[8-~3H]-鸟苷3’,5’-环磷酸钠盐的制备及鉴定

一、引言自从3＇,5＇-环磷腺苷(cAMP)作为“第二信使”学说提出以来,通过实验不仅证实了它与某些病理过程密切相关,而且还注意到cAMP对肿瘤细胞也有某些影响。这是最近几年受人注意的一个研究课题。它不仅涉及到肿瘤发生,发展的理论,也涉及到肿瘤治疗的一个新的研究方向。近几年来,人们在研究cAMP作用的同时,又对另一种核酸——鸟苷3＇,5＇-环磷酸(cGMP)的作用发生了浓厚兴趣。有人推测,生物的细胞调节作用是受cAMP和cGMP相互作用的影响。这一理论有可能用实验方法加以证实,     

环状核苷酸在大、小白鼠着床中的作用

在延缓着床的大、小白鼠证明了环-磷酸腺苷(cAMP)可以代替雌激素引起胚泡着床。本工作还第一次观察到另一种环状核苷酸——环-磷酸尿苷(cUMP)也具有类似的作用,而环-磷酸鸟苷(cGMP)和环-磷酸胞苷(cCMP)的作用很弱。在注射 cAMP 和 cUMP 24小时后多数动物出现阳性的滂胺蓝反应,在注射18小时后有部分动物的滂胺蓝反应是阳性的。这表明注射环状核苷酸到引起着床所需的时间大致与雌激素相近。     

血浆环化鸟苷—磷酸(cGMP)的蛋白竞争结合分析法

环化腺苷一磷酸(cAMP)和环化鸟苷一磷酸(cGMP)广泛存在于各种组织和体液中,是一对具有特殊意义的单核苷酸在细胞内起着调节生理机能和物质代谢的重要作用。cGMP在细胞和体液中的含量远低于cAMP,测定较困难。目前可供选择的较好的测定方法主要有放射免疫分析法及以蛋白激酶为特异试剂的放射竞争结合分析法。一般来说,放射免疫法灵敏度较高,特异性较强,样品处理较简便,但抗体制备较复杂,灵敏度的提高亦有赖于使用~125Ⅰ标记物,需经常制备。蛋白激酶的制备较简便,通常用氚标记物,一次制备可长期使用,放射防护也较简单,但对样品的纯度要求较高,灵敏度则与用氚标记物的放射免疫     

惊厥和抗癫痫药对中枢神经系统内环核苷酸的影响

3＇,5＇-环-磷酸腺苷(cAMP)是细胞内的一种“第二信使”,许多激素、神经递质等“第一信使”的作用均通过它实现。3＇,5＇-环-磷酸鸟苷(cGMP)也是一种“第二信使”;但对其生理功能的研究比cAMP少。近年来认为,以上两种环核苷酸(CN)在某些神经病中(包括癫痫)可能起着重要作用。许多实验材料证明,动物脑内的CN与惊厥,癫痫和抗癫痫药物的作用有密切关系。一、惊厥和癫痫对脑内环核苷酸的影响     

游泳训练后大鼠心肌细胞cAMP、cGMP含量的变化

目的:探讨游泳训练后大鼠心肌环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量的变化。方法:用心脏重量(mg)/体重(g)计算心脏系数,放射免疫法测定心肌cAMP、cGMP含量。结果:8周游泳训练导致心脏系数显著增高(P<0.05),心肌cAMP水平升高不显著(P>0.05),cGMP水平显著升高(P<0.05)。结论:8周游泳训练导致心脏代偿性肥大,cAMP/cGMP比值减小。     

S_(180)-V系细胞周期中cAMP,cGMP含量与细胞形态变化扫描电镜的观察

本实验用氚标记环磷酸腺苷(~3H-cAMP)及碘标记环一磷酸鸟苷(I~(125)-cAGP)的放射免疫法,测定了体外培养S_(180)-V系细胞周期中悬浮的M期细胞和其贴瓶细胞与均相细胞内cAMP及cGMP的含量,并对相应的细胞形态的变化做了扫描电镜观察。此外,对这三种群体细胞体积进行了测量,据此对这些细胞内cAMP及cGMP浓度进行了换算。实验结果表明:M期细胞体积的平均值接近其它时相细胞平均细胞体积的2倍,M期细胞的cAMP含量明显低于贴瓶细胞和均相细胞内cAMP含量,而cGMP含量略有提高,但差异不显著,但cAMP/cGMP比值与贴瓶细胞(非M期的其它时相细胞)及均相细胞(包括M期时相的混合细胞)相比,显著降低,相差2—3倍。用扫描电镜对上述测定的各类细胞组份进行了对应的观察,从其外形的变化表明,S_(180)-V系细胞的骨架系统很不发达,在cANP含量低的漂浮组(M期细胞)比贴瓶细胞的骨骼系统更不发达.     

