显示DNA的改良染色在图象分析系统中的应用

在人体和动物组织中的核酸染色技术应用较为深入，通过图象分析系统对ＤＮＡ含量测定，而提供了可靠的依据。为了能够使ＤＮＡ组化染色技术，更好的适应图象分析系统的定量研究需要，因此我们对显示ＤＮＡ的染色方法进行了实验对照研究。选用在室温下的高浓度盐酸对细胞水解充足作用，而得到较好效果。改进了Ｓｃｈｉｆｆ＇Ｓ染色液配制，减少染色时间和程序，结果证明了染色稳定可靠，色彩对比度较强，适用于图象分析系统的应用。     

儿童白血病患者血浆循环DNA定量分析

目的:通过对儿童白血病患者血浆循环DNA定量检测,分析血浆循环DNA含量用于儿童白血病诊断的价值.方法:用血液微量DNA抽提试剂盒提取血浆循环DNA,以SYBR GreenI荧光染色法分别检测46例儿童急性白血病患者、20例健康对照标本血浆循环DNA含量;利用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆循环DNA对儿童白血痛的诊断价值.结果:儿童白血病患者血浆循环DNA含量为(30.04±15.13)ng/mL,高于对照组(12.22±7.10)ng/mL,二者差异有统计学意义(P＜0.05);循环DNA含量16.31 ng/mL为诊断儿童白血病最佳临界值,敏感性和特异度分别为86.96%和75.00%,ROC曲线下面积(AUC)为0.879.结论:血浆循环DNA定量检测有可能成为一种新的用于儿童白血病诊断方法.     

小儿急性白血病细胞DNA、蛋白质含量及其临床意义

用流式细胞术（ＦＣＭ）测定了４５例不同病期急性白血病患儿和１３例非白血病患儿骨髓细胞ＤＮＡ及蛋白质含量,结果显示：１．急性白血病患儿的ＤＮＡ非整倍体检出率为４１．２％,其中ＡＬＬ为３３．３％,ＡＮＬＬ为６０％;２．ＡＬＬ组和ＡＮＬＬ组的ＤＮＡ合成期细胞百分数（Ｓ％）显著低于非白血病组,而ＣＲ组与非白血病组之间的Ｓ％差异无显著性;３．ＡＮＬＬ组的ＰｒＩ显著高于ＡＬＬ组、非白血病组及ＣＲ组,ＡＬＬ的ＰｒＩ显著低于ＣＲ组和非白血病组,而非白血病组与ＣＲ组的ＰｒＩ差异无显著性。四组之间ＬＰＣ－Ｆ差异无显著性;４．在对１１例ＣＲ病人进行的连续观察过程中,５例病人检出ＤＮＡ非整信体,其中４例于检出ＤＮＡ非整倍体后３３～７４天复发。     

成人T细胞白血病

<正>前言 1979年高月等发现成人T细胞白血病(ATL),指出是以日本冲绳,南九洲,四国,纪伊和三陆,以及加勒比海沿岸各国为中心多发的淋巴瘤和白血病,据Gallo和日沼等证实病原病毒是逆转录病毒的人I型T淋巴细胞病毒(HTLV—I)。吉田等确定了病毒基因的全部碱基序列。 HTLV—I的主要传播途径,是以母乳为媒介的母子间垂直传播、经性行为的横向传播及输血,但详细的传播机制还不完全清楚。HTLV—I如进入人的淋巴细胞内,就与其他逆转录病毒一样,两条病毒RNA经自身的逆转录酶作用转化为DNA,形成双链DNA后随机插入宿主DNA中,以前病毒DNA的形式继续存在。因此,可用HTLV—IDNA诊断ATL患者的淋巴细胞DNA。     

阿达玛变换显微图象分析Ⅰ──细胞定量分析初探

简单介绍了阿达玛变换多通道成象技术的原理及我们研制的阿达玛变换显微图象分析仪的工作原理,在此基础上,讨论了该仪器用于细胞定量分析及图象分析的可行性,包括图象和分析结果的可靠性及外界条件对分析结果的影响。结果表明：阿达玛变换显微图象分析是一种灵敏、准确、受外界干扰小、能同时提供分析物图象和定量分析结果的有效的细胞定量分析方法。     

DNA甲基化、基因表达的定量分析制品上市销售

美国Sequenom公司于2006年3月宣布将向市场推出该公司在基因分析系统”MassARRAY“上搭载了2种生物标记的分析制品。新产品是DNA甲基化和基因表达定量分析制品，可以增强”MassARRAY”平台的基因分析的功能。Sequenom公司的新产品是面向继基因表达分析市场之后，急速增长的DNA甲基化分析领域的产品。这些新产品于2006年4月在美国华盛顿DC召开的美国肿瘤研究学会年度总会上进行了展示。[第一段]     

