广州河涌污水暴露致食蚊鱼骨骼形态雄性化的影响

食蚊鱼(Gambusia affinis)骨骼发育具有性别二态性,雄鱼臀鳍与第14、15和16椎体脉棘的形态特化受雄激素所调控,因此可以作为生物标志物监测水环境中的雄激素污染。本文利用食蚊鱼臀鳍和椎体脉棘形态变化为指标,调查了生活在受城市废水严重污染的广州市河涌中的食蚊鱼受内分泌干扰物影响的现状。根据食蚊鱼生长情况和捕鱼的便利性,选择广州市海珠涌中下游宝岗大道段(BG)、洪德路段(HD)和黄埔涌中下游赤岗路段(CG)、苗艺路段(MY)4个采样点,同时设置不受城市废水污染的华南师范大学校区内的中心湖作对照点(REF)。测量了雌、雄食蚊鱼第4臀鳍条长度和第4与第6臀鳍条长度的比值,并采用食蚊鱼第14、15和16椎体脉棘的总长(L,μm)、投影长度(P,μm)、尾部尖端到脊柱的高度(D,μm),以及L︰D、P︰D和P︰L的比值来评价食蚊鱼骨骼形态变化。结果,与对照点相比,夏冬两季海珠涌和黄埔涌4个采样点成年雌性食蚊鱼的第4臀鳍条长度显著延长(P0.05或P0.01),第4与第6臀鳍条长度的比值明显增大(P0.05或P0.01),成年雌性食蚊鱼臀鳍显现形态雄性化的特征;尽管4个采样点成年雄性食蚊鱼第4臀鳍条长度均显著小于对照点(P0.01),但是所有采样点的成年雄性食蚊鱼第4与第6臀鳍条长度的比值则无明显差异(P0.05)。与对照点(REF)相比,夏冬两季海珠涌宝岗大道段(BG)、洪德路段(HD)和黄埔涌苗艺路段(MY)采样点成年雌性食蚊鱼第14、15、16椎体脉棘的投影长度(P)显著增加(P0.05或P0.01);海珠涌宝岗大道段(BG),黄埔涌赤岗路段(CG)和苗艺路段(MY)采样点成年雌性食蚊鱼的P︰D比值显著增加(P0.05或P0.01);海珠涌宝岗大道段(BG)和洪德路段(HD),黄埔涌苗艺路段(MY)采样点成年雌性食蚊鱼的P︰L比值也显著增加(P0.05或P0.01);成年雌性食蚊鱼的第14、15、16椎体脉棘出现了骨质增生,增长,并向前倾斜,显示不同程度的形态雄性化特征。可是,各采样点成年雄性食蚊鱼第14、15、16椎体脉棘的投影长度(P)、P︰D和P︰L比值则没有明显变化(P0.05)。结果表明,广州河涌水体中的环境内分泌干扰物对食蚊鱼产生明显的形态雄性化效应。     

苯并[a]芘和镉暴露对食蚊鱼求偶行为的影响

研究苯并[a]芘(BaP)和镉(Cd2+)暴露对雄性食蚊鱼(Gambusia affinis)求偶行为的影响。设对照组和实验组,BaP暴露浓度为0、0.1、100μg/L;Cd2+暴露浓度为0、5、500 nmol/L;分别暴露6和8周。暴露实验结束后,观察雄鱼与雌鱼配对(1∶1)的求偶行为,并作录像记录分析。结果显示,雄鱼在0.1和100μg/L的BaP分别暴露6周后其对雌鱼的求偶行为开始明显降低,并随着暴露浓度的升高和时间的延长而呈现下降趋势;BaP高浓度组(100μg/L)暴露8周后对雄鱼有严重的致死效应。暴露在5和500 nmol/L的Cd2+至8周后雄鱼求偶行为明显降低;雌鱼暴露在低浓度BaP和Cd2+中其对雄鱼的求偶行为无明显影响(P>0.05);但分别在高浓度100μg/L BaP和500nmol/L Cd2+中暴露后,雄鱼对雌鱼的求偶行为显著减少。结果表明,BaP和Cd2+暴露均可降低雄性食蚊鱼的求偶行为。     

