绵羊艾美虫一新种：（真球虫目：艾美亚目：艾美科）

本文记述了真球虫目、艾美科、固原艾美虫一新种Eimeria guyuanensis sp.nov.的形态。在宿主——绵羊肠道里的寄生部位及体外发育情况。本种与小型艾美虫E.parva的区别在于有卵膜孔和浅极帽。新种与槌形艾美虫E.crandallis的区别在于卵囊较小,孢子囊长宽比例较大,有斯氏体,以及卵囊的寄生部位与体外发育等特征不同。     

柔嫩艾美耳球虫安徽肥西(AHFX)株的分离与鉴定

目的 分离并鉴定安徽肥西病鸡盲肠内的柔嫩艾美耳球虫.方法 通过雏鸡进行单卵囊接种与增殖试验,对所获卵囊用形态学方法进行初步鉴定;运用PCR方法扩增该分离株的ITS-1基因序列,并与相关序列进行比对、构建系统进化树.结果 该球虫分离株孢子化卵囊的平均大小为21.1 μm ×18.0 μm,卵形指数为1.17,潜隐期为140 h;其ITS-1基因序列与柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)GQ856310相似性达98.2％,二者的亲缘关系非常接近.结论 该球虫分离株为柔嫩艾美耳球虫(E.tenella),暂命名为柔嫩艾美耳球虫安徽肥西(AHFX)株.     

昆明市家兔艾美球虫卵囊的研究

家兔球虫属于原生动物门(Protozoa)、孢子虫纲(Sporozoa)、球虫目(Coccidia)、艾美科(Eimeridae)、艾美虫属(Eimeria)。是家兔的重要寄生虫,常引起幼兔的大量死亡,是养兔业的大敌。 迄今,国内家兔球虫共记述有9种。包括裴锡庚等(1958)在成都、川西记录的7种;江静波等(1959)在广州报告的9种;孙希达(1966)在西安市报告的8种,以及蒋金书等(1979)在北京地区记录的7种。云南家兔球虫尚未见有报道。1978—1979年,我们对云南大学及昆明医学院兔场的300多只自养自繁的家兔进行了粪便检查,并剖检了数只私人饲养的家兔,发现寄生于昆明市家兔的球虫共有10种。多为混合感染。除了国内已报告的9种以外,还有新兔艾美球虫(Eimeria neoleporis)为国内新记录。此种球虫自然感染家兔是继Gill及Ray(1960)首次在印度报告之后的第二次报告。同时,对肝艾美球虫(Eimeria stiedae)的卵囊余体和穿孔艾美球虫(Eimeria Perforans)卵囊的胚孔也进行了观察。     

高原姬鼠一新艾美球虫记述(顶复合门,艾美球虫科)

粪检云南省昆明市太平镇捕获的31只高原姬鼠Apodemus chevrieri,在9只高原姬鼠中共发现了2种艾美球虫,自然感染率为29%,其中1种被命名为新种:齐氏艾美球虫Eimeria chevrieri sp.nov.。齐氏艾美球虫孢子化的卵囊椭圆形,大小为21·2μm×16·3μm(22·2~19·7μm×17·3~15·6μm)。卵囊壁光滑,单层,厚约1·0μm;无胚孔和卵囊余体。有1~2个极体,极体形状不规则,直径1·0~2·0μm。卵圆形的孢子囊大小为11·2μm×7·5μm(12·3~10·3μm×8·3~6·8μm),有孢子囊余体,且主要分布在2个子孢子的中间,斯氏体扁豆形,大小为1·0μm×0·3μm,亚斯氏体亚球形,大小为2·5μm×1·5μm。子孢子在孢子囊里面头尾相接,在其宽端有1个明显的反光体,直径约3μm。模式标本保存在云南大学标本馆。齐氏艾美球虫,新种Eimeria chevrieri sp·nov.(图1~2,4)寄生于姬鼠属,具有椭圆形的卵囊,卵囊壁具有光滑、无色、单层特点的艾美球虫有3种:E.gomurica Musaev and Veisov,1963,E.kaunensis Arnastauskiene et al.,1978和E.gandobica Musaev and Veisov,1965。E.gomurica、E.kaunensis与本种的主要区别是卵囊较小且有卵囊余体;E.gandobica与本种的主要区别是卵囊呈宽椭圆形,卵囊和孢子囊较小(19·0μm×16·8μmvs·21·2μm×16·3μm;8·0μm×5·0μmvs·11·2μm×7·5μm),孢子囊余体少,无反光体和亚斯氏体。寄生于姬鼠属,具有椭圆形的卵囊,卵囊壁具有光滑、2层特点的艾美球虫有3种:E.alorani Hurková et al.,2005、E.apodemi Pell啨rdy1974和E.zaurica Musaev and Veisov,1965。E.zaurica与本种的主要区别是具有卵囊余体;E.alorani的卵囊和孢子囊比本种大的多(26·9μm×19·3μmvs.21·2μm×16·3μm),且其孢子囊余体形成一个直径约4~5μm的球状结构;E.apodemi的孢子化卵囊呈宽椭圆形,经常不对称,无极体和斯氏体。该种区别其它种的关键特征是:1)孢子化卵囊椭圆形,卵囊壁光滑、单层、无色;2)有极体;3)孢子囊有亚斯氏体。模式标本,含孢子化卵囊的齐氏姬鼠粪便保存在云南大学生物系,标本编号:2006047;齐氏姬鼠标本保存于云南大学标本馆,标本编号20060081。词源:种名源自宿主种名。     

柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建

为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构建了2个子孢子cDNA消减文库和1个孢子化卵囊cDNA消减文库。随机从3个cDNA消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定2个子孢子cDNA消减文库的重组率都为96%,孢子化卵囊cDNA消减文库的重组率为98%。从每个文库中随机挑取50个克隆测序,并进行同源性比较分析,结果显示:从孢子化卵囊cDNA消减文库中获得了13个单一有效序列,其中8个EST与已知蛋白同源性很高;从2个子孢子cDNA消减文库中共获得了40个单一有效序列,其中9个EST与已知蛋白同源,其余可能为柔嫩艾美耳球虫的新基因。这些结果为分离柔嫩艾美耳球虫新功能基因和进一步探索防治球虫病的方法提供了理论基础。     

柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建

为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交（SSH）技术,构建了2个子孢子cDNA消减文库和1个孢子化卵囊cDNA消减文库。随机从3个cDNA消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定2个子孢子cDNA消减文库的重组率都为96%,孢子化卵囊cDNA消减文库的重组率为98%。从每个文库中随机挑取50个克隆测序,并进行同源性比较分析,结果显示：从孢子化卵囊cDNA消减文库中获得了13个单一有效序列,其中8个EST与已知蛋白同源性很高;从2个子孢子cDNA消减文库中共获得了40个单一有效序列,其中9个EST与已知蛋白同源,其余可能为柔嫩艾美耳球虫的新基因。这些结果为分离柔嫩艾美耳球虫新功能基因和进一步探索防治球虫病的方法提供了理论基础。     

云南省黄牛球虫的种类包括艾美球虫一新种的描述

国内牛球虫病已屡见报告,但关于牛球虫种类,牛群感染情况等尚未见有系统的调查。1981年2月至1982年3月,我们在云南省三个地、州、市的六县一市共调查黄牛372头,检查出12种球虫卵囊,11种为艾美球虫(Eimeria),其中包括一新种;1种为等孢球虫(Isospora)。统计了牛群和不同年龄牛的球虫感染率以及单种感染和混合感染的情况。并绘制了球虫卵囊图以兹参考。     

肠艾美耳球虫(Eimeria intestinalis)内生发育阶段超微结构研究:Ⅱ.大配子的发育及卵囊壁的形成

肠艾美耳球虫(Eimeria intestinalis)大配子体(Macrogametocyte)带虫空泡内有许多泡内小管。大配子体外被单层限制膜,核大,有一明显的核仁。两种成囊颗粒几乎同时出现。发育中的大配子体胞质中出现多糖和脂肪小体,并逐渐增多。大配子表面被有两层膜。卵囊壁形成的标志是大配子表面的两层膜松弛地向带虫空泡内推移,成囊颗粒Ⅰ形成卵囊壁的外层,成囊颗粒Ⅰ的物质形成卵囊壁的内层,在内层之下又有一颗粒层的形成和消失。     

驯鹿艾美虫属一新种：（球虫目：艾美科）

本文寄生于驯鹿Ｒａｎｇｉｆｅｒ ｔａｒａｎｄｕｓ艾美虫属一新种－－敖鲁古雅艾美虫Ｅｉｍｅｒｉａ ａｏｌｕｇｕｙａｅｎｓｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ．,新种的特种是具有卵囊残体和最小的量度,可与文献中记载寄生于驯鹿的五种艾美虫相区别。     

柔嫩艾美耳球虫HSP基因的克隆、表达及鉴定

为研究柔嫩艾美耳球虫热激蛋白(Heat shock proteins,HSPs)的生物学特性,应用RACE和RT-PCR技术,从柔嫩艾美耳球虫子孢子中首次克隆获得了EtHSP的全长cDNA(GenBank Accession No.FJ911605)。EtHSP包含一个1455 bp的开放阅读框,编码484个氨基酸,预测表达蛋白的分子量大小为53.5 kD。应用Real-time PCR对柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和裂殖子)表达量进行分析,发现该基因在子孢子阶段的表达明显高于其他阶段。同时,构建了原核表达重组质粒pET28a(+)-EtHSP,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE及Western blotting分析。结果显示,重组质粒pET28a(+)-EtHSP在大肠杆菌中以包涵体形式表达,经1 mmol/L IPTG诱导6 h后的表达量最高,该蛋白可被抗柔嫩艾美耳球虫的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性。本研究结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。     

