表面压与紫膜含量对紫膜LB膜质量的影响

本文报导了用表面轮廓测量仪测量了不同表面压和不同紫膜含量下制备的紫膜LB膜中紫膜碎片的厚度。实验结果表明:单个紫膜碎片在紫脂LB膜中的厚度为50左右,相当数量的紫膜碎片之间有重叠。当表面压为30mN/m或紫膜碎片与大豆磷脂之重量比为20:1时,紫膜碎片容易进入到水相或碎片之间相互重叠变得更加严重。     

Mg~(2+)离子对紫膜表面电位效应的自旋探针—ESR研究

本文根据带正电荷自旋探针CAT_(12)在紫膜结合相和水相的分布,利用自旋探针顺磁共振(ESR)技术测定了Mg~(2+)对紫膜表面电位的影响,我们的结果表明紫膜具有σ为3.02×10~(-4)Ch-arges/(?)~2的表面电荷密度.据此σ用Gouy-Chapman理论计算得到Mg~(2+)离子浓度与表面电位((?)_i)的关系与实验结果极为一致,这表明离子通过表面电位的变化引起紫膜的表面pH值的改变从而影响紫膜的结构与功能,Mg~(2+)对紫膜表面电位的影响明显地比K~+要大,说明镁离子可能在紫膜的结构与功能中有更为重要的作用.     

酰化对紫膜结构的影响

在很宽波长和ＰＨ范围内用紫外及可见区光吸收、圆二色及共振拉曼测定了酰化诱导的紫膜溶液的光谱变化。结构表明：酰化引起的表面电位的改变诱导了蛋白局部构象的改变。这种改变在很大程度上离域到整个蛋白分子中而影响了视黄醛结合位点的性质及生色团的结构,从而导致可观察的光谱变化。与未酰化紫膜比较,紫膜对ＰＨ的稳定性减小了。     

紫膜表面电荷数的测量

以CAT₁₂为自旋探针,用ESR自旋标记法测量了不同表面pH时酰化前后紫膜表面负电荷密度,以酰化所屏蔽的表面电荷数为标准,计算了表面pH4-11时单位菌紫质紫膜两侧的总负电荷数.结果表明:表面pH5-9时为9,表面pH≥10及表面pH < 5时增大.结果有力支持了膜表面5个二价阳离子结合位点的模型.     

表面活性剂CHAPS对紫膜脂双层微环境的作用

利用顺磁性自旋标记技术,探测在表面活性剂ＣＨＡＰＳ（３－〔（３－Ｃｈｏｌａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）ｄｉｍｅｔｈｙｌ－ａｍｍｏｎｉｏ〕ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）作用下,紫膜脂双层微环境的物理参数（序参数Ｓ和旋转相关不同。表层序参数Ｓ值随ＣＨＡＰＳ浓度的增加而逐渐减小;深层旋转相关时间τｃ值开始随ＣＨＡＰＳ浓度的增加而增大,在ＣＨＡＰＳ浓度为５ｍｍｏｌ／Ｌ时,τｃ值呈现最大值,随着ＣＨＡ     

嗜菌紫膜表面电位和质子泵效率间的关系

本文研究了中性红与紫膜结合,并用直接滴定法和测定结合量法,求得了结合于膜上之中性红本征PK和在不同离子强度时的表观PKa值.从它们的差值中计算得到紫膜表面电位.并得不同盐浓度的表面电位和质子泵效率作了比较.结果说明.阳离子对质子泵效率的影响不能完全用表面电位的变化来说明.这一结果暗示了一定的阳离子对于紫膜质子泵功能的完成有着特殊作用.     

冷冻干燥对紫膜菌紫质圆二色性的影响

无论是先冷冻后干燥,还是先干燥后冷冻,或只冷冻处理,或只干燥处理的干湿紫膜样品,也无论是在处理后将其悬浮在水中,或在十六烷中,或在大豆磷脂正己烷液中,紫膜中的菌紫质分子均丧失了天然紫膜水悬浮液中的圆二色谱的双相性。然而,对于先冷冻后干燥,只干燥处理的紫膜水悬浮液,这种双相性可以缓慢地恢复。该现象提示,冷冻和/或干燥处理对紫膜菌紫质的圆二色性的影响,可能主要通过影响脂区间接实现的;用环三体激子理论难以圆满解释该现象。     

温度对紫膜bR结构的影响

温度升高使天然紫膜在可见差分吸收光谱中650nm处出现一吸收峰,这意味着紫膜去离子兰膜的形成,而这在脱氧胆酸处理后的紫膜中并未出现.天然紫膜与脱脂紫膜在630nm处的吸收与温度间的关系进一步表明:只有天然紫膜在温度大于68℃才有膜结合离子的释放,释放的离子结合于移去的膜脂之上.紫膜结合离子的释放改变了天然紫膜中bR的构象.热致离子的释放还受介质pH值及介质中离子的影响.pH5.03时,热致离子释放温度提前至温度46℃,而pH7.00,10mM MgCl_2及pH9.00时都没有观察到紫膜离子释放.温度对紫膜在不同pH值时表面电位影响的不一致性进一步表明这是由于膜表面电荷参与的结果.     

