响应面法对青稞红曲中两种Monacolin K的提取工艺优化北大核心CSCD

优化青稞红曲中两种Monacolin K的提取工艺,并建立其含量测定方法。在单因素试验基础上,利用Box-Benhnken中心组合试验及响应面分析法确定优化提取工艺,结合HPLC法以ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水(60∶40,v/v)为流动相,1.0 m L/min为流速,在238 nm处测定两种Monacolin K含量。所建立测定两种Monacolin K含量方法,线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率试验结果良好,最佳工艺条件为:提取溶剂纯甲醇,提取温度60℃,液固比20∶1 m L/g,超声提取1 h,酸型与内酯型Monacolin K得率分别为2.51 mg/g和1.65 mg/g,经验证所得模型方程能较好地预测实验结果。     

紫色红曲霉Mp-24高产Monacolin K发酵工艺响应面优化

将单因素实验结果与响应面法相结合,对高产Monacolin K的紫色红曲霉Mp-24菌株进行发酵工艺条件优化。通过摇瓶发酵对碳源、氮源、碳源含量、氮源含量、培养时间等进行单因素优化,确定Mp-24菌株摇瓶发酵适宜条件：乳糖为碳源、酵母膏为氮源、碳源含量7%、氮源含量2%、培养时间12 d,Monacolin K产量为167 mg/L。应用Box-Behnken中心组合试验设计建立数学模型,进行响应面分析优化发酵条件,结果显示最佳发酵工艺条件为：碳源(乳糖)8%,氮源(酵母膏)3%,培养时间11 d,在此条件下Monacolin K的含量达到247.8 mg/L,比优化前提高1.5倍。     

慈竹竹叶抗氧化活性成分的提取工艺研究

慈竹资源丰富,慈竹叶提取物为天然无毒的植物抗氧化剂。为有效地开发和利用慈竹叶资源,研究了慈竹叶抗氧化活性成分的提取工艺。通过单因素试验考察了提取溶剂乙醇浓度、样品粒度、提取方式、提取时间、料液比、提取温度、提取次数7个因素对慈竹竹叶抗氧化活性成分得率的影响。基于单因素试验结果,进一步运用L9(34)正交设计试验优化慈竹竹叶抗氧化活性成分的提取条件,并确定最佳提取工艺:20~28目竹叶粉末,70℃下,料液比为1∶10(g/m L),以60%乙醇静置提取1.5 h。验证试验确定此工艺稳定可行,可从1 g竹叶粉末中提取得到7.44 mg抗氧化活性成分。含量测定结果表明1 g竹叶粉末中含有总酚4.73 mg,总黄酮5.52mg。     

高产莫纳可林K低产桔霉素红曲霉菌株的筛选和发酵条件初步优化

采集全国各地红曲霉制品中的红曲霉资源,经分离获278株红曲霉菌株。高效液相色谱(HPLC)法测定各菌株发酵液中莫纳可林K(Monacolin K)和桔霉素含量,筛选获1株Monacolin K产量较高、桔霉素含量较低的红曲霉菌株编号为M-22。依据形态特征和ITS基因序列,参照红曲霉属分类检索表,鉴定M-22菌株为紫色红曲霉(Monascus purpureus)。通过摇瓶发酵对温度、初始pH、碳源、氮源、碳氮比(C/N)等因素进行优化,确定M-22菌株摇瓶发酵产Monacolin K适宜条件为发酵温度26℃、初始pH 5.0、转速160 r/min,甘油为碳源、蛋白胨为氮源、碳氮比(C/N)为5:1,Monacolin K产量显著提高,最高为107.16 mg/L。以优化的发酵条件对M-22菌株进行5 L发酵罐发酵,发酵液中Monacolin K产量最高为189.83 mg/L,桔霉素含量32.53μg/L,红曲色素色价为16.38 U/m L。     

火棘不可萃取多酚的提取工艺优化及抗氧化研究

采用响应面法优化了火棘不可萃取多酚(non-extractable polyphenol,NEPP)的提取工艺,分析了火棘中可萃取多酚(extractable polyphenol,EPP)和不可萃取多酚分别占总酚(total polyphenol,TEPP)的比例,同时监测了NEPP萃取液的抗氧化能力。以NEPP得率为评价指标,采用Folin-Ciocalteu法测定NEPP含量。考察了乙醇浓度(%,v/v)、乙醇占乙醇-硫酸提取液的比率(%,v/v)、料液比(g/m L)、提取时间(h)及提取温度(℃)对火棘NEPP得率的影响。进一步通过Box-Behnken设计优化提取工艺,同时以ABTS及FRAP法对NEPP提取液的抗氧化能力进行测定。最佳提取工艺为:提取时间2.68 h,乙醇浓度94.44%(V/V),温度83.47℃,NEPP萃取量可达167.328 mg/g,EPP 40.4 mg/g。响应面模型优化火棘NEPP提取工艺结果可靠,NEPP占火棘TEPP比重较高,为80.55%,ABTS及FRAP抗氧化能力均与NEPP含量呈良好正相关性。     

