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人白细胞抗原G(HLA G)是一种在母婴耐受中起主要作用的非经典的HLA Ⅰ类分子 .其中HLA G3结构简单 ,仅具有α1结构域、穿膜区及胞浆区 ,其是否在细胞表面表达尚存在争议 .为了建立HLA G3稳定转染细胞株并确定其在细胞内的定位 ,采用RT PCR法从 9周人胎盘组织中获得了HLA G3的cDNA ,并构建到真核表达载体pcDNA3中 ,将所获得的真核表达质粒pcDNA G3转染至HLA Ⅰ (- )细胞株K5 6 2 ,经G4 18筛选后获得稳定转染的细胞株K5 6 2 G3.利用RT PCR、Western印迹检测方法证明在K5 6 2 G3细胞株中 ,HLA G3在mRNA水平和蛋白水平上均有表达 .进一步利用免疫荧光标记技术 ,证明HLA G3能够在转染细胞细胞膜上表达 .结果表明 ,稳定转染细胞株中HLA G3蛋白能够定位表达在细胞膜 相似文献
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《现代生物医学进展》2016,(26)
正由安徽医科大学、复旦大学与华大基因研究院共同开展的人类MHC(主要组织相容性复合体)区域全覆盖深度测序近日完成。该研究构建出迄今为止最完整的中国汉族人群MHC遗传变异数据库(Han-MHC),并阐述了其在复杂疾病研究中的重要价值。相关成果5月23日在线发表于《自然-遗传学》。MHC又被称作HLA(人类白细胞表面抗原),位于6号染色体上,包括一系列紧密连锁的基因座,与人类免疫系统功能密切相关,涉及几乎 相似文献
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青海藏族HLAⅡ类基因多态性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用PCR-RFLP的技术进一步研究了青海藏族HLA-DPB1的多态性。在19个HLA-DPB1的等位基因中,共检出18个等位基因。其中,*0501的频率最高(AF=380%);其次为*0201(AF=20.0%);未检出*1601。在HLA-DPB1各等位基因的分布上,藏族与中国南方汉族、中国北方汉族等无明显差异,而与高加索人及尼格罗人的差异则较为显著。综合隶属于三大人种11个群体中的HLA-DQAl、-DQBl和一DPBl基因座各等位基因的分布频率,用UPGMA方法构建了分子系统树,实验结果进一步证实汉藏同源说。 相似文献
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目前在脐带血间充质干细胞分离纯化过程中,往往出现纯度不高,有大量混杂的细胞。人羊膜组织是胚胎发育的早期产物,由于人羊膜具有无毒、无菌、无刺激性、抗微生物、不表达人HLA—ABC和HLA—DR抗原、易于获得和处理等特性,近十几年来羊膜在组织工程和移植治疗的临床应用较为广泛。 相似文献
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HLA系统是人群一种具有高度多态性的遗传结构,在不同人种间有明显差异。某一人种中常见的HLA抗原,在其它人种中可能少见或甚至完全缺失。在试验与血清供者同一人种时被认为是使用单价的(operationally monospecific)HLA分型血清,在其它人种中可能出现额外反应。因此鉴定HLA抗原最好是采自同一人种的抗血清。上海市白细胞分型协作组曾用上海地区经产妇细胞毒血清检出11个白细胞抗原。这些抗原分属于两个分离子系列(segregant series),由于当时缺乏参考血清,被临时命名为R系列和S系列。R系列包括7个抗原:R1、R2.2、R3、R4、R7、R8和R11.2。S系列包括4个抗原:S5、S6、S10和S12。本文报道将R和S系列抗原的分型血清与法、英、日等国实验室提供的HLA分型血清作平行试验,通过血清聚类分析(clustering analysis)和群体抗原相关分析(correlation analysis)确定R和S系列5个抗原的HLA相应命名。 相似文献
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我国大陆主要少数民族HLA多态性聚类分析和频率分布对中华民族起源的启示 总被引:21,自引:1,他引:21