食蚊鱼CYP19b基因克隆及环境激素暴露对其表达的影响

为探讨17-雌二醇(E2)、17-甲基睾酮(MT)和雄烯二酮(AED)暴露对食蚊鱼脑组织CYP19b表达的影响,首次克隆和分析了食蚊鱼(Gambusia affinis) CYP19b cDNA的全系列。采用静水暴露方法, 分别设置2、10、50和100 ng/L E2、MT和AED各4个实验组, 并设置对照组和平行组, 定量测定了1、3、5和7d脑组织中的CYP19b mRNA表达水平的变化。成功克隆了食蚊鱼CYP19b基因全长, 获得基因片段总长1670 bp, ORF(OpenReading Frame)是从52 bp到1554 bp, 共编码501个氨基酸。通过与其他相关鱼类CYP19b基因编码的氨基酸序列相似性作比较, 食蚊鱼CYP19b基因氨基酸序列的同源性很高。结果显示, 短时间的暴露, E2较低浓度组(2和10 ng/L)对食蚊鱼作用不明显, 但E2相对较高浓度组(50和100 ng/L)能显著地上调食蚊鱼CYP19b基因的表达(P0.01)。暴露早期MT对CYP19b表达无明显影响, 随着暴露时间的持续延长, 除了MT较高浓度组(50 ng/L)外, 其他各浓度组MT对CYP19b的表达有显著的抑制作用(P0.01), 并呈一定的剂量相关关系。AED作为雄激素类似物与MT的作用效果相似, 相对较高浓度(50和100 ng/L)的AED抑制CYP19b的表达(P0.01)。研究结果初步表明, 3种典型环境激素对食蚊鱼CYP19b基因表达的影响十分显著, 但不同的暴露浓度及不同的取样时间点可能表现为促进或抑制CYP19b基因的表达。     

LH与hCG对昆明小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的研究促黄体素（LH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）对昆明小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法小鼠经注射孕马血清促性腺激素（PMSG）48h后,摘取卵巢获得未成熟卵母细胞,分别在含不同浓度的LH和hCG的成熟液中,或将LH和hCG以不同的浓度组合加入到成熟液,进行体外成熟。结果经15.16h的成熟培养,5个浓度LH组中的极体率均高于对照组,其中200IU/mL组显著高于50IU/mL、400IU/mL、300IU/mL组和对照组（P〈0.05）;5个浓度hCG组的极体率与对照组极体率无显著差异（P〉0.05）;协同组中15IU/mL hCG＋200IU/mL LH组的极体率显著高于对照组和其它各处理组。结论LH对小鼠卵母细胞的体外成熟有一定的促进作用。     

低剂量三聚氰胺对小鼠精子质量影响的研究

采用灌胃法,研究了三聚氰胺在1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、4.0 mg/kg浓度下染毒35 d时,小鼠体重、精子运动参数和精子形态的变化.结果显示,4.0 mg/kg 处理组小鼠部分精子运动参数显著性降低(P＜0.05),1.0 mg/kg 和2.0 mg/kg 浓度组各项精子运动参数与对照比较变化不显著(P＞0.05);在染毒一周后,2.0 mg/kg 浓度组小鼠体重增长显著性下降(P＜0.05),4.0 mg/kg 浓度组小鼠体重极显著降低(P＜0.01);3个处理浓度组对小鼠精子形态影响均不显著.总之,食物中低浓度三聚氰胺对小鼠精子活性和形态无明显的影响.     