板桥党参多糖提取工艺优化及对肝癌细胞HepG 2的抑制

本文采用星点设计—效应面优化法和正交设计优化板桥党参多糖的提取工艺,并对两种工艺进行比较,同时初步考察了板党多糖对肝癌细胞Hep G2细胞的细胞毒作用。本实验的两种方法均以粗多糖得率为因变量,以液料比、提取时间、提取温度为自变量对提取工艺进行系统考察。星点设计优选的最佳工艺为提取时间154.6 min,料液比1∶12.3(m/v),提取温度91.5℃,板党多糖得率为(18.67±1.23)%;正交设计优选的最佳工艺为料液比1∶12(m/v),提取时间3.0 h,提取次数2次,板党多糖提取率为(15.49±1.36)%;板党多糖对Hep G2细胞细胞毒作用采用噻唑蓝(MTT)法进行检测,结果 24 h抑制Hep G2细胞的IC_(50)值为346.322μg/m L,48 h IC_(50)值为325.609μg/m L。同时检测了板党多糖对Hep G2细胞的凋亡诱导作用,结果显示浓度为400μg/m L时对细胞的凋亡诱导作用最强。实验结果表明两种实验设计方法所优化工艺条件基本相近,但是星点设计—效应面优化法精度更高,可用于指导制剂生产;细胞毒作用的结果表明板党多糖具有抑制Hep G2细胞增殖的能力。     

粗柄羊肚菌菌丝体多糖及胞外多糖的提取工艺

为了研究粗柄羊肚菌菌丝体多糖及胞外多糖的最佳提取工艺条件,采用超声波提取菌丝体多糖、菌丝体发酵液浓缩提取胞外多糖的方法。通过单因素试验和L9(34)正交试验设计,探讨二者的最佳提取工艺条件。研究结果表明菌丝体多糖的最佳提取工艺条件:料液比1∶20(g∶m L),超声波处理温度70℃,超声时间20 min,超声提取次数2次;胞外多糖的最佳提取工艺条件:浓缩倍数1∶5,浓缩温度50℃,醇沉浓度95%,p H为6。该项工艺研究得到菌丝体粗多糖平均含量56.761 2 mg/g,胞外多糖平均含量1.275 4 mg/m L,多糖产量稳定,且此试验方法稳定可行。     

新疆石榴皮多酚的提取及其对酪氨酸酶的抑制作用

优化新疆石榴皮多酚的提取工艺,并研究石榴皮提取物对酪氨酸酶的抑制作用。采用超声波辅助法提取石榴皮多酚,通过单因素试验和正交试验确定其最佳提取工艺条件:丙酮体积分数70%、超声波功率200 W、提取温度40℃、料液比1∶35 g/m L、提取时间50 min、提取2次,在此条件下石榴皮多酚得率为23.77 mg/g。同时测定了石榴皮多酚提取物对蘑菇酪氨酸酶的抑制活性,石榴皮多酚提取物质量浓度在12 mg/m L时,对酪氨酸酶活力的相对抑制率为44.05%。该研究为从石榴皮中提取天然酪氨酸酶抑制剂提供了实验依据。     

响应面法优化合萌总黄酮提取工艺

目的:利用响应面法优化合萌中总黄酮的提取工艺条件。方法:通过单因素试验分别考察提取时间、乙醇体积分数、液固比、提取温度及提取次数对合萌总黄酮得率的影响,并选取提取时间、乙醇体积分数、液固比、提取温度为影响因子,应用响应面法优化提取工艺。结果:合萌总黄酮的最佳提取条件为:提取时间60 min,乙醇浓度65%,液固比(g∶m L)25∶1,提取温度90℃,在此条件下,合萌总黄酮得率为4.08 mg/g,接近模型预测值4.11 mg/g。结论:响应面法在一定程度上可以提高合萌总黄酮得率,表明响应面法用于合萌总黄酮提取工艺的优化具有可行性。     