紫膜LB膜的结构特性研究

研究了紫膜LB膜中的紫膜碎片的结构特性。扫描电子显微镜观察表明,紫膜LB膜中单个紫膜碎片的直径大约为0.3微米。表面轮廓测量仪(简称台阶仪)观察到紫膜LB膜中的紫膜碎片的厚度为40—50。在不同的表面压和不同紫膜含量时测量了紫膜碎片在紫膜LB膜中的形态学分布,当表面压为30mN/m或紫膜与大豆磷脂的重量比大于20:1时,紫膜碎片容易重叠或凝聚。     

细菌视紫红质的构象与介质pH依赖关系的荧光寿命研究

本文采用荧光探针的方法,通过测量与紫膜结合后的荧光探针ANS的荧光寿命随介质pH的变化,研究了介质pH对bR的构象的影响.结果表明:在pH4～11范围内ANS的荧光寿命呈U字形分布;其荧光寿命中含有快慢两种衰减成分;随着介质pH的变化;这两种成分的含量所占比例也有很大变化.说明介质pH能够引起蛋白构象的变化.     

用自旋标记研究嗜盐菌紫膜的相变

本文用5′酮基软脂的甲酯的N′氧基4、4-二甲基(口恶)唑衍生物、TEMPO和4-(乙氧基氟代磷酸))-TEMPO′研究了嗜盐菌紫膜的相变.ESR测定表明:在醋酸钠缓冲溶液中(100mM、pH7.0)、30至70℃没有观察到相转变;在81℃附近获得了紫膜类脂的另一相变点,此转变点可能与紫膜类脂及蛋白质晶格的分离有关.紫膜蛋白质的热变性点则在100℃附近.当温度升至110℃时紫膜类脂烃链则趋“熔化”,紫膜蛋白质的热变性也呈不可逆的.文中还就不同的物理因素对紫模相变的影响进行了讨论.     

扫描隧道显微术研究脂双层表面结构

扫描隧道显微术可用于研究生命物质表面结构,为人类认识生物物质的微观世界打开一条新途径.本文探讨国产扫描隧道显微镜直接观测脂双层膜表面分子的排布,以线扫描像和灰度扫描像显示出脂双层膜上磷脂头部的排列.     

紫膜热转变与水合

本文首次用DSC研究水合紫膜的热力学性质了,实验发现室温至400K内紫膜有三个吸热峰.水合对紫膜特别是其中蛋白质的结构及结构转变有很大影响.在R≌O.05时,BR变性峰才变得更为明显,其焓值也开始由大到小变化.在R≌O.09处,转变峰Ⅰ消失.在R=0.17处,BR变性峰的焓值及半宽分别达到其稳定值和最小值,△H=2.82±0.18 cal/gPM和△T_(1/2)=5.88K.在R≌0.25处,开始出现反映BR三、四级结构变化及紫膜晶格转化的峰Ⅱ.在R≌0.40处,变性峰半宽及峰温分别达到其稳定值△T_(1/2)=9.20±0.62K和T_3=373.1±0.46K.     

磷脂模型膜的时间分辨纳秒荧光光谱的研究

叙述了用时间分辨率纳秒荧光技术研究大豆磷脂或合成磷脂模型膜（脂质体）的物理状态变化与荧光寿命以及时间分辨各向异性测量参数变化相关性的实验结果。用荧光探剂ＭＣ５４０标记模型膜的结果表明,荧光寿命（τ）的变化与脂质／探剂比例、磷脂组成、磷脂的极性头部、脂肪酸酰链长度等有关。用ＤＰＨ（１,６－ｄｉｐｈｅｎｙｌ－１,３,５－ｈｅｘａｔｒｉｅｎｅ）标记磷脂模型膜的时间分辨各向异性分析结果表明,序参数（Ｓ）、     

紫膜与溶剂的相互作用

本文研究了溶剂正己烷,正十六烷,甲苯和二甲基甲酰胺(DMF dimethyl formamide)与紫膜的相互作用.吸收光谱,园二色谱和紫膜光循环中间产物M412的动力学过程的测量表明,在不同条件下,溶剂与紫膜能相互作用而影响到紫膜的光谱特性和光化学循环动力学过程.结果说明,在制作紫膜LB膜时,正己烷和正十六烷是合适的,使用二甲基甲酰胺时必须防止强光照射,甲苯则不能采用.     

人精子膜蛋白片段在沙门氏菌中的表达——一种制备抗生育疫苗的途径(英文)

合成编码一种人精子膜蛋白YWK-Ⅱ胞外区的一段多肽片段的双链寡核昔酸链,HSD—2a。用平端连接的方法将其插入到沙门氏菌鞭毛基因fliC(d)的抗原表位IV高变区EcoRV位点,构建了重组质粒pLS408-H1。重组基因在鞭毛负性aroA基因缺失的无致病性沙门氏菌S.dublin SL5928疫苗菌株中表达。经ELISA、电镜免疫胶体金法检测,表明HSD-2a编码的多肽片段成功地在沙门氏菌鞭毛表面表达。融合鞭毛蛋白分子量约为60kD。Western-Blot法检测,提纯的融合鞭毛蛋白与YWK-Ⅱ小鼠抗血清只在60 kD处出现一条结合带。携带重组质粒pLS408—H1的沙门氏菌疫苗菌株极有可能成为抗生育疫苗。