氨基酸制备色谱——DPSC大孔型离子交换树脂对发酵液中L-缬氨酸的分离纯化

<正> 前言前文运用液相色谱理论的基本数学方程式评价了国内生产的凝胶型和大孔型离子交换色谱柱柱效率,作者认为这些离子交换树脂都不适合于作氨基酸制备色谱柱。运用液相色谱理论的基本数学方程式对作者实验室合成的凝胶型和大孔型离子交换树脂进行了评选,从中筛选出 DPSC 大孔型离子交换树脂,它比较适合于作氨基酸制备色谱柱。本文按比例将 DPSC 大孔型离子交换树脂柱,从百克级放大到公斤级,其分离变 R和柱效率 N,两者都达到相同水平,证明可以按比例放大。     

氨基酸制备色谱——丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸制备柱柱效率研究

现代液相色谱已从分析色谱发展到制备色谱,为了研究氨基酸制备色谱柱柱效率,我们从液相色谱理论的十几个基本关系式中归纳出五个基本方程式,用以评价丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸制备柱柱效率。初步试验结果表明,对强酸性阳离子交换树脂柱而言: 1.凝胶型离子交换树脂柱柱效率高于普通大孔型离子交换树脂柱柱效率,而与本室合成的Dpsc大孔型离子交换树脂柱柱效率相当。 2.凝胶型离子交换树脂中,低交联度离子交换树脂有利于提高缬氨酸和亮氨酸制备柱柱效率,可较好地分离缬氨酸和亮氨酸;较高交联度离子交换树脂有利于提高丙氨酸和缬氨酸制备柱柱效率,可较好地分离丙氨酸和缬氨酸。将不同的离子交换树柱组合起来,可以提高丙氨酸,缬氨酸和亮氨酸的分离度,提高氨基酸的回收率。这项研究成果已应用到从猪血粉、猪毛等天然蛋白质酸水解物中系统分离多种氨基酸,以及分别从缬氨酸、亮氨酸(异亮氨酸)发醇液中分离纯化缬氨酸、亮氨酸(异亮氨酸)。     

氨基酸的离子交换色谱(理论原理和实践)

本书评述了氨基酸色谱文献。阐明了柱色谱过程的理论基础和技术,以及分析样品的准备。援引了缓冲体系、离子交换树脂、显色试剂及其制备方面的参考资料。说明了离子交换剂的合成、性质及其调节方法。本书可供从事氨基酸自动分析仪的科研人员、工程师和技术人员参考。也可供从事蛋白质水解液和生理液体测定的高校学生、研究生和生化部门及科研所的工作人员参考。书中列出不合格7个,图21幅、文献135篇。     

氨基酸的离子交换色谱(续)(理论基础和实践)

<正> 三分析用树脂交联度离子交换剂选择性吸附氨基酸是获得离子交换色谱最佳化的最重要因素。方法创始人Moore和Stein业己指出了选择适当交换剂及其颗粒可以提高色谱柱柱效力。在当时(1950年)世界离子交换剂市场上出现     

几种中性氨基酸的离子交换行为

<正> 在实际工作中,应用离子交换层析业已建立起用离子交换分离氨基酸的某些成功程序。其中,尤其主要的是 partidge 等人创立的用于制备氨基酸的置换展层法及 MOOrs 和 Stein提出的用于分析氨基酸的具有高度分离能力的洗脱分析法。然而,氨基酸在离子交换树脂上的交换行为只有少数的基本究研。这是一个有趣的问题,基氨酸如同弱的两性电解质一样。显示出与离子交换反应有关的某些特殊行为。本文仅从实验结果来讨论几种中性氨基酸的离子交换行为,着重讨论 pH 对离子交换反应的影响。并进行一些综合性的评论。下一篇论文将讨论酸碱性氨基酸在离子交换树脂上的行为。     

蛋白质的离子交换层析技术

利用人工合成的离子交换树脂来分离纯化各种化学物质已有将近四十年的历史。在生物化学方面也成功地用于氨基酸的分析。生物高分子如蛋白质核酸等虽然也可以用离子交换树脂来分离,但有以下缺点:(1)交联的树脂孔洞很小,生物高分子不能进入内部,只能在树脂表面吸附,所以吸附容量较小;(2)树脂的离子交换基团排列很密,对蛋白质吸附得太牢,一经吸附上去则很难洗脱下来,必须用剧烈的条件(较高的盐浓度和较大的pH变化),容易引起蛋白质变性;(3)树脂     

