用ANS研究脱落酸提高植物线粒体膜的流动性

用荧光标记法,以ＡＮＳ作荧光探剂研究了脱落酸（ＡＢＡ）对植被线粒体脱流动性的影响。（＋）ＡＢＡ浓度效应实验结果和不同ＰＨ及不同温度条件下的实验结果均表明（＋）ＡＢＡ能降低植物线粒体膜的荧光强度,即（＋）ＡＢＡ能提高线粒体原流动性,且此种效应具有浓度饱和性,并导致线粒体异柠檬酸脱氢酶（ＩＣＨ）活性升高。ＡＢＡ的类似物,ＲＣＡ．７Ａ和ＲＣＡ．７ｂ,也具有提高ＩＣＤＨ活性的效应,抗ＡＢＡ结合蛋白的抗体（     

丙型肝炎病毒C33_c单克隆抗体的研制和鉴定

用丙型肝炎病毒重组蛋白Ｃ３３_ｃ抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,运用杂交瘤技术成功地建立了７株能稳定分泌抗Ｃ３３_ｃ单克隆抗体的杂交瘤细胞１Ｈ６Ｄ２、２Ｇ１Ａ６、３Ａ４Ａ８、３Ｅ３Ｅ７、４Ｇ１２Ｃ１０、４Ａ１０Ｃ２、５Ｆ４Ｂ６．试验结果表明,７株ＭｃＡｂｓ具有良好的ＨＣＶ特异性,间接ＥＬＩＳＡ法测得小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１：１０￣４－１：４×１０￣４;竞争抑制实验和相加指数测定证实７株ＭｃＡｂｓ识别相关的抗原表位;７株ＭｃＡｂｓ中１株为ＩｇＭ（５Ｆ４Ｂ６）,其它６株为ＩｇＧ（２ａ）。     

从线粒体细胞色素b探讨长臀？属三个种分类与进化的关系

本研究测定了长臂Ｂａ属（Ｍｙｓｔａｃｏｌｅｕｃｕｓ Ｇｕｅｎｔｈｅｒ）中的３个种：月斑长臂Ｂａ（Ｍ．ｃｈｉｌｏｐｔｅｒｕｓ Ｆｏｗｌｅｒ）、长臂Ｂａ〔Ｍ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｓ（Ｃｕｖｒｉｅｒ ｅｔ Ｖａｌｅｎｃｉｅｎｎｓｅ）〕和细尾长臂Ｂａ（Ｍ．ｌｅｐｔｕｒｕｓ Ｈｕａｎｇ）共２２个个体的线粒体细胞色素ｂ部分基因片段,其序列为４０８ｂｐ,并选用Ｐａｎｇ Ｐｉ（Ｒｈｏｄｅｕｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｕ     

血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌肌浆网Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase基因转录调节的影响

观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对心肌肌浆网Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ基因（ＳＥＲＣＡ２ａ）转录调节的影响,评价ＤＭＰ８１１对此效应的干预作用．６周龄雄性ＳＤ大鼠随机分为３组,每组６只．组１：生理盐水输注;组２：ＡｎｇⅡ输注＋ＤＭＰ８１１管饲（３ｍｇ·ｄ－１·ｋｇ－１）;组３：ＡｎｇⅡ输注（２００ｎｇ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１．１周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总ＲＮＡ后采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ的方法检测ＳＥＲ－ＣＡ２ａ的转录水平,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡｎｇⅡ１型受体（ＡＴ１）ｍＲＮＡ水平．实验后,组３心重（ＣＷ）、心重／体重（Ｃ／Ｂ）、ＡＴ１受体转录水平均高于组１（分别增加４．７±０．４％,４．９±０．９％和２４．７±３．５％;Ｐ＜０．０１）,而ＳＥＲＣＡ２ａ基因转录水平显著低于组１（降低２０．１±３．０％,Ｐ＜０．０１）,并且ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ水平与ＡＴ１受体ｍＲＮＡ水平呈负相关（ｒ＝－０．７４,Ｐ＜０．０１）．ＡｎｇⅡ导致的上述改变能被ＤＭＰ８１１完全阻断．ＡｎｇⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了ＳＥＲＣＡ２ａ的转录下调     