竹柏叶总黄酮不同提取方法比较

本研究采用正交试验设计分别优选回流提取和超声波提取竹柏叶总黄酮的最佳工艺条件。在单因素试验的基础上,以总黄酮得率为参考指标,选取液料比、乙醇体积分数、温度和时间4个影响因子,进行正交试验,分别确立回流提取和超声波提取最佳提取工艺条件。结果表明,回流提取优化工艺条件为:液料比30∶1(m L∶g),乙醇体积分数为70%,回流时间1.0 h,回流温度80℃;超声波提取优化工艺为:液料比25∶1(m L∶g),乙醇体积分数为70%,超声时间30 min,超声水浴温度60℃。两种提取方法的最终提取效果比较,回流提取的总黄酮得率为15.522%,超声波提取总黄酮得率为13.637%,回流提取法总黄酮得率高于超声波提取法。本实验结果为后续竹柏叶总黄酮的开发利用提供了参考。     

假蜜环菌发酵工艺的优化研究

目前,国内普遍采用亮菌固体发酵工艺生产亮菌制剂。采用小型发酵罐液体深层发酵和液体静置发酵对亮菌发酵工艺进行优化研究。液体深层发酵采用28℃,200 r/min,通气量1∶1 v/v·m,培养7 d,亮菌干重为16.55g/L,其中菌丝体中多糖含量为5.42%,蛋白含量为1.75%;液体静置发酵采用500 mL三角瓶,28℃,150 r/min,摇瓶3 d后静置发酵14 d,亮菌干重可达10.69 g/L,发酵液中多糖含量为1.016 g/L,蛋白含量为0.320 g/L。对液体静置发酵进一步研究发现其发酵液中亮菌甲素含量可达3.118 mg/L。由此可见,两种发酵方式在保证生物量和活性成分的前提下,缩短了发酵周期,均优于传统的固体发酵工艺,值得工业生产借鉴。     

紫山药色素的提取工艺及抗氧化性能研究

研究紫山药色素的最佳提取工艺及其抗氧化性能。在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验法,以pH示差法测定花色苷得率为考察指标,优化了溶剂提取法提取紫山药色素的工艺参数。通过DPPH体系测定该色素清除自由基能力。试验结果表明:紫山药色素属于花色苷类物质,优化的紫山药色素提取条件为:提取温度60℃,提取时间80 min,料液比1∶30,提取溶剂为0.5%盐酸乙醇溶液,提取液花色苷含量可达2.075mg/鲜紫山药g。紫山药色素提取液清除DPPH自由基的IC50为98.14μg/mL。紫山药具有开发功能性色素的潜力。     

石韦中绿原酸的提取工艺优化及含量分析

通过正交试验,以绿原酸提取率为指标,对石韦中绿原酸的提取工艺参数进行优化,建立石韦中绿原酸的最佳提取方法。并在此优化条件下,对不同石韦药材中的绿原酸含量进行分析。石韦中绿原酸的乙醇提取最佳工艺参数组合为:乙醇浓度50%,超声时间60 min,料液比1∶12(g∶m L),超声温度80℃。这为中药石韦的合理开发和利用提供依据。     

油橄榄鲜果中多酚提取工艺优化及不同成熟度含量变化分析

利用响应面法优化油橄榄鲜果多酚的提取工艺,并测定8个油橄榄品种5个成熟度的多酚含量。在单因素试验结果的基础上,以料液比、超声温度和超声时间为自变量,以油橄榄鲜果中多酚的提取量为响应值,利用Box-Benhnken中心组合设计三因素三水平试验,运用响应面法优化提取条件,确定最佳提取工艺为料液比1∶22(g/m L)、超声时间30 min、超声温度47℃。经验证,多酚的平均提取量为6.8145 mg/g,与理论值的相对误差为1.35%。说明模型拟合度好,提取工艺稳定可行,具有实用价值。油橄榄鲜果多酚含量因品种不同而有差异,在总体变化趋势上,多酚含量在第一成熟度最高,之后随着成熟度增加逐渐下降,在第三成熟度达到最低,之后略有增加,最终趋于相对稳定。     

超高效液相色谱法测定万寿菊悬浮培养细胞中的叶黄素

建立了超高效液相色谱快速测定万寿菊悬浮培养细胞中叶黄素的方法。样品冷冻干燥后,经甲醇溶液提取,采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,柱温为25℃。以乙腈-甲醇(90∶10,v/v)(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 m L/min。进样体积为5μL,检测波长为448 nm。在1.56~25 mg/L范围内,叶黄素的色谱峰面积与质量浓度之间具有良好的线性关系。采用该方法测定了实际样品中叶黄素的含量,并进行了3个水平的加标回收试验,其回收率为102%~105%,相对标准偏差(n=5)为0.11%~1.19%。该方法快速、操作简单,适合于分析植物培养细胞中叶黄素的含量和产率。     

