大鲵皮肤粘液多糖的提取及单糖组成分析北大核心CSCD

本文对大鲵皮肤粘液多糖的提取和单糖组分进行了研究。采用水提取、碱提取、酸提取及酶提取法从大鲵皮肤粘液提取粗多糖,通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法分析大鲵粘液多糖的单糖组分。结果表明:碱提取、酸提取、水提取、碱性蛋白酶及酸性蛋白酶提取物的总糖含量分别为4.23%、1.54%、1.81%、3.71%、2.19%;碱提取物的单糖组分为甘露糖(Man)、葡萄糖醛酸(Glc UA)、半乳糖醛酸(Gal UA)、氨基葡萄糖(Glc N)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal);酸提取物的单糖组分为Man、Glc UA;水提取物的单糖组分为Man、Glc UA、Gal;碱性蛋白酶提取物的单糖组分为Man、Glc UA、Glc N;酸性蛋白酶提取物的单糖组分为Man、Glc UA、Glc,表明不同提取工艺得到的粘液多糖的单糖组成存在差异。本文为大鲵皮肤粘液多糖的开发利用提供了依据。     

小刺猴头菌丝体多糖的结构研究

对小刺猴头过滤掉发酵液的发酵菌丝体,水提和碱提后获得的均一组分多糖HMP-w1.1和HMP-a1.1进行结构性质的研究。结果表明:HMP-w1.1是分子量为36.3 kD的α型吡喃糖,单糖组成为甘露糖(Man),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),岩藻糖(Fuc);HMP-a1.1是分子量为42.8 kD的β型吡喃糖,单糖组成为甘露糖(Man),半乳糖醛酸(GalUA),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),岩藻糖(Fuc)。综合高碘酸氧化和Smith降解的试验结果,推断HMP-w1.1的糖苷键构型可能为1→、1→4、1→4,6、1→6、1→2、1→2,6;HMP-a1.1的糖苷键构型可能为1→6、1→2、1→2,6。     

高效液相色谱法测定金钱菇多糖的单糖组成

采用高效液相色谱法,测定金钱菇多糖的单糖组成.用超声辅助提取金钱菇多糖,通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)衍生水解后的单糖,高效液相色谱法检测衍生物.结果表明：金钱菇多糖由甘露糖(Man)、核糖(Rib)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)组成,其摩尔为1．00∶0．90∶0．91∶28．03∶1．58∶0．11.该方法快速、简便、重现性好,可用于测定金钱菇多糖的单糖组成.     

枸杞多糖的提取纯化及组成分析

采用水提法从枸杞中提取分离枸杞多糖(LBP)用DEAE纤维素柱色谱和凝胶柱色谱进行分离纯化,采用GPC-LLS法、红外光谱和气相色谱等方法对其组成进行研究。结果表明LBP含有3个级分,LBP的分子质量约为1.497×105,由阿拉伯糖(Ara),鼠李糖(Rha),木糖(Xyl),甘露糖(Man),半乳糖(Gal)和葡萄糖(Glc)6种中性单糖组成。     

人工栽培灵芝中多糖的部分理化性质及免疫调节作用

【背景】灵芝是一种广受关注的药食两用真菌,在中国作为传统药材和健康食品已有几千年历史,近年来中国人工栽培灵芝规模扩展迅速,而多糖被认为是灵芝中最主要的活性成分。【目的】分离和纯化人工栽培灵芝子实体多糖,并对其结构和免疫调节活性进行研究。【方法】采用水提醇沉法提取灵芝子实体多糖(GLP),采用DE-52纤维素柱和Sephadex G-100进行多糖的分离纯化,高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡啶啉酮(PMP)柱前衍生法测定单糖组成,红外光谱进行结构分析,噻唑蓝(MTT)比色法测定多糖对小鼠脾细胞增殖的影响,同时评价其对RAW 264.7细胞吞噬能力和细胞因子分泌能力的促进作用。【结果】GLP平均分子量为1.93×10~4 Da,单糖组成包含葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)及甘露糖(Man),占比为Glc:Gal:Man=3.3:1.3:1.0。红外光谱显示,GLP的异头碳为β构型。GLP能直接促进脾细胞的增殖,且能显著增强刀豆蛋白A(Con A)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖。此外,对于RAW 264.7细胞的吞噬能力及细胞因子分泌具有一定的促进作用。【结论】灵芝多糖可作为一个潜在的免疫调节药物而开发利用。     

