分析微生物学及其现状

不久前,生物学一直是一门描述性的科学,是在整休或显微水平上,生物学家只能了解它们生命过程的结果,而不知引起结果的动力。由于电子显微镜、超速离心机以及各种色谱技术的应用,使人们认识到许多生物学现象的最后因果机理,是依赖于细咆内外各种特异性分子之间的纷杂关系,其中包括带有遗传信息和生物学活性的核酸、蛋白质、多塘和类脂等。     

毛细管在离心机制冷系统中的应用

高速冷冻离心机是医学临床分析中不可缺少的设备,它的制冷系统一般均有四大关键部件,即压缩机、冷凝器、节流装置和蒸发器。国产离心机中制冷系统的节流装置均采用热力膨胀阀,但热力膨胀阀有其本身固有的缺点,如结构比较复杂,易泄漏制冷剂,易产生故障等。国外60年代以来已开始试验采用毛细管来替代热力膨胀阀,如美国Beck-man公司生产的高速、超速离心机,日本久保田、日立生产的高速、超速离心机均采用毛细管作为制冷系统的节流装置。毛细管与热力膨胀阀相比,有其独特的优点:     

蔗糖密度梯度离心法测定蛋白质的沉降系数

沉降系数(S值)是蛋白质的一个重要物理常数,一般在分析超迷离心机中进行分析。由于分析超速离心机需要配备特殊的分析转头和监测记录沉降粒子在离心过程中行为的装置,价格昂贵,一般实验室难以配备。Martin和Ames使用制备超速离心机,采用蔗糖密度梯度超离心法,测定了细菌组氨酸生物合成的有关酶的沉降系数,取得了较好的效果。我们参照该方法,并作了某些改进,现报告如下。     

GLL-18高速冷冻离心机

随着科学技术的发展,离心机的使用日趋广泛。除生物学、化学、医药卫生、食品等传统使用离心机的部门之外,在某些国防尖端部门也开始使用离心技术。因而各主要工业国家都对离心机的研制和生产给予一定的重视,并建立了自己的离心机系列,包括低速、高速和超速。高速冷冻离心机是离心机系列中不可缺少的一个组成部分。我国各科研和生产部门所用高速离心机基本依赖进口,这不仅要花费国家的大量外汇,而且仪器发生故障时,修理比较麻     

分析超速离心技术及其在分子生物学中的应用

分析超速离心技术是生物化学和分子生物学中的一种经典方法。该技术是基于热力学和流体动力学第一定律,利用分析超速离心机研究蛋白、核酸和聚合物及其他各种复合物在溶液状态下的行为。从该技术利用的仪器、原理和数据分析方法及其在分子生物学中的应用等方面进行了综述,并对这一技术在现阶段的应用进行了总结和展望,以期为国内相关领域研究人员提供参考。     

利用速率区带离心数据计算沉降系数

速率区带离心法原本用于分离粒子和大分子。经Martin的发展,利用速率区带离心数据可以计算粒子的沉降系数,结果相当满意。此法的优点在于,不适于分析离心机测定的粒子,如亚细胞,可用此法测定其沉降系数,并且可用测定生物活性的方法测定区带的位置,样品不要求纯化,这些都是优于分析离心机之处。又由于可在制备超速离心机上完成,因此得到广泛的应用。在Martin之后,为了便于应用,许多人在计算上做了些改进,多数是就着某些型号转头、各别实验条件,制成数值表供计算用。其中较     

简易的沙眼衣原体扩增及纯化方法的建立

目的建立扩增培养和纯化沙眼衣原体的简化方法.方法采用HeLa细胞培养扩增衣原体,并应用一步法将沙眼衣原体纯化回收.结果获得了具有高感染活性的沙眼衣原体.结论该方法与常规方法相比更简便、快速,同时减少污染机会、不需要超声和超速离心机等设备.     

乙肝疫苗的制备安全性

<正>我们在研制乙肝疫苗中,先用硫酸铵沉淀浓缩表面抗原(HBsAg),然后用KⅡⅠ离心机经密度超速区带离心等一系列步骤,提纯的部分HBsAg用PH为2的胃蛋白酶消化后置于8M尿素中灭活。在明胶     

超速离心机制备冷冻干燥保存菌种

利用超速离心机原有的冷冻系统和真空系统进行冷冻干燥的方法冻干保存了３０种国际标准菌种,４℃保存一年后,随机检测了其中的１８种,全部存活良好。用本法还可以制备出１、２、３、１０ｍｌ不同容量的冷冻干燥生物制剂,适用于中批量各种冻干生物制剂的生产和研究。一机两用,省资金,省用房,提高了机器的利用率。     