高效液相色谱法测定食品中姜黄素类化合物检测方法的建立

建立高效液相色谱法测定食品中姜黄素类化合物含量的分析方法。利用单因素试验,对食品中姜黄素类化合物的提取试剂、提取方式、提取时间进行选择,确定最佳提取条件为甲醇振荡提取5 min。色谱条件：YMCTM C30色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（80∶20,v/v）,用磷酸调节pH 到3.0,流速1 mL/min,检测波长420 nm,柱温30 ℃。结果表明：3种姜黄素类化合物在0.10~10.00 μg/mL内与峰面积有良好线性关系,生姜和咖喱中3种姜黄素类化合物的平均回收率分别为87.86%~107.35%和87.08%~107.47%,RSD均小于5%,3种姜黄素类化合物含量的相对标准偏差（RSD）均小于5%。该方法简单可行、重复性好、准确度高,可广泛用于食品中姜黄素类化合物含量测定。     

五爪龙外敷液中芹菜素与槲皮素的HPLC测定

本实验建立芹菜素与槲皮素的HPLC检测法,同时测定草药五爪龙外敷药液中芹菜素与槲皮素的含量。采用反相shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),优化条件为:柱温30℃,流动相:甲醇-0.4%磷酸(50∶50,v∶v);流速:1.0 mL/min;检测波长:360nm;进样体积10μL。对草药五爪龙外敷药液中芹菜素与槲皮素的含量进行测定。结果表明:芹菜素与槲皮素均在60~300μg/mL的范围内线性关系良好,r分别为0.9998与0.9996,草药五爪龙乙醇浸液较水煎煮液中芹菜素与槲皮素含量均高。本法方便、快速、准确,可检测草药五爪龙外敷液中的芹菜素与槲皮素的含量。     

酶水解制备山药皮可溶性膳食纤维及性能测定

本研究以山药皮为原料研究纤维素酶法制备可溶性膳食纤维工艺条件,研究考察了料液比、加酶量、提取时间、提取温度、醇沉时间等因素,确定最佳工艺条件为:料液比1∶30、酶添加量4 U/m L、提取时间2 h、提取温度50℃,醇沉时间4 h。通过响应面法对工艺条件进一步优化,确定料液比1∶35,酶添加量5 U/m L,温度48℃时,SDF制备率最高达22.87%,较初始SDF含量7.96%提高近3倍。同时对制备的SDF性能进行测定,其持水性可达到10.74 g/g,溶胀力为6.45 m L/g,具备了一定的工业应用潜力。     

王不留行刺桐碱提取工艺的比较研究

本实验采用高效液相色谱(HPLC)法检测王不留行刺桐碱含量为评价指标,分别采用单因素试验法和正交试验法对水浴回流提取和超声提取对王不留行刺桐碱的提取工艺进行比较。结果表明:超声提取王不留行刺桐碱的最佳工艺参数为液固比10∶1 mL/g,60%乙醇在350 W功率、80℃下提取40 min,在该工艺条件下王不留行刺桐碱含量为0.395 mg/g;水浴回流提取王不留行刺桐碱的最佳工艺参数为乙醇浓度75%,提取温度95℃,提取时间2 h,液固比12∶1 mL/g时,王不留行刺桐碱含量为0.345 mg/g。超声提取王不留行刺桐碱的提取效率、稳定性和重复性都优于水浴回流提取法。     

水溶性红曲中MonacolinK的稳定性

对红曲中Monacolin K（MK）在水溶液中的稳定性进行研究,考察不同加热温度、时间、pH、盐、维生素C（VC）、氨基酸、蔗糖质量浓度、光照和存放时间对其稳定性的影响。结果表明：100℃保温30min,水溶液中Monacolin K的浓度比20℃保温相同时间仅下降了4．6％。热处理、长时间光照对水溶液中Monacolin K有轻微的破坏作用：pH〈5．0,盐、VC、氨基酸的添加可降低水溶液Monacolin K溶解度。pH〈4．0可使酸型Monacolin K转化为内酯型。在Monacolin K水溶液中添加30g/L蔗糖可使水溶液中Monacolin K饱和质量浓度增至632．9mg／L。