鸡Zong菌的液体发酵与毒理研究

鸡Ｚｏｎｇ菌Ｔｅｒｍｉｔｏｍｙｃｅｓａｌｂｕｍｉｎｏｓｕｓ（Ｂｅｒｋ）．Ｈｅｉｍ采自四川西昌野生子实体,经分离,纯化,鉴定、保存于ＰＤＡ琼脂斜面培养基。报道鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体深层发酵在５００Ｌ发酵罐中,温度２８～３０℃,ｐＨ６．０～７．０接种量１％～１．５％,通气量为１：１～１：１．２（体积比）,可在３０ｈ获得鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体２４．５ｇ／Ｌ（干重）还对鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体的毒性进行了探讨,选用Ａｍ     

贵州白柄鸡Zong菌菌丝体培养条件研究

本文报道筛选了优良的固体培养基配方,对不同ｐＨ值、温度、碳源、氮源条件下白柄鸡Ｚｏｎｇ菌菌丝体的生长进行测定。结果表明：白柄鸡Ｚｏｎｇ菌以碳源葡萄糖、氮源花生 、ＰＨ４．６、温度３０℃淡最适生长条件。目前,白柄鸡Ｚｏｎｇ菌在实验室条件下生长良好,这对人工栽培和利用白柄鸡Ｚｏｎｇ菌具有实际经济意义。     

粗柄鸡Zong菌菌丝株培养和无性繁殖过程研究初报

鸡Ｚｏｎｇ属菌物是一类具有商业前景的食物蕈菌,对Ｔｅｒｍｉｔｏｍｙｃｅｓ,ａｌｂｕｍｉｏｎｓｕｓ（Ｂｅｒｋ）Ｈｅｉｍ进行了广泛研究,其它种的研究仅见于Ｔ．ｆｕｌｇｉｎｏｓｕｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｈｅｉｍ。笔者首次对Ｔ．ｒｏｂｕｓｔｕｓ（Ｂｅｅｌｓ）Ｈｅｉｍ粗柄鸡Ｚｏｎｇ菌进行了纯培养研究,其菌丝体生长所需的碳源以麦芽糖为佳,葡萄糖,蔗糖次之;氮源以蛋白胨,酶粉较好,天然材料的热水提取物,如松针,蚁巢辅圃     

鸡菌的液体培养及其多糖物质研究

采用不同的液体培养基,探索了鸡堆放(土从)菌(Termitomyces albuminosus)人工培养的最适条件,多糖形成的动态变化,并对鸡(土从)多糖进行了分离、纯化,及其免疫活性测定。结果表明:鸡(土从)菌从碳源玉米淀粉,氮源花生蛋白,生长因子麸皮浸汁,pH4.7,25℃为最适生长条件;Sephadex-G100分离多糖出现两个峰;鸡(土从)多糖作为刺激原对人淋巴细胞转化有促进作用。     

鸡枞菌的液体培养及其多糖物质研究

采用不同的液体培养基,探索了鸡(土从)菌(Termitomyces albuminosus)人工培养的最适条件,多糖形成的动态变化,并对鸡(土从)多糖进行了分离、纯化,及其免疫活性测定。结果表明：鸡(土从)菌从碳源玉米淀粉,氮源花生蛋白,生长因子麸皮浸汁,pH4.7,25℃为最适生长条件;Sephadex—G100分离多糖出现两个峰;鸡(土从)多糖作为刺激原对人淋巴细胞转化有促进作用。     

鸡Zong凝集素的分离纯化与性质研究

鸡Ｚｏｎｇ菌丝体浸取液依次经硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ离子交换层析和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００分子筛层析３个主要步骤纯化得到一种凝集素（ＴＡＬ）。纯化的ＴＡＬ在聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示一条蛋白质着色带。ＴＡＬ的分子量为８９．４ｋＤ,亚基分子量为３８ｋＤ和５１ｋＤ,提示ＴＡＬ分子由两个不同亚基组成。ＴＡＬ具有供血动物种属专一性,使Ｗｉｓｔａｒ大鼠红细胞凝集所需ＴＡＬ最     

鸡枞菌粉不同组分的体外抗氧化活性研究

目的:研究鸡枞(Termitomyces albuminosus)菌粉不同组分的体外抗氧化活性.方法:通过分离纯化,鸡枞菌粉中皂甙和多糖被富集于两个不同的组分.以Vc,没食子酸和TSHQ为对照,测定不同组分的还原力、对二苯代苦味酰肼自由基(DPPH)和超氧阴离子自由基O-2的清除能力,及其对亚油酸过氧化的抑制作用.结果:鸡枞菌粉不同组分均具有一定的抗氧化活性.结论:鸡枞具有较好的抗氧化活性,为开发鸡枞产品提供了理论依据.     