阿达玛变换显微图象分析Ⅰ──细胞定量分析初探

简单介绍了阿达玛变换多通道成象技术的原理及我们研制的阿达玛变换显微图象分析仪的工作原理,在此基础上,讨论了该仪器用于细胞定量分析及图象分析的可行性,包括图象和分析结果的可靠性及外界条件时分析结果的影响。结果表明：阿达玛变换显微图象分析是一种灵敏、准确、受外界干扰小、能同时提供分析物图象和定量分析结果的有效的细胞定量分析方法。     

应用反义技术研究DNA聚合酶ε在HeLa细胞DNA复制中的功能

我们应用以义技术,结合Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入和ＧＰＴ筛选方法,研究了ＤＮＡ聚合酶ε在ＨｅＬａ细胞ＤＮＡ复制过程中的功能,针对ＤＮＡ聚合酶ε和α的反义寡核苷酸都能够专一地抑制ＨｅＬａ细胞的ＤＮＡ合成。首镒直接证明了ＤＮＡ聚合酶ε在哺乳动物细胞的ＤＮＡ复制过程中具有重要作用。．     

滋养细胞肿瘤糖原PAS整块显色及图像定量分析

应用图像分析仪,对经过ＰＡＳ整块染色的４４例滋养细胞肿瘤标本进行糖原定量测定和分析。结果表明：滋养细胞肿瘤细胞的糖原含量和细胞增生程度成正比。恶性葡萄胎（ＨＭ）（未化疗）和绒毛膜癌（未化疗）的糖原含量明显高于良性葡萄胎和正常绒毛,有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。恶性葡萄胎和绒毛膜癌经化疗后,糖原含量明显降低。结果提示：滋养细胞肿瘤糖原含量的图像分析,在该肿瘤的诊断、预测预后,指导临床治疗方面,有一定的意义     

角结膜缘上皮良、恶性病变细胞核DNA原位图像定量分析

应用真彩色医学图像分析技术,对５１例角结膜缘上皮良、恶性病变（其中上皮增生１９例,不典型增生６例,原位癌１４例,鳞状细胞癌１２例）进行了ＤＮＡ原位定量分析研究．结果显示：原位癌和鳞状细胞癌ＤＮＡ含量明显增加,多为高倍异倍体细胞,ＤＮＡ直方圆明显右移,峰值主要位于＞５Ｃ处,≥５Ｃ细胞分别占７８．８９％和７８．３１％;上度增生病变ＤＮＡ含量较低,多为低倍整倍体细胞,ＤＮＡ直方图峰值位于２Ｃ～４Ｃ处,２Ｃ～４Ｃ细胞占８８．５９％;上皮不典型增生病变ＤＮＡ含量介于良性病变和癌之间,ＤＮＡ直方图逐渐右移,２Ｃ～４Ｃ细胞占５８．６２％,≥５Ｃ细胞占４１．３８％。以上数据经统计学处理各组间有显著性差异。表明ＤＮＡ倍性程度与肿瘤的增殖程度呈正相关,高倍异倍体细胞随肿瘤恶性程度的增高而增多。作者认为ＤＮＡ原位图像定量分析可为角结膜缘上皮良、恶性病变的诊断、分级及早期发现癌变趋势提供一个可靠的参考指标。     

LFNG在白血病BALL-1细胞中的表达状况研究

O-岩藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(Lunatic Fringe,LFNG)与Notch信号作用密切相关,且LFNG在不同组织细胞中对Notch信号所起的作用不同。为了探讨LFNG在急性B细胞白血病中的表达及对Notch信号的作用,应用real-time PCR和Western-blot在核酸水平及蛋白质水平上检测了LFNG在人急性B淋巴细胞白血病细胞系BALL-1、人正常B淋巴母细胞系HMy2.CIR及正常B细胞中的表达状况,并应用si RNA技术分析了LFNG基因沉默后对白血病BALL-1细胞中Notch信号通路的影响。结果显示:白血病细胞系BALL-1存在LFNG蛋白过度表达,且LFNG基因沉默后抑制白血病B细胞的Notch信号通路。上述结果提示LFNG在白血病B细胞中的异常表达能促进Notch信号。     

用无细胞克隆系统进行特异DNA扩增的技术—PCR

作为分子生物学基石之一的分子克隆技术,是一系列技术的总称,包括目的基因的提纯,选择有自主复制能力的载体DNA,选用不同的限制性内切酶,构建新的重组DNA,导入受体细胞,重组DNA的转化,转化后遗传物质和性状的转移及重新组合,重组DNA的纯化扩增等。该系列技术的操作相当复杂繁琐且耗时长。如何从极微量的生物材料中简便快速地得到大量特定的基因,或是在众多复杂的生物基因DNA中,     

