永生化转基因成纤维细胞治疗帕金森病

将SV40大T抗原的基因（LTAg）转染大鼠原代成纤维细胞并筛选到永生化成纤维细胞（RFLT）,将此细胞皮下植入裸鼠和大鼠脑内均无致瘤性,植入脑内时LTAg基因即停止表达,3个月后取出细胞培养时LTAg基因又会重新表达,将RFLT细胞分别转入酪氨酸羟化酶（TH）、GTP环水解酶－1（GCH）的基因,筛选出稳定表达姝。混合培养的这两种细胞经HPLC－ECD法测出多巴胺（DA）,将它们移植入帕金森病（PD）大鼠模型可明显改善动物的旋转行为（近4个月）,在脑切片中观察到TH和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的表达产物,本细胞株的建立为人类PD的基因治疗提供了一种获得新的适用的效应细胞的方法。     

改善草莓风味的基因

人们为了培育出更优良的草莓品种,使其味道更加甜美、丰产以及刺激食欲,英国科学家们曾试图通过传统的植物育种方法,用分子标记找出草莓中这个关键的风味基因,或者将这个控制风味和香气的基因转移到微生物中,以便作为调味香料添加到食品中去。近年来,通过他们的不断努力,终于从草莓中分离出控制甜度、酸度和香气的基因。首先,他们发现了一个能把糖份从草莓果皮转移到果肉细胞中的蛋白,称为糖转移蛋白体。当把蔗糖堆积在细胞的液泡中,这个蛋白将起收敛细胞的作用,从而在果实成熟时,让更多糖积累在细胞中。如果这种基因使蛋白过分…     

植物遗传工程的新进展

植物细胞的遗传工程要比微生物和动物细胞进展迟缓。科学家们已经发现,能携带基因进入植物细胞的载体很少,并且移植基因工作很少获得成功。然而,上周在迈阿密冬季讨论会上,两个研究小组宣布了这个领域中的重要进展。每个小组的科学家在各自独立的工作中,都报告已成功地把细菌的基因移植到植物细胞中,     

基因转移指日可待

对基因的定点转移,既可增加基因治疗成功的机率,也将为研究基因在发育过程中的作用提供一条新途径。学者们正研究把外源基因引入他们所要引入的特定基因位点,而不是基因组的任一位置。这一新的把基因引入染色体特定位点的能力,可提高对人类遗传疾病如镰状细胞性贫血(SCA)进行有效基因治疗的机会。在此之前,要控制被转移基因在基因组中的终止位置是不可能的。这些引入的基因可进     

基因工程小麦培育成功

基因工程小麦培育成功加拿大国家研究委员会植物生物技术研究所的研究人员,用转化工艺把三个新基因（二个标准标志基因和一个除莠剂抗性基因）成功地引人小麦细胞。随后用再生工艺把含有新基因的转化细胞培育成为全植株。最后,使新引入的基因在植株体内发挥作用,培育出...     

日本三菱化学公司研究出一种从大肠杆菌中提取基因产物的新技术

日本三菱化学公司和名古屋大学的科学家一起,共同研究出一种从大肠杆菌(E.coli)提取基因重组产物的新技术。迄今,在使用大肠杆菌的遗传重组中的一个严重缺点是细菌细胞具有把外来翻译产物贮存在细胞内的习性。新方法可以克服这一缺点,该方法是将所需产物的外来基因与E.coli的编码细胞表面膜蛋白质的基因连接起来,该产物被分泌到细胞外,因此大大促进产物的分     

漂浮基因有助于哺乳类动物的细胞培养

宾西法尼亚州的Donald Bryant和巴斯德学院(巴黎,法国)的Tandeau de Mafsac克隆了引起蓝藻漂浮的基因并将其表达在大肠杆菌里。还没有产生大量的基因产物。但已初步显示出大肠杆菌能漂浮——而不以生物体通常沉降的方式而沉降。把漂浮基因移入哺乳类动物细胞内可以简化基因在发酵桶内的生长过程。哺乳类动物的细胞往往沉降到发酵桶底。它们较脆弱,为保持其悬浮而进行的猛烈摇动会损坏细胞。而漂浮细胞只需极轻微的摇动。漂浮还有助于收获重组体微生物。有可能用一种化合物来控制漂浮基因,该化合物可在微生物体收获前加入发酵桶内。这些实验中克隆的基因来自眉藻属(Calothrix)的种。漂浮基因编码形成气液泡膜的多肽。气体可以进入液泡,但水却不能。三个有关基因中的两个已被克隆。它们产生相似的蛋     