人精细胞基因组DNA的分离提纯方法及其含量测定

虽然很容易从低等脊稚动物、哺乳动物的 一些细胞,甚至鱼的精子中分离得到DNA,但 从哺乳动物精细胞分离DNA则极为困难〔：,”, 直至1988年Bahnak等才提出一个有效的方 法‘习,但费用既高耗时又多,需用超速离心机及 贵重药品氯化艳,故无此仪器的实验室就无法 引用。由于工作需要,我们建立了一个不用超 速离心机的新方法,突破了精子头难破及破后 DNA 又被大量蛋白质紧密缠绕很难分离的双 重困难。     

一种大量提取纯化SPP1-DNA的简便方法

自从Silvano等于1969年发表了关于枯草杆菌噬菌体SPP1及其DNA的研究论文后,十几年来有关SPP1及其DNA的研究日渐深入。本文介绍一种简便而大量提取该噬菌体DNA的方法,该法在对Silvano等人的方法予以改进和简化之后,避免了使用昂贵的药品氯化铯和超速离心机,从而使噬菌体SPP1的效价达到了一定的高度,便于获得大量的SPP1-DNA。     

乙醇:一种快速冷冻生物物质的有效冷却剂

<正>前言 制备电子显微镜生物标本的理想步骤包括两个主要阶段:首先要保留细胞的相互作用,使样品处于暂停活动状态;其次,要使样品在检查前和检查期间的稳定性保持不变。目前,以超速冷冻方法最接近实现第一步目标,此法一般认为比常规化学固定更快速。一种达到超速冷冻的方法是把样品投入低温液体。然而,选择一种合适的超速冷冻剂常要兼顾试验的安全性和冷冻的快速程度。例如氟利昂(Freon)和氮,虽然它们并没有最好的冷冻效力,但由于它们比较安全而常常使用。而丙烷具有高度易燃挥发蒸气,因其有较高的冷却效力而偶然使用。     

离心机训练对大鼠脑和心脏组织基因表达的影响

 分析离心机训练对大鼠脑和心脏组织基因表达的影响 ,并从中筛选正加速度 (forwardaccel eration ,+Gz)高耐力相关基因 .雄性SD大鼠在动物离心机上训练 ,刺激G值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d在离心机上通过测定动物的 +Gz耐力筛选出高耐力动物 ,立即断头处死 ,取全脑和心脏组织 ,分离其mRNA .将此mRNA与未处理动物相应组织来源的mRNA进行抑制性消减杂交 (SSH) ,获得的相关EST(expressionsequencetag ,EST)进行序列测定 ,并经BLAST进行计算机分析 .结果获得 88条与离心机训练相关的EST ,其中 4 4条为已知基因的部分序列 ,4 4条为未知基因的部分序列 .提示离心机训练对大鼠脑和心脏组织基因表达有影响 ;这些相关基因可能与 +Gz高耐力的产生有关     

刺槐木质部栓塞脆弱性检测的方法比较

在全球变暖的背景下, 植物木质部栓塞脆弱性是林木死亡率升高的重要生理学因素。然而不同方法在长导管树种上建立的栓塞脆弱性曲线存在较大差异。该研究以长导管树种刺槐(Robinia pseudoacacia)为研究对象, 利用自然干燥法、Cochard Cavitron离心机法以及Sperry离心机法建立了栓塞脆弱性曲线, 旨在探讨不同检测方法的合理性。在Sperry离心法中, 使用了两种规格的转子, 从而对“开口导管假象”学说进行了检验。研究结果表明: 自然干燥法建立的栓塞脆弱性曲线为“s”形, 而Cochard Cavitron离心机法和Sperry离心机法建立的栓塞脆弱性曲线为“r”形; 自然干燥法与离心机法建立的曲线存在显著性差异, 且两种离心机法建立的曲线也具有显著性差异。尽管刺槐枝条的导管长度分布表明14.4 cm长的刺槐枝条具有更高比例的开放导管, 但用Sperry离心机法在27.4 cm和14.4 cm长茎段上建立的栓塞脆弱性曲线相似, 表明Sperry离心机法检测刺槐脆弱性曲线时未产生“开口导管假象”, 具有更为可靠的检测结果。     

Comparison of methods for detecting vulnerability of xylem embolism in Robinia pseudoacacia