低氧对高原鼠兔肝细胞内质网和心肌肌浆网Ca^2＋泵的影响

模拟高原低氧条件研究高原鼠兔肝细胞内质网（Ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍ,ＥＲ）和心肌肌浆网（Ｓａｒｃｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍ,ＳＲ）钙泵功能变化。实验设对照组（海拔２３００ｍ）和两个低氧实验组（模拟海拔５０００ｍ和７０００ｍ）。２４ｈ急性低氧时,海拔５０００ｍ组高原鼠兔ＥＲ的Ｃａ２＋泵活性无变化,海拔７０００ｍ组高原鼠兔ＥＲＣａ２＋泵活性下降２９．０２％。７ｄ亚急性低氧时高原鼠兔ＳＲ的Ｃａ２＋泵活性无显著变化。高原鼠兔ＥＲ的Ｃａ２＋泵活性在海拔５０００ｍ组和７０００ｍ组分别升高３２．５０％和３３．３３％。２５ｄ慢性低氧时高原鼠兔ＥＲ,ＳＲ的Ｃａ２＋泵活性均无显著变化．表明：急性低氧对Ｃａ２＋泵功能有抑制作用,低氧７ｄ后抑制缓解,至２５ｄ低氧时趋于恢复。     

大鼠酰胺化酶的信号肽引导的昆虫细胞表达外泌系统

将大鼠酰胺化酶的信号肽及前导肽编码序列引入昆虫核多角体病毒转移表达载体,构建ＰＡＢＣｈＧＲＦ（Ｇｌｙ）、ＰＡＢＣＩＧＦＩ融合基因的昆虫细胞分泌表达质粒ｐＢａｃＰＡＧ２、ｐＢａｃＰＡＩ,并与经修饰的银纹夜蛾核多角体病毒ＢａｃＰＡＫ６线性化ＤＮＡ共转染秋粘虫细胞Ｓｆ２１,通过同源重组、筛选和鉴定,得到它们的重组病毒ＢａｃＰＡＧ、ＢａｃＰＡＩ。将重组病毒感染Ｓｆ２１细胞,ＰＡＢＣｈＧＲＦ（Ｇｌｙ）和ＰＡＢＣＩＧＦＩ均得到有效外泌表达,表达产物通过ＩｇＧＳｅｐｈａｒｏｓｅ柱可获得快速纯化。     

管藻目绿藻叶绿素蛋白复合物特性及比较研究

采用温和的ＰＡＧＥ法从管藻目刺松藻（Ｃｏｄｉｕｍ ｆｒａｇｉｌｅ （Ｓｕｒ．）Ｈａｒｉｏｔ）和假根羽藻（Ｂｒｙｏｐｓｉｓ ｃｏｒｔｉｃｕｌａｎｓ Ｓｅｔｃｈ．）,丝藻目绿藻软丝藻（Ｕｌｏｔｈｒｉｘ ｆｌａｃｃａ （Ｄｉｌｌｗ．）Ｔｈｕｒ．）,及菠菜（Ｓｐｉｎａｃｉａ ｌｏｅｒａｃｅａ Ｍｉｌｌ．）中分别得到１１、１１、７和９种色素蛋白复合物,对复合物的多种特性,包括分子量、Ｃｈｌ ａ／ｂ比值、叶绿     

牡丹冬季到内催花过程中内源激素含量的变化

牡丹品种朱砂垒（Ｐａｅｏｎｉａ ｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ Ａｎｄｒ．ｃｖ．Ｚｈｕｓｈａｌｅｉ）在冬季室内催花过程７种内源激素含量变化不同。玉米素核苷（Ｚ＋ＡＲ）、生长素（ＩＡＡ）和赤霉素（ＧＡ３）的含量在花生长发 处于较高水平;而脱落酸（ＡＢ）、异戊烯基腺苷（ＩＰ＋ＩＰＡ）、二氢玉米素核苷（ＤＨＺ＋ＤＨＺＲ）、赤霉素（ＧＡ４）的含量低于上述３种内源激素。激素平衡方面,ＧＡｓ／ＡＢＡ、ＣＴＫｓ／ＡＢ     

