黏着斑激酶及其小分子抑制剂作为抗肿瘤药物的研究进展

抗黏着斑激酶是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶,在许多肿瘤的发生和发展过程中均有过表达。研究表明,作为细胞内重要的骨架蛋白和调节多种细胞信号通路的关键分子,黏着斑激酶在肿瘤发生、发展、迁移和侵袭的各个阶段都起着重要作用。因此,以黏着斑激酶作为抗肿瘤靶点开发其抑制剂的研究受到广泛关注。综述黏着斑激酶的结构与功能、它与肿瘤的关联及其小分子抑制剂的研究与开发。     

VEGF通过调节黏着斑促进间充质干细胞的黏附及铺展

间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）具有多向分化潜能并能在体外趋化剂或细胞因子的作用下进行定向迁移,体内移植后可趋向迁移至脑瘤病灶区。细胞黏附是细胞迁移的首要条件,了解细胞黏附及其调控有助于细胞迁移机制的研究。细胞黏附及铺展涉及到黏着斑（f0－caladhesions,FAs）的动态变化以及细胞骨架的重排。细胞铺展面积在黏附过程中逐渐增大,黏附初期形成的小的黏着复合物逐渐成熟,聚集在一起形成较大的FAs。肌动蛋白（F—actin）聚集形成的螺线圈样微丝结构逐渐被应力纤维代替,细胞也由圆形变为具有极性的梭形或多角形。黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）和桩蛋白（paxillin）具有调节FAs聚合及骨架重排的作用,其中,Y397－FAK和Y31／Y118－paxillin的磷酸化活性在细胞铺展过程中不断变化。FAs组装时,Y397－FAK的磷酸化活性升高;FAs成熟后,Y397．FAK的磷酸化活性下降。活化的FAK能够磷酸4LY31／Y118-paxillin,激活paxillin参与调节细胞骨架的形成和排列。血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）诱导~SMSCs黏附过程中,细胞面积变大,完全铺展的时间缩短,黏着斑及细胞骨架的形成均提前。另外,VEGF诱导的细胞铺展过程中形成的FAs形态细长,数量较多。该研究表明,VEGF通过调节黏着斑和细胞骨架促L~MSCs的黏附与铺展,提示vEGF可以通过调节黏着斑进而调控MSCs的定向迁移,为细胞迁移行为的研究提供理论基础。     

FAK和ILK介导骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移

黏着斑激酶（FAK）和整合素偶联激酶（ILK）是整合素信号途径中的重要信号转导分子,为阐明两者在血管平滑肌细胞（VSMC）黏附和迁移中的作用,以骨桥蛋白（OPN）作为VSMC黏附和迁移的诱导剂,检测其对FAK和ILK磷酸化以及对两者之间结合的影响.在此基础上,用FAK磷酸化特异性抑制剂黏着斑相关非激酶（FRNK）或ILK反义RNA分别阻断FAK磷酸化或ILK表达,进一步探讨两者在VSMC黏附和迁移中所起的作用.结果显示,OPN诱导可促进FAK磷酸化,诱导10 min后FAK磷酸化水平升高到对照组的2.4倍;与此同时,ILK的磷酸化受到抑制,30 min降至对照细胞的44.6％.OPN诱导FAK磷酸化的同时使FAK与ILK的结合减少.外源性FRNK在VSMC中的过表达显著降低FAK的磷酸化水平,促进ILK磷酸化和FAK与ILK之间的结合,抑制VSMC的黏附和迁移.用ILK反义RNA抑制ILK表达使VSMC在OPN上的黏附增加1.8倍,迁移细胞数降低45.5％.结果提示,FAK和ILK介导OPN诱导的VSMC黏附和迁移过程,两者通过对同一刺激信号产生不同的磷酸化变化而对VSMC的黏附和迁移产生不同的影响.     

Pyk2介导的细胞信号通路

酪氨酸蛋白激酶在细胞信号传递过程中起重要作用,由酪氨酸蛋白磷酸酶和酪氨酸蛋白激酶协同控制的酪氨酸的磷酸化是细胞生长、分化、凋亡、黏附和迁移等生理过程的重要调节机制。酪氨酸蛋白激酶Pyk2是黏着斑激酶家族成员,能被包括整合素在内的多种细胞外信号激活,参与多条信号通路的传递,在细胞信号转导过程中发挥重要作用。     

