外源性apelin对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的防治作用

目的:探讨外源性给予小分子活性肽apelin对大鼠慢性低氧性肺动脉高压和肺血管重构的作用及其机制。方法:采用常压低氧法建立SD大鼠低氧性肺动脉高压模型。实验分4组(n=10)对照组(NC)、低氧组(HH)、低氧+apelin低剂量组(5nmol/(kg.d)(LA)和低氧+apelin高剂量组(10nmol/(kg.d)(HA),HA组和LA组通过皮下埋植微量渗透泵持续给药。低氧4周后,测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室与左心室加室间隔的重量比[RV/(LV+S)]、肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、管腔面积/管总面积(CA/TA)、中膜厚度(PAMT)以及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量。结果:①mPAP和RV/(LV+S):HH组较NC组高,HA组较HH组低;LA组mPAP较HH低,而RV/(LV+S)两组间无显著性差异。②WA/TA和PAMT:HH组较NC组高,HA组、LA组均较HH低。③CA/TA:HH组较NC组低,HA组、LA组均较HH高。④肺组织SOD含量:HH组较NC低,HA组、LA组均较HH高。⑤MDA含量:HH组较NC高,HA组、LA组均较HH低。结论:Apelin对低氧性肺动脉高压和肺血管重构的形成具有防治作用,这种作用可能与直接舒张肺血管作用及改善氧化应激有关。     

Intermedin/adrenomedullin 2及其受体在慢性低氧性肺动脉高压大鼠右心室的表达变化

本研究探讨了新发现的小分子生物活性肽intermedin／adrenomedullin 2（IMD／ADM2）及其受体在慢性低氧性肺动脉高压大鼠右心室中的变化和可能作用。用放射免疫分析法测定正常对照组和常压低氧4周组Sprague-Dawley大鼠血浆、右心室匀浆IMD／ADM2和肾上腺髓质素（adrenomednllin,ADM）蛋白水平;逆转录-多聚酶链反应法测定右心室IMD／ADM2、ADM及受体：降钙素受体样受体（calcitonin receptor-like receptor,CRLR）、受体活性修饰蛋白1,2,3（receptor activity modifying protein 1,2,3,RAMP1,RAMP2,RAMP3）mRNA表达。结果显示：低氧组平均肺动脉压、右心室与左心室加室间隔重量比[RV／（LV＋S）]显著高于对照组（均P〈0．01）;低氧组血浆和右心室组织匀浆ADM水平比对照组分别高1．26倍和1．68倍（P〈0．01）,IMD／ADM2水平则较对照组分别高0．90倍和1．19倍（P〈0．01）;与对照组相比,低氧组右心室IMD／ADM2、ADM mRNA表达均上调（P〈0．01）,RAMP2 mRNA表达增强（P〈0．05）,而两组间CRLR、RAMP1、RAMP3 mRNA的表达水平无显著性差异。结果表明,慢性低氧性肺动脉高压大鼠IMD／ADM2表达水平升高。     

低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉Siah1的表达变化及意义

目的:探讨低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺小动脉Siah 1的动态表达变化及作用.方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组和低氧3 d、7d、14d、21 d组,每组8只,常压间断低氧复制HPH大鼠模型.测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;原位杂交、RT-PCR检测肺内Siah1 mRNA表达,免疫组化、Western blot检测其蛋白质水平.结果:①低氧7d后,肺小动脉出现血管重塑,且mPAP明显上升;低氧14d后,肺小动脉重塑更明显,mPAP达高峰.RVHI在低氧14d后明显增加.②Siah1 mRNA在对照组肺小动脉壁呈弱阳性表达,低氧7d后显著增高,低氧14d后达高峰.低氧21d后下降但仍高于对照组.免疫组化显示,Siahl蛋白在对照组肺小动脉壁呈弱阳性表达,低氧7d后显著增高,低氧14d后达高峰,低氧21 d后下降但仍高于对照组.③大鼠肺小动脉壁Siah1蛋白与Siah1 mRNA呈正相关;Siah1 mRNA、Siah1蛋白与mPAP、重塑指数、RVHI均呈正相关.结论:慢性低氧诱导肺小动脉壁Siah1表达增加,进而在HPH发病过程中发挥一定的作用.     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织肾上腺髓质素-2的变化

