隐球菌感染诊治专家共识

1简介 隐球菌属在真菌分类学上归人半知菌亚门、芽孢菌纲、隐球酵母目、隐球酵母科,引起人类感染的隐球菌主要是新生隐球菌和格特隐球菌。两种隐球菌的无性繁殖体均为无菌丝的单芽孢酵母样菌,在体外为无荚膜或仅有小荚膜,进入人体内后很快形成厚荚膜,有荚膜的隐球菌菌体直径明显增加,致病力明显增强。     

十种虫生真菌液体培养芽生孢子的形态发生

芽生孢子是许多真菌通过出芽方式产生的无性孢子,在液体发酵中主要以这种形式大量繁殖。真菌杀虫剂活性成分分生孢子的大量生产使用液体发酵得到的芽生孢子作为接种物,另外,它也是当今虫生真菌遗传转化的重要受体,因而研究虫生真菌芽生孢子的形态和发生特点具有重要意义。本研究分别对液体发酵中的球孢白僵菌、粉棒束孢、蝉棒束孢、环链棒束孢、玫烟色棒束孢、细脚棒束孢、斜链棒束孢、金龟子绿僵菌、蝗绿僵菌和蜡蚧霉等10种常见虫生真菌芽生孢子的形成过程进行显微观察,了解其分生孢子产生过程的异同。结果表明,芽生孢子的产生方式有两种类型：1）蝉棒束孢在其整个生活史中以菌丝生长为主,芽生孢子产生的数量很少。2）其他各种真菌芽生孢子产生方式相似,在菌丝体形成后就开始大量以菌丝出芽或缢缩产生芽生孢子,接着还可通过芽生孢子的出芽或缢缩断裂产生新的芽生孢子。芽生孢子的产生分为3个时期：初期先由菌丝形成芽生孢子;指数期芽生孢子大量增殖,菌丝和芽生孢子都可产生芽生孢子;后期以芽生孢子产新芽生孢子为主要方式。     

林生地霉血液分离株的形态学观察

目的 进一步了解林生地霉的形态学特征和产孢方式。方法受试菌株复苏后,转种于沙堡培养基,37℃和27℃温箱培养3周,每天观察菌落生长情况,并对其丝状型和酵母样型两种菌落进行光镜观察。在培养1周时,挑取菌落常规制片后行扫描电镜和透射电镜观察。结果 培养第2～3d,菌落开始生长,初为白色绒毛样、粉末样,1～2周后菌落均转变为乳酪样,其中37℃下培养的菌落转变较早。菌丝相时,光镜下可见丰富的分支、分隔菌丝,成链的关节孢子和圆形、椭圆形小分生孢子。酵母相时,光镜下可见丰富的芽生孢子,少量的厚膜孢子、外生或内生的关节孢子,菌丝稀少。扫描电镜下可见菌丝分支末端或侧面着生球形、棒状的分生孢子,末端凹陷。透射电镜下可见分生孢子与菌丝分离时全壁断裂,另一端正在出芽。结论 林生地霉包括丝状型和酵母样型两种菌落形态和链状排列的矩形关节孢子、圆形或椭圆形的小分生孢子、厚膜孢子以及分支、分隔菌丝为其形态学特征,有芽殖、外生和内生节孢子三种产孢类型。     

中国-新记录属──齿梗霉属

１９９７年７月从长白山自然保护区原始森林中采集的腐朽木材髓心标本,经分离培养获得－淡黄色菌落,经鉴定为齿梗霉属０１ｐｉｔｒｉｃｈｕｍ真菌。齿梗霉属在中国是首次报道。齿梗霉属中国新记录属０１ｐｉｔｒｉｃｈｕｍ　Ａｔｋｉｎｓｏｎ, Ｂｏｔ．Ｇａｚ． １９：２４４, １８９４ 菌落呈淡黄色,绒毛状。菌丝有隔膜,分枝,相互交织,淡黄色或近无色。分生孢子模较粗大,近直立,有隔膜,不分枝或不规则分枝。产孢细胞齿状,齿突圆柱状,产孢区域稍膨大。分生孢子着生在齿突顶部,单生,无色或淡色,单细胞,球形、卵圆形或椭圆形…     

子宫颈感染孢子丝菌1例

目的探讨双相真菌申克孢子丝菌(复合体)子宫颈感染的临床特点,为进一步提高实验室及临床诊断水平提供资料。方法分析1例申克孢子丝菌(复合体)子宫颈感染临床表现与实验室诊断过程,检索近年来国内外主要文献进行复习。结果患者阴道分泌物镜检见成团的革兰染色阳性、圆形、卵圆形孢子,较球菌大,较酵母样真菌孢子小。37℃血平皿培养,形成边缘不齐、表面有褶皱、干燥、有韧性不易挑取的白色菌落;革兰氏染色镜下见染色阳性酵母样芽生孢子。25℃SDA培养,形成中心有白色褶皱,周围绒毛样的丝状真菌菌落形态,直接涂片镜检见大量有隔菌丝、孢子。上述特征符合申克孢子丝菌。国内外文献检索,申克孢子丝菌感染多为皮肤局限性、肺炎、骨关节等病例,偶有累及局部淋巴结的病例,仅少数艾滋病等免疫力极度低下患者为全身播散性感染。结论申克孢子丝菌所致子宫颈感染罕见,掌握其在人体内与不同条件下培养菌落的特征有助于及时诊断。     

