巨噬细胞集落刺激因子克隆化成功

日本森永乳业公司和美国 Genetics Institute(GI)公司都宣布成功地克隆化了有待查明其机理的血液增殖分化因子——人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,CSF-1)的基因。M-CSF 是刺激巨噬细胞的前驱细胞,促进巨噬细胞增殖分化的因子。巨噬细胞是能吞食细菌和癌细胞等,并从体内排出的非特异性的免疫系统的主力,是活体防御的重要细胞。GI 公司开发 M-CSF 的目的是为了制造肺炎等感染症的治疗药,现在正进行临证前期试验,计划在1987年内进入临床试验。森永乳业公司是否要开发重组 M-CSF,现在似乎还没有决     

B淋巴细胞刺激因子

B淋巴细胞刺激因子是新发现的属肿瘤坏死因子族的细胞因子。它是由单核细胞和巨噬细胞持续合成、分泌的,具有特异的激活B淋巴细胞,诱导B淋巴细胞增殖、分化为浆母细胞、分泌抗体,以及促进成熟B淋巴细胞在体内的存活等功能。在缺少B淋巴细胞刺激因子的情况下,可导致成熟B淋巴细胞缺乏。而异常过高表达B淋巴细胞刺激因子引起自身免疫性疾病,系统性红斑狼疮样症状。     

IL-34在中枢神经系统疾病中的作用

白介素家族一直以来都受到广泛关注,其中白介素34 (interleukin-34, IL-34)是2008年发现的一种新型细胞因子,是巨噬细胞集落刺激因子1受体(macrophage colony-stimulating factor-1 receptor, CSF-1R)的第二个配体。IL-34是单核巨噬细胞系增殖、分化等一系列生命活动的关键调节剂。由于IL-34在脑内的特异性表达以及其对小胶质细胞增殖、发育、维持的关键性作用,越来越多的研究聚焦于IL-34在中枢神经系统疾病中的作用。IL-34在神经退行性疾病、脱髓鞘疾病、病毒感染和作为中枢系统疾病研究工具中的作用受到广泛关注。该文综述了IL-34的生物学特性,以及IL-34在中枢神经系统疾病研究中的重要作用。     

Cetus公司克隆CSF-1

Cetus公司宣布该公司的科学家已克隆和表达了人集落刺激因子-1(CSF-1)的基因。CSF-1是一种血细胞生长因子,可能对治疗传染病和某地癌症有用。     

即早基因c-fos在THP-1单核巨噬细胞亚型极化中的差异表达*

目的:探讨即早基因c-fos在THP-1巨噬细胞亚型极化过程中的表达变化。方法:运用PMA刺激诱导THP-1单核细胞极化为巨噬细胞,观察c-fos在单核细胞极化过程中的表达变化;在PMA刺激的基础上,分别运用LPS和IL-4诱导THP-1巨噬细胞向M1及M2亚型极化,实时定量PCR及Western blot技术分析刺激24 h时,细胞亚型标记物CD274、CD86和CD163的表达变化,并动态观察诱导极化过程中,c-fos的表达情况。结果:c-fos在PMA刺激THP-1单核细胞分化为巨噬细胞过程中蛋白和mRNA水平显示上调;LPS诱导THP-1巨噬细胞极化为M1型过程中,c-fos蛋白和mRNA水平表达降低,其特异性标记物在24 h呈现出M1型极化的特点(CD86蛋白表达升高,CD274、CD163蛋白表达降低);IL-4诱导THP-1巨噬细胞极化为M2型过程中,c-fos蛋白和mRNA水平表达升高,其特异性标记物在24 h表现出M2型极化的特点(CD86蛋白表达降低,CD274、CD163蛋白表达升高)。结论:c-fos参与了THP-1单核细胞向巨噬细胞极化的过程,并且可能通过抑制巨噬细胞M1亚型形成,促进巨噬细胞向M2亚型极化的作用参与巨噬细胞的亚型极化及其功能调节中。     