铜对梨形环棱螺抗氧化酶活性和金属硫蛋白含量的影响

本实验采用暴露重金属的方法,研究了不同浓度硫酸铜（Cu2+ 分别为0、0.005、0.01、0.02、0.05 mg/L）在不同暴露时间（0—14d）下对梨形环棱螺（Bellamya purificata）过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽硫转移酶（GST）的活性、还原性谷胱甘肽（GSH）和金属硫蛋白（MT）含量的影响,以探讨Cu2+ 对梨形环棱螺的氧化损伤及其防御作用的机理,并为水环境Cu2+ 污染的早期诊断及生态风险评价提供科学的依据。结果表明：Cu2+对梨形环棱螺肝脏和鳃中CAT、SOD、GST、GSH 和MT 均有明显影响,表现出时间剂量效应。SOD在前4天、CAT在前3天酶活性总体上表现出诱导趋势, GST在前4天酶活性处于诱导状态,随着暴露时间的延长,酶活性下降,到第5天时表现出抑制趋势;随着时间的进一步增长,至14d时, 0.005 mg/L剂量组酶活性维持在正常值附近波动, 0.01 mg/L剂量组酶活性被诱导, 0.02 mg/L剂量组酶活性在肝脏中表现为诱导而在鳃中则被抑制,0.05 mg/L剂量组酶活性被抑制。肝脏和鳃GSH含量的变化与GST相似,在短时间内表现出诱导效应,肝脏GSH在暴露的前5天、鳃GSH在暴露的前4天均处于诱导状态,随着暴露时间的延长,0.005 mg/L剂量组表现出诱导,0.05 mg/L剂量组则受到抑制。MT在整个实验期间均处于诱导状态,各剂量组在0.5d被极显著诱导,随后MT含量出现起伏波动,有上升和下降,至第14天时达到一稳定水平。其中,0.01 mg/L剂量组肝脏的MT在整个实验期间均被极显著地诱导（P <0.01）,0.01 mg/L 剂量组的鳃组织MT除第10天外也被极显著诱导（P <0.01）。在暴露14d时,除0.05 mg/L剂量组的肝脏MT外,其余处于极显著诱导状态（P <0.01）。     

高效氯氰菊酯对草鱼肝胰脏和肾脏溶菌酶活性的影响

研究了暴露在不同高效氯氰菊酯浓度下的草鱼Ctenopharyngodon idella肝胰脏和肾脏溶菌酶(LSZ)的活性变化.实验中高效氯氰菊酯浓度设5组,分别为0 μg/L、0.5μg/L、1.0 μg/L、3.0μg/L和5.0 μg/L,每组分别于1d、5d和12 d取样,测定肝胰脏和肾脏溶菌酶活性.结果显示,肝胰脏LSZ活性在暴露1d、5d、12 d时,各处理组均显著下降(P ＜0.05,P ＜0.01).肾脏LSZ活性在暴露1d、5d时,0.5μg/L、1.0 μg/L和3.0 μg/L组显著上升(P＜0.05,P＜0.01),5.0 μg/L组显著下降(P＜0.01);暴露12d时,0.5μg/L、1.0 μg/L组显著上升(P＜0.05),3.0μg/L和5.0 μg/L组显著下降(P＜0.05,P＜0.01).表明高效氯氰菊酯对草鱼肝胰脏和肾脏具有明显的毒害作用.     

制备低剂量四氯化碳诱导小鼠慢性肝损伤模型的探讨

目的：通过注射低剂量四氯化碳（ carbon tetrachloride ,CC14）建立B/C小鼠肝损伤模型。方法正常B/C小鼠随机分为正常对照组、油对照组、CCl4模型组。正常对照组常规饲养;油对照组腹腔注射鲁花花生油（10μL/g,1次/3天,连续6周）;CC14模型组腹腔注射0.5％CC14（10μL/g,1次/3天,连续6周）。第6周,各组小鼠检测血清AST、ALT浓度,HE及Masson染色后观察小鼠肝脏结构、细胞形态及纤维化程度。结果第6周CCl4模型组小鼠血清ALT（P＝0.00）、AST（P＝0.00）浓度极显著性增高,HE及Masson染色显示CCl4模型组小鼠肝上皮细胞呈广泛性空泡样变及大量坏死,肝小叶内出现明显的条索样纤维增生,其纤维化程度评分显著性升高（P ＝0.00）,纤维显色积分光密度值极显著性增高（P ＝0.00）。结论注射低剂量CCl4可以诱导B/C小鼠肝损伤模型,实验模型具备肝损伤和肝纤维化病理特征。     