用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖

氨基酸分析仪在结构上与糖分析仪相似,本文仅讨论利用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖。一、原理在硼酸缓冲液洗脱条件下,糖的混合物能够在强碱性阴离子交换树脂柱上得到分离。经分离的单一糖组分在98℃温度下,与2,2′-双金鸡纳酸盐试剂作用,生成蓝紫色的络合物。该络合物在波长562nm处有最大吸收,因此可用氨基酸分析仪检测器的570nm通道进行检出。检出信号经数据处理机处理,电传打字机打印出色谱图和分析实验报告。二、材料与试剂阴离子交换树脂Aminex A-28(美国Bio-RAD实验室);2,2′-双金鸡纳酸钠(美国Sigma     

离子交换树脂在制药工业中的应用

本文主要对离子交换树脂概念、原理、优势与劣势、其在制药工业和药物制剂中的应用及其使用与保存进行综述,离子交换色谱在制药领域被广泛应用,应用最为普遍的是缓控释给药系统和靶向释放系统。     

亮氨酸沉淀法在色层法分离多种氨基酸工艺中的应用

<正> 前言从天然蛋白质水解液中用732离子交换色层法分离碱性氨基酸时,尤其在生产规模下,常常存在亮氨酸和组氨酸部分交叉重叠现象,影响收率。把亮氨酸沉淀法穿插在活性炭——离子交换树脂联合柱层析分离多种氨基酸的工艺中进行,先用邻二甲苯—4—磺酸(以下简称磺酸)沉淀活性炭柱流出液中的亮氨酸,再进行离子交换柱层析分     

两步发酵过程中有机酸对产1，3-丙二醇的影响

考察了基因工程菌发酵生产1.3 丙二醇过程中,有机酸对发酵过程的影响,并选用了不同的离子交换树脂对甘油发酵液进行处理。发现有机酸、特别是乳酸对1.3丙二醇生产的抑制作用最明显。在使用离子交换树脂处理有机酸的过程中,确定了使用005号离子交换树脂处理效果最好,005号离子交换树脂可除去大部分的有机酸,处理后的发酵液发酵产1.3丙二醇产量比未处理的发酵液产量提高166%,转化率提高34%。     

两种树脂固相合成机体保护肽的比较

目的:比较Wang树脂和二氯三苯甲基树脂(以下简称二氯树脂)在固相合成机体保护肽中的表现,为工业化生产提供理论依据。方法:通用的Fmoc固相合成法制备机体保护肽,通过比色法对两种树脂与氨基酸的偶联率进行比较,用质谱(MALDI-TOFMS)对粗肽进行鉴定分析,用反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行粗肽的分析和纯化。结果:显示以二氯树脂作载体,第一个氨基酸的连接率,以及机体保护肽的纯度和产率都要明显高于Wang树脂。结论:二氯树脂作载体合成机体保护肽更适合大规模工业化生产的要求。     

乌梢蛇氨基酸图谱研究

目的建立乌梢蛇的氨基酸指纹图谱。方法采用L-8800型全自动氨基酸分析仪提取乌梢蛇水解氨基酸。色谱条件:分离柱直径4.6mm×40mm,离子交换树脂型,缓冲液流速0.4ml/min,茚三酮流速0.3ml/min;缓冲液泵压力茚三酮泵压力8~11.5Pa;柱温56℃。结果建立16个共有特征峰的水解氨基酸指纹图谱。结论本研究有助于提高乌梢蛇药材的质量控制水平。     

介绍几个新的氨基酸沉淀剂

氨基酸沉淀剂在蛋白质化学组成的研究及氨基酸的分离和制备方面,发挥过重要的作用。直到本世纪五十年代,它仍然是分离和制备氨基酸的最常使用的基本方法。1951年Moor 和 Stein 用离子交换树脂系统,分离出蛋白质水解产物的报导发表之后,氨基酸沉淀剂法在许多场合逐渐被离子交换法所代替。但是,用离子交换剂分离和制备氨基酸时,技术要求高,进行大规模的生产时亦比较困难,不能满足迅速增长的大量氨基酸生产发展的需要。七十年代以来,国外文献又陆续报导了不少具有强选择性和沉淀效能很高的、新的氨基     