本文是1991年11月6—13日横滨第11届国际组织相容性会议(IHWC)协作科研中我国主要少数民族(苗族、布依族、蒙古族、满族、回族、藏族、维吾尔族)和南北汉族样本HLAⅠ、Ⅱ、Ⅲ类抗原多态性分析的联合报告。聚类分析表明,苗、布依与南方汉族聚类,蒙、满、回、藏与北方汉族集群,提示中华民族包含南北两大群体。维吾尔族非常疏远地共聚于高加索人种。高加索人种起源的HLA抗原基因频率(A3、B8等)由西向东又由北向南递减。东南亚蒙古人种起源的HLA抗原基因频率(B46等)由南向北递减。HLA抗原基因频率的这种梯度分布反映我们祖先自远古史前时期以来的不断迁移和相互融合的过程。本文讨论了中华民族包含南北两大群体这一事实对于中华民族起源的启示。 相似文献
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目的:Y国探索HLA(human leukocyte antigens,HLA)不同分子的空间结构差异与功能之间的关系以及结构差异能否对预测造血干细胞移植GVHD(graft-versus-host disease,GVHD)的发生奠定基础。方法:提取人外周血总RNA,RT-PCR扩增HLA——DR等位基因全序,连接、转化大肠杆菌后并测序,将第二外显子氨基酸序列输入微机,通过INTER-NET传送至SWISS-MODELLING蛋白质空间结构模建服务器进行结构模建,结果:本文反转录了2例健康无血缘关系个体的HLA-DR位点基因全序,测序结果与HLA-DRα*0101、DRβ1*04051和DRβ1*07011的公布序列完全一致。对后两者的蛋白质空间结构模建发现它们在空间结构上存在显著差异。结论:对HLA基因位点进行全长测序可以明确判断基因型别;空间结构模建可以直观地辨别HLA不同舂子在空间结构上的差异。这为研究HLA结构与功能的关系以及HLA不完全相合的造血干细胞移植后预测GVHD的研究提供实验基础。 相似文献
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应用直接细胞毒试验,分别对Bcap-37人乳癌细胞系(第10,111代)、原供者及其丈夫和女儿进行了HLA-A,B,C分型。初步确定Bcap-37与原供者的HLA分型相同,均为HLA-A_2,A_(w30+31),B_(13),B_(w60);Bcap-37第10代和第111代HLA分型相同,无抗原表现型改变;原供者及其丈夫、女儿的HLA分型反映了其亲子关系。 相似文献
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《中国实验动物学报》2016,(4)
目的明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(GGTA1-/-)的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。方法采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLA I类基因(SLA-1、SLA-3、SLA-2)扩增、克隆及测序,对序列进行BLAST分析,并采用生物信息学方法对SLA I类基因分子结构特征及其与人HLA的同源性进行分析。结果测序分析表明,共获得6条等位基因序列,其中4条为已公布的等位基因(SLA-1*0703、SLA-2*1102、SLA-3*0401、SLA-3*0403),另2条为新等位基因(SLA-1*0401wz01、SLA-2*11wz01)。五指山小型猪与人HLA同源性为70.5%~72.1%。SLA-1*0401wz01、SLA-1*0703、SLA-2*11wz01、SLA-2*1102和SLA-3*0401的CD8+分子识别的关键结合域与人HLA氨基酸序列比对,均仅在位点225、228处发生了突变(T→S、T→M),其他位点高度保守。SLA-2*11wz01和SLA-2*1102与人HLA I类基因NK细胞抑制性受体(killer inhibitory receptor,KIR)结合区氨基酸同源性较高,在NKTA-1亚型结合域内仅有1个氨基酸差异,而在NKTA-2和NKTA-3亚型结合域内有2个氨基酸差异。结论从免疫细胞介导的异种排斥反应角度出发,GGTA1-/-五指山小型猪SLA I类基因氨基酸序列与人HLA高度相似,可作为未来猪-人异种器官移植的良好供体之一。 相似文献