亚磁场对雄性小鼠神经递质、 激素和血常规的影响

本研究主要是探讨连续亚磁场环境暴露对C57BL/6雄性小鼠（Mus musculus domesticus）神经递质、激素含量和血常规参数的影响。实验组为亚磁场暴露组（1.1 ± 0.5）μT,对照组为地磁场组（53.3 ± 0.2）μT。实验对象分别为3周龄幼年小鼠和8周龄成年小鼠。幼年小鼠随机分为实验组与对照组,每组42 只;成年小鼠也随机分为实验组与对照组,每组36只。幼年小鼠在两种磁场环境中的暴露时间为1 ~ 5周,成年小鼠的暴露时间为1、3、6、9、12周。采用液相色谱-质谱联用法（LC-MS）检测小鼠脑组织及血清中的神经递质含量,包括5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、乙酰胆碱（Ach）、去甲肾上腺素（NA）、γ-氨基丁酸（GABA）;用 ELISA 方法检测小鼠血清中的激素含量,包括甲状腺素（T4）、生长激素（GH）、去甲肾上腺素（NA）;血常规在北京大学医学部检测。采用独立样本 t 检验对实验组与对照组的检测结果进行差异分析。与地磁场组相比,亚磁场组幼年小鼠脑组织多巴胺（DA）含量在第5周有显著降低（P < 0.05）,血清中的甲状腺素（T4）含量在第 2和5 周有显著降低（P < 0.05）,去甲肾上腺素（NA）含量在第4周出现显著性降低（P < 0.01）;与地磁场组相比,成年小鼠脑组织5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NA）含量在处理1周时均出现显著性降低（P < 0.05）,血清中5-羟色胺（5-HT）含量在第3周也出现显著性降低（P < 0.01）,甲状腺素（T4）含量在第 3、6、12 周出现显著性降低（P < 0.05）。血常规结果显示,成年和幼年小鼠的白细胞（WBC）在暴露早期第1周和第2周分别出现显著性增多（P < 0.01）,其他参数基本无变化。本研究发现,两个年龄段的小鼠对亚磁场响应的指标不完全一致,仅甲状腺素（T4）在两个年龄段小鼠的体内都出现显著性降低。通过本研究说明,甲状腺素（T4）、5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NA）、多巴胺（DA）和白细胞（WBC）可能是不同年龄段小鼠对亚磁场环境暴露较为敏感的生理指标,可在今后的亚磁场生物效应研究中重点关注。     

不同流速和饵料密度下食蚊鱼与唐鱼的摄食率比较

研究通过比较外来入侵物种食蚊鱼（Gambusia affinis）和土著濒危物种唐鱼（Tanichthys albonubes）在不同流速和饵料密度条件下的摄食特点来评价两者对溪流环境的适应能力。实验共设5 个流速梯度（0 bl/s,1.5 bl/s,3.5 bl/s,5.5 bl/s,7.5 bl/s）和3个饵料密度梯度（500 ind/L, 1 500 ind/L, 3 000 ind/L）。摄食一定时间后通过计数鱼体消化管内的丰年虫无节幼体个数来表示鱼的摄食率。实验结果表明,在不同流速和不同饵料密度下,唐鱼摄食率的变化幅度都小于食蚊鱼。食蚊鱼的摄食率显著受到水流速度和饵料密度以及两者交互作用的影响,表现为随着水流速度的上升而极显著地降低,而随着饵料密度的上升而极显著地升高。而唐鱼摄食率则随水流速度的增大而显著下降,但其摄食率不受饵料密度及其与水流两者交互作用的影响。     

化肥磷酸二铵对花背蟾蜍蝌蚪发育的影响

目的为了探究化肥磷酸二铵对两栖类幼体发育的影响。方法以花背蟾蜍(Bufo raddei)蝌蚪为研究对象,用化肥磷酸二铵(DAP)进行染毒培育,并依据Gosner(1960)分期标准,将蝌蚪分为G0实验组和G20实验组,分别暴露于浓度为0.045g/L、0.135g/L、0.225g/L的DAP水溶液中,直至蝌蚪完成变态发育,并对孵化率、死亡率、畸形率以及发育时程等参数进行统计分析。结果随着化肥DAP浓度的升高,孵化率逐渐下降,但对照组与各侵染组之间均无显著性差异;侵染组蝌蚪死亡率均高于对照组,均呈极显著性差异(P0.01),且G20侵染组明显高于G0侵染组;蝌蚪畸形可分为四大类,侵染组蝌蚪畸形率均高于对照组,且均呈极显著性差异(P0.01),畸形率随着DAP浓度的升高而增加;完成变态发育所用时程,侵染组明显长于对照组。结论化肥磷酸二铵对蝌蚪发育具有显著影响及损伤。     