中国的遗传病基因治疗研究

随着分子生物学和基因工程技术的发展,基因转移的手段已逐趋完善。应用反转录病毒介导的基因转移已成为遗传病基因治疗的主要手段。我们以血友病B为研究对象,将人凝血因子ⅨcDNA构建在反转录病毒上,转染到各种细胞中,其中包括血友病B患者的成纤维细胞中,获得了高效的转移和表达。将这些细胞包埋在胶原中,然后腹腔移植或注射到家兔体内,获 得了高效的转移和表达。将这些细胞包埋在胶原中,然后腹腔移植或注射到家兔体内,获得了持久而稳定的表达,持续时间已超过20个月。     

人类基因在鼠肺中的作用

国立心、肺及血液研究所(NHLBI)和Transgene S.A.(法国.Strasbourg)的研究人员开发了一种把基因转移到活体肺细胞中的新技术,以达到治疗囊纤维变性和遗传性肺气肿的目的.目前,该技术仅用于把人类基因转移到活鼠肺细胞里,利用一种弱毒性的rDNA病毒.将编码α1抗胰蛋白酶蛋白的基因插入此病毒里,然后注入鼠肺里.该鼠肺部的液体取样显示出α1抗胰蛋白酶的存在,表明此基因在起作用.     

基因编辑技术在人类生殖细胞中的应用研究

基因编辑技术极大地提高了对基因组靶位点精确修改的效率。人类早期胚胎发育的特异性和目前报道的上万种遗传突变的修复必要性使得基因编辑技术在人生殖细胞中的应用成为必然。对人生殖细胞基因编辑是一个新的领域,涉及到伦理的考虑。因此,这既是个科学问题,同时也是个社会问题。现综述基因编辑技术在人类生殖细胞应用的伦理之争和研究进展。     

人抗药基因在小鼠ES细胞中的表达及嵌合体小鼠的研究

本文用磷酸钙沉淀法将含人ｍｄｒ１基因表达质粒转染到小鼠胚胎干细胞,得到了四个能稳定地在含有２００ｎｇ／ｍｌ秋水仙素培液中生长传代的细胞克隆。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交及ＲＮＡ印迹杂交证明人ｍｏｄｒ１基因已整合到ＥＳ细胞基因组,并有表达。其中两个克隆杂交信号较强,抗药基因可随秋水仙素深度提高而扩增,表达量也随之增加。用抗该基因编码的ｐ１７０糖蛋白抗体对ＥＳ－ｍｄｒ １细胞作免疫荧光染色,证实ｐ１７０     

少根根霉Δ_-~6脂肪酸脱氢酶基因在毕赤酵母中的表达(英文)

Δ6- 脂肪酸脱氢酶是一种膜整合蛋白,也是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶。在前期工作中,通过RT PCR和RACE技术,从少根根霉NK300037中克隆到一个潜在编码Δ6- 脂肪酸脱氢酶的序列,序列和功能分析结果表明该序列具有一个长度为1377bp、编码由458个氨基酸组成、大小为52kD的新的Δ6- 脂肪酸脱氢酶基因。把少根根霉Δ6- 脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)亚克隆到表达载体pPIC3.5K,构建重组表达载体pPICRAD6,并转化到毕赤酵母菌株GS115进行表达。提取酵母细胞总脂肪酸和进行甲酯化,经气相色谱和气相色谱质谱连用分析表明,目的基因的编码产物能将C16∶1、C17∶1、C18∶1、亚油酸和α- 亚麻酸在Δ6和7位间特异性脱氢而引入一个新的双键,生成更高不饱和的脂肪酸,该催化反应没有链长特异性,只有键位特异性。此外,按Kozak序列特点,改变目的基因转译起始密码子周边序列结构,并把改变后序列导入毕赤酵母GS115中进行功能表达分析,结果表明在毕赤酵母中这种改变同样能提高目的基因的表达水平。综合所有分析结果表明,巴斯德毕赤酵母更适合用来综合分析Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的功能。     

外源基因表达

体外重组DNA技术,在很多方面已经被用来导入外源遗传物质到一个新的细胞里,其目的常常是分离以及在结构上研究一个特定的DNA片段。可是,主要目的是在新的寄主细胞中获得外源基因的表达。 到达新寄主的某些外源基因,其表型至少在定性上与在原寄主中是一样的(表一)。获得这些结果的时间相对地早一些,并且一般地被介释为,原核和低等真核基因在新的     

SLP-2荧光表达载体的构建及其在乳腺癌细胞MCF-7中的表达与定位

人的SLP-2基因是一个新的肿瘤相关基因,它在多个癌组织里高表达,如食管鳞状细胞癌组织和肺癌组织。其中在乳腺癌组织的高表达和病人的存活率负相关,这说明该基因很可能在乳腺癌的发生中发挥重要作用。为了研究SLP-2基因在肿瘤里的功能,将人类SLP-2基因全长编码区定向连入pEGFP—C3质粒,使SLP-2蛋白可以与绿色荧光蛋白在乳腺癌细胞MCF-7内融合表达。而且细胞荧光实验发现SLP-2蛋白主要定位在MCF-7细胞的胞质内,这为进一步研究SLP-2基因在乳腺癌中的功能奠定了实验基础。     