SHIP1在急性髓细胞白血病患者中的表达及对人白血病细胞凋亡的影响研究

目的:探讨含SH2结构域的肌醇1(SHIP1)在急性髓细胞白血病患者中的表达及对人白血病细胞凋亡的影响。方法:采用Western blot检测收集的急性髓细胞白血病患者骨髓中SHIP1的表达。人白血病细胞U937转染SHIP1过表达载体(pEGFP-SHIP1组)及对照空载体(pEGFP组),同时设置对照组,对照组细胞不转染载体,其他步骤同pEGFP-SHIP1组和pEGFP组。流式细胞仪检测48 h的细胞凋亡情况,Western blot检测48 h细胞中SHIP1、Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt的表达。结果:急性髓细胞白血病患者骨髓中SHIP1表达明显低于正常人(P0.05)。pEGFP-SHIP1组细胞中SHIP1、Bax表达和凋亡率均明显高于pEGFP组及对照组(P0.01),Bcl-2、p-Akt表达均明显低于对照组(P0.01)。结论:SHIP1在急性髓细胞白血病患者骨髓中表达下调,其可能通过Akt信号促进人白血病细胞凋亡。     

PCR介导的DNA序列系统分析在系统动物学中的应用

ＰＣＲ介导的ＤＮＡ序列系统分析在系统动物学中的应用王亚明，周开亚（南京师范大学生物系南京２１００９７）关键词：ＤＮＡ序列分析，系统发育，系统动物学，分子进化在过去的几十年中，系统学（Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｓ）研究得到了革命性发展，其原因有三个：首先是基...     

天然药物活性成分诱导白血病细胞凋亡研究进展

细胞凋亡是由基因控制的细胞主动死亡过程。现代研究表明,白血病与细胞凋亡密切相关。本文综述了天然药物活性成分对白血病细胞凋亡的影响。     

microRNA在急性淋巴细胞白血病中的作用

MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA分子,其通过降解mRNAs或抑制mRNAs翻译来负调控基因表达并可能调控着几乎每一个细胞生理进程.急性淋巴细胞白血病(ALL)是儿童时期最常见的血液肿瘤,miRNA的异常表达谱对于ALL的发病机制与临床应用有至关重要的作用,因此miRNAs已迅速成为ALL潜在的治疗靶点.     

彗星分析及其在DNA损伤研究中的应用

Ostling和 Johanson于 1 984年创立了一种检测单细胞 DNA链断裂的方法 ,他们将少量经过 γ射线辐照的细胞包埋在薄层琼脂糖中 ,裂解后加电场电泳 ,用亲合 DNA的荧光染料染色 ,在荧光显微镜下观看断裂的 DNA片段从大到小由细胞核向外扩散迁移 ,就象彗星一样 ,故称为彗星分析 (Comet Assay)。以后又有不少学者对这种方法进行了改善 ,但一直没有统一实验方案 ,因此很难进行比较 ,但总的来说 ,可以概括如下 :　　本文对彗星分析法中的关键步骤作简短讨论 ,然后谈谈它在 DNA损伤研究中的应用。1　制片一般用终浓度 0 .5 %～ 1 .0 %的低熔…     

细胞DNA倍体分析和EBERs原位检测在鼻咽癌早期诊断中的应用

目的　探讨鼻咽脱落细胞进行DNA倍体和EB病毒编码RNA (EBERs)检测在鼻咽癌诊断中的应用。方法　对 38例经细胞学诊断为鼻咽癌和 8例为正常的鼻咽细胞涂片分别进行图像分析测定细胞DNA含量和EB病毒EBERs原位杂交检测。结果　与病理细胞学诊断相比 ,DNA异倍体分析和EBERs检测诊断癌的敏感性分别为 5 0 %和 92 %,其特异性均为 10 0 %;其阴性预测值分别为 30 %和 72 %。结论　与EBERs检测相比 ,DNA异倍体分析的诊断敏感性和阴性预测值较低 ,差异具有显著性 (分别为P <0 0 0 1和P <0 0 5 )。证明在鼻咽细胞学涂片应用EB病毒原位杂交检测诊断鼻咽癌优于应用DNA异倍体分析诊断。与细胞DNA图像分析相比 ,EB病毒原位杂交检测具有客观、实验条件简单等优点 ,在鼻咽癌可疑病人的早期诊断和鉴别诊断上具有重要的实用价值。     

ABI 1700芯片分析系统在基因差异表达研究中的应用

应用化学发光法标记技术分别对正常和临床慢性髓细胞性白血病（chronic myelogenous leukemia,CML）病人骨髓单个核细胞的RNA进行标记,然后与ABI的人全基因组表达谱芯片杂交,对于杂交后所得到的荧光信号数据,应用1700芯片分析系统对其进行生物信息学分析.实验结果表明,ABI1700芯片分析系统可以对基因芯片杂交后得到的差异表达基因进行疾病学分类和生物功能分类分析,同时还发现与CML相关的差异表达基因75个,因此ABI1700芯片分析系统在芯片研究领域中具有重要的应用价值.