基于谱效关系和成分敲除探讨独一味总黄酮抗类风湿关节炎的关键成分

为探讨独一味总黄酮抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的关键成分，阐明独一味治疗RA的药效物质基础，本研究建立了独一味总黄酮的指纹图谱，13批独一味总黄酮指纹图谱共标示了8个共有峰，指认了其中3个共有峰。同时基于13批独一味总黄酮样品对成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)活力的影响，建立了独一味总黄酮抗RA的谱效关系，结果表明木犀草苷和木犀草素为独一味总黄酮抗RA的关键成分。采用成分敲除技术探讨独一味总黄酮中木犀草苷成分抗RA的药效，并比较了等摩尔量木犀草苷和木犀草素对照品分别对FLS细胞活力的影响，结果表明木犀草苷和木犀草素成分均能显著抑制FLS细胞活力(P<0.01),且二者抑制率无显著性差异。结合独一味总黄酮HPLC图谱中木犀草苷含量明显高于木犀草素，表明木犀草苷为独一味总黄酮抗RA的关键成分之一，可为临床运用独一味治疗RA提供一定的参考。     

不同产地野菊花中黄酮类成分含量的HPLC分析

野菊花为菊科(Compositae)植物野菊[Dendranthema indicum (L.) Des Moul.]的头状花序,具有清热解毒和疏风散热等功效.黄酮类化合物为野菊花最主要的有效成分之一,最早从野菊花中分离出的黄酮类化合物为木犀黄酮苷,此后相继得到刺槐素、木犀草素、芹菜素和蒙花苷等黄酮类化合物,以蒙花苷和木犀草素含量最高,其中蒙花苷含量是野菊花药材的主要质量检测指标[1].     

崇左金花茶花朵和叶片类黄酮UPLC-Q-TOF-MS分析

以崇左金花茶（Camellia chuangtsoensis）为材料,利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）联用技术定性定量分析其花朵（花瓣、雄蕊）和叶片（老叶、新叶）中类黄酮成分与含量。结果表明,崇左金花茶中共检测到14种类黄酮成分,木犀草素、木犀草素-7-O-芸香糖苷、槲皮素-3,7-O-二葡萄糖苷、芸香柚皮苷、圣草素和染料木苷为山茶属金花茶组植物中首次发现,其中槲皮素-3,7-O-二葡萄糖苷、芸香柚皮苷、圣草素和染料木苷主要存在于花朵中,木犀草素和木犀草素-7-O-芸香糖苷在花朵中含量高于叶片,雄蕊中高于花瓣;槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷为金花茶组植物叶片中首次发现,其叶片中含量远低于花朵,老叶中远低于新叶,雄蕊中远低于花瓣;儿茶素和表儿茶素在花朵中含量高于叶片,雄蕊中高于花瓣;槲皮素和山萘酚在花朵和叶片中含量均较低。崇左金花茶花瓣和雄蕊中含量较高的类黄酮为儿茶素类、木犀草素类和槲皮素类,主要是表儿茶素、木犀草素和槲皮素-3-O-葡萄糖苷;叶片中为儿茶素类和木犀草素类,主要是表儿茶素、木犀草素和木犀草素-7-O-芸香糖苷。崇左金花茶花瓣和雄蕊中儿茶素类、木犀草素类及类黄酮总量均高于叶片,且雄蕊高于花瓣;花瓣和雄蕊中槲皮素类远高于叶片,且花瓣中远高于雄蕊。     

1株曲霉属真菌(Aspergillus sp.)固体发酵对金银花及叶的活性成分影响

木犀草苷具有很高的应用价值。为了提高金银花中木犀草苷的含量,利用从野生冬虫夏草周围环境中分离的1株曲霉属真菌GL625对金银花进行固体发酵,并分析测定金银花中主要活性成分木犀草苷等的变化。以大米-金银花、大米-金银花叶为底物进行固体发酵15 d后,将发酵产物用95%乙醇超声辅助提取。采用高效液相色谱(HPLC)分析金银花发酵前后指纹图谱差异性与活性成分的含量变化,通过双层平板打孔法比较金银花发酵前后95%乙醇提取物的抑菌活性差异。结果表明,金银花固体发酵后绿原酸和芦丁分别降低了20.14、1.73 mg/g,而木犀草苷发酵后增加了4.76 mg/g;物质a、b的含量也显著上升,在HPLC图中Rt=17.5 min后吸收峰明显丰富;金银花叶在发酵后绿原酸、芦丁同样分别降低了11.74、0.99 mg/g,而木犀草苷增加了5.07 mg/g;并且金银花发酵产物的95%乙醇提取物抑菌活性明显强于未发酵以及对照组。结果说明,GL625是一株能转化金银花提高木犀草苷的曲霉属真菌,且物质a、b含量的显著上升增强了抑菌活性。     