掷孢酵母及其应用研究进展

掷孢酵母是一类能够弹射孢子(称为掷孢子)的酵母菌,主要由Bullera属、Sporobolomyces属和Sporidiobolus属组成,该类酵母分布广泛。在实验室培养过程中多以芽殖、掷孢子以及菌丝状生长,Sporidiobolus属的菌株经配对能够形成有性孢子。分子生物学手段的开展使掷孢酵母各类群间的系统发育关系更加明确。本文结合本实验室的研究结果,阐述了掷孢酵母存在的细胞分化现象,并且推测细胞分化有助于菌体抵抗逆境。因此,掷孢酵母可以作为一种潜在的模式生物对抗逆机制进行探究。在食品和环境问题备受瞩目的今天,掷孢酵母以其可自身积累酯类、色素、酶类等有益代谢产物的特点,及治理污染物特性越来越受到人们的关注。     

中国红酵母新种

本文研究了自北京冷库病梨分离的红色芽裂酵母L-82。它具有耐低温的特性,二端芽裂(bipolar budfissiort),不形成子囊孢于与掷孢子,但能形成厚垣抱于。老或幼的细胞均可能萌发形成具横隔的芽管,甚至发展为粗菌丝。长期低温培养4个月以上,于局部菌落形成棕色菌丝菌落,此菌落由细菌丝组成,并形成大量棕色椭圆形、梨形或尖形厚垣孢子。此菌能产生类淀粉,同化肌醇,并能合成类胡萝卜素。此菌在很多方面与属于担子菌的黑粉菌之情况很相似,说明它与担子菌有一定关系;与红色冬孢酵母(Rhodosporidium)既有类似又有其特点。由于目前对L-82的有性阶段尚不完全明确,虽看到一些现象,但在有些方面还有待进一步研究。根据其产类胡萝卜素,不形成掷孢子,有菌丝与厚垣孢子等特性,暂时将L一82归在红酵母属(Rhodotorula ),作为一个新种,定名为中国红酵母(Rhodolorula sinensis Lee sp. Nov.)L-82。     

中国一新记录属--齿梗霉属

1997年7月从长白山自然保护区原始森林中采集的腐朽木材髓心标本,经分离培养获得一淡黄色菌落,经鉴定为齿梗霉属Olpitrichum真菌。齿梗霉属在中国是首次报道。 齿梗霉属 中国新记录属 Olpitrichum Atkinson,Bot.Gaz.19:244,1894 菌落呈淡黄色,绒毛状。菌丝有隔膜,分枝,相互交织,淡黄色或近无色。分生孢子梗较粗大,近直立,有隔膜,不分枝或不规则分枝。产孢细胞齿状,齿突圆柱状,产孢区域稍膨大。分生孢子着生在齿突顶部,单生,无色或淡色,单细胞,球形、卵圆形或椭圆形,光滑。 模式种：Olpitrichum carpophilum Atkinson 大孢齿梗霉 图1 Olpitrichum macrosporum (Farlow) Sumstine, Mycologia 3:55,1911． =Rhinotrichum macrosporum Farlow in Sacc., Michelia 2:148,1880． 菌落平展,淡黄色,绒毛状。菌丝分枝,有隔膜,宽5.0～6.0μm。分生孢子梗粗壮,直立,淡色,长130μm以上,不分枝或不规则分枝,横隔间距较大,顶部稍膨大（宽6～7μm）。产孢细胞齿状,不规则散生,齿突长3.0～6.5μm。分生孢子卵圆形或长椭圆形,无色或淡色,14～21×8～10μm。腐生。     

