Autocrine factor-independent growth of mammalian fibroblasts established in fully synthetic medium: No V-onc requirement in establishment

Summary In a previous study Chinese hamster fibroblasts carrying a partially deleted v-src were established in a synthetic medium lacking macromolecular supplements and shown to possess a particular serum-free phenotype hereafter designatedsf. In cloning efficiency assays,sf, unlike wild-type, fibroblasts required a threshold cell density to growth from single cells, suggesting autocrine stimulation. In the present study a conditioned medium harvested fromsf cells was added to the samesf cells, and the resulting cloning density was found to markedly diminish rather than increase.Sf cells were found to be unable to grow at cloning density because of trypsin damage;sf cells seeded into trypsin inhibitor-containing medium cloned with no requirement for threshold cells and were therefore independent of autocrine secretion from neighboring cells. Their cloning efficiency reached 7.7%; this value could not be improved by subcloning thesf culture, and it diminished when selenium was not added to the assay medium. To determine whether v-src is involved in thesf phenotype, five clones of the parental Chinese hamster fibroblast line not infected with Rous sarcoma virus were explanted into serum-free cultures with no macromolecular additives as in the case of v-src-containing cells. Each clone gave rise to ansf cell line growing indefinitely in synthetic medium like the v-src-containingsf cells, showing that the v-src gene is not required either for the establishment or maintenance of thesf phenotype. Supported by grants from CNRS, INSERM, contract 862015, Association Claude-Bernard, Association pour la Recherche sur le Cancer, and Fondation pour la Recherche Médicale.     

Malignant transformation of human keratinocytes during adaptation to autotrophy

The work was supported by grants from the Association pour la Recherche sur le Cancer and from the Fondation pour la Recherche Médicale.     

Growth in serum-free medium of human colonic adenocarcinoma cell lines on microcarriers: A two-step method allowing optimal cell spreading and growth

Summary Human colonic adenocarcinoma cells have been successfully grown on polystyrene microcarriers by modifying the culture conditions used in monolayer culture. The method can be divided into two culture phases: a) a phase of spreading, wherein cells were seeded in presence of serum-supplemented medium; b) a phase of active growth wherein spread cells on the beads were allowed to grow in a serum-free medium. Under these conditions, optimal spreading and growth of HT 29 and HRT 18 cells on the microcarriers were obtained. A differential propagation was observed between HT 29-D4 and HT 29-D9 cells (both clonal populations derived from HT 29 cells) on the microcarriers that is tentatively related to the discrepancy observed in the spreading efficiency of these clonal cells on serum-coated culture flasks. An index of spreading efficiency (IS index) has been defined to quantify the efficiency of spreading of each cell line on microcarriers. These data gave the opportunity to develop serum-free, scale-up methods to culture cells like HT 29 which release potentially useful products. This work was supported by CNRS (U.A. 202 and U.A. 1186), Fédération Nationale des Centres de Lutte Contre le Cancer (FNCLCC), INSERM (CRE, n^o 847006), CNAMTS-INSERM (8386), MRT (GBM 85M0564) and l'Association pour la Recherche sur le Cancer (ARC 86-234).     

Inhibition of caspase-dependent mitochondrial permeability transition protects airway epithelial cells against mustard-induced apoptosis

In the present study, the toxicity of yperite, SM, and its structural analogue mechlorethamine, HN2, was investigated in a human bronchial epithelial cell line 16HBE. Cell detachment was initiated by caspase-2 activation, down-regulation of Bcl-2 and loss of mitochondrial membrane potential. Only in detached cells, mustards induced apoptosis associated with increase in p53 expression, Bax activation, decrease in Bcl-2 expression, opening of the mitochondrial permeability transition pore, release of cytochrome c, caspase-2, -3, -8, -9 and -13 activation and DNA fragmentation. Apoptosis, occurring only in detached cells, could be recognized as anoikis and the mitochondrion, involved both in cell detachment and subsequent cell death, appears to be a crucial checkpoint. Based on our understanding of the apoptotic pathway triggered by mustards, we demonstrated that inhibition of the mitochondrial pathway by ebselen, melatonin and cyclosporine A markedly prevented mustard-induced anoikis, pointing to these drugs as interesting candidates for the treatment of mustard-induced airway epithelial lesions. This work was support by the Délégation Générale pour l’Armement (D.G.A./D.S.P. No. 95-151). A. Deniaud received a fellowship from Ligue contre le Cancer. C. Brenner is supported by the Association pour la Recherche sur le Cancer (ARC). The authors are grateful to D.C. Gruenert for providing us with the human bronchial epithelial cell line.     

