黑斑蛙小观察

黑斑蛙小观察吕秀芬,李春林（首都师范大学生物学系１０００３７）张兰萍,邢俊（北京崖头镇邹家完小学）黑斑蛙是青蛙的一种,在我国分布很广,是教学和科学研究的好材料。引导学生做些这方面的实验和观察,既能巩固所学知识,又能培养搞科学实验的兴趣。现就黑斑蛙胚胎...     

镉对黑斑蛙精巢组织结构的毒性效应

为了研究镉对两栖动物精巢组织结构的影响,用不同浓度Cd2 溶液对黑斑蛙(Rana nigromaculata)成体隔日皮下注射染毒,光镜下观察精巢组织的显微结构变化。结果表明,镉具有毒性效应,可以导致处理后的黑斑蛙精巢组织中的各级生精细胞、支持细胞和间质细胞受到损伤。对处理组和对照组的精巢组织分别用金属硫蛋白(MT)进行免疫组化定位观察,MT阳性颗粒在处理组和对照组均有表达,表达随处理组镉浓度的增大而减弱。     

镉在黑斑蛙组织的积累与分布

研究民镉暴露实验中黑斑蛙不同器官组织对镉的吸收积累,并对其在不同器官组织中的分布规律进行了分析。结果表明：镉在黑斑蛙器官组织的积累具有选择性,主要积累在肠和肝脏中,其次是皮肤、肌肉,而骨骼中没有积累。     

黑斑蛙繁殖期血浆性激素浓度变化的研究

本文研究了黑斑蛙在繁殖期血浆性激素的变化,得到如下结果:1.雄蛙在繁殖期吋,精巢饱满,活动精子多、血浆雄激素含量高;繁殖期过后,精巢萎缩,活动精子数少、血浆雄激素含量低。说明雄激素影响精子的形成与成熟;2.雌蛙在排卵前,卵巢较重、有不同发育阶段的卵泡、血浆雌激素含量高;排卵后,卵巢较轻,有残留小卵和残留物,血浆雌激素含量低。说明雌激素对卵和副性征的发育有关。     

棘胸蛙、虎纹蛙、黑斑蛙血细胞的比较

应用Giemsa染色法对棘胸蛙、虎纹蛙和黑斑蛙的血细胞进行显微观察和各形态参数测定,并对各类细胞作了图示和描述。结果表明,红细胞和白细胞的形态和数量比例有一定属和种的特征,并与其生长环境和进化地位有一定联系。     

黑斑蛙光感受器计数和分类—扫描电镜研究

在扫描电镜下观察了黑斑蛙视网膜光感受器的类型、直径和密度。并用统计学方法对光感受器进行了计数。六个视网膜的光感受器计数平均为2,120,000±230,000(P<0.05)。可以见到两类视锥细胞和两类视杆细胞:单视锥,外段为锥形,最粗处直径约6微米;双视锥,由一主锥和一附锥构成,外段直径最粗处约7微米;红视杆,外段圆柱形,直径约6微米,其内段短粗,数目比绿视杆多;绿视杆,外段与红视杆极相似,但内段细长。视锥和视杆的外段上有许多小突起,这些小突起互相联系。     

中国大陆黑斑侧褶蛙基于mtDNA控制区序列的种群遗传结构

用分子遗传数据研究了黑斑侧褶蛙 (Pelophylaxnigromaculata)种群的遗传结构和分化。标本采自中国大陆的 12个地点 ,每个种群测定 10只或少于 10只蛙的mtDNA控制区 5′端 6 85bp的序列。 112只蛙的序列经比对后 ,共发现 111个变异位点 ,定义了 6 7种单元型 ,其中 7种单元型为地方种群间共享单元型 ,多数单元型为地方种群内特有。 12个地方种群合并成一个大种群分析时表明 ,中国大陆黑斑侧褶蛙的线粒体单元型多样性相当高 (h=0 98± 0 0 0 5 ) ,总体核苷酸多样性也较高 (π =0 0 30 3± 0 0 0 2 9)。这样高的单元型多样性和核苷酸多样性与黑斑侧褶蛙作为古北界和东洋界的广布种、种群大是相应的。基于最大简约法的单元型系统发生树和基于邻接法的地方种群系统发生分析中 ,吉林通化和辽宁辽阳种群与中国大陆其他地方种群构成姐妹群。分子变异分析表明 ,吉林和辽宁种群代表的吉辽组和其余 10个地方种群代表的综合组间出现了显著的种群分化 (Φ CT=0 80 9,P <0 0 0 1) ,各地方种群间成对的FST及种群间的核苷酸歧异度也均表明两者之间出现了显著的遗传分化。吉辽组与综合组间的遗传分化最可能的原因就是受第四纪冰川的影响     