宁夏不同地区灵武长枣果实多糖的单糖成分分析

以宁夏4个不同地区(灵武、中宁、青铜峡、银川)成熟期的灵武长枣果实为研究对象,经水提醇沉法提取,采用DEAE-cellulose52和HW-55S分离纯化,并利用GC-MS法进行多糖的单糖组成分析。结果表明:多糖提取率最高的是灵武地区,达到1.795%;分离纯化后,4个地区的长枣多糖各得到1个中性(Ju-0)和3个酸性组分(Ju-1、Ju-2、Ju-3),其中Ju-2含量最高;GC-MS分析可知灵武长枣多糖含有阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸10种单糖,不含果糖,以阿拉伯糖、核糖、半乳糖和2种糖醛酸为主,木糖含量最低。各地区多糖的单糖组成、含量各不相同,从各组分来看,四个地区多糖的Ju-0和Ju-1组分组成均以阿拉伯糖、核糖、半乳糖为主,四个地区多糖的组成差异主要在于Ju-2和Ju-3组分。从各地区单糖总量来看,灵武地区是阿拉伯糖含量最高,中宁、青铜峡、银川地区以葡萄糖醛酸含量为最高。     

不同溶剂分级提取的茶多糖的组成及降血糖活性

比较绿茶中不同溶剂分级提取的茶多糖的得率、含量、单糖组成及降血糖活性的差异,以从茶叶中分离出高活性的茶多糖.粗老绿茶采用去离子水低温提取茶叶中的水溶性多糖TPSⅠ,水不溶性多糖先用草酸铵提取其果胶类多糖TPSⅡ,再用碱提取,所得到碱提取液回调至pH中性后可溶解部分为碱溶性多糖TPSⅢ,并分析其得率、含量、采用气相色谱和离子色谱分析了其单糖组成,通过四氧嘧啶腹腔注射造成高血糖模型,连续灌胃茶多糖12 d,对比研究两种茶多糖的降血糖活性.并比较复合纤维素酶提取与去离子水提取在得率、含量、单糖组成及其降血糖活性的差异.TPSⅠ单糖组成以鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸为主;TPSⅡ以半乳糖和半乳糖醛酸为主;TPSⅢ以阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖为主.降血糖活性顺序为:TPSⅠ＞TPSⅢ＞TPSⅡ,但TPSⅠ得率最低.复合纤维素酶提取的多糖得率、糖醛酸提取率比热水提取的多糖高1.53倍和1.42倍.酶提茶多糖较水提茶多糖降血糖效果更明显些.表明茶叶中水溶性多糖降血糖活性最好,复合纤维素酶提取可以提高其得率,增强其活性.     

红果参果实多糖的提取及其单糖组分研究

用超声波法提取红果参果实的多糖,并分别以乙醇提取,乙酸乙酯、sevage试剂等进行纯化,以苯酚-硫酸法测定多糖含量,以GC-MS测定其单糖组分。结果表明,红果参果实中多糖含量高达45.80%,其主要单糖组分及百分比为阿拉伯糖(5.00%)、木糖(9.65%)、甘露糖(11.55%)、果糖(30.20%)、半乳糖(33.85%)。     