低浓度84消毒液对小鼠生殖生理的影响

目的：观察低浓度84消毒液对小鼠生殖生理的影响。方法将72只KM小鼠随机分为3组,即：0.5％84消毒液组（ A组）、2.0％84消毒液组（ B组）和生理盐水组（ C组）,每组24只,雌雄各半,各组每天1次灌胃给予相应药物,连续9周。阴道涂片镜检观察雌性小鼠的动情周期。9周后,观察雄性小鼠的精子畸形率;并用ELISA法测定小鼠血清中性激素的水平;并取睾丸（或卵巢）、心、肝、肺、肾进行组织学观察。结果与C组比较,A和B组小鼠体重差异无显著性（ P ＞0.05）;血清性激素水平差异无显著性（ P ＞0.05）;雌性小鼠动情周期差异无显著性（P ＞0.05）;组织学观察未见异常;与C组比较,A组小鼠精子畸形率差异无显著性（P ＞0.05）,B组小鼠精子畸形率显著增高（ P ＝0.041＜0.05）。结论0.5％84消毒液对小鼠的生殖生理无明显影响,在实际使用中要严格控制消毒液浓度。     

母代高脂饮食诱导子代在小鼠生命早期出现糖脂代谢紊乱且具有雄性易感性

目的：探讨孕期和哺乳期的高脂饮食能否导致子代在生命早期出现糖脂代谢紊乱。方法成年雌性C57BL/6J小鼠与正常饮食雄性小鼠进行交配,孕鼠随机分为高脂饮食组和正常饮食组,在孕期和哺乳期喂养高脂饲料或正常饲料,至交配后第一代鼠断乳时（3周龄）观察其糖脂代谢相关性指标以及肝脏病理表现。结果较正常饮食组子鼠相比,高脂饮食子鼠出生体重更低（ P＜0.05）。在断乳时,高脂饮食组雄性子鼠体重较重（ P ＝0.038）,腹腔糖耐量实验30 min和60 min血糖明显升高（P值分别为＜0.001和＜0.01）,糖耐量曲线下面积较大（P＝0.0016）,HOMA-IR值较大（P＜0.05）,雌性子鼠腹腔糖耐量实验在30 min血糖高于正常组（P＜0.01）,而糖耐量曲线下面积和HOMA-IR值在两组之间无明显统计学意义。雄性和雌性子代小鼠空腹胆固醇水平高脂饮食组均高于正常饮食组（ P值分别为＜0.0001和0.0004）,而两组雄性和雌性子代小鼠空腹胰岛素和甘油三酯水平差异均无显著性（ P均＞0.05）。另外,在断乳时高脂饮食子鼠出现肝脏脂肪变性,雌性和雄性子鼠无明显差异。结论母鼠孕期和哺乳期高脂饮食能够诱导子代在生命早期就能出现糖脂代谢紊乱并且雄性子鼠更易出现肥胖、糖耐量异常、胰岛素抵抗。     

雌二醇和孕酮对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的研究雌二醇（E2）、孕酮（P4）对昆明小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法小鼠经注射孕马血清促性腺激素（PMSG）后48 h,摘取卵巢获得未成熟卵母细胞,分别在单独含不同浓度的E2或P4的成熟液中,或在同时含有不同浓度E2和P4的成熟液中,进行体外成熟,并对经过E2和P4处理成熟的卵母细胞进行体外受精。结果经15-16 h的成熟培养,各E2处理组的卵母细胞第一极体排出率虽然均略高于对照组,但它们之间无显著差异;各组卵母细胞体外受精48 h后,1000 ng/mL E2处理组的卵裂率显著低于其他各处理组和对照组,但各组的囊胚率之间无显著差异。各P4处理组的极体率和卵裂率,与对照组相比无显著差异,但是各处理组的囊胚率均极显著低于与对照组;两种激素协同处理组中[1000 ng/mL E2＋1000 ng/mL P4]组的极体率显著高于其他各处理组;而与对照组的极体率差异不显著。结论P4对小鼠卵母细胞的后期发育能力有一定的抑制作用,而E2却对小鼠卵母细胞的成熟及其发育潜力无明显作用。     

