正常仔猪肠道内大肠杆菌定居的研究II．正常仔猪肠道内大肠杆菌血清型排除机制的探索

通过给26头仔猪口服大肠杆菌NY—10菌林(O33,：K．H)和ST-A菌株(未定型,但与前者血清型不同),研究了不同日龄仔猪肠道内大肠杆菌定居的规律。 给不同日龄仔猪口服109一3×1010个细菌,定期从各猪的直肠粪样中分离大肠杆菌,并崩相应抗血清对所分离的各株大肠杆菌加以鉴定。结果表明,NY-10或ST-A菌液经初生仔猪口服后,两者在肠道内的定居模式基本相同;NY-10菌株在不同日龄仔猪肠道内的定居曲线也大体一致。一个血清型大肠杆菌在肠道内占100％的优势期为5—6天,而总的定居期约10天,以后则被其它血清型大肠杆菌更替。在最初接种的NY 10株菌于定居肠道中消失后7一12天,给仔猪再次口服该栋菌4×1010个。发现该株菌迅速被排除,或者不篚从这些仔猜的直肠棉拭中分离到,或者仅在肠遒中定居很短的时期。与此相反,初次口服过ST-A菌株的仔猪,在口服NY一10株苗后,则后者在这些仔猪肠道内的定居模式与初次口服NY一10株菌的定居曲线相似。本试验证实,仔强肠道对大肠杆菌的排斥具有抗原特异性,其机制可能主要是寄上肠道对定居菌的主动免疫应答所致的免疫排除。     

仔猪肠道微生物研究进展

肠道菌群在哺乳动物及人类健康的作用正日益受到重视。仔猪的健康生长需要一个动态平衡的肠道微生态环境。然而,在猪的生命周期中,从食管到直肠的微生物分布与组成存在时间和空间的变化。健康的肠道菌群具有促进猪的营养代谢,维持肠黏膜屏障,调节免疫应答,抑制病原菌感染等功能。多种因素对猪肠道菌群的形成与稳定具有重要的作用,包括分娩方式(经过产道或剖宫产)、幼龄时期饮食(母乳或配方饲料)、抗生素或抗生素样分子的使用等。本文主要从仔猪肠道微生物组成与定植、功能、影响肠道微生物的因素等方面论述了仔猪肠道微生物与仔猪肠道健康的关系,从而加深肠道微生物对维护仔猪肠道健康作用的认识。     

哺乳仔猪关闭饲养的试验

目前,国内外对哺乳仔猪的饲养管理有关闭和开放两种不同方式。为摸清这两种方式对哺乳仔猪在成活率、断乳重和饲料消耗等方面的不同影响,以指导今后的养猪生产,我们进行了哺乳仔猪关闭饲养的试验。一、试验猪的选择在1977年春产中,我们从三分场的第三饲养组养的生产母猪群内,选择本产季中期的产期接近的10头经产苏白大母猪,在相同的饲养管理条件下进行试验。并据产仔日期先后,将10头大母猪分为两组,即先产仔的5头为试验组,后产仔的5头为对照组。此10头大母猪历产生产成绩相似(见表1)。     

甘露寡糖对断奶仔猪肠道主要菌群的影响

选择健康的 35日龄断奶仔猪 4 8头 ,随机分为两组 ,每组 3圈 ,每圈 8头。一组为含 0 .5 %甘露寡糠 +基础日粮 ,另一组为基础日粮。试验开始第 7天 ,每组各随机选 6头仔猪 ,麻醉后剖腹取肠道内容物以测定盲肠和结肠大肠杆菌、乳酸杆菌及双歧杆菌浓度和 p H。试验结果表明 ,与对照组相比 ,甘露寡糖可以显著降低盲肠、结肠大肠杆菌浓度 (P<0 .0 5 ) ;同时显著提高盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌浓度 (P<0 .0 5 ) ,但对结肠乳酸杆菌和双歧杆菌数影响不显著 (P>0 .0 5 )     