阻断Kv1.3和K_(Ca)3.1钾通道对单核/巨噬细胞增殖和趋化功能的影响

电压门控钾通道Kv1.3和钙激活钾通道KCa3.1是单核/巨噬细胞上的两种钾通道。本文旨在研究阻断Kv1.3和KCa3.1钾通道对于单核/巨噬细胞增殖和趋化功能的影响。用趋化实验检测单核/巨噬细胞对Ly-6Chi单核细胞(炎症型单核细胞)的趋化作用,用CCK8试剂盒检测单核/巨噬细胞的增殖情况,用ELISA法检测趋化因子CCL7的浓度变化,用趋化实验检测趋化因子CCL2和CCL7对炎症型单核细胞的趋化作用。结果显示,结果显示,分别用KCa3.1特异性阻断剂TRAM-34和Kv1.3强效阻断剂Sh K阻断这两种钾离子通道后,单核/巨噬细胞对Ly-6Chi单核细胞的趋化能力降低;Sh K使单核/巨噬细胞增殖受到显著抑制。用TRAM-34和Sh K孵育过的Ly-6Chi单核细胞对CCL2的敏感性下降。以上结果提示,Kv1.3和KCa3.1钾通道在单核/巨噬细胞活化、增殖和趋化过程起重要作用,这两种钾通道有望成为自身免疫性疾病和急性心肌梗死后心肌重塑调节的靶点。     

免疫调变人巨噬细胞增强天然杀伤(NK)细胞活性的表达

人体单核-巨噬细胞通过塑料培皿粘附技术从外周血单个核细胞(PBMNC)中分离,并在体外短期培养。培养8天后,这些细胞已发生形态和功能上的分化,成为成熟的巨噬细胞。培养8天的巨噬细胞和PBMNC的比例为2:1和1:1时能引起NK活性的显著抑制。本实验应用4小时~(51)Cr释放试验来测定NK细胞对K562肿瘤细胞的细胞毒性。然而,培养1天的粘附性单核细胞不能观察到对NK活性的抑制。这提示,巨噬细胞对NK活性的抑制与体外分化、成熟、激活有关。培养1天和8天的单核-巨噬细胞对肿瘤靶细胞MBL-2和EAC都有很强的细胞静止效应。应用免疫调变剂脂多糖(LPS)体外处理粘附性单核细胞或巨噬细胞,仅培养8天的巨噬细胞能显著增强NK活性,而培养1天的单核细胞不能引起这种功能。这表明,免疫调变效应的诱导期发生在细胞明显增大的巨噬细胞形成期。与此同时,免疫调变巨噬细胞增强了IL-1的分泌和保持了抗肿瘤功能,从而证明,培养8天的巨噬细胞其抗肿瘤和免疫调节两类功能是可以分离的。本实验应用免疫调变剂寻找到既抗肿瘤又增强NK活性的人体新表型的巨噬细胞亚群。进一步支持了先前在小鼠激活的腹腔巨噬细胞免疫调变研究中的观察。     

大脑皮层缺血损伤后CSF-1R在中枢神经元的表达变化

目的：观察大脑皮层缺血损伤后,集落刺激因子-1受体（CSF-1R）在损伤区及其周围脑区表达的变化,探讨集落刺激因子-1（CSF-1）/CSF-1R信号在中枢神经系统缺血损伤、修复过程中的作用。方法：采用免疫组化技术和Western blot法,对正常和受缺血损伤刺激小鼠全脑CSF-1R免疫阳性神经细胞的分布及表达量进行对比观察。结果：缺血损伤能引起CSF-1R在中枢神经系统（CNS）广泛脑区神经元上的表达上调,不仅发生在损伤及其周围区,还出现在损伤对侧及许多远隔部位。结论：CSF-1/CSF-1R可能参与CNS缺血损伤的发生和修复过程。     

流行性出血热病毒在各种鼠类巨噬细胞和人外周血白细胞培养中的增殖

本文证实了流行性出血热病毒(EHF)在体外培养的长爪沙鼠、金黄地鼠、Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞和人外周血白细胞及单核细胞中的增殖。沙鼠和地鼠腹腔巨噬细胞对EHF病毒的敏感性要高于Vero-E_6细胞,而Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞的敏感性却低于其他三种培养的细胞。野鼠型EHF病毒(A_9株)和家鼠型EHF病毒(R_(22)株)在三种鼠腹腔巨噬细胞中的繁殖能力未见明显差异。在人外周血白细胞中,其单核细胞对EHF病毒(A_9株)的敏感性高于淋巴细胞。病毒感染单核细胞后4天的病毒滴度可达10~(-3.0)。以上结果说明EHF病毒在单核巨噬细胞中能繁殖和释放感染性病毒,这表明单核巨噬细胞在鼠、人体内EHF病毒感染的建立及病毒在体内扩散至各器官过程中可能起很重要的作用,即起其靶细胞和扩散媒介的作用。     

