铁皮石斛花总RNA提取方法的比较研究

为筛选铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)花总RNA提取方法,对8种提取方法进行了比较研究,包括改良CTAB-LiCl法(M1)、改良CTAB-异丙醇法(M2)、改良SDS-LiCl法(M3)、改良SDS-异丙醇法(M4)、多糖多酚植物RNA提取试剂盒法(M5)、柱式植物RNAout 2.0试剂盒法(M6)、RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒法(M7)和Biospin多糖多酚植物总RNA提取试剂盒法(M8)。结果表明,以M4和M5提取的总RNA带型清晰,完整性好,A260 nm/A280 nm为1.8～2.0,A260 nm/A230 nm大于2.0,RNA产率分别为(159.45±1.45)和(170.84±3.53)μg/g。利用M4、M5提取霍山石斛、金钗石斛、鼓槌石斛和美花石斛花的总RNA,样品的完整性、浓度和纯度均符合质量要求。以M4、M5提取的铁皮石斛总RNA为模板,扩增Actin基因片段,扩增产物大小与预期一致且条带单一。这说明M4、M5方法操作简便,结果重复性好,能够较好地提取石斛属植物花的总RNA。     

顽拗植物澳洲坚果成熟叶片DNA提取方法比较

目的:针对澳洲坚果成熟叶片中富含多糖、多酚等杂质的特点,建立澳洲坚果成熟叶片中提取高质量 DNA 的方法.方法:采用改良CTAB法和改良SDS法提取澳洲坚果样品的总DNA,并对产物进行紫外、电泳及PCR扩增检测.结果:改良CrAB法的平均产率为13.6μg/g,略低于改良SDS法18.5μg/g,但改良CTAB法可有效去除多糖等杂质,获得的基因组DNA质量高.OD260/OD280均在1.7～1.9之间.进行ISSR扩增可获得清晰、多态性好的条带.结论:改良CrAB法较之改良SDS法更适合于从澳洲坚果成熟叶片中提取高质量DNA.     

魔芋及魔芋多糖

魔芋是天南星科魔芋属(Amorphophallus)植物的泛称,种类很多,主要产于东半球热带、亚热带。魔芋属中的一些种类块茎富含人类需要的魔芋多糖(KGM),在食品、化工、医药等领域,用途广泛。中国魔芋资源丰富,含魔芋多糖多的种类主要有花魔芋(A.rivieri)和白魔芋(A.albus)两种,常年产魔芋精粉(主要含魔芋多糖)约7000吨,四川省的产量占50％以上。     

重楼属植物DNA提取的方法研究

为了获得重楼属植物高质量的DNA,以研磨、冻融和细胞溶胀破膜的原理设计了一种DNA提取的方法并与CTAB法和高盐法比较。结果显示该方法提取的重楼属植物DNA纯度（A260/A280=1.792-1.852;A260/A230=2.052-2.267）,产率（6.12-12.84mg/g）较其他两种方法高,降解少,节省药品。所提出的DNA能用于RAPD分析和ITS测序。     

落羽杉属树木基因组总DNA的提取及SRAP反应体系的优化

本文针对落羽杉属植物组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,对其基因组DNA提取方法进行研究,比较了SDS法、CTAB法提取落羽杉属植物基因组DNA的效果,结果表明:CTAB法提取效果较佳.在此基础上,利用正交设计法,对SRAP反应体系中的各个主要影响因子Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶进行了优化筛选,确立了适合落羽杉属植物SRAP-PCR反应的最佳体系,即10 μL体系中含有1 μL10×PCR buffer,Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP 100 μmol/L,引物0.3 μmol/L,Taq DNA聚合酶0.5 U和50 ng模板DNA.利用该优化体系,通过48对SRAP引物组合对2个落羽杉属植物(落羽杉和墨杉)及4个杂交后代进行SRAP扩增,结果发现,SRAP引物及优化后的反应体系能够有效地用于落羽杉属植物种质资源鉴定及遗传多样性分析等研究.     

提取蕨类植物蜈蚣草总RNA的一种有效方法

介绍了一种提取蕨类植物蜈蚣草(Pteris vittata L.)总RNA的有效方法.由于蜈蚣草富含多酚和多糖,用普通的RNA提取方法很难获得高质量的RNA.本方法通过优化提取缓冲液的条件来抑制多酚氧化,并利用RNA与多酚、多糖在不同浓度的2-丁氧乙醇中溶解度不同的特性来去除多酚和多糖.本方法简便、快速,所提取的RNA质量较高,可直接用于cDNA合成、cDNA文库的构建以及RACE等分子生物学操作.     

