长非编码RNA作为ceRNA分子在乳腺癌中的调控机制

乳腺癌是全球女性最常见的异质性恶性肿瘤，分为多种亚型，不同亚型的临床治疗方式和效果不同。多项研究表明长非编码RNA(lncRNA)在乳腺癌的进展中起着关键作用，其中由lncRNA-miRNA-mRNA相互作用形成的ceRNA网络是RNA分子间的一种新调节机制。LncRNA通过该网络广泛参与乳腺癌的增殖、迁移、凋亡等多种生物学过程，可作为诊断和治疗的分子靶点。该文重点阐述了lncRNA介导的ceRNA调控机制，系统总结了lncRNA相关ceRNA网络在调控不同乳腺癌亚型的增殖、迁移和耐药性中的研究进展，旨在为乳腺癌的精准治疗和lncRNA研究提供新见解。     

乳腺癌干细胞调控及靶向治疗研究进展

乳腺癌干细胞是乳腺肿瘤内具有自我更新能力以及多向分化潜能的细胞,乳腺癌的发生﹑发展、转移﹑复发与干细胞的高致瘤性、高侵袭转移性、治疗抵抗能力密切相关。深入研究乳腺癌干细胞相关细胞因子及微环境因素的调控对乳腺癌的临床靶向治疗具有重要指导意义。该文就近年来乳腺癌干细胞调控相关信号转导通路、转录因子、表观遗传调控因子以及微环境因素进行综述,探讨乳腺癌干细胞及其相关信号因子作为乳腺癌治疗靶点的潜在价值,为临床靶向治疗乳腺癌提供新方向。     

加权ceRNA网络筛选乳腺癌生物标志物

竞争性内源RNA (competing endogenous RNA, ceRNA)作为生物标志物和潜在的治疗靶点,在探究肿瘤的发病机制中,表现出了巨大的研究价值和临床应用前景。本文对乳腺癌ceRNA网络进行了系统的分析,首先通过差异分析获得差异miRNA、mRNA和lncRNA,其次利用网络的边聚集系数(edge clustering coefficient,ECC)和皮尔逊相关系数(Pearson correlation coefficient, PCC)计算ceRNA网络节点的权重,最后采用基于随机森林的逐步特征选择(stepwise feature selection based on random forest, SFS-RF)方法筛选出一组可作为乳腺癌生物标志物的RNA——LINC00466、CHL1-AS2和LINC00337,并利用GEO数据库验证了该组RNA对乳腺癌样本的识别情况。此外,通过GO和KEGG通路富集分析探索了该组RNA在乳腺癌中的生物学功能。结果显示:这些RNA作为生物标志物,在识别乳腺癌样本方面具有高精度和高效率等特性,在乳腺肿瘤细胞的增殖及遗传物质的合成等过程中具有重要生物学意义。     

乳腺癌细胞株中MKK4的表达及其对细胞转移的影响和机理研究

目的：观察乳腺癌细胞株中MKK4蛋白的表达水平,研究MKK4蛋白表达对乳腺癌细胞运动能力及EMT标志物的影响,确定MKK4在肿瘤细胞EMT转化及肿瘤转移中的作用,为肿瘤转移机制研究提供一定的基础资料,为肿瘤防治奠定一定的理论基础。方法：通过体外细胞培养技术收集系列乳腺癌细胞株的培养裂解液,利用Westernblot技术检测细胞培养裂解液中MKK4及EMT标志物的表达水平,构建M鼬（4表达水平与细胞转移能力的对应图;采用siRNA技术,干扰MKK4高表达乳腺癌细胞株MKK4的表达,Westernblot技术观察MKK4低表达后,EMT标志物的变化,同时,构建MKK4质粒,转染MKK4低表达乳腺癌细胞株,Westernblot技术观察MKK4高表达后,EMT标志物的变化。并采用MTT法、Transwell、划痕法观察MKK4高表达后细胞增殖、运动、迁移等能力的变化。结果：乳腺癌细胞株中MKK4蛋白的表达水平与乳腺癌细胞运动能力有一定的相关性,并与EMT标志物的表达具有相关性,MKK4蛋白表达越高,细胞运动能力越差。干扰或转染技术影响乳腺癌细胞株中MKK4的表达后,细胞EMT标志物的表达也相应变化,乳腺癌细胞株中MKK4高表达后,其细胞增殖明显抑制,运动迁移能力也相应下降。结论：乳腺癌细胞中MKK4蛋白的表达水平与乳腺癌细胞EMT转化及运动能力有一定的相关性,MKK4蛋白表达越高,细胞运动能力越差。     

乳腺癌细胞株中MKK4 的表达及其对细胞转移的影响和机理研究

目的:观察乳腺癌细胞株中MKK4蛋白的表达水平,研究MKK4蛋白表达对乳腺癌细胞运动能力及EMT标志物的影响,确定MKK4在肿瘤细胞EMT转化及肿瘤转移中的作用,为肿瘤转移机制研究提供一定的基础资料,为肿瘤防治奠定一定的理论基础。方法:通过体外细胞培养技术收集系列乳腺癌细胞株的培养裂解液,利用Western blot技术检测细胞培养裂解液中MKK4及EMT标志物的表达水平,构建MKK4表达水平与细胞转移能力的对应图;采用siRNA技术,干扰MKK4高表达乳腺癌细胞株MKK4的表达,Western blot技术观察MKK4低表达后,EMT标志物的变化,同时,构建MKK4质粒,转染MKK4低表达乳腺癌细胞株,Western blot技术观察MKK4高表达后,EMT标志物的变化。并采用MTT法、Transwell、划痕法观察MKK4高表达后细胞增殖、运动、迁移等能力的变化。结果:乳腺癌细胞株中MKK4蛋白的表达水平与乳腺癌细胞运动能力有一定的相关性,并与EMT标志物的表达具有相关性,MKK4蛋白表达越高,细胞运动能力越差。干扰或转染技术影响乳腺癌细胞株中MKK4的表达后,细胞EMT标志物的表达也相应变化,乳腺癌细胞株中MKK4高表达后,其细胞增殖明显抑制,运动迁移能力也相应下降。结论:乳腺癌细胞中MKK4蛋白的表达水平与乳腺癌细胞EMT转化及运动能力有一定的相关性,MKK4蛋白表达越高,细胞运动能力越差。     