合肥地区鸡沙门菌带菌情况调查及其血清型与基因型分析

目的了解合肥地区临床健康鸡沙门菌的携带率及其分离菌株的血清型与基因型的分布情况。方法采集父母代鸡和商品肉鸡肛拭样品500份,利用常规法和PCR技术进行沙门菌的分离鉴定,并用凝集试验和ER IC-PCR技术确定分离菌株的血清型与基因型。结果合肥地区临床健康鸡沙门菌的携带率为4.2%(21/500),21株分离菌分属5个血清型,鸡-雏沙门菌14株(66.67%)、纽兰沙门菌3株(14.29%)、明斯特沙门菌2株(9.52%)、茨昂威沙门菌和圣保罗沙门菌各1株(4.76%),分离菌株的基因型聚类分为5个群7个基因型,相同血清型且来源相同的沙门菌基因型一致。结论鸡-雏沙门菌是合肥地区临床健康鸡携带沙门菌的优势血清型,基因型与相同血清型的来源有关。     

抗鸡白痢益生菌株的筛选

利用从健康蛋鸡和肉鸡肠道内分离的菌株以及本实验室保存菌,在体外分别与鸡白痢沙门菌强毒株作用48h后,以涂片染色镜检法和菌落计数法筛选出对鸡白痢沙门菌有抑制作用的5株细菌,即鸡粪肠球菌、鸡非致病性大肠埃希菌、环状芽胞杆菌、酵母菌和乳酸菌,抑制率分别为97.8%、99％、99.9％、98.2％和78％。     

野生鸡油菌子实体可培养微生物多样性及其功能分析

采用多种培养基对采自贵州省贵阳市3个样地的鸡油菌Cantharellus cibarius子实体内细菌和真菌进行分离、培养、鉴定和多样性分析.利用FAPROTAX和FUNGuild数据库分别对其功能类群进行注释,从而探究微生物群对鸡油菌生长发育的影响.结果 表明,鸡油菌子实体内共分离获得细菌49株,分属于2门、4纲、6...     

北京鸡传染性鼻炎病原菌分离及鉴定

北京A公司病鸡,根据其临床症状的观察和对病鸡眶下窦渗出物分离菌的形态、培养特性和生化反应,血清学特片和致病力及交叉免疫试验,表明病鸡为传染鼻炎,其病原菌是page A型副鸡嗜血杆菌(Hamophilious paragallinarum)。     

天门冬多糖对人工感染鸡传染性支气管炎的治疗试验

旨在评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的临床治疗效果,为鸡传染性支气管炎临床治疗提供依据。以复方天门冬多糖注射液临床给药剂量筛选试验为基础,分别设置高剂量组、中剂量组、低剂量组、药物对照组、阳性对照组及空白对照组,运用t检验和方差分析法对攻毒前后试验动物的相对体质量及试验结束后免疫器官指数进行统计分析,通过比较各组数据的显著性差异来评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的治疗效果。结果显示,复方天门冬多糖注射液能提高发病鸡的相对增量率,并促进发病鸡的生长发育。说明,复方天门冬多糖注射液对患病鸡的临床治疗效果显著,在实际生产中可以推广应用。     