重组RA—538及反义c—myc腺病毒对人胃癌,食管癌和bcl—2高表达细胞系的作用

本课题研究ＲＡ５３８、反义c-ymc重组腺病毒对人胃癌（ＳＧＣ７９０１）、食管癌（Ｅ Ｃ１０９、ＥＣ８７１２）、正常人胚肺２ＢＳ（２ＢＳ）及ｂｃｌ－２高表达细胞第的体仙外生物学作用及其分子机制。结果显示Ａｄ－ＲＡ５３８及Ａｄ－ＡＳｃ－ｍｙｃ对ＳＧＣ７９０１细胞体内外均具有明显的生长抑制及凋亡诱导作用,并能抑制其ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２、ｃｙｃｌｉｎＤ１基因的表达及刺激ｂａｘ基因的表达。对ＥＣ１０９、ＥＣ８     

柯萨基B_3病毒对外周血单个核白细胞介素－2受体表达的影响

本文研究了柯萨基Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３）对正常人ＰＢＭＣ白细胞介素一２受体（ｍＩＬ一２Ｒ）表达的影响,结果实验组为８９．８３±７．０３％,对照组为５２．５±６．１３％,表明ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３能作用于ＰＢＭＣ,使其ｍＩＬ一２Ｒ表达明显减少（Ｐ＜０．０１）,由此影响ＩＬ－２发挥正常的生物学功能,如促使Ｔ细胞增殖,ＮＫ细胞活化等,本文认为ｍＩＬ－２表达减少可能是ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ组病毒所致心肌炎患者细胞免疫功能异常的原因之一。     

抗癌胚抗原单链抗体基因在家蚕细胞和幼虫中的表达

将抗癌胚抗原（ＣＥＡ）单链抗体基因插入家蚕杆状病毒转移载体ｐＢａｃＰＡＫＨｉｓ, 与修饰的家蚕核型多角体病毒ＢｍＢａｃＰＡＫＤＮＡ共转染家蚕细胞, 经同源重组得到含有在多角体蛋白基因启动子控制下的抗ＣＥＡＳｃＦｖ 基因的重组病毒ＢｍＢａｃＳｃＦｖ。用重组病毒分别感染家蚕细胞和幼虫, 在两者中均得到了高效表达, 产物分子量为２８ｋＤ, 前者占细胞总蛋白的６ ％ , 后者为０ ．３ ｍｇ／ 蚕。目的基因在家蚕细胞和幼虫中表达产物经Ｎｉ２＋ＩＤＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和柱纯化, 前者纯度可达９０％ 以上, 后者纯度较低; 纯化后的融合蛋白具有ＣＥＡ 结合活力, 其亲和常数分别为５ ．４×１０８／ｍｏｌ·Ｌ－ １ 和２．３ ×１０８／ｍｏｌ·Ｌ－１ , 略低于其亲本单抗Ｅ７Ｂ１０ ２．７ ×１０９／ｍｏｌ·Ｌ－ １ 。     

荧光指示剂法测定植物细胞胞质游离Ca^2＋浓度

利用钙离子荧光指示剂Ｉｎｄｏ－１ ＡＭ 建立了测定植物细胞胞质游离Ｃａ２＋ 浓度的技术。应用此技术测出,ＢＭＳ（ｂｌａｃｋ Ｍｅｘｉｃｏ ｓｗ ｅａｔ）玉米悬浮细胞原生质体静息水平下的胞质游离Ｃａ２＋ 浓度是１２７±５６ ｎｍ ｏｌ·Ｌ－ １;Ｃａ２＋ 螯合剂ＥＧＴＡ 可使胞质游离Ｃａ２＋ 浓度由７８ ｎｍ ｏｌ·Ｌ－ １降至１２．５ ｎｍ ｏｌ·Ｌ－ １,而Ｃａ２＋ 载体Ａ２３１８７ 则可使胞质游离Ｃａ２＋ 浓度升至接近介质Ｃａ２＋ 水平。同时,证明ＡＢＡ 处理可使ＢＭＳ玉米悬浮细胞原生质体Ｃａ２＋ 浓度在１—１．５ 分钟内迅速升高,由７５ ｎｍ ｏｌ·Ｌ－ １升至７９０ ｎｍ ｏｌ·Ｌ－ １     

GABA和孕酮对人及豚鼠精子的体外获能作用

为了探讨γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）是否参与人及豚鼠精子体外获能的调节,将生育男子和豚鼠清子分别悬浮于ＢＷＷ和低Ｃａ＾２＋最小获能培养基（ＬＣａ＾２＋－ＭＣＭ）中,加入ＧＡＢＡ、孕酮（Ｐ４）、ＧＡＢＡＡ受体激动剂及其拮抗剂,在５％ＣＯ２孵箱３８．５℃培养２ｈ。然后用ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ Ａ２３１８７激发精子顶体反应（ＡＲ）和超激活运动（ＨＡＭ）。以精子与金霉素（ＣＴＣ）荧光结合类型、ＡＲ和ＨＡＭ为指标来     