纳米ZnO对斑马鱼肝脏生理生化指标的影响

研究了纳米ZnO对斑马鱼肝脏生理生化指标的影响。当斑马鱼暴露在ZnO纳米颗粒浓度为2.8 mg/L、5.6mg/L、11.2 mg/L、22.4 mg/L和44.8 mg/L时,分别测定了6 h、12 h、24 h、48 h和72 h时斑马鱼肝组织中的GSH、MDA、Na＋K＋-ATPase的含量和24 h ROS的变化,结果显示：与对照组相比,处理组中斑马鱼肝组织中GSH的含量显著减少（P〈0.05）,MDA含量随处理浓度的升高却显著增加（P〈0.05）,Na＋K＋-ATPase活性随暴露时间先显著降低后显著升高（P〈0.05）,24 h ROS含量高于对照组（P〈0.05）,说明斑马鱼肝组织的生理活动受到ZnO纳米颗粒的影响,且有时间和浓度依赖性。     

白藜芦醇对去卵巢大鼠抗氧化能力的影响

目的：探讨白藜芦醇（RES）对去卵巢大鼠抗氧化能力影响。方法：48只SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、去卵巢组、己烯雌酚（DES,0.03mg/kg）、RES 5、15、45mg/kg组,处理90d,观察各组大鼠血清总超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）在实验中期和末期的变化。结果：实验45d和90d,白藜芦醇各组的总SOD活力（分别为210.41±5.78、200.98±12.25、211.84±9.47和179.32±4.86、182.02±8.66、182.08±8.81NU/mL）高于模型组（分别为178.84±10.41、164.60±9.64NU/mL）,差异有统计学意义（P＜0.05）,但均低于假手术组（分别为231.30±12.43、227.96±6.22NU/mL）（P＜0.05）。血清MDA含量（分别为2.86±0.55、2.76±0.34、2.64±0.67和3.81±0.45、3.60±0.66、3.27±0.41nmol/mL）则都显著低于模型组（分别为4.11±0.66、4.72±0.73nmol/mL）（P＜0.05）,而与假手术组无统计学差异（分别为2.70±0.64、3.43±0.35nmol/mL）（P＞0.05）。各组SOD和MDA实验45d与90d前后比较,变化均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：白藜芦醇可增加去卵巢后大鼠血清中SOD活力,减少MDA浓度。     

来曲唑对暗纹东方鲀性腺分化及相关基因表达的影响

为了解雌激素在鱼类雌性性别分化中的作用,在克隆暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)性腺CYP19A和DMRT1基因部分序列基础上,采用不同浓度芳香化酶抑制剂来曲唑(letrozole,LE)(0、25、125、625、3 125μg/L)处理暗纹东方鲀初孵仔鱼,每个平行组各20尾鱼,观察CYP19A和DMRT1基因的表达情况和组织学变化。RT-PCR结果显示:25μg/L LE实验组中样本CYP19A和DMRT1表达水平与对照组相比无显著差异;LE 125μg/L以上各浓度组中约30%的样本同时表达CYP19A和DMRT1基因,且随着LE浓度增加,CYP19A表达量下调,而DMRT1表达量上调;组织学研究表明,125μg/L LE以上各实验组样本中可见由雌性向雄性转变的间性体性腺。孵化后56 d,125μg/L LE实验组样本中约有20%显示雌性;625μg/L LE实验组样本显示表型雄性和间性体,未见雌性;最高浓度3 125μg/L LE组中所有样本均显示表型雄性,CYP19A和DMRT1基因表达与对照组雄性相同。上述结果说明,抑制内源雌激素合成可使暗纹东方鲀仔稚鱼CYP19A基因表达下调,同时DMRT1基因表达上调,并发生雄性化性逆转。     