仔猪补料方法的比较

仔猪出生20天内,主要靠吃母猪奶获得营养。20天以后,营养需要增加,而母猪奶量日渐减少,已不能满足仔猪生长的营养需要,必须给猪补料。我场的实践表明:在相同的饲养管理条件下,生后一个月尚未补料的小猪,其断奶体重只有早期补料(生后10天左右)仔猪断奶体重的2/3。及时补料,可以加速仔猪的     

枯草芽孢杆菌YK-1R对断奶仔猪肠道菌群的影响

本研究旨在运用高通量测序技术研究益生菌Bacillus subtilis YK-1R对断奶仔猪肠道菌群的影响。挑选21日龄断奶仔猪14头,随机分成两组,即益生菌组与空白对照组,每组各7头仔猪。益生菌组每头仔猪每天灌胃15 m L浓度为109cfu/m L的益生菌,对照组每天灌胃15 m L磷酸缓冲液(PBS)。在实验第0天、第14天、第28天采集每头仔猪新鲜粪便样品,采用高通量测序技术分析仔猪肠道菌群组分与结构变化。研究表明,在实验第14天时,益生菌显著提高断奶仔猪生长性能(p0.01)、肠道菌群alpha多样性(p0.05),降低仔猪腹泻率,提高饲料利用率;基于unweighted Uni Frac距离多元方差分析(MANOVA)表明,此时益生菌组与对照组仔猪肠道菌群结构有显著差异(p0.01)。由此可见,益生菌Bacillus subtilis YK-1R能增加仔猪肠道菌群多样性,促进仔猪健康生长。     

猪圆环病毒2型感染的仔猪空肠菌群变化

【目的】研究猪圆环病毒2型(PCV2)感染导致的仔猪空肠病理变化及其菌群变化。【方法】经过口服和肌肉注射PCV2后测定3头仔猪病毒血症情况;随后将6头断奶仔猪随机分为感染组和对照组,感染组3头,空白组3头。相同接种途径感染仔猪,在感染后21 d宰杀仔猪,无菌采集空肠肠段及内容物分别进行显微病理观察和Mi Seq测序分析空肠菌群变化。【结果】PCV2感染后21 d仔猪血清中病毒核酸达到较高水平,感染组仔猪空肠绒毛萎缩脱落,空肠微生物种类和丰度发生变化,菌群多样性增高,乳酸菌属含量显著降低,假单胞菌属含量显著增高。【结论】PCV2感染导致仔猪空肠菌群发生一定变化,空肠有益菌减少,有害菌增多,加重仔猪空肠炎症发生。     

不同生长性能苏姜猪保育猪肠道菌群差异分析

【背景】苏姜猪是优质瘦肉型新品种猪,断奶仔猪受到多方面应激影响会出现生长性能差异。【目的】研究不同生长性能的苏姜猪保育猪肠道菌群结构的异同。【方法】试验选取了同日龄、体重相近、健康情况良好的的保育仔猪100头,在相同的饲养条件下饲养42 d,试验结束选取体重较轻的为弱仔猪,3头弱仔猪体重为18.43±2.37kg;体重较大的为健康仔猪,3头健康仔猪体重为27.37±1.36 kg。屠宰后,采集其空肠和盲肠内容物,提取微生物基因组DNA进行高通量测序分析其菌群结构。【结果】苏姜猪仔猪空肠和盲肠在菌群丰度、多样性上有极显著的差异(P<0.01)。苏姜猪仔猪空肠菌群优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)假单胞菌属(Pseudomonas)的非致病性菌株,占比超过90%。苏姜猪仔猪盲肠优势菌门依次为拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)。门水平组成结构存在差异,弱仔猪厚壁菌门丰度低于健康仔猪、变形菌门丰度高于健康仔猪。苏姜猪盲肠中普雷沃氏菌属(Prevotella)、疣微菌科UCG-005 (Rumi...     