Growth of preadipocyte cell lines and cell strains from rodents in serum-free hormone-supplemented medium

Summary Ob17 is a clonal cell line isolated from the epididymal fat pad of C57 BL/6J ob/ob mouse that differentiates into adiposelike cells in serum-supplemented medium. In serum-free medium, this cell line shows increased growth under the addition of insulin, transferrin, fibroblast growth factor (FGF), and a factor present in extract of rat submaxillary gland (SMGE). This medium is referred to as 4F. Epidermal growth factor or nerve growth factor cannot replace SMGE, whereas partially purified platelet extract can substitute for FGF but only partially for SMGE. 4F Medium is able to support the proliferation of cells from other established preadipocyte clonal lines, HGFu and 3T3-F442A, and also of preadipocyte cells isolated from the stromal-vascular fraction of rat and mouse adipose tissues. In each case 4F medium is insufficient to support the differentiation of these cells into adipocytes. Ob17 cells grown and maintained in serum-free hormone-supplemented medium retain the ability to convert to adiposelike cells after serum addition. This serum requirement for differentiation cannot be substituted by the addition of growth hormone or of other putative adipogenic factors, or both. The results are discussed with respect to the requirements for growth and differentiation of the 3T3-L1 and 1246 preadipocyte cell lines previously described. This work was supported by the “Centre National de la Recherche Scientifique” (Grant 1208-Biochimie du Développement and Grant 4162-Endocrinologie), by the “Ministère de la Recherce et de la Technologie” (Grant 81-L-1322), by the “Fondation pour la Recherche Médicale,” by NATO (Grant 1704), and by the “Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale” (Grant 827006).     

Erythroid precursors cultured from adult mice are sensitive to H2O2 toxicity

Summary The growth of late erythroid precursors (CFU-Es) from adult bone marrow is inhibited when Iscove's modified Dulbecco's medium supplied in liquid form is used. Catalase and other H₂O₂ destroying compounds restore the capacity of culture medium to support colony development. However early precursors from adult bone marrow and fetal liver CFU-Es were resistant to H₂O₂. This work was supported by grants from the Centre National de la Recherche Scientifique, the Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale and the Fédération Nationale des Centres de Lutte contre le Cancer.     

Évolution du complexe parasitaire des psylles du poirierPsylla pyri etPsylla pyrisuga [Homoptera: Psyllidae] en vergers dans le sud-est de la france au cours de la période hivernale,printanière et estivale

Résumé Le ?psylle commun du poirier?Psylla pyri (L.) est le ravageur-clé de cette culture en France et dans de nombreux pays d'Europe. Parmi les antagonistes, nous avons étudié l'influence du complexe parasitaire sur la dynamique des populations du ravageur. Ce travail a recours au contr?le visuel des rameaux pour suivre le niveau des populations du phytophage. Une méthode d'isolement de larves de l'h?te au laboratoire est utilisée afin d'évaluer le taux de parasitisme ou prévalence. La parasitofaune est constituée de micro-hyménoptères parasito?des et hyperparasito?des de larves L4 et L5 de psylle.Trechnites psyllae (Ruschka) et dans une moindre mesurePrionomitus mitratus (Dalman) sont les parasito?des qui assurent la régulation dès la 1^re génération du ravageur. L'hyperparasitisme, essentiellement d? àSyrphophagus mamitus (Walker), appara?t plus tard sur l'h?te-relaisPsylla pyrisuga Foerster présent en vergers entre la 1^re et la 2^e génération deP. pyri. Les autres hyperparasito?des,Pachyneuron muscarum (L.),Pachyneuron aphidis Bouche,Dendrocerus psyllarum Dessart,Dilyta subclavata Foerster etDilyta talitzkii Belizin sont encore plus tardifs. Les taux d'hyperparasitisme nuls enregistrés au cours de la 1^re génération deP. pyri laissent escompter d'excellents résultats de la mise en pratique éventuelle d'une méthode de lachers précoces de parasito?des, pour réduire le plut t?t possible les populations du ravageur.      