黑斑蛙骨髓细胞染色体标本制备的新方法

染色体标本制备是黑斑蛙分子细胞遗传学研究的基础。为了简化操作程序,缩短实验周期,建立了黑斑蛙染色体制备的一种新方法——骨髓细胞体外短时培养与秋水仙素同步处理法。该方法操作简便,重复性较好,可在较短时间里制备出分裂相较多且形态良好的蛙染色体标本,适用于核型分析、染色体荧光原位杂交、染色体显微分离和单染色体文库构建等多个方面的研究。     

几种农药对黑斑蛙黑斑蛙胚胎及蝌蚪的毒性

本文报道了常用的几种农药对黑斑蛙胚胎及蝌蚪发育的毒性影响。结果表明 :农药对黑斑蛙胚胎、蝌蚪期的毒性大小依次为使它隆 >多效唑 >多菌灵 >异丙隆 >甲胺磷。胚胎期死亡时表现为胚体腐烂 ;蝌蚪期死亡时则表现为头部膨大 ,尾部缩小 ,弯曲。畸形在两个时期都表现为腹部膨大呈透明状和尾部弯曲     

镉对黑斑蛙蝌蚪生长发育的影响

两栖动物幼体的生长发育过程对环境变化和化学污染物都很敏感,为研究镉对两栖动物幼体生长发育的影响,将37—38期黑王证蛙（Rana．nigromaculata）蝌蚪暴露于含不同浓度镉的水中饲养,直至完全变态,观察幼体生长发育过程,记录蝌蚪完全变态所需时间,平均体重和平均长度增长率的测定。结果表明,随着Cd^2＋浓度的升高,蝌蚪的啤均体重和平均长度的增长率降低,完全变态所需时间增长。说明Cd^2＋污染可抑制黑斑蛙蝌蚪的生长发育,延缓变态。     

The effect of host age on Rana temporaria-gorgoderina vitelliloba interactions

Mitchell J. B. 1982. The effect of host age on Rana temporaria-Gorgoderina vitelliloba interactions. International Journal for Parasitology12: 601–604. Two age groups of tadpoles, and newly metamorphosed and adult male Rana temporaria were fed the metacercarial cysts of Gorgoderina vitelliloba. In the younger tadpoles metacercariae died in their cysts. In the older tadpoles excystment took place and juvenile flukes invaded the kidneys, killing the hosts within 72 h. In newly metamorphosed frogs, an immunological response resulted in some of the juvenile flukes in the kidneys being attacked by eosinophils which adhered to and dissolved the tegument, presumably killing the flukes. In contrast, some young frogs were harmed by flukes in their kidneys. Migration away from the kidneys to the bladder took place on about the twelfth day after infection. Juvenile flukes in the kidneys of adult frogs 7 and 14 days after infection, evoked an inflammatory reaction involving polymorphs and lymphocytes. These cells did not appear to damage the parasites.     

中国林蛙与中华蟾蜍蝌蚪颅骨形态的系统进化比较

对无尾两栖动物系统进化的研究,主要是基于经典的形态学、现代分子生物学等技术。无尾两栖动物蝌蚪的进化与成体的进化可能是两个独立的过程,所以无尾两栖类蝌蚪形态及发育特征也可以作为研究系统进化的重要指征。本文对中国林蛙(Rana chensinensis)及中华蟾蜍(Bufo gargarizans)变态前蝌蚪的软骨性颅骨及鳃部骨骼进行形态学描述,基于幼体形态特征,进行系统建树。建树结果支持Orton将无尾两栖类蝌蚪划分为4种类型,认为最原始的类群为Ⅲ型蝌蚪,与Tihen的观点一致。新蛙亚目的中国林蛙和中华蟾蜍蝌蚪属Ⅳ型,是最进化的类群。     