在全球变暖的背景下, 植物木质部栓塞脆弱性是林木死亡率升高的重要生理学因素。然而不同方法在长导管树种上建立的栓塞脆弱性曲线存在较大差异。该研究以长导管树种刺槐(Robinia pseudoacacia)为研究对象, 利用自然干燥法、Cochard Cavitron离心机法以及Sperry离心机法建立了栓塞脆弱性曲线, 旨在探讨不同检测方法的合理性。在Sperry离心法中, 使用了两种规格的转子, 从而对“开口导管假象”学说进行了检验。研究结果表明: 自然干燥法建立的栓塞脆弱性曲线为“s”形, 而Cochard Cavitron离心机法和Sperry离心机法建立的栓塞脆弱性曲线为“r”形; 自然干燥法与离心机法建立的曲线存在显著性差异, 且两种离心机法建立的曲线也具有显著性差异。尽管刺槐枝条的导管长度分布表明14.4 cm长的刺槐枝条具有更高比例的开放导管, 但用Sperry离心机法在27.4 cm和14.4 cm长茎段上建立的栓塞脆弱性曲线相似, 表明Sperry离心机法检测刺槐脆弱性曲线时未产生“开口导管假象”, 具有更为可靠的检测结果。     

肌酸激酶胍变性与失活的关系

肌酸激酶(CK2.7.3.2)催化磷酸肌酸与ATP相互转化的反应。姚启智等曾对其在盐酸胍中的构象变化与失活动力学进行了比较研究,发现在低浓度变性剂中,失活的速度与程度都远大于构象变化。此酶为球蛋白,由两个可以解离的相同亚基组成,分子量82,600。本文在最适pH附近(pH9.0)测定了不同浓度盐酸胍中酶的沉降系数,对其解聚与构象变化进行了研究,以探讨快失活、慢构象变化与解聚的关系。 兔肌肌酸激酶的提取、活力测定、盐酸胍的纯化方法与文献[1]相同。沉降系数用日立282-型分析超速离心机于20℃左右测定,Schlieren光学系统,标     

离心机训练对大鼠脑及其它组织IL-6和TNFα基因表达水平的影响

为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、脑、肺、肾和小肠组织 ,分别提取mRNA并定量 .用地高辛标记IL 6和TNFαcDNA作为探针 ,进行狭缝杂交 ,杂交结果通过光密度扫描定量后 ,进行统计学处理 .离心机训练不同时间 ,比较大鼠各组织IL 6和TNFα基因表达水平的变化 .结果显示随着训练时间的延长 ,表达水平均有所差异 .提示训练对大鼠脑及其它主要组织IL 6和TNFα基因表达水平有影响 ,这种影响可能与机体对加速度作用的习服有关     

一种制备酵母菌线粒体DNA的简便方法

ASimpleProcedureforPreparationmtDNAinYeastJinJianlingGaoDongSunZhongdong(MicrobiologyDepartment,ShandongUniversity,Jinan250100)目前,制备酵母mtDNA的常用方法大致有两类：一是先提取混合DNA（核DNA＋mtDNA）,再通过CsCI密度梯度离心或柱层析法分离纯化mtDNA（’,’,”’;二是先通过蔗糖不连续梯度超离心法分离纯化线粒体,再从线粒体中提取mtDNA”’。这些方法虽然能够得到纯度较高的mtDNA,但超离心法需要配套设备（超速离心机等）,柱层析法对样品的回收浓缩比较复杂。本文报道的制备mtDNA的方法,不需…     

DNA及其蛋白质复合体的电镜观察及研究应用

对生物大分子形状的正确了解有助于对其功能的解析。事实上,借助于电子显微镜观察法,使我们在对构成细胞各组分功能的探讨和研究方面收益匪浅。自从生物这家们认识到ＤＮＡ在细胞行使其功能中的重要性以来,电子显微镜便成为一种最重要的技术手段而被用于分析ＤＮＡ的结构,研究ＤＮＡ的复制、重组和转录机制。近年来,这一领域的研究技术又有了非常大的改进,使人们已经能够借助于电子显微镜,观察介入ＤＮＡ复制、重组和转录等过程中的ＤＮＡ－蛋白质复合体的活体状态。今后,在对生物大分子的活体行为进行探讨时,电子显微镜技术将发挥越来越重要的作用。     

DNA及其蛋白质复合体的电镜观察及研究应用

对生物大分子形状的正确了解有助于对其功能的解析。事实上,借助于电子显微镜观察法,使我们在对构成细胞各组分功能的探讨和研究方面收益匪浅。自从生物学家们认识到DNA在细胞行使其功能中的重要性以来,电子显微镜便成为一种最重要的技术手段而被用于分析DNA的结构,研究DNA的复制、重组和转录机制。近年来,这一领域的研究技术又有了非常大的改进,使人们已经能够借助于电子显微镜,观察介入DNA复制、重组和转录等过程中的DNA蛋白质复合体的活体状态。今后,在对生物大分子的活体行为进行探讨时,电子显微镜技术将发挥越来越重要的作用。