长体茧蜂属中国五新记录种

长体茧蜂属中国五新记录种ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＳＯＦＭＡＣＲＯＣＥＮＴＲＵＳＣＵＲＴＩＳ（ＨＹＭＥＮＯＰＴＥＲＡ：ＢＲＡＣＯＮＩＤＡＥ：ＭＡＣＲＯＣＥＮＴＲＩＮＡＥ）ＦＲＯＭＣＨＩＮＡ￥长体茧蜂属ＭａｃｒｏｃｅｎｔｒｕｓＣｕｒｔｉｓ,１８３３隶于茧蜂科长...     

脱落酸及其类似物对玉米线粒体异柠檬酸脱氢酶活性的影响

用(+)ABA及其两种RCA系列类似物(RCA．7a,RCA．7b)处理从玉米黄化芽提取的离体线粒体,三者均能促进线粒体上异柠檬酸脱氢酶(ICDH)的活性,另外,(+)ABA、RCA．7A及RCA．7b分子都有一个环己烯酮环(cyclohexenonering),差别仅在侧链的不同,这提示,此环己烯酮环是ABA表现此种促进作用所必需的。(+)ABA处理离体线粒体之前,先经抗ABA结合蛋白的抗体(anti-ABBPPAbs)处理,则(+)ABA促进ICDH活性的效应被显著抑制。暗示,线粒体上可能存在具有受体功能的ABA结合位点。     

抗真菌蛋白Rs—AFPs基因在大肠杆菌中的表达

将抗真菌蛋白Ｒｓ－ＡＦＰ１和Ｒｓ－ＡＦＰ２全长ｃＤＮＡ插入表达质粒ｐＥＴ－２２ｂ／ＮｃｏＩ＋ＳａｃＩ位点,构建成融合蛋白表达载体ｐＲＡＦ１和ｐＲＡＦ２．将不含信号肽编码序列的Ｒｓ－ＡＦＰ１和Ｒｓ－ＡＦＰ２ｃＤＮＡ分别插入ｐＥＴ－２２ｂ／Ｎｃｏｌ＋Ｓａｃｌ和ｐＥＴ－２２ｂ／Ｎｄｅｌ＋ＳａｃＩ位点,构建成不含信号肽序列的融合蛋白表达载体ｐＲＡＦ３、ｐＲＡＦ４和非融合蛋白表达载体ｐＲＡＦ５和ｐＲＡＦ６．将构建的上述各种表达载体转化Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１,挑菌落培养,ＩＰＴＧ诱导,使Ｒｓ－ＡＦＰｓ基因得到表达,并用体外抑菌试验检测表达产物的活性,结果表明,各种表达载体的表达产物均具有不同程度的抑菌活性,其中,ｐＲＡＦ３和ｐＲＡＦ４表达产物的抑菌活性较明显．     

柑橘抗寒育种早期鉴定的一种指标

以５个抗寒性不同的柑橘品种或杂交后代：“山金柑”（ＦｏｒｔｕｎｅｌａｈｉｎｄｓｉＳｗｉｎｇｌｅ）、“伏令夏橙”（ＣｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．ｃｖ．Ｖａｌｅｎｃｉａ）、“伏令夏橙”＋“宁波金柑”（Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓｃｖ．Ｖａｌｅｎｃｉａ＋Ｆ．ｃｒａｓｉｆｏｌｉａＳｗｉｎｇ．ｃｖ．Ｍｅｉｗａ）、“Ｐａｇｅ”橘柚（Ｃ．ｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏ×Ｃ．ｇｒａｎｄｉｓＯｓｂ．ｃｖ．Ｐａｇｅ）、“Ｍｕｒｃｏｔ”橘橙（Ｃ．ｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏ×Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．ｃｖ．Ｍｕｒｃｏｔ）为材料,研究了低温锻炼期间柑橘原生质体抗寒性的变化及其田间植株的冬季抗寒性,表明离体原生质体抗寒性与田间植株抗寒性之间有显著的正相关,因而前者可以作为衡量后者的指标。     