Cycle de développement et table de vie d'Olla v-nigrum [Col.: Coccinellidae] ennemi naturel d'Heteropsylla cubana [Hom.: Psyllidae] introduit en nouvelle-calédonie

Résumé Après l'invasion de la Nouvelle-Calédonie en 1985 parHeteropsylla cubana Crawford, psylle ravageur de la légumineuseLeucaena leucocephala (Lam.) de Wit, le coccinellide auxiliaireOlla v-nigrum Mulsant a été introduit depuis Tahiti, au début de 1987, et ses principaux paramètres biologiques ont été étudiés en conditions contr?lées. A 25,7°C (24,6/26,8) la valeur médiane de la durée du développement pré-imaginal est 16,5 jours, de la ponte de l'œuf à l'adulte. A 25,8°C (25/26,6), en adoptant le taux d'éclosion observé sur les pontes de femelles sauvages, la multiplication par génération R₀=201,4, le taux intrinsèque d'accroissement r_m=0,165, et la durée moyenne de génération T=32,2 j. En tenant compte de la baisse de fertilité observée en cours d'étude de la cohorte, ces valeurs deviennent: R₀=153,9, r_m=0,160, T=31,4 j. Comparées à celles mesurées pour d'autres proies, ces valeurs impliquent une bonne adaptation trophique àH. cubana, qui est toxique pour la plupart des prédateurs polyphages. En juillet 1989,O. v-nigrum était déjà établi sur la majeure partie de la Nouvelle-Calédonie.      

Parasitisme au laboratoire et au champ D'Epidinocarsis (Apoanagyrus) Lopezi [Hym.: Encyrtidae] auxiliaire exotique introduit au congo pour la régulation de l'abondance dePhenacoccus manihoti [Hom.: pseudococcidae]

Résumé L'Hyménoptère parasito?deEpidinocarsis lopezi (De Santis) a été introduit d'Amérique du Sud au Congo pour le contr?le des populations de la cochenille du maniocPhenacoccus manihoti Matile-Ferrero. Dans les conditions du laboratoire, les principaux paramètres du développement ont été étudiés: le temps de développement entre la ponte de l'œuf et l'émergence de l'adulte est en moyenne de 15,6 jours; le taux sexuel est de 56% de femelles en maintien de souche, variable selon le stade des h?tes présentés; la longévité des ♀♀ est de 42,26 jours; la fécondité moyenne pour des ♀♀ nourries de miel s'établit autour de 207,6 œufs sur une période de 40 jours (5,2 œufs par jour en moyenne), elle est inférieure en absence d'alimentation (141 œufs au total et 3,8 par jour); le stade h?te choisi pour la ponte est essentiellement la larve L3 (à un moindre degré les jeunes ♀♀ sans ovisac); le superparasitisme peut atteindre 64% en situation de raréfaction de l'h?te, mais il n'est que de 5,7% en présence de fortes proportions de L3. Après des lachers expérimentaux, l'auxiliaire s'est acclimaté dans les champs expérimentaux et a colonisé les champs voisins. Ses taux de parasitisme achevé ont atteint un maximum de 15,4% des stades préférentiels (22% pour le parasitisme en cours) avant le pic de gradation de la cochenille. Ces données présententE. lopezi comme un parasito?de ayant de bonnes qualités intrinsèques mais qui, à l'heure actuelle, ne parvient pas à réguler les populations de la cochenille dans la zone où il a été laché.      

Laminin provides a better substrate than fibronectin for attachment,growth, and differentiation of 1003 embryonal carcinoma cells

Summary Culture of cells in hormonally defined media has allowed (a) the demonstration of physiological responses from cells usually unable to express them in vitro and (b) the study of the effects on growth and differentiation of diffusible factors and attachment factors. The embryonal carcinoma line 1003 forms multidifferentiated tumors in vivo but is unable to differentiate in vitro when grown in serum-containing medium. In a defined medium containing insulin, transferrin, selenium, and fibronectin as attachment factors, 1003 cells grow for several generations and differentiate into neurons and embryonic mesenchyme (Darmon et al., 1981, Dev. Biol. 85: 463–473). In the present work the effects of fibronectin and laminin were compared. In the presence of laminin the cells attached and spread better, grew faster, and could be plated at lower densities. Neurite extension was also better under these conditions and most importantly, it was found that laminin induced an important formation of muscular tissue when the cells had been seeded at low densities. Multinucleated myotubes could be stained with antibodies directed against embryonic muscular myosin. Coating the dishes with polylysine or adding FGF or serum-spreading factor to the medium allowed growth of low-density cultures with fibronectin instead of laminin but muscular differentiation was not detected under these conditions. Addition of fibronectin to laminin-containing medium did not inhibit muscular differentiation. Presented in the symposium on Plant and Animal Physiology in Vitro at the 33rd Annual Meeting of the Tissue Culture Association, San Diego, California, June 6–10, 1982. This research was supported in part by grants from the “Centre National de la Recherche Scientifique” (LA 269), the “Délégation Générale à la Recherche Scientifique et Technique,” the Fondation pour la Recherche Médicale Fran?aise,” the “Institut National de la Santé et de la Recherche Medicale,” the “Ligue Nationale Fran?aise centre le Cancer,” and the “Fondation André Meyer.” This symposium was supported in part by the following organizations: Bellco Glass, Inc., California Branch of the Tissue Culture Association, Collaborative Research, Hana Media, Hybridtech, K C Biological, Inc., and Millipore Corporation.     