不同品种金银花中绿原酸和木犀草苷的含量测定

目的:测定不同季节‘济草堂一号’和‘九丰一号’金银花的花蕾、茎、叶中绿原酸和木犀草苷的含量。方法:按2010年版《中国药典》中金银花含量测定项规定的方法测定样品中绿原酸和木犀草苷的含量。结果:湘南产‘济草堂一号’和‘九丰一号’金银花都是绿原酸含量在花蕾中最高,木犀草苷含量在叶中最高。两个品种金银花的花蕾中绿原酸含量从5月到9月都迅速减少,而茎、叶中绿原酸含量变化趋势因品种而异;两个品种的花蕾、茎和叶中木犀草苷含量从5月到9月都逐渐减少。结论:湘南产‘济草堂一号’和‘九丰一号’金银花较佳的采收季节都是5月份。     

UPLC-Q-Exactive Orbitrap高分辨质谱定量分析不同产地、炮制前后女贞子中9种成分的含量

采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)建立了同时测定女贞子中红景天苷、芸香苷、木犀草苷、特女贞苷、橄榄苦苷、木犀草素、芹菜素、槲皮素、松果菊苷等9个成分含量的方法,对比分析不同产地、酒炖前后女贞子含量的差异。采用Hypersll GOLD C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm, 3μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI),负离子模式扫描,结合化学模式识别分析不同产地、炮制前后的女贞子中9个成分的变化。结果表明9个成分在各自浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 6),平均加样回收率为97.4%～101.9%。不同产地、炮制前后的女贞子中9个成分含量有明显差异,其中特女贞苷、红景天苷、木犀草苷、木犀草素、芸香苷、橄榄苦苷、松果菊苷对产地划分的贡献程度较大;女贞子经炮制后红景天苷、特女贞苷、橄榄苦苷的含量明显增加。本研究所建立的方法快速、准确、灵敏度高、重复性好,可为女贞子饮片和炮制品的质量标准完善提供科学依据。     

小叶三点金的黄酮类成分研究

从小叶三点金(Desmodium microphyllum)乙醇溶液中分离得到9个黄酮类化合物,通过波谱学方法分别鉴定为()-表儿茶素(1)、genistein-4′-O-β-glucoside(2)、异荭草苷(isoorientin,3)、荭草苷(orientin,4)、木犀草素(luteotin,5)、异日本獐牙菜素(isoswertiajaponin,6)、luteoayamenin(7)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7-galactoside,8)、木犀草素-7-O-鼠李糖苷(luteolin-7-rhamnoside,9)。所有化合物均为首次在该植物中分离得到。     

蓝花侧金盏化学成分的研究

从藏药蓝花侧金盏的乙醇溶液中分离得到8个化合物,通过波谱学方法分别鉴定为三十一烷醇(1)、对甲酰基肉桂酸(2)、芹菜素(3)、木犀草素(4)、荭草苷(5)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、异荭草苷(7)及侧金盏醇(8)。化合物1、2、4、6、7均首次从该种植物中分离得到。     

海螺沟引种金银花的药用成分含量对比研究

金银花是我国传统常用的中药材之一。近年来,在药用、香料、化妆品和保健食品等领域有极大的需求量,具有极高的药用价值和经济价值。为探索海螺沟适生金银花品种,从山东、河南、河北和四川引进21个主流栽培品种进行引种实验。采用高效液相色谱法(HPLC)测定了金银花花蕾、茎和叶中绿原酸和木犀草苷含量。结果如下:1)花蕾中绿原酸含量为1.617~3.394%,高于药典规定值(1.5%);茎和叶中绿原酸含量分别为0.613~1.712%和1.257~2.475%。花蕾中木犀草苷含量为0.009%~0.184%,山东的中金1号和蒙金1号的木犀草苷含量分别为0.009%和0.029%,低于药典规定含量(0.050%);茎和叶中木犀草甘含量分别为0.017~0.076%和0.406~0.562%。2)利用隶属函数综合评价花蕾、茎和叶中绿原酸和木犀草苷含量,山东鲁峰王3号得分最高,具有较高的品质,且生长茂盛,产量高,为可以引进的优良品种。     