基于微流控的真菌单细胞捕获和培养

【背景】真菌单细胞培养在研究细胞异质性及细胞生长特性等方面十分重要,因此需要建立简单便捷的方法对真菌单细胞进行培养与观察。【目的】基于微流控建立一种真菌单细胞的捕获及培养方法,同时直观地对单细胞进行定位和实时观察。【方法】利用L-edit设计芯片图案并利用等离子键合的方法制备微流控芯片;通过注射泵将红酵母菌溶液及里氏木霉孢子溶液进样以实现单细胞捕获;采用台盼蓝染色法测定酵母细胞的存活率;利用显微镜对酵母单细胞及木霉孢子的萌发、生长、繁殖过程进行观察。【结果】所制备的芯片形状完好,可实现酵母或孢子的单细胞捕获;酵母的捕获率为25.00%±1.38%;分别于0、2、4、6h对酵母进行观察,可看到酵母出芽过程;培养至48h,芯片上酵母细胞的存活率与游离培养条件下的存活率无显著性差异;分别于0、3、6、9 h对单个孢子进行观察,可以看到孢子萌发以及菌丝生长情况,且直至120h菌丝仍在生长。【结论】设计并制备了一种用于真菌单细胞捕获及定位培养的微流控芯片,这是此种芯片在真菌单细胞培养中的首次应用。细胞可在此微流控芯片上正常生长至少2 d,并可实现5 d及更长时间的培养,此方法可对真菌单细胞进行直观、定位的实时观察,有望用于多种微生物单细胞的生理、遗传性状研究,以及原生质体融合育种研究。     

暗色丝孢霉病的临床及研究现况

暗色真菌（dematiaceous fungi）是指菌丝和（或）孢子的细胞壁具有黑色素样颜色的一组真菌,可引起人类皮肤甚至多种组织的感染。迄今尽管有的学者仍在使用“着色霉菌病（chromomycosis）”来命名所有的暗色真菌感染,然而自20世纪90年代已形成的共识是将暗色真菌感染主要分为着色芽生菌病（chromoblastomycosis）和暗色丝孢霉病（phaeohyphomycosis）两类独立的疾病。本文主要就暗色丝孢霉病的命名、病原学、流行病学、临床类型及分子生物学研究现况进行综述。     

新生隐球菌的酚氧化酶及用于菌种鉴定的研究

采用4％玉米浸汁咖啡酸琼脂(CACA)培养基。观察了具不同生物学特性的新生隐球菌的酚氧化酶活性,并对临床常见的多种酵母和酵母样真菌作了该酶的检测。结果,受试的3个变种、5种血清型和尿素酶阴性新生隐球菌均呈明确的阳性反应;150株常见酵母和酵母样真菌中43株新生隐球菌全部呈酚氧化酶阳性。107株其它酵母和酵母样真菌全部阴性。具各种不同生物学特性的新生隐球菌均特异性地产生酚氧化酶,用检测该酶的方法作该菌鉴定的特异性和敏感性均为100％,且可于72小时内得到结果。此外,结合尿素酶试验可以准确的鉴定出尿素酶阴性的新生隐球菌。     

单孢节丛孢--中国新记录种

<正>捕食线虫真菌是指以营养菌丝特化形成的捕食器官捕捉线虫的一类真菌,主要包括节丛孢属Arthrobotrys、隔指孢属Dactylella和单顶孢属Monacrosporium等3个属。我国现已报道节丛孢属     

酵母细胞周期及其调控

酵母菌是一类多形的、不运动的、单细胞的真核微生物的统称。多数酵母菌都以出芽方式进行繁殖,称为芽殖酵母,也有少数种类的酵母以二分裂方式进行繁殖,称为裂殖酵母,例如粟酒裂殖酵母（＆hizosaccha－roapcesPombe）．芽殖酵母是研究细胞周期GI向S期过渡调控机制的好材料;而裂殖酵母为研究GZ向M期过渡调节的典型材料．下面简要介绍酵母细胞周期及其调控机制．1＄母细胞周期酵母细胞周期是由四个连续的时期组成,即：M期（有丝分裂期,包括核分裂和胞质分裂）、GI期（介于有丝分裂期与DNA合成之间的间歇期）、S期（DNA合成期）和…     

毕赤氏酵母新种——嗜石油毕赤氏酵母D3

该菌是从我国南方豆饼酱中分离出的一株石油酵母。它具有毕赤氏酵母属特征：细胞呈圆形、卵圆形。营养繁殖为多边芽殖,有假菌丝,无真菌丝。子囊孢于呈卵形,光面,不利用硝酸盐,发酵葡菌糖。在麦芽汁中培养易形成白色干燥皱皮膜。此外,它有强嗜石油能力,同化和发酵葡萄糖,弱同化半乳糖和纤维二糖,不同化其他糖类,也不同化核糖、酒石酸,乳酸、琥珀酸、苹果酸,这些与本属的近似种粉状毕赤氏酵母[Pichia farinasa (Lindner) Hansen]不相同,故定为新种——嗜石油毕赤氏酵母D,[Pichia petrophilum Mu sp. Nov. D3]。     