仔猪红痢病的防制

出生后2—3天的仔猪容易发生红痢病。发病仔猪大部分死亡,有的全窝都死亡,给养猪生产带来很大损失。 病因 为C型魏氏梭菌引起。这种细菌常存在于猪的肠道中,很容易随粪便散布在猪圈的泥土里,仔猪出生后不久,若将该菌吞进消化道,该菌即在猪的肠道     

仔猪白痢治疗试验

仔猪白痢是仔猪常见的多发疾病。尤其对生后10—20日龄的仔猪危害极大,轻则影响发育,出现僵猪,重则造成大批死亡。究竟用什么药物治疗效果好,是一个急需解决的课题。我们根据用瞿麦等药物治疗仔猪白痢的经验,开展了两个试验,现介绍如下。一、粟壳水加链霉素、粟壳水、痢特灵、链霉素、瞿麦治疗仔猪白痢的比较试验:将粟壳水加链霉素、粟壳水、痢特灵、链霉素、瞿麦五种药分成五个试验组,各组的试验方法列表如下:     

123名患儿及440名正常儿咽喉拭细菌培养正常参考值调查研究

本文目的为进一步了解患儿及正常儿咽喉部常见菌种类及所占数量,为临床治疗及细菌培养提供正常参考值一、调查对象及检验方法1岁以下到10岁门诊初诊患儿;托儿所,幼儿园的正常儿,以棉拭子当场采样立即接种血平板及中国兰平板,常规培养观察处理标本,鉴定菌种。二、结果分析563人咽拭取样培养:肺炎链球菌100%生长,卡他球菌100%生长,表皮葡萄球菌14.6%,金黄色葡萄球菌7.4%,甲型链球菌1.1%,白色念珠菌0.15%,其它非致病菌占1.19%。     

低蛋白质日粮对断奶仔猪生长相关激素和肠道微生物区系的影响

【目的】在饲喂低蛋白质日粮条件下,探究断奶仔猪生长相关激素、回肠和盲肠微生物组成及其代谢产物的变化。【方法】选取体重相近杜长大断奶仔猪54头,随机平均分为3组,每组18头,分别饲喂含20%(NP组)、17%(MP组)和14%(LP组)粗蛋白日粮,平衡日粮中的赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸,于试验第10、25和45天每组屠宰6头,采血测定血常规和生长相关激素;于第45天采集回肠和盲肠食糜,分析微生物及其代谢产物。【结果】与NP组相比,第25和45天时MP和LP组尿素氮水平显著降低(P0.05),第25天时LP组甘油三脂含量、第45天时LP组胆固醇含量显著增加(P0.05)。各时间点血液胰高血糖素、胰岛素、生长激素、T3和T4在3组之间差异均不显著。门水平上,回肠和盲肠中的微生物均以厚壁菌门占主导地位,但各组间差异不显著;随日粮蛋白质含量降低,乳酸杆菌属呈上升趋势,严格梭菌属呈下降趋势,但差异不显著。降低日粮蛋白质含量显著减少了回肠和盲肠中氨氮的产量(P0.05)。【结论】断奶仔猪日粮蛋白质降低3或6个百分点不影响机体生长相关激素的分泌,但能降低血液尿素氮和肠道内氨氮的浓度,对肠道有益菌乳酸杆菌属的相对丰度有一定的提高作用。这说明低蛋白质日粮能提高断奶仔猪对饲料氮源的利用率,且有利于肠道健康。     

早期灌喂母源粪菌对新生仔猪肠道菌群发育的影响

【目的】粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)作为一种治疗手段,已在人类肠道疾病治疗中有较多应用,但在干预新生仔猪肠道菌群上的研究未见报道。本文旨在研究早期母源粪菌移植对新生仔猪肠道菌群发育的影响。【方法】选取一窝12头杜长大新生仔猪,随机分为粪菌处理组(feces treatment,FT)和对照组(control,CO)。FT组仔猪出生后1–5 d每日灌注母源粪菌接种液,CO组灌注等量生理盐水。于1、3、5、7、10、14、18和22日龄采集仔猪粪样,Miseq高通量测序分析仔猪粪便菌群。【结果】灌喂母源粪菌有增加仔猪肠道菌群丰富度的趋势;主坐标分析显示,两组仔猪粪样菌群结构簇并未分开,并在18和22日龄时靠近母猪粪样菌群结构簇;随日龄增加,两组仔猪肠道中的变形菌门丰度均显著降低,而厚壁菌门的丰度显著增加,且从10日龄起拟杆菌门和厚壁菌门之和约为90%;与对照组相比,灌喂母源粪菌增加了10日龄时Escherichia-Shigella的丰度,而降低了18日龄时该菌属的丰富度,18日龄时肠球菌属和普氏菌属的丰度则显著增加。【结论】1–3日龄口服灌喂母源粪菌液并不能影响仔猪肠道菌群的定殖,这一阶段主要受母体微生物结构的影响;灌喂粪菌液对仔猪肠道菌群定殖的影响最多持续10–14 d;而且仔猪在22 d左右,肠道菌群结构逐渐趋同于母猪肠道菌群。     

