LLS培养基的研制及其效果考核

本文采用含量在98.8%的食用赖氨酸和十二烷基硫酸钠代替脱氧胆盐,研制了乳糖赖氨酸十二烷基硫酸钠琼脂培养基(LLS),通过对分离出的168株沙门氏菌的生化试验、肠杆菌科分属噬菌体裂解试验和血清学分型,结果证明LLS培养基分离沙门氏菌的检出率较高(达76.2%),成本低廉(每个平板为0.04元)适于推广使用的一种肠道致病菌分离用的培养基。     

粗制猪胆盐枸橼酸钠培养基对分离痢疾杆菌的实效

分离痢疾杆菌的培养基种类很多,但阳性检出率还不令人十分满意。其原因是多方面的,其中选择最适合的培养基尤为重要。目前3号胆盐S.S.琼脂及去氧阻酸钠—牛胆酸钠琼脂较满意。为了摸清痢疾菌型分布和探讨粗制猪胆盐枸橼酸钠培养基的实用效能,我站曾于1965年6—12月试用粗制猪胆盐枸橼酸钠培养基(简称猪胆盐培养基)和伊红美蓝培养基比较,     

胆盐水解酶产生菌的筛选及其益生潜力研究

目的从健康仔猪肠道及粪便中筛选具有胆盐水解酶活性的优良益生乳杆菌菌株,并对筛选菌株的体外、体内益生潜力进行初步探讨。方法用MRS培养基分别从仔猪新鲜粪便和小肠黏膜分离培养乳酸菌,用筛选鉴别培养基筛选阳性菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性。结果从粪便和小肠黏膜共得到乳酸菌388株和97株,其中胆盐水解酶阳性菌株分别为291株(75%)和86株(89%)。选择5株胆盐水解酶活性最强、能水解游离胆酸的菌株,研究菌株的抗逆能力、黏附特性以及体内益生活性,并对最终选育得到的菌株进行生理生化及16S rRNA分子鉴定,发现菌株罗伊乳杆菌G22-2能耐受pH 3.0的酸度、1.0%的胆盐浓度,在小肠上皮细胞上的黏附效率超过15个以上;通过大鼠体内实验,筛选出的菌株G22-2对大鼠无毒无害,并能显著改善血脂水平。结论罗伊乳杆菌G22-2符合益生菌的要求,可以作为产胆盐水解酶的益生乳杆菌优良的候选菌株。     

应用不同方法检测食品中大肠菌群结果的比较

评价检测食品中大肠菌群不同方法。比较国家标准、行业标准和显色培养基检测方法检测大肠菌群结果的差别。国家标准和行业标准检测结果基本一致,但有差异,应用显色培养基检测大肠菌群优于目前使用的国家标准和出口食品检验行业标准方法。检测食品中大肠菌群,显色培养基检测方法快速、灵敏、特异。     

洗衣粉S.S.琼脂培养基的初步应用报告

分离肠道病原菌的培养基种类繁多,但效果却不一致,其中效果较满意者当推3号胆盐S.S.琼脂及去氧胆酸钠-牛胆酸钠琼脂(简称郑氏S.S.琼脂)。我院试用的洗衣粉-去氧胆酸钠琼脂(简称洗衣粉S.S.琼脂)效果又较前者为优,这种培养基对肠道病原菌不但有很高的阳性检出率,而且痢疾杆菌在这种培养基上呈特殊的粘性菌落,可以在分离培养基上初步鉴别痢疾菌和沙门氏菌菌落,使肠道培养基更趋于完善。     

正常仔猪肠道内大肠菌定居的研究I．正常仔猪肠道内大肠菌血清型的定居及更替的观察

用NY-10株大肠菌口饲初生仔猪14头,定期用直肠棉拭从仔猪分离大肠菌并鉴定其血清型。其中10头猪共观察7一13天不等,直至NY一10从棉拭中消失为止,二头猪观察16和24天,最后二头猪观察50和53天。     