鸭源鸡杆菌的分离鉴定及其全基因组序列分析

【背景】鸭源鸡杆菌作为一种条件致病菌能引起家禽卵巢炎、输卵管炎和腹膜炎等疾病,严重威胁养殖业的发展。【目的】四川某养鸡场送检了一批疑似感染鸭源鸡杆菌的病死鸡,为探究其感染机制与防治方法,对该菌进行分离鉴定及全基因组测序分析。【方法】从病料中分离并纯化细菌,再依次进行生化试验、16S rRNA基因序列分析和药敏试验,同时通过全基因组测序对其进行物种分型与毒力、耐药等基因功能注释及遗传进化分析。【结果】该分离菌被鉴定为鸭源鸡杆菌,菌株命名为TS0001,药敏试验显示其仅对硝基呋喃类和少数β-内酰胺类药物敏感,对部分β-内酰胺类、氯霉素、部分氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类和磺胺类药物具有耐药性。全基因组序列长度为2 626 722 bp,蛋白质编码基因功能注释显示其有较强的自我加工修饰能力,全基因组注释到83个与毒力因子和耐药性相关的基因,包含4个前噬菌体区域。序列类型分析结果显示,该菌株为ST69型,而且管家基因联合建树表明其与墨西哥普通家鸡分离株7990一致性最高。【结论】本研究为鸭源鸡杆菌的感染机制与防治研究提供了参考,丰富了后续研究的分子生物学背景。     

鸡菌的液体发酵与毒理研究

鸡菌Termitomycesalbuminosus（Berk）．Heim采自四川西昌野生子实体,经分离、纯化、鉴定、保存于PDA琼脂斜面培养基。报道鸡菌菌丝体深层发酵在500L发酵罐中,温度28～30℃,pH6.0～7．0,接种量1％～1．5％,通气量1：1～1：1．2（体积比）,可在30h获得鸡菌菌丝体24．5g/L（干重）。还对鸡菌菌丝体的毒性进行了探讨,选用Ames试验（TA97,TA98,TA100,TA1024个标准菌株）、小鼠骨髓微核试验,小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变分析,小鼠精子畸形试验,试验结果为阴性。说明鸡菌菌丝体基本安全,无毒。     

鸡白痢沙门氏菌及其噬菌体vB-SpuS-Spp4的分离鉴定

分离鸡白痢沙门氏菌及其噬菌体,对分离到的噬菌体进行生物学特性分析。采用沙门氏菌选择性培养基进行鸡白痢沙门氏菌的分离,并进行特异性PCR鉴定。以鸡白痢沙门氏菌分离株为宿主菌,采用双层平板法进行噬菌体的分离,通过负染法电镜观察噬菌体的形态和大小,并对噬菌体进行裂解谱、最佳MOI、一步生长曲线、对温度、pH、紫外线以及氯仿的稳定性等生物学特性的研究。分离到噬菌体vB-SpuS-Spp4为长尾噬菌体,对29株鸡白痢沙门氏菌的裂解率为100%;最佳感染复数为0.001时噬菌体的效价可达1.47×10~9 PFU/mL。该噬菌体潜伏期为15min,暴发期为45min,暴发量为127;vB-SpuS-Spp4温度耐受性较强,在pH2～13环境中仍有活性。噬菌体vB-SpuS-Spp4对紫外照射不敏感,对氯仿不敏感。噬菌体vB-SpuS-Spp4作为一株烈性噬菌体,对鸡白痢沙门氏菌具有广泛的裂解作用,为临床鸡白痢的噬菌体控制奠定了基础。     

鸡白痢沙门菌ipaJ基因的克隆与鉴定

摘要：【目的】从鸡白痢沙门菌C79-13中克隆ipaJ基因,体外表达该蛋白后进行免疫原性分析。【方法】鸡白痢沙门菌C79-13与肠炎沙门菌50041进行抑制差减杂交后获得的片段PEA2、PE31和PE44与猪霍乱沙门菌C500疫苗株pSFD10质粒上ipaJ基因高度同源,拼接后获得了鸡白痢沙门菌完整的ipaJ基因序列。从鸡白痢沙门菌中克隆出ipaJ基因并将其构建到原核表达载体pET-30a(+)上,Western-blot检测体外表达蛋白的免疫原性,同时检测了该基因在鸡白痢沙门菌分离株中的分布。【结果】从鸡白痢沙门菌中克隆了大小为840 bp的ipaJ基因序列,并获得了体外原核表达的大小为37 kDa融合蛋白。该蛋白可与鸡白痢沙门菌阳性血清反应。PCR结果显示该基因广泛存在于鸡白痢沙门菌菌株中。 【结论】本文首次报道和克隆了鸡白痢沙门菌ipaJ基因,并证明了IpaJ蛋白具有免疫原性。     