断奶仔猪肠道菌群的研究

研究断奶仔猪在不同生理状况下的肠道菌群,结果表明：健康仔猪肠道内容物中,从十二指肠到结肠,所测定的８种细胞数量都随肠段后移而逐渐增加,４３日龄仔猪肠道内容物中以乳杆菌、肠球菌和梭菌占绝对优势,双歧杆菌次之;与健康仔猪相比,下痢仔猪肠道中肠球菌、梭菌和乳杆菌等优势菌群的数量明显低于对照组;饲喂了含肠球菌的活菌制剂的仔猪肠道中双歧杆菌和类杆菌的数量比对照组明显增加,但肠球菌数量却无显著改变。     

异种源复合益生菌对杜滇仔猪肠道微生物多样性的影响

为研究异种源复合益生菌对超早期断奶（7日龄）的杜洛克×滇南小耳猪肠道微生物多样性的影响,选取30头7日龄杜洛克×滇南小耳猪,分为DD组哺喂代乳粉,DY组哺喂代乳粉+复合益生菌,对照组（DM组）母乳喂养,每组10头。试验期为21 d,采用IIIumina技术分析粪便菌群组成。结果表明,早期哺喂代乳粉,使杜洛克×滇南小耳猪肠道菌群多样性下降（P＜0.05）,厚壁菌门（P＜0.01）、螺旋菌门（P＜0.05）和Epsilonbacteraeota（P＜0.01）相对丰度降低,乳杆菌属相对丰度极显著提高（P＜0.01）,代乳粉中添加异种源复合益生菌后,拟杆菌门和普氏菌属的相对丰度显著提高（P＜0.05））,与碳水化合物代谢（Prevotella_7、Prevotella_2、Prevotella_9）及肠道抗炎症（Colilnsella）相关菌群的相对丰度也显著提高,具有降低仔猪断奶应激的潜能。     

无菌猪和普通猪早期脂肪发育及脂肪组织基因转录表达的差异

通过比较无菌仔猪和普通仔猪在生长早期脂肪沉积的差异及脂肪组织基因转录表达谱的不同,评估肠道微生物定植对猪脂肪组织早期发育的直接影响.分别采集25日龄无菌仔猪(3头)和普通仔猪(3头)的颈部皮下脂肪,切片后经HE染色观察不同猪脂肪细胞的形态差异;Western Blot检测脂肪合成调控因子的蛋白表达差异;ELISA法测定...     

大肠埃希氏菌SY-30菌株预防初生仔猪大肠杆菌病的研究

SY-30是埃希氏菌属(Escherichia)的一株大肠杆菌,该菌株产生大肠菌素,无致病性,对致病性大肠埃希氏菌具有明显的拮抗作用,我们将该菌制成活菌制剂,对101例初生仔猪大肠杆菌病临床效果观察及1330例效果累计表明,对该病的预防效果是肯定的。     