Glycation of wood frog (Rana sylvatica) hemoglobin and blood proteins: In vivo and in vitro studies

The effects of in vivo freezing and glucose cryoprotectant on protein glycation were investigated in the wood frog, Rana sylvatica. Our studies revealed no difference in the fructoselysine content of blood plasma sampled from control, 27 h frozen and 18 h thawed wood frogs. Glycated hemoglobin (GHb) decreased slightly with 48 h freezing exposure and was below control levels after 7 d recovery, while glycated serum albumin was unchanged by 48 h freezing but did increase after 7 d of recovery. In vitro exposure of blood lysates to glucose revealed that the GHb production in wood frogs was similar to that of the rat but was lower than in leopard frogs. We conclude that wood frog hemoglobin was glycated in vitro; however, GHb production was not apparent during freezing and recovery when in vivo glucose is highly elevated. It is possible that wood frog blood proteins have different in vivo susceptibilities to glycation.     

两种蛙Sox基因的PCR-SSCP分析

采用PCR技术,以参考人SRI,基因HMG-box的保守区序列而设计一对特异引物,扩增了黑斑蛙和金线蛙的Sox基因。结果两种蛙的雌雄个体均扩增出217bp的基因片段,与人对照相同。对扩增产物进行SSCP分析显示,两种蛙雌雄个体间的单链迁移率相同,两种蛙之间差异较小,而与人有较大差异。测序表明,两种蛙的Sox序列之间以及与各类物种的Sox基因都有非常高的相似性,充分显示出Sox基因在系统进化上的高度保守性。     

酚类物质对中国林蛙蝌蚪生长发育的毒性效应

中国林蛙蝌蚪对水环境有极强的依赖性,水环境中的酚类物质可以通过中国林蛙蝌蚪的呼吸系统和皮肤进入其体内,影响蝌蚪的存活状况、生长发育和生理生化指标。因此中国林蛙蝌蚪可以用作监测水体环境的指示物种。从壬基酚、辛基酚和双酚A等酚类物质对中国林蛙蝌蚪生长发育的毒性效应进行阐述,为酚类污染物对两栖动物生长发育影响机理的深入研究奠定基础,为中国林蛙蝌蚪的生态保护和水环境监测提供科学依据。     

中华蟾蜍与黑斑蛙消化道黏液细胞的观察

目的：探索两栖类动物消化道黏液细胞的类型与分布规律。方法：利用阿利新蓝与过碘酸雪夫试剂染色法对中华蟾蜍（Bufo bufo gargazizans）、黑斑蛙（Rana nigromaculata）消化道黏液细胞进行石蜡切片和染色。结果与结论：黏液细胞表现为4个类型：Ⅰ型玫瑰红色;Ⅱ型蓝绿色;Ⅲ型紫红色;Ⅳ型蓝紫色。两种动物食管黏膜上皮中黏液细胞主要是杯状细胞,其中中华蟾蜍的黏液细胞主要为Ⅱ型和Ⅳ型细胞,黑斑蛙的黏液细胞主要Ⅲ型细胞。胃体柱状黏膜上皮细胞与胃腺颈细胞主要为Ⅰ型和Ⅲ型细胞,黏原颗粒主要集中在细胞的核上区。胃腺浅部有成团分布并着色较浅的黏液细胞,其中黑斑蛙胃腺黏液细胞主要为Ⅰ型和Ⅲ型细胞,中华蟾蜍胃腺黏液细胞主要为Ⅲ型和Ⅳ型细胞。小肠杯状细胞主要为Ⅲ型和Ⅳ型细胞。大肠杯状细胞主要为Ⅱ型和Ⅳ型细胞。     

Thermal acclimation and hardening in tadpoles of the bullfrog, Rana catesbeiana

1. 1.|Critical thermal maxima (CTMax) and minima (CTMin) were measured to evalute thermal hardening in Rana catesbeiana.

2. 2.|Tadpoles show heat hardening and CTMax acclimation, and both responses are influenced by developmental stage.

3. 3.|The first evidence of cold hardening in vertebrates is reported here.

4. 4.|Heat hardening significantly reduces cold tolerance, but there is otherwise no evidence of a cross-hardening effect.