遗传工程的某些成就

1.1977年5月,在加利福尼亚大学将大鼠的胰岛素基因转移到大肠杆菌。转移成功,但未表达。 2.1977年11月,在斯坦福大学报告了大肠杆菌从高等细胞获得DNA的工作。 3.1977年11月,加利福尼亚大学把化学合     

植物培养细胞遗传学——一个最新开拓的研究领域

最近有机会到美国、瑞士、英国进行了一年多的访问和学习。接触到国际上正在开拓的一个新的研究领域——植物培养细胞遗传学。它是由植物分子遗传学、细胞学和植物激素生理等几个学科交织起来的一门新学科。它的内容是用分子生物学的研究技术,以植物培养细胞为材料,研究植物细胞的DNA,重复顺序(rcpetitive sequence),基因重组(recombination),激素作用机理,激素对基因     

雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因的筛选与初步鉴定

采用染色质免疫共沉淀技术在全基因组水平筛选雄激素非依赖性前列腺癌细胞LNCaP-AI的雄激素受体结合位点,行高通量测序及生物信息学分析共得到2 876个peak（pvalue〈1×10–5）,peak平均长度为673 bp;将peak序列定位到Hg19基因组,共有1 865个靶基因,其中fold enrichment≥10的基因有425个。对peak相关基因进行GO分析发现,与细胞、细胞组分、细胞过程、结合、细胞器相关的基因位列前五位;对peak相关基因进行通路分析发现,与黏着斑、代谢通路、癌症中的转录错误调控、嘌呤代谢等信号通路相关的基因占大多数。筛选出7个候选AR靶基因,采用Real-time qPCR技术分析它们在LNCaP-AI细胞和雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP中对DTH刺激的反应性,发现DHT刺激可改变7个候选AR靶基因在LNCaP-AI细胞中的表达,为进一步研究雄激素依赖性前列腺癌向非依赖性前列腺癌发展的过程中雄激素受体及其调控的下游靶基因功能起着至关重要的作用。     

加拿大注视着能保护昆虫、鱼和植物的抗冻基因

加拿大 Queens 大学研究人员利用海洋狼鱼和其它品种里发现的编码抗冻蛋白的基因进行一些有趣的研究。该基因与颗粒冰晶结合后使固体冰难以在活细胞中形成。Virginia Walker 用一种鱼抗冻基因遗传工程转化了一种昆虫(果蝇)。他采用的载体是一种含有鱼基因的转座子,此转座子位于昆虫启动子 DNA 序列的后面。把该载体注入新的产卵昆虫的卵中。尽管新的昆虫由于初始核酸的增殖而含有几个核酸,但在这个阶段它仅含     

少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤酵母中的表达

△6-脂肪酸脱氢酶是一种膜整合蛋白,也是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶.在前期工作中,通过RT-PCR和RACE技术,从少根根霉NK300037中克隆到一个潜在编码△6-脂肪酸脱氢酶的序列,序列和功能分析结果表明该序列具有一个长度为1377bp、编码由458个氨基酸组成、大小为52kD的新的△6-脂肪酸脱氢酶基因.把少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)亚克隆到表达载体pPIC3.5K,构建重组表达载体pPICRAD6,并转化到毕赤酵母菌株GS115进行表达.提取酵母细胞总脂肪酸和进行甲酯化,经气相色谱和气相色谱-质谱连用分析表明,目的基因的编码产物能将C16:1、C17:1、C18:1、亚油酸和α-亚麻酸在△6和7位间特异性脱氢而引入一个新的双键,生成更高不饱和的脂肪酸,该催化反应没有链长特异性,只有键位特异性.此外,按Kozak序列特点,改变目的基因转译起始密码子周边序列结构,并把改变后序列导入毕赤酵母GS115中进行功能表达分析,结果表明在毕赤酵母中这种改变同样能提高目的基因的表达水平.综合所有分析结果表明,巴斯德毕赤酵母更适合用来综合分析△6-脂肪酸脱氢酶基因的功能.     

遗传工程还能给人类带来什么

在可以予见的未来,遗传工程还能给我们带来什么呢? 畜牧学家将能利用无性繁殖技术培养出体大如象的奶牛,一年能提供牛奶四万多磅,而且抗病力强、食用饲料少,六个月就完全成熟。人们把蚕的遗遗传基因移入某种细胞里,由此造出蚕丝。如果能够把某些海洋生物耐盐或处理盐的基因分离出来,并把它转移到农物作的细胞里,那么,它们就成为耐盐植物,以后我们可以取之不尽的海水灌溉这种作物了。