金银花配方颗粒、标准汤剂含量测定及指纹图谱研究

本文主要为金银花配方颗粒的质量评价提供依据,并建立金银花配方颗粒、标准汤剂含量测定及HPLC指纹图谱的研究方法。主要采用HPLC法测定金银花饮片、标准汤剂、配方颗粒绿原酸、木犀草苷含量,建立三者指纹图谱共有模式。结果显示金银花饮片、标准汤剂、配方颗粒中绿原酸、木犀草苷含量差异较大;分别建立金银花饮片、标准汤剂、配方颗粒的指纹图谱;金银花配方颗粒HPLC指纹图谱中的12个共有峰均可在标准汤剂中追踪到,有11个可以在饮片中得到追踪,并指认出绿原酸、芦丁、木犀草苷3种成分。表明所建立的定性、定量分析方法简便,准确度高,专属性强,对金银花配方颗粒的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。     

Biosynthesis of a water solubility-enhanced succinyl glucoside derivative of luteolin and its neuroprotective effect

The natural flavonoids luteolin and luteoloside have anti-bacterial, anti-inflammatory, anti-oxidant, anti-tumour, hypolipidemic, cholesterol lowering and neuroprotective effects, but their poor water solubility limits their application in industrial production and the pharmaceutical industry. In this study, luteolin-7-O-β-(6″-O-succinyl)-d -glucoside, a new compound that was prepared by succinyl glycosylation of luteolin by the organic solvent tolerant bacterium Bacillus amyloliquefaciens FJ18 in an 8.0% DMSO (v/v) system, was obtained and identified. Its greater water solubility (2293 times that of luteolin and 12 232 times that of luteoloside) provides the solution to the application problems of luteolin and luteoloside. The conversion rate of luteolin (1.0 g l⁻¹) was almost 100% at 24 h, while the yield of luteolin-7-O-β-(6″-O-succinyl)-d -glucoside reached 76.2%. In experiments involving the oxygen glucose deprivation/reoxygenation injury model of mouse hippocampal neuron cells, the cell viability was significantly improved with luteolin-7-O-β-(6″-O-succinyl)-d -glucoside dosing, and the expressions of the anti-oxidant enzyme HO-1 in the nucleus increased, providing a neuroprotective effect for ischemic cerebral cells. The availability of biosynthetic luteolin-7-O-β-(6″-O-succinyl)-d -glucoside, which is expected to replace luteolin and luteoloside, would effectively expand the clinical application value of luteolin derivatives.     

裸花紫珠的化学成分

从裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.ex Arn.)地上部分的乙醇提取物中分离得到了7个化合物,经波谱分析确定其结构分别为:木犀草苷(1),木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),2α,3α,19α-三羟基-乌索-12-烯-28-酸(4),乌索酸(5),2α-羟基-乌索酸(6)和齐墩果酸(7)。其中化合物2-7为首次从该植物中分离得到。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的裸花紫珠水提物化学成分分析

为了对裸花紫珠水提物的化学成分进行分析鉴定,本研究以加热回流提取法制备裸花紫珠水提物,并采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)通过高分辨质谱数据并结合相关文献,分析鉴定水提物的化学成分。最终从裸花紫珠药材水提物中共鉴定出37个化学成分,包括5个黄酮类化合物,16个苯乙醇苷类化合物及16个环烯醚萜类化合物。其中,京尼平苷酸、连翘脂苷E、肉苁蓉苷F为首次从裸花紫珠中报道。并推测木犀草苷、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷为裸花紫珠的标志性成分,可为裸花紫珠后续药效物质基础研究及中成药二次开发和质量控制提供参考。     

栗柄金粉蕨的黄酮类成分

从栗柄金粉蕨（ Ｏｎｙｃｈｉｕｍ ｌｕｃｉｄｕｍ ） 地上部分的甲醇抽提物中分到１０ 个成分, 经详细的一维、二维核磁数据分析, 它们被鉴定为： 木犀草甙（１） , ３ , ７ － 二甲基槲皮素（２） , 高山甙Ｂ （３） , 金粉蕨素（４） , 栗柄醇（５） , 金粉蕨醇Ｂ（６） , β－ 谷甾醇（７） , 胡萝卜甙（８） ,齐墩果酸（９） 和蔗糖（１０） 。栗柄醇系新成分。１ , ２, ９ 系首次由金粉蕨属分到。     