日粮添加褐藻糖胶对断奶仔猪抗炎能力和肠道微生物多样性的影响

【目的】本试验旨在研究日粮添加海带提取物褐藻糖胶对断奶仔猪生长性能、营养物质消化率、机体免疫力和肠道微生物多样性的影响。【方法】试验选用36头初始体重为(7.43±0.12) kg的健康仔猪,按照随机区组设计分为3组,每组12头。日粮处理组分别为不含抗生素的基础日粮组、抗生素组和褐藻糖胶组;试验期为28d。评价褐藻糖胶对仔猪生长性能和营养物质消化率的影响;通过比色法和酶联免疫吸附法检测血清中与免疫相关的指标;通过16S rRNA扩增子高通量测序检测试验第0、14和28天肠道微生物多样性。【结果】日粮添加褐藻糖胶可降低试验0–14 d仔猪耗料增重比(P0.05),但对试验全期仔猪平均日增重和平均日采量无显著影响(P0.05)。与对照组相比,饲喂褐藻糖胶日粮后,仔猪的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维表观消化率显著提高(P0.05);仔猪饲喂抗生素和褐藻糖胶日粮后,血清IL-22含量显著降低。试验第14天,抗生素组和褐藻糖胶处理组中Bacteroidetes数量呈上升趋势(P=0.07);试验第28天,抗生素组和褐藻糖胶处理组Actinobacteria丰度显著高于对照组(P0.05),且褐藻糖胶处理组Bacteroides属的菌群丰度显著高于对照组和抗生素组。【结论】日粮添加褐藻糖胶提高了断奶仔猪纤维养分消化率和拟杆菌属的丰富度和多样性,并且降低了促炎性细胞因子IL-22含量,这有助于缓解仔猪的断奶应激反应,建立稳定健康肠道菌群。     

日粮蛋白质水平对断奶仔猪肠道发育的影响

实验研究了饲粮不同粗蛋白水平对断奶仔猪肠黏膜形态和肠道健康状况的影响.实验采用完全随机设计,将72头28日龄断奶的仔猪分为4组,每组3个重复,每个重复6头.4个组分别接受24%、22%、20%、18%蛋白水平的日粮.结果表明,采食粗蛋白水平为24%的日粮使小肠不同肠段绒毛的生长受到了抑制,使隐窝加深、绒毛/隐窝比降低;随着日粮粗蛋白水平的下降,回肠和盲肠消化物pH、氨氮浓度显著降低(P<0.05),盲肠消化物中腐胺浓度显著降低(P<0.01).采食粗蛋白水平为24%的仔猪有轻度腹泻现象.上述结果提示,适当降低断奶仔猪日粮粗蛋白水平并平衡主要必需氨基酸,有利于降低肠道有害菌群的增殖,改善肠道健康状况.     

刺五加提取物对早期断奶仔猪肠道微生物多态性的影响

选用21日龄断奶的三元杂交仔猪60头,随机分为3个处理,处理1饲喂添加0.1%刺五加提取物日粮,处理2饲喂添加0.02%硫酸粘杆菌素日粮,处理3饲喂基础日粮。分别于添加后第7、14和28 d从各处理随机取5头试猪,处死后无菌采集空肠、回肠和盲肠内容物,采用体外培养计数法和PCR/DGGE技术,测定其中乳酸杆菌和大肠杆菌的数量及细菌菌群的变化。结果表明,第7 d时,提取物组回肠内容物大肠杆菌数量显著低于对照组;各肠段内容物乳酸杆菌数量均显著高于其它2组。第14 d时,提取物组各肠段内容物大肠杆菌数量均显著低于其它2组;空肠和回肠内容物乳酸杆菌数量显著高于其它2组,且盲肠内容物乳酸杆菌数量显著高于对照组。第28 d时,提取物组空肠和回肠内容物大肠杆菌数量显著低于其它2组,盲肠内容物大肠杆菌数量也显著低于对照组;回肠内容物乳酸杆菌数量显著高于其它2组。各时间点提取物组盲肠内容物细菌DGGE条带数较对照组多,第28 d时空肠内容物细菌DGGE条带数比对照组多;3个处理间各肠段内容物DGGE图谱间的相似性均达56.9%以上。提示刺五加提取物有助于提高肠道内容物乳酸杆菌的数量,抑制大肠杆菌增殖,显著增加肠道微生物的多样性,这可能是其防治断奶仔猪腹泻、促进生长的机理之一。