利用食蚊鱼目标基因转录水平评价东莞寒溪河雌/雄激素物质污染现状

应用食蚊鱼(Gambusia affinis)的卵黄蛋白原(VTGa)基因和雌/雄激素受体(ERa/ARa)基因转录水平为指标, 评价广东东莞寒溪河受雌/雄激素物质污染的现状。结果显示, 与对照点从化流溪河(LX)相比, 寒溪河松山湖(SM)、杨屋村(YW)、横沥镇(HL)、樟村污水处理厂上游(ZU)和樟村污水处理厂下游(ZC)各采样点雄性成年食蚊鱼肝脏中的VTG转录水平都具有显著或极显著水平的升高(p0.05和p0.001), 分别为7.67、169.43、148.69、152.01和98.12倍; 而较之对照点, 雄鱼臀鳍的雌激素受体ER转录水平仅HL位点有显著性升高(p0.05), 其余位点则不明显(p0.05)。此外, 寒溪河SM、YW、HL、ZU和ZC各采样点雌鱼臀鳍雄激素受体AR转录水平分别是对照点从化流溪河(LX)的1.21、0.82、0.34、0.41和0.89倍, 但是只有HL和ZU点有显著性减小(p0.05), 其余各点的变化差异不显著(p0.05)。研究结果显示, 生活在东莞寒溪河中的食蚊鱼受雌/雄激素物质干扰明显, 普遍出现显著的雌激素效应, 表明寒溪河水体受雌激素物质污染更严重。此外证明, 鱼类肝脏VTGa基因相对于臀鳍ERa/ARa基因转录水平更适合作为监测水体环境雌/雄激素物质的生物标志物。       

兴国红鲤ER基因克隆表达及EE2暴露对肝中ER表达的影响

为评估环境内分泌干扰物对鱼类的影响,研究克隆了兴国红鲤雌激素受体（Estrogen receptor,ER）4种亚型ERα、ERβ、ERβ1、ERβ2的全长cDNA序列,氨基酸序列比对发现兴国红鲤ERs分别与3种鲤科鱼类相应亚型具有较高的同源性。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测结果表明,4种ER亚型mRNA在雌雄成体组织中呈现差异表达,雌性个体中,肝、卵巢和肠中4种ERs的表达量均较高;在雄性个体中,ERα和ERβ主要在肝中表达,ERβ1、ERβ2分别在肠和精巢中的表达量最高。将150日龄的兴国红鲤幼鱼分别暴露在0.01、0.1和1 nmol/L的17α-乙炔基雌二醇（EE2）中4周,检测了雌性幼鱼肝中4种ER基因的表达变化情况。在EE2中暴露1-2周后,兴国红鲤雌性幼鱼肝中ERα基因的表达水平有极显著的提升;各浓度EE2能持续显著促进其肝中ERβ的表达;在1-2周内各浓度EE2对ERβ1表达有所抑制;第1周EE2能够抑制ERβ2基因mRNA的表达,并在0.01 nmol/L时抑制作用达到了显著的水平。上述研究结果表明,EE2暴露能诱导或抑制兴国红鲤雌性幼鱼肝中ER亚型的表达,相对于ERβ、ERβ1和ERβ2、ERα可作为EE2短期（1-2周）敏感性生物学标记。     

褪黑素抑制小鼠卵母细胞的体外成熟

目的:探讨褪黑素(MT)对小鼠卵母细胞的体外成熟的影响.方法:通过卵母细胞自发、次黄嘌呤(HX)阻滞和激素诱导成熟三种体外培养模型研究了褪黑素(MT)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响.结果:①0.1 g/L、0.02g/L、0.004 g/L及0.0008 g/L浓度的MT均能显著抑制小鼠卵丘卵母细胞复合体(CEOs)自发成熟过程中第一极体(PB1)的释放(P＜0.01);②动力曲线分析表明,MT对自发成熟的CEOs的GVBD和PB1有显著的推后作用,与对照组相比,处理组的GVBD和PB1分别被推后8～10 h和3～4 h;③0.1 g/L和0.02 g/L两有效浓度的MT还能显著抑制促性腺激素(FSH)诱导的HX阻滞的CEOsGVBD的发生(P＜0.05),对PB1的排出虽有一定的抑制作用,但没有统计学意义;④MT和次黄嘌呤(HX)对CEOs的自发成熟有协同抑制作用(P＜0.01),但在裸卵(DO)自发成熟的阻滞中没有协同效应.结论:MT是调节哺乳动物卵母细胞成熟的重要激素之一,其作用机制可能是通过卵丘细胞实现的.