单纯疱疹病毒感染细胞内环核苷酸含量的改变

用单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ型Sm44株和Ⅱ型333株感染非洲绿猴肾细胞系(Vero细胞),观察感染细胞中cAMP和cGMP含量的改变。病毒感染量均为0.5TCID50/细胞,观察周期为36小时(从接种病毒到CPE达++++),在感染后0、2、8、12、24、36小时分别收获细胞,以放射免疫法测定细胞内环磷酸核苷的含量改变。结果Ⅰ型、Ⅱ型HSV感染后在全部6个观察时期,细胞内的cAMP含量始终是升高的。HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ组的平均cAMP含量都明显高于正常细胞(P<0.05和P<0.02)。cGMP和cAMP/cGMP的变化不显著(表1)。     

正常和活力低下的人精子膜脂类过氧化反应或环核苷酸与运动性的关系(英文)

本文分别采用过膜游动法、硫代巴比妥酸比色法和放射免疫分析法测定了正常人和精子活力低下的不育症患者精子膜的脂类过氧化反应(LP)、环一磷酸腺苷(cAMP)和环一磷酸鸟苷(cGMP)水平,研究了膜LP、细胞内cAMP和cGMP与运动性之间的关系。结果表明,无论正常还是活力低下的精子,膜LP和运动性之间均存在明显负相关(r=-0.76,P<0.001和r=-0.68,P<0.001);精子内两种环核苷酸与运动性之间则均存在明显正相关(cAMP:r=0.64,P<0.01和r=0.59,P<0.01;cGMP:r=0.60,P<0.01和r=0.55;P<0.05)。其中膜LP与运动性之间的相关性最高。这些结果提示,膜LP是造成精子运动性降低的主要原因之一;精子内两种环核苷酸也可能影响其运动性。     

惊厥和抗癫痫药对中枢神经系统内环核苷酸的影响

3′,5′-环-磷酸腺苷(cAMP)是细胞内的一种“第二信使”,许多激素、神经递质等“第一信使”的作用均通过它实现。3′,5′-环-磷酸鸟苷(cGMP)也是一种“第二信使”;但对其生理功能的研究比cAMP少。近年来认为,以上两种环核苷酸(CN)在某些神经病中(包括癫痫)可能起着重要作用。许多实验材料证明,动物脑内的CN与惊厥,癫痫和抗癲痫药物的作用有密切关系。一、惊厥和癫痫对脑内环核苷酸的影响许多实验材料证明,多种方法引起的动物惊厥和人类癫痫活动可明显影响脑内CN的水平。Sattin首先报道超强电休克惊厥(MES)可使小鼠前脑cAMP含量明显升高,以后许多报告也证明,以多种方法引起动物惊厥时,均可使其脑内CN含量升高。如Lust证     

乳杆菌DM9811代谢产物中的RNA组分对宫颈癌细胞cAMP/cGMP影响

目的通过分析乳杆菌DM9811代谢产物中的RNA组分对宫颈癌细胞cAMP/cGMP影响,探讨乳杆菌对细胞作用的分子机制。方法采用细胞与分子生物学方法。结果乳杆菌代谢产物中的RNA组分对细胞的信息分子cAMP具有重要的调节活性。当除去代谢产物中的RNA分子刺激细胞时,细胞内的cAMP水平低于纯化后的RNA组cAMP水平,低了1.75倍,cGMP水平也出现了对应关系。结论乳杆菌DM9811代谢产物中的RNA组分对细胞内信息分子cAMP/cGMP具有调节作用。     

外源环化鸟-磷(cGMP)对蒜根尖细胞有丝分裂的生物学效应

1957年,Sutherland等发现环化腺-磷(cAMP),被看作是生物界的一件大事,随后,Price等在1963年从大鼠尿中分离出cGMP,并且逐渐了解到cGMP也是细胞生命活动的重要调节控制物质,其作用与cAMP相拮抗。一些研究证明:提高细胞内cGMP水平,可以促进有丝分裂。这两种核苷酸在细胞分裂、分化的调节控制中起重要作用。虽然在动物、细菌、真菌等中cGMP的研究方面已有不少报导,但对植物细胞cGMP的研究则较少。为了了解外     

玉屏风散联合头孢丙烯对鼻炎患者免疫功能及应激损伤程度的影响

目的:探讨玉屏风散联合头孢丙烯对鼻炎患者免疫系统及应激损伤程度的影响。方法:将2016年8月～2018年2月我院收治的鼻炎患者120例按照随机数字表法分为对照组与观察组,每组60例。对照组患者给予头孢丙烯治疗;观察组患者给予玉屏风散联合头孢丙烯治疗。两组患者均连续治疗14天。分别于治疗前后检测并比较两组患者血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、免疫球蛋白E(Ig E)、辅助T细胞1/辅助T细胞2(Th1/Th2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化。结果:治疗后:两组患者血清cAMP、Th1/Th2比值及SOD水平较治疗前显著升高;cGMP、Ig E、NO、MDA、CRP、TNF-α及IFN-γ水平较治疗前显著降低(P0.05),且观察组患者血清cAMP、Th1/Th2比值及SOD水平明显高于对照组,cGMP、Ig E、NO、MDA、CRP、TNF-α及IFN-γ水平明显低于对照组(P0.05)。结论:玉屏风散联合头孢丙烯治疗鼻炎患者可提高患者免疫功能,同时减轻氧化应激及炎症反应损伤。     

小鼠小肠cAMP、cGMP免疫反应性的观察

1977年Polak等用放射免疫法测定胃肠道有内源性阿片样物质,以后Onvall用免疫测定法也指出以小肠含量最高。阿片样物质有抑制腺嘌呤环化酶活性,而影响环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP)的生成。但吗啡戒断时对cAMP,cGMP的影响尚未见报道,我们采用免疫组化的方法,对不同条件下的小白鼠小肠粘膜上皮细胞内环核苷酸进行了定位,定量的观察。动物按随机原则分成四组,即对照组,吗啡成瘾急性戒断组,吗啡成瘾急性戒断非电针组,吗啡成瘾急性戒断电针组。分别取各组十二指肠近段,常规脱水,透明,石蜡包埋,采用sternberger的PAP法进行免疫组化     

480米氦氧饱和潜水时粘附分子及腺苷的表达变化

目的:探讨480m氦氧饱和潜水时潜水员体内粘附分子、环磷酸腺苷(cAMP)及环磷酸鸟苷(cGMP)的表达改变。方法:4名潜水员经氦氧混合气加压至饱和深度480m,饱和逗留期间巡潜到493m。高压暴露时间共约447 h,其中加压96 h,饱和逗留49 h,减压302 h。分别在进舱前及出舱后抽取静脉血,ELISA法测定血清中的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、E-选择素(E-selectin)、P-选择素(P-selectin)、L-选择素(L-selectin)、cAMP、cGMP的表达变化。结果:和基础值比较,480 m饱和潜水后各潜水员血清中ICAM-1、P-selectin、E-selectin、L-selectin、cGMP均无显著改变,但cAMP由进舱前(66.72±83.15)nmol/L增高为(629.91±75.01)nmol/L(P<0.05)。结论:480 m氦氧饱和潜水减压程序是安全的,未引起减压障碍的病理生理的改变,但引起机体应激反应增强。     

卵母细胞第一次减数分裂的阻滞和恢复

哺乳动物卵母细胞第一次减数分裂阻滞期间,来自卵母细胞的Gs-GPR-ADCY诱导环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)的生成,升高卵母细胞内cAMP的水平。颗粒细胞中的C型利钠肽(natriuretic peptides C, NPPC)和肌苷-5'-磷酸脱氢酶(inosine-5′-monophosphate dehydrogenase, IMPDH)调节卵丘颗粒细胞中环磷酸鸟苷(cyclic guanosinc monophosphate, cGMP)的生成,cGMP进入卵母细胞抑制cAMP-磷酸二酯酶(cAMP-phosphodiesterase, cAMP-PDE)活性,升高cAMP浓度,并使细胞质成熟促进因子(maturation promoting factor, MPF)处于非活化态,最终诱导了减数分裂阻滞在双线期。促黄体素(luteinizing hormone, LH)峰的出现一方面降低了壁颗粒细胞中NPPC的水平,另一方面激活了卵丘颗粒细胞丝裂原活化蛋白激酶3/1 (mitogen-activated protein kinase3/1, MAPK3/1),两者均降低了卵母细胞中cGMP的浓度,促进cAMP水解,使得MPF处于活化态,最终诱导了减数分裂恢复。该综述将探讨这两种环核苷酸如何通过阻断或启动减数分裂过程来调节卵母细胞成熟,并对未来的研究提供一定的见解。     

环状AMP和GMP环状溶液构象核磁共振研究

本文分析和比较了环状腺嘌呤核苷一磷酸(cAMP)和环状鸟嘌呤核苷一磷酸(cGMP)~1HNMR谱的化学位移。通过对cGMP分子的H_8和H_1质子化学位移与浓度的依赖关系求出缔合常数,K_α=3.12±0.7M~(-1),(温度30℃)。cGMP自缔合的亲合力大于cAMP。假设了环状鸟嘌呤核苷一磷酸在中性重水溶液中的缔合模型。     

环状AMP和GMP环状溶液构象核磁共振研究

本文分析和比较了环状腺嘌呤核苷一磷酸(cAMP)和环状鸟嘌呤核苷一磷酸(cGMP)~1HNMR 谱的化学位移。通过对cGMP 分子的H_8和H_1质子化学位移与浓度的依赖关系求出缔合常数,K_α=3.12±0.7M~(-1),(温度30℃)。cGMP 自缔合的亲合力大于cAMP。假设了环状鸟嘌呤核苷一磷酸在中性重水溶液中的缔合模型。     

精氨酸加压素、神经降压素和强啡肽对神经母细胞瘤细胞cAMP和cGMP的影响

本文报道小鼠神经母细胞瘤细胞在无血清培养条件下,用cAMP和cGMP放射免疫测定方法,观察AVP、NT和DYN对小鼠神经母细胞瘤细胞内cAMP和cGMP水平及cAMP/cGMP比值的影响。结果发现:AVP使cAMP水平和cAMP/cGMP比值显著升高(P<0.01);DYN使cGMP水平升高(P<0.01),但cAMP/cGMP比值下降;NT使cAMP水平和cAMP/cGMP比值下降,同时又使cGMP水平升高。结果提示:这三种神经肽可以分别对神经母细胞瘤细胞内cAMP、cGMP水平和cAMP/cGMP比值产生影响。     

氨甲酰胆碱(Carbamylcholine)对大鼠缺血心室致颤阈值的影响及其与cAMP、cGMP的关系

本实验以心室颤动阈(VFT)作为心室易颤性的指标,观察胆碱类物质氨甲酰胆碱对大鼠缺血心室 VFT 的影响及其与心肌 cAMP 和 cGMP 水平的关系。实验结果表明,氨甲酰胆碱可提高正常心脏和急性局部缺血心脏的 VFT,提高缺血和未缺血心肌的 cGMP 水平,但明显降低缺血心肌 cAMP 水平,使缺血和未缺血心肌的 cAMP/cGMP 比值显著降低,其作用与肾上腺素正好相反。实验结果还表明,急性局部缺血心脏的 VFT 与缺血心肌 cAMP/cGMP 比值之间有密切的负相关关系,相关系数 r=-0.905(n=22,P<0.001)。上述结果提示缺血心肌 cAMP/cGMP 比值的提高可能是急性心肌梗塞早期发生心室纤维性颤动的重要因素。     

磷脂酰肌醇系激素的作用机理

以cAMP作为“第二信使”的激素简称CAMP系激素。激素的作用与磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI)代谢循环密切相关。以cGMP、Ca~(2 )为“第二信使”的激素简称为PI系激素。PI系激素有独特的作用方式,存在DG-C激酶系、Ca~(2 )-CDR系和cGMP-G激酶系三种传递机理,具有调节各种细胞机能的作用。两类膜受体激素的作用互相拮抗,互相制约,有可能以磷脂酰丝氨酸为交接点互相沟通。