柔嫩艾美耳球虫基因在丝状体蓝藻中的克隆*

以纯化的柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊为模板 ,根据已知的序列设计一对引物 ,用RT PCR方法扩增出球虫的SO7基因 ,通过三亲接合转移、新霉素筛选、序列分析等方法得到了转球虫基因工程蓝藻。这为球虫基因在蓝藻中表达奠定了基础。     

石榴果皮水溶性提取物的抗球虫活性分析

本研究将‘软籽石榴’作为实验材料,将感染柔嫩艾美耳球虫的3周龄Cobb肉仔鸡作为研究对象,考察石榴果皮水提物组、氨丙啉组、未用药组和对照组的每克粪便中的卵囊数、体重增量和饲料转化率之间的差异。结果显示,治疗7 d后,水提物组的每克粪便中的卵囊数和饲料转化率显著低于未用药组,而体重增量显著高于未用药组。不同剂量(100 mg/kg, 200 mg/kg, 400 mg/kg体重)的石榴果皮水提物的抗球虫效果呈剂量依赖性增加,而以400 mg/kg体重的石榴果皮水提物对Cobb肉仔鸡灌胃效果最佳,治疗7 d后,每克粪便中的卵囊数(103个)和饲料转化率(1.47)分别达到最低,体重增量达到最高(1 699.99 mg·kg~(-1)·bw~(-1))。因此,石榴果皮水提取物具有较好的抗球虫活性。     

肠艾美耳球虫（Eimeria intestinalis）内生发育阶段超微结构研究：Ⅱ…

肠艾美耳球虫大配子体带虫空泡内有许多泡内小管。大配子体外被单层限制膜,核大,有一明显的核仁。两种成囊颗粒几乎同时出现,发育中的大配子体胞质中出现多糖和脂肪小体,并逐渐增多,大配子表面能两层膜。卵囊壁形成的标志是大配子表面的两层膜松弛地向带虫空泡内推移,成囊颗粒Ｉ形成卵囊壁的外层,成囊粒Ⅱ的物质形成卵囊壁的内层,在内层之下又有一颗粒层的形成和消失。     

艾美耳混合球虫对高原鼠兔致死毒力的初步研究

球虫是专一性地寄生于宿主体内且对宿主有很强致死性的一种原生动物。艾美耳球虫是高原鼠兔的主要寄生物。利用艾美耳球虫防治高原鼠兔将具有重要的生态学意义和应用价值。本研究通过人工感染不同剂量的艾美耳混合球虫研究了对高原鼠兔的致死毒力。高原鼠兔的成体死亡率与球虫的感染剂量呈正相关关系,感染600 × 10⁴ 个/ mL 剂量的球虫可导致大部分高原鼠兔成体死亡,而感染60 ×10⁴ 个/mL 剂量的球虫可导致全部亚成体死亡;成体和亚成体的死亡率无性别间的差异,其死亡时间分别为第4 d和第8 d。感染60 × 10⁴ 个/ mL 剂量球虫的高原鼠兔随粪便排出的卵囊数量最大。本研究结果表明,艾美耳球虫对高原鼠兔的非急性致死效应类似于慢性杀鼠剂的作用。如果野外大剂量投放艾美耳球虫制剂后,不仅有望短期内有效降低高原鼠兔种群数量,而且其控制效果可具长效性的潜在优点。     

东北虎源等孢球虫的发现

对东北虎粪便进行虫卵检查,分离获得了自然感染的球虫卵囊。对球虫卵囊的形态和经培养发育后的各阶段的卵囊形态进行了观察。东北虎源球虫卵囊符合等孢属球虫的形态学特征。根据Genbank 上发表的猫等孢球虫18S rDNA 序列(L74671)设计一对特异性引物,利用PCR 技术对东北虎源球虫的18S rDNA 进行了扩增。扩增得到一段360 bp 的DNA 片段,并对该片段进行了序列测定。测序结果和其它17 种原虫的相应序列进行序列同源性比较分析,分析显示东北虎源球虫和其它等孢属球虫单独聚为一类。结合对东北虎源球虫的卵囊形态、卵囊发育情况及序列分析结果,确定其为等孢属球虫。      

重庆市中药研究院实验兔球虫感染种类调查

2009年6月对重庆市中药研究院实验兔场的实验兔球虫感染种类进行了调查.采用兔粪分离沉淀孵化法获得充分孢子化的卵囊,通过对卵囊形态鉴定,发现该兔场的家兔感染球虫达13种之多,以斯氏艾美尔球虫(占23％)、盲肠艾美尔球虫(占15.33％)、大型艾美尔球虫(占12.67％)和长形艾美尔球虫(占12％)4种为主,长艾美尔球虫和那格浦耳艾美尔球虫在重庆地区首次被检出.提示很有必要深入调查重庆地区的兔球虫种类和感染强度,积极探索适合重庆特点的兔球虫病防制措施和方法.     

柔嫩艾美耳球虫早熟系的选育及其生物学特性研究

选育制备弱毒疫苗所需的柔嫩艾美耳球虫早熟系并对其生物学特性进行研究。运用Jeffers建立的早熟系选育方法对柔嫩艾美耳球虫山西株（E．tenella SX010323）进行早熟选育,并对其内生发育、致病性、繁殖力、免疫原性、稳定性进行观察和检测。结果表明：经过海兰白雏鸡15次传代之后,E．tenella SX010323潜隐期由141h缩短至120h,卵囊明显缩小。选育得到的柔嫩艾美耳球虫山西株早熟系（E．tenella SX010323P15）其内生发育表现第二代裂殖生殖不完全;亲本株与早熟系对11日龄雏鸡的半数致死量分别为7．52×10^4个／只、27．64×10^4个／只,早熟系在致病性与繁殖力上均较母株大幅度降低,但保留了母株的免疫原性,经早熟系免疫的雏鸡可抵抗亲本株半数致死量的攻击。对选育的早熟系进行放松选择传代10次,其潜隐期、OPG、致病性均保持了早熟系的特征。提示通过早熟选育得到了遗传相对稳定的柔嫩艾美耳球虫早熟系。     

中国圈养麝内寄生虫感染情况调查

为了掌握我国圈养麝内寄生虫感染情况,为圈养麝内寄生虫病防控技术的研究提供科学依据。本研究抽样采集圈养麝新鲜粪样,采用循序沉淀法、离心漂浮法和贝尔曼法进行粪样中寄生虫虫卵(或卵囊)和幼虫的检查。从四川、陕西、甘肃和湖北等地24个养麝场中抽样采集了1049只麝的新鲜粪样,共查到9种(类)寄生虫虫卵(或卵囊)和幼虫,总阳性率为71.21%。其中,球虫Eimeria sp.卵囊阳性率达44.61%,卵囊密度(OPG)为800~54 400;线虫卵(未定科属)阳性率次之,为11.73%,虫卵密度(EPG)为300~18 700;而肺线虫(网尾属Dictyocaulus sp.)幼虫、毛细线虫Capillaria sp.卵、毛圆线虫Trichostrongyloides sp.卵、食道口线虫Oesophagostmum sp.卵、绦虫Anoplocephalidae sp.卵、类圆线虫Strongyloides sp.卵和毛首线虫(鞭虫Trichuris sp.)卵的阳性率分别为6.01%、2.00%、1.81%、1.53%、0.95%、1.24%和1.33%。调查表明我国圈养麝感染的内寄生虫种(类)多,感染率较高,其中以球虫和线虫感染情况最严重。     

高原鼠兔寄生艾美耳球虫(顶复器门,艾美耳科)二中国新纪录种

记述从高原鼠兔Ochotona curzoniae新鲜粪便收集的艾美耳属Eimeria球虫二中国新纪录种:E.worleyi Lepp,Todd & Samuel,1972和E.klondikensis Hobbs & Samuel,1974,高原鼠兔是其寄生新宿主.鼠兔标本保存于青藏高原生物标本馆,孢子化卵囊标本保存于中国科学院西北高原生物研究所高原生物适应与进化重点实验室.     

毁灭泰泽球虫小配子形成及受精现象的扫描电镜观察

现今关于球虫超微结构方面的研究资料已相当丰富,其中涉猎最多的是文美耳属(Eimeria)的虫种,同样隶属于孢子虫纲真球虫目艾美耳科的泰泽属球虫(Tyzzeria)尚未见报道。作者以纯种毁灭泰泽球虫(T.Perniciosa)人工感染无球虫北京鸭,定时扑采取小肠组织,利用扫描电镜对虫体小配子的形成过程及其形态进行了描述,并观察了大小配子的受精现象。 小配子形成毁灭泰泽球虫的小配子发育在小肠上皮细胞的带虫泡(Parasito phorous vacuole)内进行,和已报道的肠道艾美耳属球虫相同。在感染严重的样品,一个上皮细胞内往往有几个大、小配子体