乳腺癌干细胞的研究进展

乳腺癌是女性最常见恶性肿瘤.随着乳腺癌发生、发展研究的不断深入,乳腺癌干细胞日益受到研究者们的重视.乳腺癌干细胞是首次分离出来的实体干细胞,研究表明,它是一群未分化、具有多种分化和自我更新能力的细胞.正常情况下,乳腺干细胞的分化、更新能力受激素及信号转导通路的严格控制,一旦这种机制被破坏或发生异常,干细胞就会异常分化,变成乳腺癌干细胞,并无限生长形成肿瘤.乳腺癌干细胞具有放、化疗抵抗性,高致瘤性及高侵袭转移性,其在乳腺癌的发生、发展及复发、转移过程起到非常重要的作用.因而,要想更好地治疗乳腺癌就需要寻找针对这些干细胞的靶标,从而为临床靶向治疗乳腺癌提供依据.本文对乳腺癌干细胞在乳腺癌研究及治疗中的最新进展进行综述.     

SYK基因与乳腺癌

SYK基因编码蛋白曾被认为是造血细胞特有的信号分子，新近发现其亦具有抑制乳腺癌发生和转移的功能。对SYK基因深入研究，有望使之成为乳腺癌防治中新的分子靶点。     

一种新的LncRNA——linc00324在乳腺癌细胞中的定位和表达分析

本研究旨在探究linc00324在侵袭能力不同的乳腺癌细胞中的表达情况及其作为乳腺癌诊断与预后判断的标志物的可能性。本研究首先通过核质分离得到MDA-MB-231细胞核中和细胞质中RNA,利用荧光定量PCR技术探究linc00324在细胞核和细胞质中的表达情况;其次提取了侵袭能力不同的MCF-7和MDA-MB-231两种细胞中的RNA,逆转录后进行荧光定量PCR,探究linc00324在两种细胞中的表达量。分析结果表明,linc00324主要表达于细胞质中,并且在侵袭能力较强的MDA-MB-231细胞中表达量较低,在侵袭能力较低的MCF-7细胞中表达量较高。本研究结果提示linc00324可能与乳腺癌发展和乳腺癌细胞侵袭转移存在关系,可作为乳腺癌预后判断的潜在标志物。     

AC3-33基因沉默对乳腺癌细胞体外迁移能力的抑制作用

乳腺癌是女性高发恶性肿瘤之一,其发生发展是一个多基因参与的复杂过程。AC3-33是一个可以抑制AP-1活性的分泌蛋白,本研究旨在探讨AC3-33在乳腺癌细胞中的表达及其调控乳腺癌迁移的功能。首先采用定量-PCR检测了AC3-33在ZR-75-30、MDA-MB-231、T-47D和MCF-7 4种乳腺癌细胞中的表达差异;然后构建了3个特异性沉默AC3-33表达的载体,采用双荧光素酶实验、定量-PCR和绿色荧光观察筛选沉默效果最明显的质粒用于后续实验;最后采用Transwell迁移实验检测了过表达或沉默内源性AC3-33对MCF-7细胞迁移的影响。研究表明AC3-33在4种乳腺癌细胞中均高表达;通过双荧光素酶实验、定量-PCR和绿色荧光强度的检测确定si-AC3-33沉默AC3-33表达的效果最佳;迁移实验表明过表达AC3-33可以抑制MCF-7细胞的迁移能力,而特异性沉默内源性AC3-33的表达,MCF-7细胞的迁移能力则会显著增强。本研究证明了AC3-33具有抑制乳腺癌细胞迁移的作用,希望为乳腺癌的防治提供新的防治靶点。     

乳腺癌细胞QSOX1的CRISPR/Cas9基因编辑及其对增殖侵袭的影响研究*

目的:乳腺癌细胞的恶性增殖和易于侵袭转移特性与其对患者的危害直接相关,因此,探究其产生的分子机制,对其有效防治具有重要意义。静息巯基氧化酶-1(QSOX1)是巯基氧化酶家族成员之一,有研究证明其对细胞内蛋白质折叠过程中二硫键形成及细胞外基质的形成发挥重要作用。由于QSOX1在乳腺癌和胰腺癌等多种癌细胞中过表达,将探索QSOX1对乳腺癌细胞过度增殖和侵袭转移方面的可能作用。方法:通过利用CRISPR/Cas9技术构建QSOX1基因敲除和敲入的乳腺癌细胞模型,检测分析QSOX1对乳腺癌细胞MCF-7的分裂增殖、侵袭迁移能力等方面的影响。结果:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了QSOX1基因敲除和敲入的乳腺癌MCF-7细胞株,其与对照野生型组细胞相比,QSOX1基因敲除株的增殖能力显著下降,癌细胞在体外的迁移和侵袭能力受到明显抑制;而QSOX1基因敲入株的增殖能力和体外迁移侵袭能力却明显有提高。结论:初步揭示了QSOX1在癌症发生与发展中的作用,为进一步阐明其作用的分子机制和设计靶向药物奠定了重要基础。