不同物质对双歧杆菌胆盐耐受性的影响研究

初步研究不同物质对双歧杆菌的胆盐耐受性的影响。结果表明,脱氧胆酸钠盐对双歧杆菌Blm和Bbm有毒性作用;在培养基中补充一定量的葡萄糖和果糖可以改善Bbm的胆盐耐受性,而菊糖和菊芋粉对提高Blm和Bbm的胆盐耐受性没有明显作用。     

抗干扰微生物培养基的抗干扰性能研究

食品饮料中残留防腐剂、消毒剂和臭氧会对其中的细菌和真菌的检出造成严重干扰,当采用大样倾注平板法和液体大样法测定细菌和真菌总数及采用国标大肠菌群测定法测定大肠菌群MPN值时,使用抗防腐剂型、抗消毒剂型及抗臭氧型微生物培养基分别检测含有防腐剂山梨酸钾及苯甲酸钠、消毒剂二氧化氧和臭氧的样品,其检出细菌、真菌和大肠菌群的能力大大高于普通微生物培养基,与采用普通微生物培养基检测不合防腐剂、消毒剂及臭氧的样品中的细菌、真菌和大肠菌群的检出能力基本一致。     

抗干扰微生物培养基的抗干扰性能研究*

食品饮料中残留防腐剂、消毒剂和臭氧会对其中的细菌和真菌的检出造成严重干扰,当采用大样倾注平板法和液体大样法测定细菌和真菌总数及采用国标大肠菌群测定法测定大肠菌群MPN值时,使用抗防腐剂型、抗消毒剂型及抗臭氧型微生物培养基分别检测含有防腐剂山梨酸钾及苯甲酸钠、消毒剂二氧化氧和臭氧的样品,其检出细菌、真菌和大肠菌群的能力大大高于普通微生物培养基,与采用普通微生物培养基检测不合防腐剂、消毒剂及臭氧的样品中的细菌、真菌和大肠菌群的检出能力基本一致。     

滤膜法测定水中大肠菌群简便方法的研究

本研究方法为ＩＳＯ９３０８－１规定的滤膜法测定水中大肠菌群的方法,该方法操作简便只需分离和证实两步实验即可得出结果;分离培养基上的阴阳性菌落颜色分明,易于分辩;所用培养基不含致癌物质。本研究方法的准确度高,回收率的均值为９４７％,批内变异系数小于１０％,检出限为５００ｍｌ水样可检出１个ＣＦＵ,检出率是传统方法的３１倍。本研究还探讨了分离培养基的ｐＨ值对菌落颜色的影响。本研究内容经查新在国内尚无报道。     

金针菇源降胆固醇土著乳酸菌的筛选与鉴定

以金针菇子实体为材料,通过添加溴甲酚紫的MRS培养基分离得到98株土著乳酸菌。以降胆固醇的效率和模拟肠道环境的耐酸和耐胆盐的耐受力为指标进行复筛,获得了2株降胆固醇以及耐酸耐胆盐综合能力都较强的菌株4J1和4J17,经16S r DNA鉴定及生理生化试验鉴定,结果表明该两株乳酸菌均为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)。本研究结果扩宽了降胆固醇的益生乳酸菌的种质资源,同时为金针菇的发酵加工产品提供良好的益生发酵菌株。     

纸片法检测大肠菌群结果判定的实验研究

纸片法检测大肠菌群是用灭菌滤纸吸收选择性培养基,细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定生长繁殖,大肠菌群在生长发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC（氯化三苯四氮唑）还原成不可逆的甲替产生红色色素,即大肠菌群在纸片上呈红色菌落,菌落周围产生黄圈是大肠菌群分解乳糖产酸使指示剂变色所致。纸片法以它经济、方便、快捷等优点给现场监测带来了极大便利,不但节省了大量人力、物力,     