目的：研究新的小分子生物活性肽肾上腺髓质素-2（ADM2／IMD）及其受体在慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的变化和可能的作用。方法：SD大鼠随机分成2组（n=10）：正常对照（NC）组和低氧四周（4H）组;放射免疫法测定血浆和肺组织ADM2／IMD和肾上腺素髓质素（ADM）蛋白水平;逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法测定肺组织ADM2／IMD、ADM及其受体（CRLR,RAMP1,2,3）mRNA表达;免疫组化法测定ADM2／IMD在肺细小动脉的定位表达：结果：①4H组平均肺动脉压（mPAP）、右心室与左心室加室间隔重量比[RV／（LV＋S）]高于NC组（P均〈0．01）。②4H组血浆和肺组织匀浆ADM水平分别为NC组的2．3倍和3．2倍（P均〈0．01）,ADM2／IMD水平分别比NC组高89．6％和45．0％（P分别〈0．01、〈0．05）。③4H组肺组织ADM2／IMD与ADMmRNA表达高于NC组（P分别〈0．01、〈0．05）,CRLR和RAMP1mRNA表达显著低于NC组（P均〈0．01）,而RAMP2和RAMP3mRNA表达水平两组间差异无显著性。①ADM2／IMD主要在大鼠肺细小动脉内皮细胞及血管外膜表达。结论：ADM2／IMD与ADM相似,与大鼠慢性低氧性肺动脉高压病理过程密切相关;ADM2／IMD及其受体CRLR／RAMP1基因表达和／或蛋白合成、代谢的改变可能参与了大鼠慢性低氧性肺动脉高压的发生发展.     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织内质网应激介导的凋亡的变化

目的:探讨内质网应激介导的凋亡在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的变化及意义.方法:清洁级雄性SD大鼠22只随机被均分成对照组和低氧组(n=11).采用常压低氧法复制慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压模型,4周后,测定肺动脉平均压(mPAP)、右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV+S)重量比、肺细小动脉管壁面积/管总面积...     

SENP1在大鼠低氧性肺动脉高压形成中肺血管壁中表达及可能作用

目的:探讨大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)形成过程中SENP1在肺小动脉的动态表达变化及作用。方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为5组(n=8):对照组和缺氧3 d、7 d、14 d2、1 d组,常压间断低氧复制HPH大鼠模型。测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;原位杂交、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺内SUMO特异性蛋白酶-1(SUMO-specific proteases-1,SENP1)mRNA表达,免疫组化、Westernblot检测其蛋白质水平。结果:①缺氧7 d后,肺小动脉出现血管重塑,且mPAP明显上升;低氧14 d后,肺小动脉重塑更明显,mPAP达高峰。RVHI在低氧14 d后明显增加。②原位杂交显示,SENP1 mRNA在对照组肺小动脉壁呈阳性表达,低氧后其相对量无明显变化。RT-PCR显示肺组织SENP1 mRNA表达与原位杂交所观察到的肺小动脉壁SENP1 mRNA变化趋势一致;SENP1蛋白在对照组呈阳性表达,低氧7 d后其表达量开始呈进行性下降。Western blot显示肺组织内SENP1蛋白表达与免疫组化观察到的肺小动脉壁SENP1蛋白变化趋势一致。③SENP1蛋白与mPAP、重塑指数、RVHI均呈负相关。结论:慢性低氧诱导肺小动脉壁SENP1蛋白降解,进而可能在HPH发病过程中发挥一定的作用。     

慢性低O_2高CO_2肺动脉高压大鼠肺动脉尾加压素Ⅱ受体的动态变化

目的:探讨尾加压素Ⅱ受体(urotensinⅡreceptor,UT)在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉中的动态变化及其意义。方法:对不同低氧(高二氧化碳)时间(1周、2周、4周)大鼠,放射性配基结合法检测肺动脉质膜UT结合位点,组织原位杂交测定各级肺小动脉UT及尾加压素Ⅱ(UⅡ)mRNA的表达。结果:①肺动脉平均压(mPAP)、右心室(RV)和左心室加室间隔(LV S)的重量比:1周组(1HH)较对照组(NC)分别增高26.2%和21.6%、2周组(2HH)较1HH增高22.5%和14.1%、4HH组与2HH组间无显著差别(P>0.05)。②肺主动脉质膜UT最大结合位点(Bmax),1HH组比NC组高38.8%(P<0.01),2HH组比1HH组高23.2%(P<0.01),4HH组比2HH组高7.3%(P<0.05),随低氧时间延长有渐升的趋势;UⅡ受体亲和力(Kd值)各组间无差别。③三级肺小动脉UⅡmRNA相对含量的变化:2HH、4HH组明显高于NC组(P均<0.01);2HH组较1HH组分别高5.9%(P>0.05)、16.4%和9.1%(P均<0.01);4HH组与2HH组间无明显差异。④三级肺小动脉UT mRNA相对含量的变化:各低氧高二氧化碳组均高于NC组(P均<0.01),以1HH组后2级肺小动脉的表达最强,而4HH组与2HH组间无显著差别(P>0.05)。⑤肺小动脉显微结构的变化:4HH组各级血管均有显著重构,1HH组无明显变化,2HH组介于两者之间。结论:UT在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉内的动态变化与肺动脉高压、肺血管改建的病理进程密切相关。     

慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠肺动脉尾加压素Ⅱ受体的动态变化

目的:探讨尾加压素Ⅱ受体(urotensinⅡreceptor,UT)在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉中的动态变化及其意义.方法:对不同低氧(高二氧化碳)时间(1周、2周、4周)大鼠,放射性配基结合法检测肺动脉质膜UT结合位点,组织原位杂交测定各级肺小动脉UT及尾加压素Ⅱ(UⅡ)mRNA的表达.结果:①肺动脉平均压(mPAP)、右心室(RV)和左心室加室间隔(LV S)的重量比:1周组(1HH)较对照组(NC)分别增高26.2%和21.6%、2周组(2HH)较1HH增高22.5%和14.1%、4HH组与2HH组间无显著差别(P＞0.05).②肺主动脉质膜UT最大结合位点(Bmax),1HH组比NC组高38.8%(P＜0.01),2HH组比1HH组高23.2%(P＜0.01),4HH组比2HH组高7.3%(P＜0.05),随低氧时间延长有渐升的趋势;UⅡ受体亲和力(Kd值)各组间无差别.③三级肺小动脉UⅡmRNA相对含量的变化:2HH、4HH组明显高于NC组(P均＜0.01);2HH组较1HH组分别高5.9%(P＞0.05)、16.4%和9.1%(P均＜0.01);4HH组与2HH组间无明显差异.④三级肺小动脉UT mRNA相对含量的变化:各低氧高二氧化碳组均高于NC组(P均＜0.01),以1HH组后2级肺小动脉的表达最强,而4HH组与2HH组间无显著差别(P＞0.05).⑤肺小动脉显微结构的变化:4HH组各级血管均有显著重构,1HH组无明显变化,2HH组介于两者之间.结论:UT在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉内的动态变化与肺动脉高压、肺血管改建的病理进程密切相关.     

姜黄素对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉高压及肺动脉管壁胶原的影响

目的：研究姜黄素对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉压力及肺动脉管壁Ⅰ型胶原的影响。方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组（NC组）,低O2高CO2 4周组（HH组）,低O2高CO2 4周＋姜黄素组（HC组）,采用免疫组化、图像分析等方法观察姜黄素对慢性低O2高CO2大鼠肺动脉压力、肺细小动脉显微和超微结构及肺动脉管壁Ⅰ型胶原的影响。结果：①血流动力学检测显示HH组mPAP明显高于NC组（P〈0．01）,HC组mPAP明显低于HH组（P〈0．01）,三组间mCAP无明显差异（P〉0．05）;②光镜下,肺细小动脉管壁面积／管总面积比值（WA／TA）、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度（SMC）、肺细小动脉中膜厚度（PAMT）HH组较NC组明显增高（均P〈0．01）,HC组WA／TA、SMC和PAMT较HH组明显降低（均P〈0．01）;③电镜下,HH组肺细小动脉中膜平滑肌细胞增生,面积增大,染色质增多,外膜胶原纤维密集,HC组大鼠肺细小动脉内皮细胞结构基本正常,胶原少见,中膜平滑肌细胞和外膜胶原纤维增生较HH组明显为轻;④免疫组化法发现肺细小动脉Ⅰ型胶原平均吸光度值HH组明显高于Nc组（P〈0．01）,HC组明显低于HH组（P〈0．01）。结论：姜黄素具有降低慢性低O2高CO2性肺动脉高压、改善肺血管重建及抑制肺动脉管壁Ⅰ型胶原沉积的作用。     