Preparation and Characterization of Copolymer Micelles for the Solubilization and <Emphasis Type="Italic">In Vitro</Emphasis> Release of Luteolin and Luteoloside

Luteolin (LUT) and luteoloside (LUS) belong to flavonoids with high anticancer potential and were loaded into biodegradable diblock copolymer micelles of methoxy polyethylene glycol-polycaprolactone (mPEG_5K-PCL_10K), methoxy polyethylene glycol-polylactide-co-glycolide (mPEG_5K-PLGA_10K), and methoxy polyethylene glycol-polylactide (mPEG_5K-PDLLA_10K) by a self-assembly method, creating water-soluble LUT and LUS copolymer micelles, respectively. The solubilization formulations of the copolymer micelles were optimized with response surface methodology (RSM). The obtained drug micelles are torispherical under transmission electron microscope (TEM) with an average diameter of about 70 nm. The mPEG_5K-PLGA_10K exhibited higher loading capacity for LUS which was 4.33%, and LUT- (or LUS)-loaded mPEG_5K-PCL_10K exhibited a better stability and encapsulation efficiency which was 65.1 and 55.8%, respectively. The in vitro drug release study showed above 47% of LUT was released from micelles at pH 7.4 PBS; however, no more than 35% of LUT was released at pH 6.4 PBS within 24 h. Meanwhile, no more than 30% of LUS was released from micelles whether at pH 6.4 or 7.4 PBS solution within 24 h.     

基于HPLC-ECD研究牡荆叶抗氧化的谱-效关系

为研究牡荆叶指纹图谱与抗氧化活性的谱-效关系，该研究首先建立了18批牡荆叶的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)指纹图谱，对不同来源牡荆叶药材进行聚类分析，鉴定主要酚类化合物且测定其含量，分析牡荆叶的总酚和总黄酮含量，并采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、氧自由基吸收能力法及铁离子还原能力法考察其体外抗氧化活性，通过皮尔逊相关分析、灰度关联分析及偏最小二乘回归分析法研究牡荆叶的谱-效关系。结果表明：(1)牡荆叶的指纹图谱标定21个共有峰，共指认出10个峰，其含量顺序为绿原酸>异荭草苷>木犀草苷>异牡荆素>异绿原酸A>异绿原酸C>原儿茶酸>荭草苷>异绿原酸B>新绿原酸；不同产地样品间相似性较高，相似度结果为0.816～0.983。(2)系统聚类分析显示，样品含量对分类有一定影响，不同来源样品被分为3类，其中南北方样品存在一定差异。(3)牡荆叶中总酚和总黄酮的含量分别为15.82～61.83 mg·g^-1和27.85～157.65 mg·g^-1,样品均具不同程度的抗氧化活...     

生物体微弱磁场检测技术在某部特殊作业人员健康评估中的应用研究

目的:研究某部特殊作业人员的健康状况,为有针对性地提出防护措施提供参考依据。方法:随机抽取某部不同工作岗位的特殊作业人员145名,进行生物体微弱磁场检测分析,以获取包括疲劳、免疫、睡眠、脑机能、血压、心脏、消化、肝胆、泌尿生殖、呼吸、运动、钙代谢、糖代谢、脂代谢、嘌呤代谢等15个系统在内的108项健康评估检测指标。对于每一项指标,仪器自带有其正常值范围,凡低于下限或高于上限的指标被视为异常。结果:所测特殊作业人员总体在钙代谢系统、消化系统、心脏系统、血压系统、呼吸系统、运动系统、免疫系统等七个系统存在不适症状的较为突出,其中钙代谢失衡的占比83.45%,脾胃不和的占比78.62%,心脏功能欠佳的占比72.41%,血压不稳的占比64.14%,咽喉不适的占比59.31%,骨关节不适的占比58.62%,免疫功能下降的占比51.72%。出现运动系统"颈椎疾患"症状的人数占比,实验组明显高于对照组(P0.05)。结论:特殊作业环境可能会影响作业人员的身体健康,应采取有效的安全防护措施,以减弱或消除有毒有害化学物质污染、强噪声、电磁辐射等对人体健康的影响。