虫草多糖的分离、纯化和初步药效活性研究

以虫草发酵菌丝体为原料提取虫草多糖并对多糖进行结构鉴定和初步药效活性研究。采用水提醇沉和离子交换纤维素进行分离得到两种虫草多糖,HPLC测定相对分子质量,紫外光谱、红外光谱、部分酸水解、甲基化分析和高效液相色谱等方法研究单糖组成及连接方式,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测虫草多糖的活性。经分离得到中性（CPSl）、酸性（CPS2）两种成分,相对分子质量分别为2．56×10^4,9．91×10^;单糖组成：CPSln,（葡萄糖）：n（甘露糖）：n（半乳糖）：n（阿拉伯糖）=46：36：18：l;CPS2／n,（葡萄糖）：n,（甘露糖）：n（半乳糖）：n（半乳糖酸）：n（木糖）：n（阿拉伯糖）：n（鼠李糖）=30：25：14：4：3：3：1。红外谱揭示均含-a-键。CPSl主链含（1→6）糖苷键的高度分支的葡甘露半乳聚糖,另有少量葡萄糖分支点在2,3,4位。CPS2主链含葡萄糖（Glc）、甘露糖（Man）、半乳糖（Gal）,分支点主要在3位,侧链含多种单糖。CPSl和CPS2都对顺铂（CDDP）损伤的vero细胞有一定保护作用。     

白囊耙齿菌多糖结构及抗肾小球系膜细胞的增殖活性研究

为表征白囊耙齿菌多糖结构并筛选出具有抗肾小球系膜细胞(GMC)增殖作用的活性多糖,研究活性多糖对GMC异常增殖及细胞外基质分泌的影响。实验采用碱提醇沉法提取粗多糖(PC),经离子交换色谱柱纯化、SePhadex G-50凝胶柱分离得到耙齿菌多糖PCP-1、PCP-2。通过苯酚硫酸法、BCA法等测定其含量,甲基化,IR分析进行结构表征。采用MTT法、ELISA法考察对GMC增殖的影响。结果表明,PCP-1和PC-2的总糖含量分别为98.05%、96.92%,酸性糖及蛋白质含量几乎为零; PCP-1主要由Man、Glc和Gal组成,具有多分枝结构,包含吡喃糖类型的结构,具备α和β两种构型;而PCP-2仅由Glc组成,没有分支,为α-构型吡喃聚糖。具有抗GMC增殖活性的均一多糖为PCP-1,可保护LPS诱导的GMC增殖,减少LN、FN蛋白的释放。     

不同种源的太子参多糖含量及其单糖组成GC-MS研究

研究不同种源太子参多糖含量以及单糖组成差异,为太子参质量评价和临床用药提供参考依据,采用水提-醇沉法提取太子参多糖,以葡萄糖为标品,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。盐酸甲醇水解、三甲基硅烷(TMS)柱前衍生、气-质联用法(GC-MS)分析不同种源太子参多糖的单糖组成。结果表明,组培太子参与野生太子参多糖的含量分别为19.05±1.38%、22.63±2.18%;不同种源太子参多糖均由葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖七种单糖组成,但单糖的比例明显不同。如以多糖含量为标准,野生太子参多糖含量高于组培太子参,品质更佳;多糖中单糖比例不同,提示不同种源的太子参多糖结构可能存在不同。     

新疆雪莲水溶性多糖的分离纯化及组成分析

为合理利用雪莲提供一定依据,对新疆天然雪莲进行多糖提取分离纯化.新疆天然雪莲经热水浸提,乙醇沉淀得粗多糖.粗多糖经Sevage法和酶法联合脱蛋白,酸性乙醇分级,得初步纯化的多糖XL1,XL2,XL3.其中XL3经DEAE-SephdexA25分离纯化得纯化多糖XL31.XL31经检测为纯多糖.气相色谱分析表明新疆天然雪莲多糖XL1,XL2,XL3和XL31均为Ara、Rha、Xyl、Gal、Glc、GalA六种单糖组成的酸性杂多糖,但单糖的摩尔比不同.     

东北红豆杉多糖的化学研究

利用水提醇沉提取东北红豆杉多糖TP,经超滤得到超滤外液TP-1和内液TP-2。TP-2进行部分酸水解和凝胶柱层析分离纯化,得到TP-2-1a。通过对理化性质、分子量、单糖组成和甲基化测定结果分析,确定其分子量分布在7.0 kDa左右,糖组成由Rha、Man、Gal、Glu、GalA和GlcA构成,摩尔比为:16.9∶1.0∶15.5∶1.3∶9.9∶2.5,中性糖以Gal的1→3、1→4连接为主,在1→3连接的O-6位上有分支;Rha以1→2连接为主,在O-4位上有分支;Man以1→4、1→6连接为主;Glu以1→3、1→4连接为主;非还原末端主要是Gal及少量的Man、Glu和Rha。酸性糖以1→4连接GalA为主,无分支。该多糖为首次从东北红豆杉中分离得到。     

欧李多糖的制备、结构表征及免疫调节活性研究CSCD

欧李富含钙素,营养丰富,且具有免疫功能,研究欧李多糖的制备、结构及免疫调节活性,可为欧李深加工提供基础。本文以欧李为原料,采用水提醇沉法提取欧李多糖(Cerasus humilis polysaccharide,CHP),利用响应面法优化提取工艺。对提取的欧李多糖用DEAE-52纤维素层析柱、G-100葡聚糖凝胶柱纯化。用高效液相色谱、凝胶渗透色谱和红外光谱对欧李多糖结构表征,并测定欧李多糖的免疫调节活性。结果表明,欧李多糖最佳提取工艺条件为提取温度79℃,提取时间2 h,液料比16∶1(mL/g)。在此条件下,欧李干粉多糖得率为(32.18±0.08)%。纯化后欧李多糖主要有CHPP-1和CHPP-2两个组分,CHPP-1、CHPP-2中多糖含量分别为99.16%和99.33%。CHPP-1的单糖组成及摩尔占比为阿拉伯糖∶半乳糖醛酸∶葡萄糖=51.4∶20.29∶17.36,分子量为47.26 kDa。CHPP-2的单糖组成及摩尔占比为阿拉伯糖∶半乳糖醛酸∶葡萄糖=41.81∶28.24∶11.68,分子量为22.94 kDa。两个组分均为吡喃环型多糖。CHPP-2可显著增强巨噬细胞增殖活性,有效刺激细胞释放NO和TNF-α、IL-6及IFN-β。欧李多糖含量丰富,且具有较强的免疫调节活性。     

香水莲花多糖的提取分离及结构测定

依次采用水提醇沉及十六烷基三甲基溴胺盐(CTAB)沉淀法得到香水莲花酸性多糖(ADT),利用萄聚糖凝胶Sephadex G-150进行柱层析,得到了主要组分ADT-Ⅱ,高效凝胶色谱法测定其分子量为2.758×105Da;ADT-Ⅱ的酸水解产物经过薄层层析、高效液相色谱法、13CNMR分析,结果表明ADT-Ⅱ的单糖组成是以甲酯化的半乳糖醛酸为主,同时还含有少量的半乳糖和甘露糖。     

姬松茸菌丝体中各组分多糖的抗肿瘤免疫活性

对深层发酵培养的姬松茸菌丝体依次采用热水、冷碱、热碱提取,得到了四种主要的多糖组分。其中冷碱提取的水不溶性多糖(CAASP)得率最高,达8.5 8g/ 10 0g干菌,且不同的多糖组分具有不同的单糖组成。其中热水提取的水溶性多糖(HWSP)及冷碱提取的水溶性多糖(CAWSP)在2 0mg/kg·d的剂量下对小鼠S180 移植瘤显示出较高的抗肿瘤活性,抑瘤率分别高达5 9.84 %和6 4 .6 6 %。同时发现在四种多糖在发挥抗肿瘤作用过程中,小鼠的脾脏指数和胸腺指数有不同程度的提高。并且各多糖活性组分在体外均具有显著的刺激脾淋巴细胞增殖的作用     