Apelin对大鼠离体肺动脉环的舒张作用及与一氧化氮的关系

目的：探讨新的小分子活性肽Apelin对大鼠离体肺动脉环的舒张作用及与一氧化氮（NO）途径的关系,并比较低氧大鼠的肺动脉环对Apelin的舒张反应与正常大鼠的差异。方法：36只大鼠随机分为正常组与低氧组;采用离体血管环灌流法,检测Apelin对去甲肾上腺素（NE）预收缩的大鼠离体肺主动脉环的舒张效应,观察去内皮或用一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）、可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）抑制剂（ODQ）孵育后该舒张率的变化。结果：①在正常组大鼠肺动脉环,Apelin（0.01~100 nmol/L）具有浓度依赖性的舒张效应。去除内皮后,Apelin对NE预先收缩的肺血管舒张效应明显减弱（P〈0.01）。L-NAME或ODQ预孵育后,Apelin的舒张效应均明显减弱（P均〈0.01）。②低氧组大鼠的肺动脉环对Apelin的舒张反应明显低于正常组大鼠,在最大浓度100 nmol/L时,Apelin的效应低60.45%（P〈0.01）,而两组EC50相比差异无显著性（P〉0.05）。结论：Apelin具有内皮依赖性的舒张肺动脉环的作用,该效应与NO-sGC-cGMP信号途径有关;低氧大鼠的离体肺动脉环对Apelin的舒张反应减弱。     

Postnatal developmental expression and localization of apelin and apelin receptor protein in the ovary and uterus of mice

Postnatal ovarian and uterine development is crucial to accomplished female fertility. Thus, the investigations of factors that present in pre-pubertal stages are important as it might be responsible for the regulation of ovarian and uterine function. Apelin, an adipokine and its receptor (APJ) are present in female reproductive organs. However, no study has reported its postnatal expression in uterus and ovary. Thus, we investigated the postnatal developmental changes in expression and localization of apelin and APJ in the ovary and uterus of mice. Postnatal ovary and uterus were collected from postnatal day (PND) 1, 7, 14, 21, 42, 65 and performed western blot analysis and immunohistochemistry. Uterine APJ is elevated in PND14 and PND65, whereas, ovarian APJ elevated in PND7, PND14, and PND65. Apelin expression in both ovary and uterus showed intense staining at PND65 and PND14. Our results showed that apelin and APJ abundance was lower at PND21 in uterus and ovary. In conclusion, apelin and APJ are developmentally regulated in the ovary and uterus, and its localization in the different compartments of ovary and uterus suggest its distribution specific physiological role in the uterus and ovary.     

尾加压素Ⅱ及其受体在肺动脉高压大鼠右心室的表达

目的：观察尾加压素Ⅱ（UⅡ）及其受体UT在慢性低Q高C02肺动脉高压大鼠右心室的表达。方法：健康SD大鼠20只随机分成正常对照组和低氧高二氧化碳4周（HH）组,分别测定平均肺动脉压力（InPAP）,右心室游离壁（Rv）和左心室加室间隔（LV＋S）的重量比;放免法测定大鼠血浆UⅡ含量;免疫组化方法检测心肌细胞、心肌小动脉UⅡ蛋白的表达;组织原位杂交方法检测心肌细胞、心肌小动脉UⅡmRNA和UⅡ受体（UT）mRNA的表达。结果：①HH组InPAP和RV／LV＋S比正常对照组分别高52．0％与25．4％（P均〈0．01）。②HH组血浆UⅡ水平较正常对照组无明显增高。③免疫组化显示HH组心肌细胞UⅡ蛋白表达阳性率和心肌小动脉UⅡ蛋白表达的平均吸光度值均明显高于正常对照组（P〈0．01）。④组织原位杂交可见HH组的心肌细胞UⅡmRNA表达阳性率和心肌小动脉UⅡmRNA表达的平均吸光度值均明显高于正常对照组（P均〈0．01）。⑤组织原位杂交可见HH组的心肌细胞UTmRNA表达阳性率和心肌小动脉UTmRNA表达的平均吸光度值均较正常对照组明显增高（P均〈0．01）。结论：慢性低氧高二氧化碳性大鼠肺动脉高压及右室肥大形成过程中,心肌小动脉和心肌细胞的UⅡ及其受体UT的表达均呈现明显上调,提示UⅡ可能有促进心肌细胞增殖,导致右心室重构的作用。推测UⅡ在慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压及右室肥大的形成机制中具有重要的病理生理意义。     

Effect of acute swimming exercise on lactate levels and its relation with zinc in pinealectomized rats

It is argued that melatonin secreted from the pineal gland regulates the levels of zinc, which is an important trace element. Decreases in zinc levels of pinealectomized rats supports this relationship. There is an increasing amount of evidence suggesting that the pineal gland can have important effects on physical activity. The objective of the present study was to explore the changes in serum lactate levels in pinealectomized rats subjected to acute swimming exercise and its relation with zinc. Forty adult male rats of Spraque Dawley strain were equally allocated to four groups. Group 1: General Control Group. Group 2: Pinealectomized Control Group. Group 3: Swimming Control Group. Group 4: Pinealectomized Swimming Group. Serum zinc, melatonin and lactate levels were determined in the blood samples collected from the animals by a decapitation method. Zinc and melatonin levels were higher in Group 1 than in Groups 2, 3 and 4 (p < 0.01), higher in Group 3 than in Groups 2 and 4 (p < 0.01) and higher in Group 2 than in Group 4 (p < 0.01). The highest lactate levels were found in Group 4 (p < 0.01). Lactate levels in Group 3 were higher than those in Groups 1 and 2 (p < 0.01), while the levels in Groups 1 and 2 did not differ. Pinealectomy results in a significant increase in lactate levels in rats subjected to an acute swimming exercise. This increase in lactate levels may be associated with the decrease observed in zinc levels after pinealectomy.     

低氧性肺动脉高压小鼠肺组织apoE蛋白表达的变化及其意义

目的：观察低氧性肺动脉高压小鼠肺组织中载脂蛋白E（apoE）蛋白表达的变化,以探讨低氧性肺动脉高压形成过程中apoE蛋白表达的变化及可能的意义。方法：SPF级雄性野生型（WT）C57BL/6小鼠和雄性apoE基因敲除（apoE-KO）小鼠各20只,各随机再分为2组（n=10）：常氧组和低氧组,共4组。常压连续低氧3周（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型,采用右心导管法测定小鼠右心室压（RVSP）,计算右心室与左心室加室间隔重量比RV/（LV+S）,ELISA法检测血浆中高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和总胆固醇（TC）的含量;Western blot法检测肺组织中apoE和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达。结果：①低氧组WT小鼠RVSP、RV/（LV+S）分别较常氧组高68%和59%（P均<0.05）,血浆中HDL含量及HDL/LDL比值分别较常氧组低17%和40%（P均<0.05）,同时肺、肝组织中apoE及肺组织中PPARγ的蛋白表达分别较常氧组下调48%、52%和37%（P均<0.05）,RVSP与apoE及PPARγ蛋白表达均呈显著负相关（P均<0.01）;②低氧组apoE-KO小鼠RVSP、RV/（LV+S）较常氧组分别高96%和86%（P均<0.05）,低氧组apoE-KO小鼠RVSP和RV/（LV+S）较低氧组WT小鼠分别高29%和24%（P均<0.05）。结论：小鼠低氧性肺动脉高压的形成与肺组织中apoE蛋白表达下调有关。     

低氧性肺动脉高压小鼠体内脂质水平的变化

目的：观察低氧性肺动脉高压小鼠体内脂质代谢的变化,探讨脂质代谢异常在低氧性肺动脉高压发生发展中的意义。方法：SPF级雄性C57BL/6小鼠20只,随机分为2组（n=10）：常氧组和低氧组。常压连续低氧3周（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型,测定小鼠右心室压（RVSP）和右心室与左心室加室间隔重量比,Elisa法检测血浆中总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）的含量;real-time PCR法检测肝组织中3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）、低密度脂蛋白受体（LDLR）、清道夫受体B1（SR-B1）、固醇调节元件结合因子2（SREBF2）等基因的表达。结果：低氧组小鼠RVSP、RV/（LV+S）显著高于常氧组（P<0.05）,血浆中HDL含量及HDL/LDL比值较常氧组显著降低（P<0.05）,肝组织中LDLR、SR-B1基因表达较常氧组显著下调（P<0.05）;RVSP与HDL/LDL比值及LDLR、SR-B1基因表达呈显著负相关（P<0.05）。结论：脂质代谢异常参与小鼠低氧性肺动脉高压的形成。