嗜碱放线菌分离方法的研究

本文从土样的处理、分离培养基的选择、抑菌剂的选择和培养基的配制方法等方面研究了嗜碱放线菌的分离方法。察氏琼脂、淀粉酪素琼脂甘油精氨酸琼脂的分离效果较好;土样用十二烷基磺酸钠处理,分离培养基中加重酪酸钾,放线菌酮能更有效地分离嗜碱放线菌;用缓冲溶液配制培养基不影响分离效果,且能使培养基的pH保持相对稳定。     

乳酸菌的分离、鉴定及其生长特性

从动物粪便中分离乳酸菌,得到产酸快、代谢物抑菌活性强的乳酸菌菌株共６株。其中Ｏ－２菌株的产酸、抑菌、耐酸、耐胆盐和生长性能都优于其他菌株,是一株有潜质的有益菌菌性,经鉴定表明为乳杆菌。不同的营养配比的液体培养基进行发酵实验表明,Ｒ２培养基配料简单,成本低,发酵２４ｈ产生的菌体总数多,４８ｈ培养液的抑菌活性强,且其抑菌活性具有一定的热稳定性。     

微生物肥料中大肠菌群的测定及鉴别

为了正确区分微生物肥料产品中的大肠菌群,对近期检测的样品在伊红美兰(EMB)平板上得到的52株细菌进行了验证,并根据菌落的颜色和形态挑选出18个菌株,用Biolog微生物自动鉴定系统进行鉴定,以大肠杆菌科的4属7株标准菌株进行对照,鉴定结果和标准菌株一致。同时对微生物肥料中常用的13株革兰氏阳性(或可变)菌株和8株革兰氏阴性菌株也作了大肠菌群检测试验。其中,革兰氏阳性(或可变)菌株在乳糖胆盐发酵管和EMB平板上结果均为阴性,革兰氏阴性菌8株中有3株能利用乳糖,但都不产气,可以通过验证试验加以区分。明确了微生物肥料产品中常用菌种利用乳糖的情况以及在EMB平板上经常出现的不同菌落的分类地位,对大肠菌群的判定具有指导意义。     

幽门弯曲菌MLE无血培养基的研究

用MLE无血培养基与MHC(M-H血巧克力琼脂)培养基同时进行已知幽门弯曲菌(Cp)的培养及胃粘膜活检标本中Cp的分离试验。结果表明,16株已知菌在MLE培养基上生长的菌落比MHC上丰茂,特点明显,两者的菌体形态及生化反应一致。200份胃粘膜活检标本用MLE培养基分离阳性者114例,阳性率为57.0％,用MHC分离阳性者101例,阳性率为50.5％,符合率为86.5％,分离阳性率MLE高于MHC(p<0.05)。我们认为MLE无血培养基可代替含血培养基用于培养分离Cp。     

婴幼儿粪便中双歧杆菌的分离及其菌株特性研究

为筛选具有潜在益生功能的双歧杆菌,本研究采用改良MRS培养基,从婴幼儿粪便中分离到5株菌株:AR499,AR667,AR668,AR669和AR610。通过16S r DNA测序分别鉴定为两歧双歧杆菌,短双歧杆菌,动物双歧杆菌,长双歧杆菌和假小链双歧杆菌。对其耐酸耐胆盐能力和黏附性能进行测试,结果表明,菌株AR499耐酸性较好,菌株AR610有较强的耐胆盐能力,菌株AR499的自动聚集能力和细胞表面疏水性都较高。实验表明,菌株AR499可作为一株耐受性和黏附性能较好的益生菌进一步深入研究,以期应用于优良双歧杆菌产品的开发。     