利用AABBDDDD八倍体培育小麦一簇毛麦二体附加系的研究

对普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ）－节节麦（Ａｅｇｉｌｏｐｓ ｓｑｕａｒｒｏｓａ）八倍体（２ｎ＝８ｘ＝５６,ＡＡＢＢＤＤＤＤ）与硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ）－簇毛麦９Ｈａｙｎａｌｄｉａ ｖｉｌｌｏｓａ）六倍体（２ｎ＝６ｘ＝４２,ＡＡＢＢＶＶ）杂交后,将所得七倍体杂种（ＡＡＢＢＤＤＶ）进行连续自交,在Ｆ４代中利用Ｃ－分带鉴定出可能的簇毛麦６Ｖ二体附加系９５－７和２Ｖ二体附加     

药物诱导后的人大肠癌细胞的[Ca^2＋]i的变化

采用荧光分光光度计法检测维甲酸（ＲＡ）、１,２５（ＯＨ）２ＶＤ３及佛波酯（ＰＭＡ）诱导ＣＣＬ２２９细胞分化后［Ｃａ２＋］ｉ变化,并观察内质网（ＥＲ）特异的Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ抑制剂Ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ（ＴＧ）、ＩＰ３受体抑制剂Ｈｅｐａｒｉｎ对ＲＡ诱导［Ｃａ２＋］ｉ变化的影响,从而探讨ＲＡ诱导［Ｃａ２＋］ｉ变化与ＥＲ的关系。结果显示：ＲＡ和１,２５（ＯＨ）２ＶＤ３在数秒内引起［Ｃａ２＋］ｉ显著升高。在ＥＧＴＡ和Ｖｅｒａｐａｍｉｌ预处理细胞条件下,ＴＧ不能抑制ＲＡ引起Ｃａ２＋从细胞内钙池中外流,ＲＡ作用后ＴＧ仍能升高［Ｃａ２＋］ｉ。另外,Ｈｅｐａｒｉｎ也不能完全抑制ＲＡ升高［Ｃａ２＋］ｉ。提示ＲＡ诱导大肠癌细胞升高［Ｃａ２＋］ｉ可能通过ＥＲ上ＩＰ３敏感性和非敏感性钙池,亦可能细胞内存在除ＥＲ外对ＲＡ敏感的钙池。     

青藏高原毛茛科3种特有植物核型和进化研究

对青藏高原高山冰缘地区毛茛科３种特有植物的核型进行了分析。它们的核型公式（Ｋ）、染色体相对长度组成（Ｃ．Ｒ．Ｌ．）和核型不对称系数（Ａｓ．Ｋ％）分别为：青藏金莲花Ｔｒｏｌｉｕｓｐｕｍｉｌｕｓｖａｒ．ｔａｎｇｕｔｉｃｕｓ：Ｋ（２ｎ）＝６ｍ＋８ｓｍ（２ＳＡＴ）＋２ｓｔ,Ｃ．Ｒ．Ｌ．＝４Ｌ＋４Ｍ２＋４Ｍ１＋４Ｓ,Ａｓ．Ｋ％＝６３．５７,核型属２Ｂ型;甘青乌头Ａｃｏｎｉｔｕｍｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ为Ｋ（２ｎ）＝６ｍ＋１０ｓｍ,Ｃ．Ｒ．Ｌ．＝４Ｌ＋８Ｍ１＋４Ｓ,Ａｓ．Ｋ％＝６２．５４,２Ｂ型;单花翠雀花Ｄｅｌｐｈｉｎｉｕｍｃａｎｄｅｌａｂｒｕｍｖａｒ．ｍｏｎａｎｔｈｕｍ为Ｋ（２ｎ）＝６ｍ＋８ｓｍ＋２ｓｔ,Ｃ．Ｒ．Ｌ．＝４Ｌ＋４Ｍ２＋４Ｍ１＋６Ｓ,Ａｓ．Ｋ％＝６４．３４,属３Ｂ型。经同相关近缘种核型资料比较,青藏金莲花核型不对称性和进化程度比金莲花Ｔ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ低;甘青乌头的核型不对称性和进化程度在其近缘类群（乌头组Ｓｅｃｔ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ）已报道的种之内最低;单花翠雀花核型不对称性和进化水平比翠雀组（Ｓｅｃｔ．Ｄｅｌｐｈｉｎａｓｔｒｕｍ）已报道的展毛翠雀花Ｄ．ｋａｍａｏｅｎｓｅｖａｒ．ｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ、