一种构建高质量随机肽库的有效方法

为构建完全随机化的基因工程肽库 ,克服现有简并方案中终止密码子和序列组成偏歧的不足 ,提出了一种新的简并DNA文库合成方式。通过这种分组式合成方式构建的肽库可以避免终止密码子的出现和氨基酸组成偏歧的发生 ,还可以控制随机化过程中不同氨基酸的参入比例。以一个 13肽库的合成过程为例对分组式合成法进行了实验 ,测序结果和对 19种氨基酸出现频率的统计表明没有终止密码子和半胱氨酸密码子出现 ,各氨基酸的出现频率接近均值 ,表明这种分组 混合 分组 ,辅以简并合成的方法是行之有效的 ,能满足各类高容量基因工程随机肽库要求。     

质量肽谱在蛋白质结构研究中的应用

蛋白质的一级结构始终是生物学家关心的一个焦点,他们通常使用肽谱分析的方法测定蛋白质的一级结构。肽谱是一种技术,它使用特异性的酶或化学的方法,将蛋白质降解成小肽,然后进行分离和分析[1]。肽谱在蛋白质研究中起着重要的作用,它可以确证蛋白质的序列,用于蛋白质鉴定;鉴定翻译后的修饰及体外的化学修饰;检测单个氨基酸的变异(即突变);鉴定不同的蛋白构型;也可用于产生核苷酸探针检测ＤＮＡ文库;合成多肽诱导...     

调控保幼激素合成的神经肽抑制素Allatostatin 4的初级结构分析

由太平洋折翅蠊Diploptera punctata脑提取,纯化出脑神经肽Allatostatin 4(AST 4),并合成了AST 4及两种类似物。这种神经肽可有效地抑制体外咽侧体的保幼激素生物合成。测定了这种肽的初级结构,有8个氨基酸残基。它与已知的AST 1—3的氨基酸序列有某些相似性,即靠近C-末端的三个氨基酸和从C-末端数第五和第六位氨基酸相同。AST 4的氨基酸序列为: Asp-Arg-Leu-Tyr-Ser-Phe-Gly-Leu-NH_2 合成的肽和由N末端截断的片段(末端残基为5或6个氨基酸),其体外活性明显。     

采用固相法合成高纯度生产激素释放因子

工业技术院纤维高分子材料研究所合成了由44种氨基酸构成的人生长激素释放因子(GRF)。从脑下垂体中放出的人生长激素是受丘脑下部产生的GRF控制的。自从1982年发现GRF是由44种氨基酸组成的肽以后,在全世界范围内进行了对它的合成研究。现在该研究所的大箸信一等使用了连结氨基酸成为肽的自动合成装置,在溶媒中使用二氯甲烷、氯仿、甲醇等,通过固相合成法,成功地合成了在世界上居领先的高纯度GRF。     

用混合氨基酸接肽的方法合成OX型肽亚库

肽库合成是药物研究组合化学策略的重要技术之一。建立合成OX型肽亚库的固相合成方法 ,接肽反应采用等摩尔的Fmoc氨基酸混合物和DIC HOBt缩合方法 ,以高浓度的缩合剂和不断缩减溶剂的策略促进偶联反应进行完全。产物的氨基酸组成分析结果显示 ,所使用的常见氨基酸都能以相近的摩尔比例接肽至X位置。推测经多次接肽后最终形成的肽亚库中 ,含低活力氨基酸较多的肽其浓度虽然会较低一些 ,但影响不会太大 ,且本合成方法成本相对较低 ,故可为抗原表位分析、多肽药物筛选及构效关系分析提供一种有用的工具。     

肽和DNA合成仪

英国Biotech Institute Limited公司设计并生产了一种价值10万英镑的现代化、自动化肽和DNA合成仪.目前已销售给日本和印度的先进实验室.据报道,该仪器订货量使公司月出口销售量创纪录.印度(孟买)农业部实验室、日本神奈川理工学院(产业、学术界及神奈川县政府之间的一种独特的合伙的高技术组织)采用了上述仪器.该院校着手的初始工程是开发便于分子识别的新型生物特异性膜.     

分支状多抗原肽系统在疫苗研制中的应用

疫苗接种是预防和控制传染病流行的一种重要措施。常用的疫苗包括减毒活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗。目前的亚单位疫苗多是采用重组DNA技术用微生物或哺乳动物细胞产生。但分子量较小的抗原很难用重组DNA技术制备,化学合成便成为较为简便的途径。合成肽疫苗是根据抗原的氨基酸序列设计的用化学方法合成的一种安全性很高的     

微生物学的发光仪器

生物发光和化学发光的仪器已有很多应用.这里,我们坚持使用“发光仪”这个词来命名这类仪器,虽然也有人偶尔用辐射仪或光度计等其他名称.这里“发光”一词仅包括生物发光和化学发光,不包括荧光、磷光等等.有好几家公司生产发光仪,本文结尾罗列了这些仪器.而所使用的非商品发光仪不在此列,因此论述将集中在适于工业化生产的发光仪的设计原则.当把生物和化学发光与微生物学联系在一起,人们习惯上会想到生物发光的ATP技术.可是近年来,免疫分析和DNA探针方法也在使用生物及化学发光标记.这些分析技     

快速基因序列仪问世

目前,美国威斯康星大学的化学教授Lloyd Smith成功地制造了一台能快速分析基因序列的仪器,这台仪器序列分析速度为目前同类仪器的25倍。这台新的序列仪样机由Smith教授领导一个研究小组设计制造,五年前正是他创造了第一台自动基因序列仪。现在,数百台由他先前设计的这种机器(或技术上大同小异的同类序列仪)正在世界各地的实验室发挥作用。Smith设计的这种新装置将在三年内成为商品,它与过去同类仪器的主要不同是采用了毛细管灌胶,取代了目前所用的平板胶。现在较先进的序列分析仪采用的是激光测定法,这种方法采用双脱氧末端终止法的基本     

嗜铬蛋白可能是一种激素原

Tatemoto 等报道了一种胰源肽的氨基酸顺序及其生物学活性,该肽具有抑制葡萄糖诱导胰腺分泌胰岛素的作用,被称为胰腺抑制素(pancreastatin)。他们认为这种肽可能属于一种至今尚未被阐明的肽类族。不久以后,Huttner 等又发现该肽与嗜铬蛋白的氨基酸顺序有相似处。牛嗜铬蛋白 A 第251～294残基之间,     

一种多肽固相合成方法与纯化策略研究

目的：多肽与小分子化学药物相比,具有生物活性高、特异性强、不容易产生耐药性等特点,是目前新型药物研发的重点领域。多肽的合成直接影响到多肽药物的作用机制以及药物效果,因此需要建立一种更加便捷、高效的多肽合成方法。方法：采用Fmoc固相合成法合成多肽HF01,通过比较氨基酸连接的反应体系以及氨基酸脱保护的反应体系,从中确定最优体系。利用乙酰化基团进行肽链末端保护,经肽链剪切制备干燥的粗肽,最后采用高效液相色谱仪与高分辨质谱仪联用对粗肽进行纯化。结果：确定多肽合成的连接和脱保护反应体系,并获得纯度高达98.3%的线性多肽。结论：建立了一种高效、便捷的多肽合成及纯化方法,提高了实验室合成多肽的效率,为多肽类药物的研发提供技术支撑。     

肽类合成服务

中国人民解放军总医院 ( 3 0 1医院 )建立的肽类合成室为满足社会各单位、科研院所的科研和开发的需要 ,公开向全社会提供肽类合成服务。该肽类合成室位于北京市复兴路 2 8号中国人民解放军总医院内 (地铁五棵松站 ) ,该室由多位留美资深专业从事肽类合成的学者组成 ,并配备有国际最先进的ＰｒｏｔｅｉｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＩｎｃ出品的Ｓｙｍｐｈｏｎｙ 1 2通道肽类自动合成仪、半制备型高效液相色谱、冷冻干燥仪等与多肽合成和检测相关的先进仪器和设备。可按照客户的需求合成多肽序列片段、肽库及肽类修饰产品 ,接受委托加工。每条…     

人类胰腺中发现一种生长素释放因子

1982年Thorner等从一名肢端肥大症妇女的胰腺中摘除了一个胰岛肿瘤,它能分泌一种生长素释放因子,使患者的垂体前叶分泌过多的生长素。经分离提纯,确定了这种生长素释放因子的氨基酸顺序;并成功地进行了人工合成。这种生长素释放因子是由40个氨基酸组成的直链肽。作者将这种因子称为:“人类胰腺生长素释放因子-40”(human pancreatic growth-hormone-releasing factor-40,简称hpGRF-40)。天然的hpGRF和大鼠下丘脑的生长素释放因子在葡聚精凝胶G 50层析中表现相同的性质,但可用高压液相层析将两者区分。由于(1)大量资料表明,从异位肿瘤中产生的肽与从原位产生的同功能肽之间在结构上有密切联系;(2)高度纯化的大鼠下丘脑生长素释放因子的N端部分氨基酸顺序与bpGRF-40相似;(3)用合成的hpGRF-40和纯化的大鼠下丘脑生长素释放因子在体外实验中得到平行的剂量-反应曲     

用合成的肽模拟口蹄疫病毒的亚型特异性

口蹄疫病毒(FMDV)的主要免疫原位于外壳蛋白质(VP1)的141-160氨基酸之间。相当于主要免疫原区段的合成肽在豚鼠体内可诱致中和抗体反应和保护作用。为了更精确地确定口蹄疫病毒的免疫原位置,我们使用了含有141-160氨基酸区段的合成肽,研究了血清A型的亚型之间的血清学差别。我们发现这些合成肽携带有同口蹄疫病毒亚型特异性一样的决定子。根据氨基酸序列,本文还讨论了这些研究结果和预测的结构模型之间的关系。     

生长激素释放肽的合成及促生长活性

用固相多肽合成法合成了生长激素释放肽(GHRP),这是一种含D-型氨基酸的外源性激素,具有促进脑下垂体分泌生长激素功能的人工合成六肽,其氨基酸序列为His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH₂.观察了使用不同剂量的GHRP对不同日龄小鼠的促生长效应,当使用最佳剂量(1000μg/kg)时,可使25日龄小鼠体重较对照组增加14.8%,同时发现鼠龄越小对GHRP越敏感,当使用剂量高达10mg/kg时仍然安全无毒.     

在AOT/异辛烷反相胶束体系中酶法合成RGD前体二肽

近十年来,在有机相中利用酶法合成短肽技术取得了长足的发展．但对于在有机相中合成含有亲水氨基酸的短肽,仍然是一个难题．利用反相胶束可以解决亲水氨基酸在有机相中的低溶解性问题［１］．Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ（ＲＧＤ）是近年来发现的一种具有粘合细胞作用的三肽...     

肽抗生素研究进展及其应用前景

传统的抗生素大多为霉菌、放线菌的代谢产物。但近些年来的研究已经表明 ,一些植物、昆虫、两栖类、鸟和多种哺乳动物甚至人类等生物也能产生抗生素类物质。目前已经发现的这类物质已达 30 0多种以上。它们在生物界的广泛存在表明其是有机体防御系统进化的古老机制。早期将此类物质称为“防役素”(defencin) ,也有称为“抗菌肽”(antibacterialpeptides)的。近年来国际文献中趋向于使用“肽抗生素”( peptideantibiotics)一词 ,这是最贴切的 ,它既反应了肽抗生素的化学本质是一种“多肽” ,也反应了它是一种“抗生素” ,最容易为大众理解与…     

一种简易显微摄影仪

作者从结构、制造、成本和使用诸方面比较了国外目前已有的几类显微摄影仪,制作了一种新型的简易仪器。其特点是比一般常见仪器省去了结构复杂,费用昂贵的倒T形观象器,将DF型照相机机壳用一个特制的接筒与显微镜相接即可。经实际使用表明,这种摄影仪操作简便,可连     

生物转化和手性拆分技术制备D-氨基酸研究进展

在自然界中D-氨基酸相对稀少,被冠以“非天然”氨基酸之称,但D-氨基酸在医药、农药和食品等的组成中起着重要的作用,特别是它们已被用于合成!-内酰胺类抗生素和生理活性肽。综述了通过生物转化和手性拆分技术制备D-氨基酸新进展,希望能为相关研究者和有关企业提供有益的参考。     

牛磺酸、羟脯氨酸、γ－氨基丁酸、鸟氨酸和色氨酸的测定

在日立８３５－５０型氨基酸分析仪上,用７２ｍｉｎ程序进行分析,通常一次只能分析１７种氨基酸。采用本文所述方法则一次能分析２２种氨基酸。在不延长分析时间,不增加成本的情况下,一次多分析了五种氨基酸,提高了仪器工作效率。经过精密度、准确度试验和样品分析证明：该方法测定的数据准确、可靠,是一个又快又省的好方法。