花魔芋中三种功能性成分联产分离工艺

采用超声辅助联产工艺法对魔芋活性成分的提取及分离进行了研究。用正交优化试验考察了提取神经酰胺与生物碱的影响因素,确定了最佳提取工艺条件:提取温度60℃、乙醇浓度70%、提取时间20 min、料液比1∶40。在此条件下得到魔芋中神经酰胺提取量为1.57 mg/g,生物碱提取量为0.41 mg/g。采用柱层析、重结晶等技术纯化后神经酰胺和生物碱的纯度分别为80.77%和71.68%;采用乙醇沉淀法从魔芋残渣中提取KGM类化合物,提取量为0.51 g/g,纯化后的纯度为93.86%。进一步对神经酰胺的保湿性能进行研究,结果显示其保湿效果强于橄榄油和甘油。本研究对提高魔芋的综合利用、降低生产成本、增加附加经济值以及提高经济效益具有重要意义。     

高粱基因组DNA提取方法的比较与优化

目的：比较CTAB法和高盐低pH法提取高粱总DNA效果,进一步优化建立高盐低pH值法提取高粱基因组DNA的方法。方法：采用CTAB法、高盐低pH法对高粱叶片DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率三方面进行比较研究。通过提取缓冲液中SDS浓度的优化,不同组织器官的DNA提取纯化以及不同沉淀方法的优化,比较不同方法对高粱基因组DNA提取的影响。结果：高盐低pH法DNA平均得率为689.36μg/g,略小于CTAB法的718.26μg/g,但其A260/A230平均值为1.854,比CTAB法的2.164更接近标准要求。高盐低pH法提取高粱基因组DNA的适宜条件确定如下：提取液中含有2%SDS、2%PVP、2%β-巯基乙醇;水浴时间30min;沉淀方法采用0.7体积异丙醇室温沉淀的沉淀方法。结论：综合考虑高盐低pH法是提取高粱基因组DNA的最佳方法。     

沙棘叶多酚提取物抗氧化及体外降血糖活性研究

本实验以沙棘叶为原料,通过溶剂提取制得提取物A,将提取物A经大孔树脂纯化制得沙棘叶多酚提取物B,在研究提取物A及提取物B的抗氧化能力和自由基清除能力的基础上,探究了沙棘叶多酚提取物B对猪胰α-淀粉酶的抑制类型,并通过DNS法来评价提取物B的体外降糖能力。实验结果表明:提取物A、提取物B多酚含量分别为18.59%和30.25%;以VC当量计,总抗氧化能力分别为6.15 mgVC/g提取物A、9.79 mgVC/g提取物B,对应的DPPH自由基清除率IC_(50)值分别为20.19μg提取物A/mL、8.6μg提取物B/mL;当猪胰α-淀粉酶浓度为0.5 mg/mL以下,反应时间在1 min以内时,酶反应体系具有良好的线性趋势,在此条件下,沙棘叶多酚提取物B对猪胰α-淀粉酶具有一定的抑制作用,其半抑制浓度为0.25 mg/mL,属于可逆反竞争抑制。本研究可为沙棘叶的开发和利用提供数据支撑。     

一种从苏铁叶片中有效提取RNA的方法

由于苏铁（ Cycas revoluta） 叶片中含有大量的多糖多酚等次生代谢物, 常规RNA 提取方法很难获得优质的RNA。在常规的CTAB 法中加入了硼砂和β- 巯基乙醇来消除多酚和多糖的干扰, 得到了一个从苏铁叶片中有效提取RNA 的方法, 每克鲜叶片可获得约930μg RNA。A260 280 和A260 230 的纳米波长的吸收比值都约为2 , 表明RNA 的质量较好。获得的RNA 可用于Northern blot 和反转录PCR 等分析, 也说明RNA 的质量比较好。此外, 改进的提取方法也适合于含有次生代谢产物的其它植物, 同样可以获得优质RNA。     

寻找黑脸琵鹭觅食地

黑脸琵鹭的觅食地在哪里?民以食为天,鸟为食而亡。弄清黑脸琵鹭的食物来源,对保护它们至关重要。