Étude de la consommation alimentaire d'Hyperaspis raynevali [Col.: coccinellidae] Prédateur de la cochenille farineuse du maniocPhenacoccus manihoti [Hom.: pseudococcidae]

Résumé Hyperaspis raynevali Muls. est une coccinelle coccidiphage appelée à intervenir en lutte biologique contre la cochenille du manioc:Phenacoccus manihoti Matile-Ferrero en Afrique. Au laboratoire, ce prédateur est multiplié sur la cochenille du manioc et sur la cochenille farineuse des agrumesPlanoccus citri Risso (proie de substitution). L'étude des aptitudes trophiques d'H. raynevali élevée avec ces 2 espèces de cochenille a été entreprise afin de comparer la valeur alimentaire respective de ces proies. Les résultats montrent que la qualité nutritive deP. manihoti est légèrement supérieure à celle deP. citri pour les larves et les adultes de la coccinelle, à condition de ne pas utiliser le poinsettia, comme végétal de substitution pour élever la cochenille du manioc. De plus,P. citri constitue une proie que l'on peut avantageusement utiliser au Congo afin de produireH. raynevali pour entreprendre une opération de lutte biologique contreP. manihoti.      

Comparaison des potentialités biologiques de trois coccinelles prédatrices de la cochenille farineuse du maniocPhenacoccus manihoti (Hom. Pseudococcidae)

Résumé H. raynevali est la principale espèce de coccinelle importée de l'Amérique latine et acclimatée par l'I.I.T.A. pour lutter contre la cochenille du maniocP. manihoti. E. flaviventris etD. hennesseyi sont 2 autres coccinelles prédatrices présentes au sein de la biocoenose de la cochenille du manioc. Après avoir étudié leur biologie au laboratoire, on a pu comparer leurs potentialités respectives. A partir de ces résultats, on a tenté de déterminer le r?le que chaque espèce prédatrice pourrait éventuellement jouer dans les conditions naturelles et de définir les périodes les plus propices à la manifestation d'une meilleure efficacité.      

Lutte biologique et intégrée dans les vergers de citrus en zone méditerranéenne

Les problèmes posés par les ravageurs des Citrus ont pris une importance considérable au cours de ces 3 dernières décennies et cela pour plusieurs raisons:

Seuil thermique de développement de trois coccinelles prédatrices de la cochenille du manioc au congo

Résumé Le seuil thermique de développement de 3 prédateurs de la famille desCoccinellidae (un exotique et deux locaux) a été étudié. L'équation de la constante thermique a été utilisée pour le calcul du seuil thermique. Les données obtenues ont été comparées entre elles. L'espèce exotiqueHyperaspis raynevali a un seuil thermique de développement plus bas que celui des 2 espèces locales (Hyperaspis senegalensis hottentotta etExochomus flaviventris). Le seuil thermique suivant a été obtenu pour chaque espèce, à savoir: 11,81°C pourH. raynevali; 13,78°C pourH. s. hottentotta; 13,63°C pourE. flaviventris. Des différences de seuil thermique de développement et de mortalité ont été enregistrées entre le prédateur exotique et les espèces indigènes. Des hypothèses explicatives sont évoquées dans la discussion.      

