血小板计数、红细胞计数相比,差异均有统计学意义(P0.05)。研究组有17例患者出现术后并发症,占16.0%;对照组有20例患者出现术后并发症,占38.2%;两组对比差异有统计学意义(P0.05)。结论:根据病情合理选择使用脾动脉结扎联合肝癌切除术治疗肝癌并门静脉高压症,可以有效治疗肝癌和脾功能亢进,促进肝功能恢复,对延长原发性肝癌合并肝硬化脾功能亢进患者的生存时间,提高生活质量,具有重要意义。     

Ischemic preconditioning induces autophagy and limits necrosis in human recipients of fatty liver grafts, decreasing the incidence of rejection episodes

Whether ischemic preconditioning (IP) reduces ischemia/reperfusion (I/R) injury in human normal and fatty livers remains controversial. We compared two independent groups of liver donor transplants with versus without steatosis to evaluate IP consequences. Liver donors with (n=22) or without (n=28) steatosis either did or did not undergo IP before graft retrieval. Clinical data from the recipients, as well as histological and immunohistological characteristics of post-reperfusion biopsies were analyzed. Incidence of post-reperfusion necrosis was increased (10/10 versus 9/14, respectively; P<0.05) and the clinical outcome of recipients was worse for non-IP steatotic liver grafts compared with non-IP non-steatotic grafts. IP significantly lowered the transaminase values only in patients receiving a non-steatotic liver. An increased expression of beclin-1 and LC3, two pro-autophagic proteins, tended to decrease the incidence of necrosis (P=0.067) in IP steatotic livers compared with non-IP steatotic group. IP decreased the incidence of acute and chronic rejection episodes in steatotic livers (2/12 versus 6/10; P=0.07 and 2/12 versus 7/10; P<0.05, respectively), but not in non-steatotic livers. Thus, IP may induce autophagy in human steatotic liver grafts and reduce rejection in their recipients.