黏着斑激酶与肿瘤侵袭转移

黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）是一种非受体型蛋白酪氨酸激酶,在肿瘤细胞的侵袭和转移中起着重要的作用。FAK是整合素介导的或生长因子受体诱导的调节细胞迁移的信号通路的关键组分。FAK通过与相关分子作用可以调节细胞骨架重构、胞外基质降解、细胞黏附更新以及质膜突出,进而参与肿瘤细胞的运动等多个过程,所以FAK与肿瘤发展的关系已经越来越受到重视。     

不同亚细胞定位的黏着斑激酶对肿瘤的调控机制

黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)是一种非受体蛋白酪氨酸激酶。在细胞质黏着斑中,FAK通过调控细胞黏着斑的解聚与组装及多个蛋白质的磷酸化从而调节细胞的增殖和迁移。FAK也定位于细胞核和内体中。在细胞核中,FAK可导致p53的多聚泛素化及降解,从而影响正常细胞的存活和肿瘤细胞的生长。此外,核FAK还能够通过调节细胞因子和趋化因子的表达促进肿瘤免疫逃逸的发生。在内体中,FAK通过FERM结构域定位到内体并被激活。内体中整合素的信号转导时间比质膜上持续的时间更长,并且能够阻止肿瘤细胞发生失巢凋亡,因此,内体FAK可通过抵抗失巢凋亡促进肿瘤细胞的转移。现就不同亚细胞定位的FAK对肿瘤发生和发展的调控作用及机制进行讨论。     

癌细胞运动与迁移的分子机制

癌细胞运动和迁移的分子机制远较我们想象的复杂,癌细胞的运动和迁移性和接触性刺激相应答的细胞膜突起形成所启动的多步骤过程的结果.人们普遍想相信,片状伪足在驱动癌细胞迁移中起着主要作用,它通过附着在基底膜上而产生拉动细胞体向前的力量.近来的研究证明,切丝蛋白是癌细胞运动和迁移的一个重要调节因子, 切丝蛋白的局部激活可以诱导片状伪足的形成,并设定细胞运动方向.此外,成束蛋白.Arp2/3复合物、Cdc42、LIM激酶和黏着斑激酶常常协同调节癌细胞的运动和迁移.虽然调节癌细胞运动和迁移的信号通路和分子机制尚未完全阐明,但现有的资料清楚地表明,抑制癌细胞的迁移性将可能成为抑制恶性肿瘤生长和扩散的一个有用的策略.     

整合素与RhoA、蛋白激酶A在肿瘤迁移过程中的作用

整合素是一种重要的细胞表面分子,因介导细胞与细胞外基质的粘附和黏着斑的形成等而在对肿瘤迁移的研究中备受关注。小G蛋白RhoA、蛋白激酶A所介导的信号通路在肿瘤迁移过程中所起的作用也是近年来研究的热点。本文综述整合素与RhoA、PKA在肿瘤迁移过程中的作用以及相互影响。     

建立稳定敲减TNIK表达的A549细胞系及对其初步分析

TNIK(TRAF2 and NCK interacting kinase)属丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员,在多种生理及病理过程中起关键作用。研究发现,TNIK在肺鳞癌组织中高表达且可驱动癌细胞增殖等恶性表型,但其在肺腺癌中的作用仍未知。该研究在构建稳定敲减TNIK表达的肺腺癌A549细胞后,流式细胞术检测发现稳定敲减TNIK阻滞细胞周期进程并诱发凋亡,细胞增殖及运动实验证明肺癌细胞增殖与迁移能力被显著抑制。进一步通过免疫荧光染色分析发现,稳定敲减TNIK表达后会诱导细胞微丝骨架排列紊乱并抑制黏着斑动态周转(组装/解聚)。综上研究结果表明,肺腺癌细胞中TNIK可能通过调节微丝骨架排列,从而影响黏着斑动态周转最终控制细胞增殖及迁移运动;推测肺腺癌细胞中高表达的TNIK可能通过调控细胞微丝骨架系统以维持癌细胞恶性表型。     

黏着斑激酶与肿瘤发生、发展及预后的关系

黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)作为一种非受体蛋白酪氨酸激酶,因其与肿瘤间的密切联系而备受关注。多年研究发现,FAK在许多肿瘤中过表达,通过多条信号通路调控细胞侵袭、迁移、增殖及凋亡等,从而参与肿瘤的发生、发展进程。研究表明FAK可以作为肿瘤预后因子,是潜在的抗肿瘤治疗靶点。本文对FAK与肿瘤进程的关系作一综述,以期更好地认识FAK在肿瘤发生、发展过程中所起的作用,为相关研究者提供资料参考。