重组人GM-CSF/MCAF融合蛋白的构建及其体内外抗肿瘤研究

以单核细胞趋化激活因子(MCAF)作为导向效应细胞(单核细胞)到靶部位的因子,与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CFS)融合构建成细胞因子融合蛋白rhGM-CSF/MCAF.它分别保留各自较高的生物学活性及具有协同与增强功能.体外抗肿瘤试验表明,它激活单核细胞后能抑制多种肿瘤细胞的生长.裸鼠抗肿瘤试验同样显示明显的抑瘤效应,且优于rhGM-CSF.病理组织学检查提示这种抗肿瘤作用是通过将大量的单核细胞募集到肿瘤部位来实现的.     

单核细胞趋化蛋白-1与2型糖尿病大血管病变

单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1;MCP-1)属于炎症趋化因子CC亚族成员,它能趋化T淋巴细胞、单核细胞,诱导内皮细胞、单核细胞释放黏附因子,使单核/巨噬细胞向病变处聚集。这些免疫及炎症过程有可能导致2型糖尿病大血管病变的发生、发展。本文就单核细胞趋化蛋白-1促使动脉粥样硬化的机制、及其干预治疗,单核细胞趋化蛋白-1表达上调的影响因素,深入了解单核细胞趋化蛋白-1与2型糖尿病大血管病变的关系。     

甲状腺激素对氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞功能紊乱的影响

甲状腺功能减退症(甲减)患者的动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)及冠心病风险指数显著增加,但机制不清楚。巨噬细胞功能紊乱是促进AS斑块形成及发展的重要环节,本研究旨在探讨甲状腺激素对巨噬细胞功能的直接影响,为甲减相关AS的机制研究提供新思路。用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,建立体外巨噬泡沫细胞模型,并观察不同浓度甲状腺素(thyroxine,T4)对巨噬泡沫细胞功能的改善效应。分别采用MTT法、划痕实验、β-半乳糖苷酶染色实验检测巨噬细胞增殖、迁移功能及细胞衰老情况;ELISA法检测巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)情况;Western blot检测参与巨噬细胞增殖、迁移等过程的粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的磷酸化水平。结果显示:oxLDL可显著抑制巨噬细胞增殖和迁移、促进其衰老及分泌TNF-α、MCP-1和IL-1β,而T4可浓度依赖性逆转oxLDL对巨噬细胞上述功能的影响;oxLDL可使巨噬细胞磷酸化FAK蛋白表达上调,而T4可浓度依赖性降低FAK蛋白磷酸化水平。上述结果提示,T4可呈浓度依赖性地调控巨噬细胞增殖、迁移、衰老及炎性因子分泌等功能。     

人集落刺激因子-1(CSF-1)对常见呼吸道病毒的抑制作用

本文观察集落刺激因子-1(CSF-1)及其诱生剂:内毒素(LPS)、胞壁二肽(MDP)和干扰素(IFN-α)对下列病毒所致细胞病变的抑制,包括不同型别腺病毒5株,单疱病毒Ⅰ型和Ⅱ型,流感病毒A_3型,鼻病毒,ECHO11型各1株,在人胚肺传代细胞株上病变抑制的结果如下:对HSV-1、HSV-2、腺病毒6、11、22型,流感A_3型,鼻病毒。(CSF-1)和IFN-α,一样有明显抑毒效果,LPS MDP联合使用对以上病毒有明显增强抑毒作用。CSF-1和IFN-α的抑毒作用能分别被CSF-1和IFN-α的抗体所解除。 CSF-1在人胚肺传代细胞和人胚皮肤肌肉传代细胞上对VSV的抑毒效果在人胚肺细胞中效果比人胚皮肤肌肉细胞更明显。LPS10ng/ml作用48小时比作用24小时效果更强。LPS MDP和IFN-α对二种细胞都有同样高效的抑毒作用。     

