温特曲霉转富马酸为L-苹果酸的初步研究

从大量霉菌中选育到一株具有较高富马酸酶活性的温特曲霉(Aspergilluswentii)A     

温特曲霉转富马酸为L-苹果酸的初步研究*

从大量霉菌中选育到一株具有较高富马酸酶活性的温特曲霉(Aspergillus wentii) A5-61。在摇瓶培养条件下,32℃ 96小时,产L-苹果酸达10.49g/100ml,对富马酸的转化率达90.80%。利用菌体细胞,进行酶转化试验,结果表明：1.6g湿菌体接入25ml含富马酸10.0%（用NaOH中和至pH7.0）的转化液中,35℃16～24小时,连续转化三次,分别产生L—苹果酸9.61g/100ml、9.73g/100ml、6.93g/100ml。对菌体整体细胞酶学性质的研究表明,其最适反应温度35℃,最适反应pH7.0,Cu2＋对该酶有明显的抑制作用,该酶的Km＝0.154mol/L,Vmax＝0.0571mol/L·h。     

曲霉N1—14‘胞质酶活性与产L—苹果酸能力的关系

Ｌ－苹果酸（ＬＭＡ）高产突变株曲霉Ｎ１－１４’在高产酸状态下,其胞质中催化ＣＯ２固定反应的酶有四种：丙酮酸羧化酶（ＰＣ）、磷酸烯醇丙酮羧化酶（ＰＥＰＣ）、磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶（ＰＣＫ）和苹果酸酶（ＭＥ）;除ＭＥ之外,三种羧化酶的活性与ＬＭＡ产生速率呈较好的线性正相关关系;苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）活性比ＰＣ等酶高２￣３个数量级;琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活力则明显低,几种酶只有ＳＤＨ与发酵醪中ＬＭＡ含量     

温特曲霉延胡索酸酶的提纯及性质研究

报道经硫酸鱼精蛋白沉淀、硫酸铵分级沉淀和葡聚糖凝胶G-200柱层析,再经冰冻干燥后从温特曲霉F-871菌体中获得延胡索酸酶,纯化倍数为31.70,回收率为36.64％,酶比活性为24.6U/mg。酶学性质研究表明:酶作用最适pH和温度分别为8.0和30℃,稳定pH范围为6.0～8.5,酶在35℃下保温30min后仍残留约90％以上的活力。     

固定化细胞生产L—苹果酸动力学及两种酶反应器的比较

研究了产氨短杆菌ＭＡ－２,黄色短杆菌ＭＡ－３的固定化细胞在富马酸铵转化体系中生成Ｌ－苹果酸的动力学参数,同时比较了固定化细胞在填充床及连续机械搅拌反应器中酶转化反应的差异。研究结果表明：当转化率小于４０％时,酶反应在两种反应器所需的停留时间相当。随着转化率的提高,填充床反应器较连续机械搅拌反应器所需的停留时间短且不会因剪切力使固定化颗粒受到损伤,因此,在富马酸铵体系中用固定化酶生产Ｌ－苹果酸采用填     

黄曲霉发酵薯干粉水解液生产L—苹果酸

经选育和诱变得到一株产苹果酸的黄曲霉菌ＴＨ５００７,通过发酵条件的优化,以薯干粉的水解波为主要原料,发酵５ｄＬ－苹果酸可达到６％左右。在总酸中苹果酸含量平均达７２％以上,杂有机酸主要是柠檬酸,延胡索酸的含量在０．０２％以下。补糖发酵比分批发酸产酸性能更佳。     

黄曲霉发酵薯干粉水解液生产L－苹果酸

经选育和诱变得到一株产苹果酸的黄曲霉菌ＴＨ５００７,通过发酵条件的优化,以薯干粉的水解液为主要原料,发酵５ｄＬ－苹果酸可达到６％左右。在总酸中苹果酸含量平均达７２％以上,杂有机酸主要是柠檬酸,延胡索酸的含量在０．０２％以下。补糖发酵比分批发酵产酸性能更佳。     

产纤维素酶菌株宇佐美曲霉Y-11产酶条件及酶性质的研究

通过正交试验,对宇佐美曲霉纤维素酶固态发酵条件进行了研究,其较适培养基为：麸皮与稻草配比为２：３,氮源：尿素,含水量：２００％（液固比）,ｐＨ：５．５。２８－３０℃培养７２小时,ＣＭＣ酶活力为５．０５（ｕ／ｍｌ）,滤纸酶活力达到１．０４（ｕ／ｍｌ）。ＣＭＣ酶及滤纸酶最适ｐＨ分别为４．４１、６．０６;最适温度分别为６５℃、５５℃。酶的热稳定性与ｐＨ稳定性较高。     

L-苹果酸产生菌F-871变株合成延胡索酸酶的研究

温特曲霉Aspergillus wentii F-871是高效转化延胡索酸为L-苹果酸的变株,通过对其合成延胡索酸酶的因素进行研究,筛选了培养基主要营养元素有L-精氨酸、酪氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、赖氨酸及相应含量丰富的酵母粉、黄豆饼粉和玉米浆。该变株生长阶段条件为：pH6．0,温度2830℃,培养时间为24h,酶合成阶段最适条件：接种量15％,初始pH6．8,培养温度2830℃,装量8090ml／500ml,酶合成周期40h。在优化的培养条件下,F-871变株延胡索酸酶合成水平可达156．33u／g,100ml发酵液中的酶可将延胡索酸转化为L-苹果酸32．06g,比国内一步发酵法产酸88．5％提高约4倍,转化率由85％提高到106．87％,发酵周期由90h缩短至57h。     

温特曲霉HD1的鉴定及其对氧蒽类染料脱色特性的研究

从土壤中分离到１株染料脱色真菌,经鉴定命名为温特曲霉ＨＤ１。该菌对氧蒽类染料虎红具有很强的脱色能力。温度在２８￣４０℃之间,ＨＤ１对虎红的脱色率为９３￣９９％,最适脱色温度为３３℃,ｐＨ值在４．０￣８．０之间,其脱色率为８９．３￣９８．８％,最适脱色ｐＨ值为６．０。培养基、碳源,氮源及接种量对其脱色率均有影响,该菌对虎红的脱色酶为组成酶,主要分布在细胞内,染料的加入能改变脱色酶在胞内外的分配比例,     

温特曲霉HD_1的鉴定及其对氧蒽类染料脱色特性的研究

从土壤中分离到1株染料脱色真菌,经鉴定命名为温特曲霉HD1（aspergilluswentiiWehmerHD1）.该菌对氧蒽类染料虎红具有很强的脱色能力。温度在28～40℃之间,HD1对虎红的脱色率为93～99％,最适脱色温度为33℃;pH值在4.0～8．0之间,其脱色率为89．3～98．8％,最适脱色pH值为6．0。培养基、碳源、氮源及接种量对其脱色率均有影响。该菌对虎红的脱色酶为组成酶,主要分布在细胞内。染料的加入能改变脱色酶在胞内外的分配比例,加速胞内脱色酶的合成。虎红脱色产物的紫外可见光光谱分析表明,可见光区544．8nm处的吸收峰完全消失,而紫外光区的吸收峰则减弱、移位、消失（244～277nm）或稍有增加（242nm以下）。