着色真菌monophora引起皮肤着色芽生菌病1例

目的报道1例由着色真菌monophora引起的皮肤着色芽生菌病。方法取皮损皮屑标本进行真菌直接镜检和培养,同时取活检进行真菌培养和组织病理学检查。对真菌培养阳性菌株进行形态学鉴定、温度试验和放线菌酮耐受试验,PCR扩增测序。结果KOH涂片检查可见较多圆形厚壁棕色硬壳细胞。组织病理学显示为慢性肉芽肿样改变;PAS和银染色可见到圆形厚壁的硬壳细胞。真菌菌落生长缓慢,呈橄榄色到黑色。小培养可见大量棕色菌丝、分支分隔,分生孢子梗主要为喙枝孢型,分生孢子棕色,椭圆形或卵圆形,单细胞。温度试验37℃生长,38℃不生长。0．01％、0．05％和0．1％放线菌酮均能耐受。扩增真菌rDNA的ITS区得到645bp的片段,经序列分析与裴氏着色真菌monophora变种ITS区比对,100％一致。结论据真菌学形态结构特征以及DNA序列分析菌种被鉴定为着色霉monophora。     

酵母菌专栏序言Ⅰ

正酵母菌是指主要以单细胞形式存在,以芽殖或裂殖方式进行无性繁殖,有性生殖阶段不产生子实体的真菌。其对应的英语单词"yeast",衍生于用来描述啤酒和面包等的发酵现象的词汇。因此,酵母菌通常被理解为具有发酵能力的单细胞真菌。在遗传和分子生物学等研究领域,"yeast"或"budding yeast"(出芽酵母)常被当作"Saccharomyces cerevisiae"(酿酒酵母)的代名词。但在分类学上,酵母菌包括真菌界Fungi内子囊菌门Ascomycota     

丛生丝孢酵母菌的生物学特性观察

探讨了丛生丝孢酵母菌的生物学鉴定特性。采用真菌培养法观察丛生丝孢酵母菌的培养特性、同化试验;耐受试验测定对放线菌酮的耐受性;体外双相形态转换试验确定霉菌相及酵母相;微量稀释法进行抗真菌药物敏感试验;温度耐受性试验、干燥试验、紫外线照射试验测定其抵抗力;小鼠腹腔接种法观察其侵袭力。本菌为双相型真菌,经分离培养该菌呈现真菌所特有的菌落特征,在沙氏肉汤中呈菌膜和沉淀生长;玉米粉琼脂小培养,在镜下可见到大小不等圆形和卵圆形孢子。对10种糖类同化试验阳性,不分解尿素,还原硝酸盐。对氟康唑等4种抗真菌药均敏感;对温度、干燥、紫外线有一定耐受力;侵袭力较弱,组织内酵母相呈细胞内感染。结论观察丛生丝孢酵母菌的生物学鉴定特性,对丛生丝孢酵母菌的实验室鉴定奠定基础和临床诊断提供依据。     

西弗射盾子囊霉研究进展

正西弗射盾子囊霉(Stephanoascus ciferrii)属子囊菌类酵母,与孢子丝菌属和念珠菌属同源,但在形态特征上差别较大,除单细胞的酵母菌外,营养体菌丝中有隔膜,可通过有性繁殖在子囊中产生子囊孢子[1-2]。该菌可造成健康个体的浅表感染,在免疫缺陷或免疫低下人群可造成侵袭性感染且结局较为严重[3]。近年随着激素及其他药物的广泛使用,西弗射盾子囊霉等少见真菌引起的临床感染逐年增多[4]。对该菌的鉴定方法有传统的培养表型分析,     

类胡萝卜素产生菌种的鉴定

于福建红酒酒糟中分离、筛选得到1株编号为B-5的产色素菌株。对该菌株所产色素进行定性分析,结果表明该色素为类胡萝卜素;对菌株进行常规形态和生理生化特性分析,结果表明该菌株为单细胞,呈卵圆形,芽殖;在固体培养基上,菌落呈深红色,菌落表面湿润、粘稠,边缘整齐,易被挑起;在液体培养基中,产生沉淀。无子囊孢子;无假菌丝形成。葡萄糖发酵试验为阴性,硝酸钾试验为阳性,耐高渗试验为阴性,产类淀粉化合物为阴性,37℃生长为阳性。利用26S rDNA D1/D2区域序列分析法对该菌株进行序列比对鉴定,结果表明,该酵母菌的序列与粘性红圆酵母（Rhodotorula mucilaginosa）模式菌株的序列同源性100%,结合该菌株常规形态和生理生化特性,鉴定该菌株为粘性红圆酵母（Rhodotorula mucilaginosa）。     

溶菌酶与人胆汁诱导新型隐球菌形成L型的初步研究

新型隐球菌是一种广泛存在于人的皮肤、咽喉部与胃肠道的条件致病性真菌。该菌常呈正圆形芽生酵母型。近年来,陆续有报道寄生状态的新型隐球菌可呈针形、梭形、膨大体等不规则形。这种形态变异的机制不明。我们用溶菌酶、人胆汁作诱导剂分别处理新型隐球菌6株,观察它们在体外对该菌的影响。