Sensibilité d'Aedes albopictus [Dipt.: Culicidae] à l'hyphomycète entomopathogèneMetarhizium anisopliae

Résumé Le comportement pathogène de l'hyphomycèteMetarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin a été évalué surAedes (Stegomya) albopictus Skuse. Le mode d'action de la souche testée se manifeste de 2 fa?ons, soit par une colonisation de l'hémocoele, soit par une toxémie si la dose de l'inoculum est suffisamment élevée. L'intervention d'un processus toxémique a été confirmée par la mise en évidence du pouvoir pathogène des spores irradiées aux ultra-violets. Ces toxines seraient libérées dans le mésentéron des larves pendant la protéolyse alcaline des spores ingérées, dont le nombre a pu être estimé. Le seuil d'activité toxémique étant évalué à 3.10⁵ spores pour une larve du stade 4. L'analyse du contenu de tubes digestifs étalés sur milieu nutritif et l'examen de coupes semi-fines ont montré que les larves soumises à de fortes doses du germe perdent rapidement leur capacité digestive. Enfin, le r?le de la destruxine E dans ces infections est discuté.      

Étude comparative des potentialités biologiques de deux trichogrammes:Trichogramma evanescens etTrichogrammatoidea lutea [Hym.: Trichogrammatidae]

Résumé La longévité, la fécondité, le nombre d'adultes émergés, le sex-ratio et le cycle de développement deTrichogramma evanescens Westwood etTrichogrammatoidea lutea Girault ont été étudiés sur un h?te de substitution (Anagasta kuehniella) ou sur un h?te naturel (Helicoverpa armigera), ainsi que le nombre d'œufs parasités par ces 2 espèces. La longévité des ♀♀ des 2 oophages est très influencée par l'alimentation. Une ♀ deT. evanescens nourrie vit 7 fois plus longtemps qu'une privée d'alimentation et celle deT. lutea 5 fois plus. La présence de l'h?te joue également un r?le non négligeable. La fécondité est plus élevée chezT. evanescens (42 œufs en moyenne) que chezT. lutea (31 œufs). Cependant le nombre moyen d'œufs deH. armigera parasités par ♀ ainsi que le nombre d'adultes émergés sont presque équivalents chez les 2 espèces parasito?des. Le sex ratio (♂♂/♀♀) est de 0,59 chezT. evanescens et de 0,71 chezT. lutea. Quant à la durée de développement, elle est plus longue chezT. evanescens que chezT. lutea aux basses températures (36 jours contre 30 jours à 15°C). Cette différence est moins marquée lors de l'augmentation de la température (4 h à 30°C). La température de 35°C s'avère néfaste pour le développement des 2 espèces oophages ce qui restreint la possibilité de leur utilisation en lutte biologique au Maroc. Des études complémentaires seront à développer pour vérifier leur aptitude dans les conditions de terrain.      

Prolonged activation of ERK1,2 induces FADD-independent caspase 8 activation and cell death

Prolonged ERK/MAPK activation has been implicated in neuronal cell death in vitro and in vivo. We found that HEK293 cells, recently reported to express neuronal markers, are exquisitely sensitive to long term ERK stimulation. Activation of an inducible form of Raf-1 (Raf-1:ER) in HEK293 cells induced massive apoptosis characterized by DNA degradation, loss of plasma membrane integrity and PARP cleavage. Cell death required MEK activity and protein synthesis and occurred via the death receptor pathway independently of the mitochondrial pathway. Accordingly, prolonged ERK stimulation activated caspase 8 and strongly potentiated Fas signaling. The death receptor adaptator FADD was found to be rapidly induced upon ERK activation. However using RNA interference and ectopic expression, we demonstrated that neither FADD nor Fas were necessary for caspase 8 activation and cell death. These findings reveal that prolonged ERK/MAPK stimulation results in caspase 8 activation and cell death. This work was supported by grant from Association pour la Recherche sur le Cancer (CNRS6543/ARC). S. Cagnol is supported by a fellowship from the Ligue Nationale contre le Cancer.     

A novel paraptosis pathway involving LEI/L-DNaseII for EGF-induced cell death in somato-lactotrope pituitary cells