影响人骨髓CFU-C产率某些因素的分析

在CFU-C(粒系或单核-巨噬细胞集落生成单位)体外琼脂培养中,只有在CSF(细胞集落生成刺激因子)的作用下粒系祖细胞才能增殖、分化,生长成为细胞集落。CSF来源广泛,其刺激活力文献报告不一。此外,CFU-C产率波动较大,影响因素甚多。本文在相同的实验条件下,比较了不同来源的CSF刺激活力,并对影响CFU-C产率的某些因素进行了分析。     

从反面利用G-CSF的癌增殖作用

日本中外制药公司和麒麟啤洒-三共公司最近进行粒状白细胞集落刺激因子(G-CSF)的临床试验,探讨它作为增强抗癌剂效果的增强因子的作用。这是从反面利用分化增殖因子的癌增殖作用。以前,因为担心癌增殖作用,所以在日本分化生长因子等迟迟不能进入临床试验。这次试验也许能成为生物技术医药开发的典型实例。 G-CSF和粒状白细胞巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素1～8、上皮细胞生长因子等体内的分化生长因子不仅有诱引正常细胞分化、增殖的作用,而且还有使某种癌细胞自     

恒河猴外周血单核巨噬细胞体外培养方法的建立

目的建立一种简单、经济、高效的培养恒河猴外周血单核巨噬细胞(monocyte-derived macrophage,MDM)的方法。方法用肝素钠抗凝管采集成年恒河猴(Macaca mulatta)全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于Cell BIND Surface的96孔(0.8×106个细胞/孔)或48孔培养板(3×106个细胞/孔)中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清(fetal calf serum,FCS)的RPMI 1640培养液培养24 h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7 d后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体(CD14)抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素(LPS)刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒(SIVmac17E-Br、SIVmac251)和人-猴嵌合体艾滋病毒(SHIV KU-1)感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数(85%)猴单核细胞能在24 h内贴壁,体外分化5~7d后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度(4%,8%或10%)猴自体血清或FCS的RPMI 1640培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

肺泡巨噬细胞的研究进展

肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AM)在维持肺部免疫系统稳态以及宿主防御的过程中扮演着重要的角色。起源于胚胎单核细胞的肺泡巨噬细胞依赖于粒细胞–巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)信号通路的调控进行自我更新。在生理条件下,肺泡巨噬细胞作为哨兵维持组织稳态。在炎症条件下,肺泡巨噬细胞可以由骨髓来源的造血干细胞补充,并且能够参与调节炎症反应过程。肺泡巨噬细胞在一些肺部疾病中发挥着重要的作用。该文就肺泡巨噬细胞的起源、发展、功能及其在一些肺部疾病中作用的研究进展作一综述。     

巨噬细胞在创伤修复中的作用

巨噬细胞在创伤修复中发挥着重要作用。当创伤发生后,循环单核细胞迁移到创伤局部并分化为巨噬细胞。在创伤修复的不同阶段,局部的巨噬细胞可以清除坏死细胞,促进细胞增殖、血管生成、胶原沉积和组织重塑。此外,巨噬细胞还会随着微环境的变化而发生表型和功能的改变,并且与其他细胞(主要是中性粒细胞)发生相互作用,最终完成组织修复。该文将对创伤修复中巨噬细胞的起源、极化及其与中性粒细胞的相互关系作一简要综述。     

巨噬细胞集落刺激因子与动脉粥样硬化

巨噬细胞集落刺激因子与动脉粥样硬化欧阳谦,周玫,陈瑗（第一军医大学自由基医学研究室,广州５１０５１５）关键词巨噬细胞集落刺激因子,氧化修饰低密度脂蛋白,动脉粥样硬化巨噬细胞集落刺激因子（ＭＣＳＦ）是一种多肽类激素样造血生长因子,可由单核细胞、巨噬细胞...     

白细胞介素18的生物学作用

白细胞介素 18(IL - 18)是新近发现的细胞因子 ,具有诱导 IFN-γ的产生 ,促进 T细胞的增殖 ,促进 Th1细胞的发育和增殖 ,增强 NK细胞及 Th1细胞的细胞毒性 ,增强粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)的产生 ,抗肿瘤效应 ,抑制 Ig E的生成以及破骨细胞的形成等多种生物学活性和作用