苦瓜多糖的提取、分离纯化及组成性质

正交实验确定提取工艺后,用热水提取法得到苦瓜多糖(MCP).对MCP进行DEAE-32离子交换层析分离,得到3个多糖组分MCP1、MCP2和MCP3. 进一步采用Sephacryl S-400凝胶层析进行分离,经凝胶层析和高效液相色谱检测表明,MCP1、MCP2为均一性多糖组分.通过高效液相凝胶色谱法测定了两者的相对分子质量分别为1.16×106和7.45×105.用PMP衍生化法测定其单糖,结果表明: MCP1系由Man、Rham、GlcUA、GalUA、Glu、Gal、Xyl、Ara等单糖组成的杂多糖,摩尔比为1.03:2.93:1.00:14.95:2.16:30.70:2.85:4.50.MCP2系由Rham、GalUA、Gal、Xyl、Ara等单糖组成的杂多糖,对应的摩尔比为1.63:21.88:4.66:1.00:1.29.紫外光谱表明该多糖不含蛋白质和核酸.     

金顶侧耳酸提水溶性多糖的研究——PC-3的分离、纯化与结构确定

金顶侧耳(Pleurotus citrinopileatus)子实体的3%三氯乙酸提取液经甲醇分级,十六烷基三甲基溴化铵等进一步提纯得到水溶性多糖PC-3。经Sepharose CL-4B柱层析,醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,PC-3为均一级份。G.C.与P.C.分析表明,Gal、Man为该多糖的组份,其单糖摩尔比为2.5∶1.0。PC-3的分子量约为67000,比旋光度[α]_D~(18°)=+28°。经核磁共振谱等分析,PC-3不含β型糖苷键。部份酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、完全甲基化、G.C.及G.C.-M.S.的分析表明,PC-3是由α(1→6)糖苷键相连的半乳糖构成分子的主链,部分残基C_2上带有分支,每5个Gal残基带有1个侧链,侧链为α(1-2)Man-α(1-2)Man。     

蹄叶槖吾叶多糖提取工艺优化及单糖组成研究

采用水提醇沉法提取蹄叶槖吾叶粗多糖,通过单因素试验和Box-Benhnken法优化该多糖的提取工艺。结果表明:蹄叶槖吾叶粗多糖的最佳提取工艺为:料液比1∶20(g/m L)、提取温度90℃、提取时间2 h、提取3次,提取率为8.76%;通过红外光谱扫描检测其特征基团,并应用高效液相色谱技术对已脱除蛋白的多糖结构进行初步鉴定,得到其单糖组成为半乳糖醛酸∶鼠李糖∶半乳糖∶阿拉伯糖∶甘露糖∶葡萄糖∶葡萄糖酸∶岩藻糖=43.5∶6.0∶23.6∶11.5∶6.3∶5.4∶1.6∶0.9。     

米胚多糖的组成及抗氧化性研究

为了研究米胚多糖的单糖组分、氨基酸及抗氧化性,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱法测定米胚多糖的单糖组分;通过氨基酸自动分析仪检测米胚多糖中的氨基酸。结果表明:米胚多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖组成,其物质的量比为0.90∶4.62∶2.02∶1.52∶35.30。米胚多糖检测出17种氨基酸,总氨基酸含量为2.01%。米胚多糖对DPPH自由基清除率为43.03%,对超氧阴离子自由基的清除率为47.84%,对羟自由基清除率为64.12%;还原力随浓度的增加而增强。米胚多糖可提高小鼠血清及组织中的SOD、T-AOC、GSH-Px活性,降低MDA含量。米胚多糖在体外和体内均具有一定的抗氧化性。