We have recently reported that EGF triggers an original form of cell death in pituitary cell line (GH4C1) with a phenotype sharing some characteristics of both apoptosis (internucleosomal DNA fragmentation) and paraptosis (caspase-independence and cytoplasmic vacuolization). However, the endonuclease involved in EGF-induced DNA fragmentation has not been assessed so far. In the present work we therefore further explored the putative paraptosis involvement in EGF-induced cell death and asked whether L-DNaseII might be involved. Indeed, this endonuclease is known to mediate internucleosomal DNA fragmentation in caspase independent manner. Our Western blot, immunocytochemistry and enzymatic measurement assays show that EGF triggers a cleavage of Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI) precursor into L-DNaseII, its subsequent enzymatic activation and nuclear translocation thus pointing to the involvement of this endonuclease pathway in caspase-independent DNA fragmentation. In addition, EGF-induced cell death can be blocked by paraptosis inhibitor AIP-1/Alix, but not with its anti-apoptotic C-terminal fragment (Alix-CT). Altogether these data suggest that EGF-induced cell death defines a novel, L-DNaseII-mediated form of paraptosis. This work was supported by fellowships from Fondation pour la Recherche medicale (FRM: FDT20030627283), from Association pour la Recherche contre le Cancer (ARC: ML/MLD/CM-A04/4) to JF and Retina France to AT and LP. These two authors equally contributed to this work.     

How to induce non-polarized cells of hepatic origin to express typical hepatocyte polarity: generation of new highly polarized cell models with developed and functional bile canaliculi

Few in vitro models expressing complex hepatocyte polarity are available. We used the unpolarized rat Fao cell line to isolate the polarized WIF-B line. These complex rat-human hybrid cells form functional simple bile canaliculi. To obtain Fao-derived polarized models with a simpler chromosome content and developed bile canaliculi, we employed two approaches. Partial success was achieved with monochromosomal hybrids. As shown by the immunolocalization of apical, basolateral, and tight-junctional proteins, monochromosomal hybrid 11-3 cells were polarized. They formed simple functional bile canaliculi and transiently expressed the typical polarity of simple epithelial cells. One subclone blocked in this polarity state was isolated. A more robust approach was provided by spheroid culture, a three-dimensional system that strengthens cell-cell contacts. Transient spheroid culture induced irreversible polarization of Fao cells. This induction occurred in most spheroids (approximately 1% of the cells). From populations enriched in stably polarized cells, we generated new polarized cell models, designated Can. Can 3-1 cells formed simple functional bile canaliculi when plated at high density. Regardless of plating density, Can 9 and Can 10 cells formed long tubular branched canaliculi competent for vectorial transport of organic anions and bile acids, and involving several dozen adjacent cells. Thus, we have generated new cell models stably expressing typical hepatocyte polarity. Among these models, Can 9 and Can 10 are the first capable of forming functional, highly developed bile canaliculi similar to those formed in vivo. This work was supported by grants from the Association pour la Recherche sur le Cancer (no.6551), the Institut Curie (PIC Signalisation Cellulaire, no. 914) and the Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (contract PRISME 98-09).     

Influence de la prédation des larves d'Hyperaspis raynevali et d'Hexochomus flaviventris (Col. Coccinellidae) sur les colonies de la cochenille du maniocPhenacoccus manihoti (Hom. Pseudococcidae). Étude en conditions contrôlées

Résumé L'influence de la prédation des larves d'Hyperaspis raynevali et d'Exochomus flaviventris (Col. Coccinellidae) sur les colonies de la cochenille du maniocPhenacoccus manihoti (Hom. Pseudococcidae) a été étudiée en relation avec la densité et la structure d'age des colonies de cochenilles, et avec le rapport proie/prédateur utilisé lors du lacher des larves. La prédation des deux espèces de coccinelles est surtout influencée par la densité et la structure d'age des colonies deP. manihoti: le rapport proie/prédateur intervient dans une moindre mesure. Elle est plus importante sur la densité initiale de 45 cochenilles/plant que sur la densité de 25 cochenilles/plant, et, permet de limiter significativement la multiplication des colonies deP. manihoti constituées d'adultes et de larves néonates, et de réduire significativement les effectifs de cochenilles composées de 2^e et 3^e stades larvaires. Pour les deux espèces de coccinelles, les lachers effectués avec un rapport proie-prédateur de 3 cochenilles pour 1 larve de coccinelle (3/1) ont une influence plus grande sur la réduction des effectifs de cochenilles que ceux réalisés avec un rapport de 7/1. Ce résultat est cependant plus marqué chezE. flaviventris. Pour tous les paramètres étudiés, la coccinelle exotiqueH. raynevali maintient les densités deP. manihoti à des niveaux numériques inférieurs à ceux obtenus avec l'espèce indigèneE. flaviventris. Les résultats sont comparés à ceux obtenus en parcelles au Congo. L'utilisation des larves de coccinelles dans la perspective d'une lutte biologique contre la cochenille du manioc est évoquée en discussion.