两种树脂对固相法合成丙型肝炎疫苗多肽的影响

本实验采用固相法合成丙型肝炎疫苗多肽,比较Wang树脂和二氯三苯甲基树脂（以下简称二氯树脂）作为载体时的连接率以及目标肽的产率和纯度。通过质谱鉴定分析所得目标多肽的分子量,用茚三酮法对两种树脂与氨基酸的连接率进行比较,用反相高效液相色谱（RP-HPLC）进行粗肽的分析和纯化。结果显示以二氯树脂作载体,第一个氨基酸的连接率,以及目标肽的纯度和产率都要明显高于Wang树脂,因此二氯树脂作载体合成丙型肝炎疫苗多肽更适合大规模工业化生产的要求。     

溶液的pH对离子交换法提取赖氨酸的影响

氨基酸的分离和提取,工业上以离子交换法为主,L-赖氨酸的提取也不例外。影响离子交换过程的因素较多,关键是选择合适的离子交换树脂,其次应注意选择合适的操作条件。当离子交换树脂和提取的对象已经确定,则选择合适的操作条件就成为主要矛盾,最重要的操作条件是交换时的pH值。     

提高Beckman 121 MB型氨基酸分析仪的分辨率

在Stein和Moor等人研究的基础上发展起来的Beckman 121MB型氨基酸分析仪,以聚苯乙烯磺酸树脂作为阳离子交换剂。单柱洗脱系统由pH3.28、pH3.90和pH 4.95的柠檬酸钠缓冲液组成。该仪器与日本、瑞典等国的同类仪器相比最大的缺点是无滤氨柱。因此对试剂、环境的要求很高,以消除氨对分析的污染。但在实际工作中,蒸馏水,缓冲液、试剂及实验室环境都可能带入氨,从而导致氨基酸分析,特别在碱     

用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖

氨基酸分析仪在结构上与糖分析仪相似,本文仅讨论利用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖。一、原理在硼酸缓冲液洗脱条件下,糖的混合物能够在强碱性阴离子交换树脂柱上得到分离。经分离的单一糖组分在98℃温度下,与2,2′-双金鸡纳酸盐试剂作用,生成蓝紫色的络合物。该络合物在波长562nm处有最大吸收,因此可用氨基酸分析仪检测器的570nm通道进行检出。检出信号经数据处理机处理,电传打字机打印出色谱图和分析实验报告。     

应用离子交换膜进行蛋白质水解液脱酸和酸的回收

<正> 以废蚕丝、鱼皮、明胶、血粉等原料制备丝氨酸、脯氨酸、精氨酸等时,先用盐酸把原料水解成合有各种氨基酸的水解液。为了用离子交换树脂柱层析分离得到所需的氨基酸,首先要把水解液反复减压蒸馏浓缩,以除去水解液中的大部分酸,或者用专用脱酸离子交换树脂柱脱酸。前者消耗大量的能源,后者要用酸碱再生树脂。如能把水解液中的盐酸用一种简单的方法回收,免去除酸工序或减少除酸工序的工作量,回收的酸加以利用,既可降低生产成本,又可减少三废。上海硅钢片厂应     

利用蚕蛹生产复合氨基酸营养物的研究——树脂法对酶介液中蚕蛹脱臭的研究

本文报导了用离子交换树脂法脱除蚕蛹酶解存在的蚕蛹本身的恶臭;用胰酶进行蚕蛹分解,酶解后经732树脂脱臭,获得无臭、黄色粉末的混合氨基酸,对蛋白质的收率达44%以上,保留了人体必需的色氨酸,弥补了蚕蛹酸解色氨酸被破坏的缺陷,符合要素膳对氨基酸的质量要求,从而可利用蚕蛹生产营养价值高的混合氨基酸。     

离子交换树脂在各别分离碱性氨基酸中的应用

利用离子交换树脂方法,可从全氨基酸混合液中把三种碱性氨基酸(组氨酸、赖氨酸和精氨酸)分离成单一成分,五十年代已有专书记载其分离方法。基于前人工作,我们改用国产树脂,建立了制备方法,生产了以公斤计算的组