鸡胴体中沙门菌的定量检测及风险评估

目的通过鸡胴体中沙门菌的定量检测,了解长春市市售鸡胴体中沙门菌的污染状况,为沙门菌的定量检测评估提供依据。方法前增菌:鸡胴体缓冲蛋白胨水淋洗后培养;增菌:TT肉汤和RV肉汤;分离:接种XLT4培养基;鉴定:API20E和沙门多价血清。结果沙门菌全年都有检出,阳性率15%~100%不等。7月份阳性率最高为100%;其次8月份为90%;6月份为80%。冷藏储存条件下鸡胴体样品中沙门菌的检出率及其含菌量均高于冷冻条件下。农贸市场鸡胴体样品中沙门菌的检出率及其含菌量均高于大型超市。要加强市售鸡胴体中各环节中沙门菌污染的监管。结论长春市市售鸡胴体中沙门菌的污染率为64.6%(155/240)。冷藏储存条件下鸡胴体样品中沙门菌的检出率及其含菌量均高于冷冻条件下。农贸市场鸡胴体样品中沙门菌的检出率及其含菌量均高于大型超市。要加强市售鸡胴体中各环节中沙门菌污染的监管。     

四株鸡有益链球菌的分离鉴定

用厌氧菌增菌培养基（ＢＲ）、厌氧菌血琼脂（ＣＤＣ）、选择乳酸杆菌培养基（ＬＢＳ）从鸡直肠内容物中分离出四株革兰氏阳性链球菌,据分离菌的形态、染色和培养特性及生化试验结果,鉴定为牛粪链球菌两株（Ｓｂ１、Ｓｂ２）,尿链球菌两株（Ｓｆ１、Ｓｆ２）。四株菌对雏鸡安全,无致病性和副作用,对头孢三嗪、复方新诺明耐药。     

小鼠巨噬细胞吞噬功能测定方法的改进及应用(英文)

对巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性的体内检测方法进行改进.收集小鼠腹腔巨噬细胞,加入不同浓度甘草多糖、鸡红细胞于37℃共同孵育1 h,在倒置显微镜下观察吞噬状态,统计吞噬百分率和吞噬指数.并将改进后的体外吞噬方法用于检测酵母多糖对小鼠腹腔巨噬细胞形态和吞噬功能的影响.结果表明:改进后的体外吞噬法测定的结果与传统的体内吞噬法比较,两者具有显著的相关性(n=6,P<0.01).酵母多糖对巨噬细胞刺激1 h后,与对照组相比,其吞噬功能显著性增强;巨噬细胞形态上出现被活化的特征.应用改进后的方法研究巨噬细胞吞噬鸡红细胞,不需染色,在模拟生理条件下进行,保持了细胞活性,有简便、成本低以及准确率高的特点,适用于普通实验室的科研和教学.     

益生菌地衣芽孢杆菌治疗鸡腹泻机理初探

目的：探讨益生菌地衣芽孢杆菌饲喂鸡腹泻的治疗效果以及分子机理。方法：从养鸡场土壤中选择性分离芽孢杆菌,通过优 化条件提高产生芽孢的比例;利用芽孢和大米混合后饲喂腹泻鸡,通过克隆测序分析腹泻鸡肠道微生物群落在饲喂前后的差异。 结果：我们分离到一株地衣芽孢杆菌,通过优化条件使产芽孢的比例提高到60 %。利用芽孢饲喂一周后能够有效地治疗鸡腹泻。 分析鸡肠道微生物群落发现：鸡腹泻后其肠道细菌群落的多样性和均匀度降低。造成腹泻鸡肠道主要菌群为动胶杆菌（Zoogloea sp.）;经芽孢饲喂后,主要菌群转变为拟杆菌（Bacteroides sp.）,与健康鸡的肠道微生物主要菌群相似。结论：我们筛选到一株可能 治疗鸡腹泻的芽孢杆菌,通过优化培养条件能够提高其产芽孢比例;腹泻鸡经芽孢饲喂后,其肠道中致病菌被益生菌所代替,形 成正常的肠微生物菌群而恢复健康。