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制备hβ2m HLA B2 70 4双转基因小鼠 ,研究hβ2m对HLA B2 70 4表达的影响 .通过hβ2m转基因小鼠和HLA B2 70 4转基因小鼠交配 ,出生动物及后代经PCR初步筛选 ,采用Southern杂交对经PCR初步筛选的hβ2m HLA B2 70 4双转基因阳性小鼠基因组DNA标本作进一步鉴定 .阳性者进行RT PCR和流式细胞光度术检测其在mRNA和蛋白水平的表达 .hβ2m阳性小鼠和HLA B2 70 4阳性小鼠交配 ,生仔鼠 6 7只 ,其中 2 8只仔鼠同时整合hβ2m和HLA B2 70 4基因 .Southern杂交证实 ,阳性鼠同时都含有hβ2m和HLA B2 70 4基因 .阳性小鼠的皮肤、结肠、睾丸和脾脏组织中均有HLA B2 70 4和hβ2m基因的mRNA表达 ,其外周血淋巴细胞膜上HLA B2 70 4基因的蛋白表达为 35 87% ,在HLA B2 70 4单转基因小鼠外周血淋巴细胞膜上HLA B2 70 4基因的蛋白表达为 7 87% (Histogramsta tistics) .成功地制备了hβ2m HLA B2 70 4双转基因小鼠 .在hβ2m HLA B2 70 4双转基因小鼠的外周血淋巴细胞膜上 ,HLA B2 70 4基因在蛋白水平表达较高 ,而在HLA B2 70 4单转基因小鼠中则表达不明显 .hβ2m可与HLA B2 70 4重链分子结合 ,稳定和增高其在淋巴细胞膜上的表达 相似文献
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HLA系统D区基因分型和中国汉族人特有的RFLP 总被引:1,自引:0,他引:1
HLA II类抗原在外来抗原提呈中起重要作用,在DNA水平进行II类抗原基因分型有更强的多态性鉴别能力,有利于检出新的特异性,根据白种人纯合分型细胞(HTC)和中国人部分纯合细胞DRB和DQA基因的RFLP格局,我们对上海地区90名随机健康人进行了HLA-D区基因分型,并将结果与血清学分型相比较,证明了它的可靠性和优越性。此外,通过与白种人格局相比,我们还发现了中国人特有的HLA-D区RFLP格局。 相似文献
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为预测超抗原葡萄球菌肠毒素(SE)家族中的SEA、SEB和SEC1的HLAⅠ和HLAⅡ抗原结合表位,并对其活化T细胞作用的机理进行探讨,根据已发表的SEA、SEB和SEC1基因全序列,用T细胞抗原表位预测软件Guotif2.0对其进行T细胞抗原表位预测,统计与HLAⅠ和HLAⅡ各抗原位点结合的SEA、SEB和SEC1肽段的出现次数。结果显示,SEA、SEBT SEC1具有共同的特点,即都是主要与HLAⅠ类分子的A3位点和HLAⅡ类分子的DR1位点具有较强的结合。说明SEA、SEB和SEC1与HLAⅠ类分子和HLAⅡ类分子都有很强的结合性。三者在HLAⅠ和HLAⅡ结合位点上具有较强的同源性。本研究为SE活化T细胞作用机制的功能实验提供了依据。 相似文献
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《中国生物工程杂志》2004,24(11):100
浙江省血液中心最新发现了两个人类HLA新等位基因,已被世界卫生组织正式命名为B5614和B5136。这是我国近两年来继深圳新发现3个人类HLA等位基因、成都新发现两个HLA等位基因以来,第三次发现新的人类HLA等位基因。该发现将有助于器官和骨髓移植时供体和受体更准确的配型, 相似文献
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不同海拔高度川滇高山栎群体遗传多样性的变化 总被引:23,自引:0,他引:23
采集海拔2200~3800m川滇高山栎(QuercusaquifolioidesRehd.etWils.)8个群体的样品,应用同工酶电泳的方法研究其遗传变异水平,并发现遗传变异水平随着海拔高度变化呈以下趋势:海拔2400~3300m川滇高山栎的遗传变异水平较高,而海拔3800m及2200m群体的遗传变异水平均有降低的趋势。另外,还发现人为干扰、日照多少对遗传变异水平均有影响。 相似文献
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以HLAⅡ类转基因鼠研究类风湿关节炎的发病机制 总被引:1,自引:0,他引:1
类风湿关节炎(RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病,至今发病原因不明。许多研究表明遗传因素是导致RA发病的最主要原因,而在遗传因素中约35%来自于人类白细胞抗原(HLA)Ⅱ类复合体。因此,对于HLA Ⅱ类复合体参与RA发病的分子机制研究一直是人们关注的热点,而表达HLA Ⅱ类分子的转基因鼠是研究HLA Ⅱ类复合体与RA发病关系最佳的平台。目前,国外已建立了几个HLA Ⅱ类转基因鼠品系,为RA发病机制的研究奠定了很好的基础。本文对HLA Ⅱ类转基因鼠及以此为基础的RA相关研究进行综述。 相似文献