海南热带雨林腐木上酵母菌物种多样性研究

用含木糖为唯一碳源(培养基X)和含葡萄糖及7.6%乙醇(培养基E)的两种富集培养基分别从采自海南热带雨林的56和57份腐木样品中分离到酵母菌67和75株.依据26S rDNA D1/D2区域序列分析并结合形态学特征对这些菌株进行了分类学研究,探讨了该地区腐木上的酵母菌物种多样性及其分布.从分离的142株酵母菌中鉴定出14个属63个种,其中疑似新种25个,占总种数的近40%,说明在热带雨林腐木中尚存在大量酵母菌新分类群有待被发现.从用培养基X和E分离的酵母菌中分别鉴定出7属37种和11属33种,优势属均为假丝酵母属Candida Berkhout和毕赤酵母属Pichia Hansen,但种类组成基本不同.用培养基x富集分离的菌株以Candida quercitrusa S.A.Meyer＆Phaff的地理分布最广,用培养基E富集分离的菌株以异常毕赤酵母Pichia anomala(Hansen)Kurtzman、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae Meyen ex Hansen和亚膜毕赤酵母Pichiasubpelliculosa Kurtzman分布最广泛.同一样品用两种不同富集培养基分离的菌株大多数属于不同的种,在对比的23份样品中,只从2份样品中分离到了同一个种的菌株.用培养基X和E分离的菌株分别属于可利用木糖和可耐受乙醇的酵母菌,用两种培养基同时分离到的菌株属于具备利用木糖和耐受高浓度乙醇两种能力的菌株.这些酵母菌在木质纤维素物质的生物乙醇转化技术中的应用价值值得进一步研究.     

模拟人体胃肠道环境筛选益生乳杆菌

【目的】筛选具有益生特性的乳杆菌作为保健型酸奶的候选菌株。【方法】从健康人肠道和奶豆腐中分离筛选出耐受人工胃液的乳杆菌,对其进行体外益生特性(人工胃肠液耐受性、胆盐耐受性、抑菌活性及胆固醇降解能力)研究。【结果】从在乳杆菌分离培养基上有溶钙圈的41株菌株中筛选出5株耐酸、耐人工胃液较强的菌株,经16S rR NA基因测序鉴定,其中3株为乳杆菌,分别命名为植物乳杆菌Lp MT-3、植物乳杆菌Lp MT-5和唾液乳杆菌LsA F-7。在人工胃液中3株菌的耐受力均强于商品化的对照菌株LGG(鼠李糖乳杆菌GG);转入肠液4 h后直至26 h,Lp MT-5存活率基本稳定在45%左右,仅次于LGG。胆盐浓度为0.10%时,3株乳杆菌的耐胆盐能力均强于LGG;胆盐浓度为0.20%时,Lp MT-3和LsA F-7仍能存活。3株乳杆菌均具有抑菌活性,对粪肠球菌的抑制最明显,其次是金黄色葡萄球菌,对大肠杆菌、沙门氏菌的抑制作用较差。3株乳杆菌对胆固醇的清除效力依次为Lp MT-3LpM T-5Ls AF-7;清除率依次为Ls AF-7Lp MT-3LpM T-5。【结论】筛选出3株适应人体胃肠液环境、耐胆盐、抑菌及降胆固醇活力强的乳杆菌,可作为进一步开发新的益生菌产品和保健型酸奶的菌株。     

应用肠道微生物示踪地表水粪便污染的研究进展

人和动物的粪便已成为水污染的重要污染源, 严重威胁着饮水安全和经济发展。水质污染微生物的传统检测指示菌是总大肠菌群、粪大肠菌群、埃希大肠菌、肠球菌和梭菌属。经过调查发现, 上述指示菌由于在体外能存活并繁殖, 并且不同宿主之间没有差异性, 不能准确用于追踪污染粪便的来源, 因此该指标难以直接说明粪便污染源和污染程度。最近的研究表明, Faecalibaterium作为水体粪便污染来源追踪的指示微生物具有很多优点。本文综述了粪便污染指示菌以及其相关替代方法在水质检测中的研究进展, 对各种指示菌进行了优、缺点比较, 展望了Faecalibaterium的应用前景。