Twyford跨国公司鉴定出产生蓝色花朵的植物基因

美国加州 Twyford 跨国公司(在圣保拉)专营庭院植物和蔬菜,目前对于从中发现上述基因的植物尚处保密阶段,理由是预防竞争。目前,公司正在研究该基因的化学结构,接下来打算将它转移到玫瑰中去。公司的目标在于获得一株真正的蓝色玫瑰。公司科研人员还成功地将一种基因转入菊花中去,使之能在低于正常温度3～5℃的平均温度下健旺生长并开花。改变基因的菊花可以给温室养花人省下一笔燃料费。公司预计在今年向苗圃提供两个抗寒菊花品种。     

抗真菌的有益重组葡萄的开发

法国Moet Hennessy Louis Vuiton公司(MHLV公司)成功地开发出重组葡萄(这种重组葡萄耐真菌且可酿制有益于健康的葡萄酒)。 该公司所开发的是导入了乙烯合成酶基因的重组葡萄。导入该酶基因,目的是增加葡萄酒中的抗氧化物质、白藜芦醇含量。试管实验证明这种物质由于其抗氧化作用不仅能促进健康,而且还可使葡萄抗真菌。     

AGC、Mogen寻求开发rDNA番茄新伙伴

农业遗传学公司即AGC(英国剑桥)和Mogen International(荷兰莱顿)正在寻找一家能够为其抗虫番茄研究项目提供资金的新伙伴。这两家公司目前正在联手开发重组DNA番茄,在此合作项目中,AGC提供豇豆胰酶抑制基因(CpTI),Mogen则提供一种双元载体,以将外源基因转移到植物中,两公司计划开创一个由番茄育种公司组成的国际俱乐部,并从中获得足以支持其产品开发以及     

通过根瘤农杆菌介导法获得菊花转基因植株

以带叶茎段为外植体,通过根癌农杆菌介导法,将兔防御素NP－1基因导入菊花品种“001”中。经梯度卡那霉素（kanamycin,Km）筛选,获得了大量Km抗性植株,其中部分Km抗性植株经Southem杂交鉴定为转基因植株。从而成功地建立了菊花遗传转化系统,为菊花分子育种奠定了基础。     

人参愈伤组织的PSY 基因遗传转化

将八氢番茄红素合成酶基因(PSY)重组于植物双元表达载体pBin438, 得到重组质粒pBin438-PSY。用冻融法将其导入农杆菌EHA101中, 采用叶盘法转化人参愈伤组织, 对所获得的抗性细胞系进行PCR和Southern检测, 并对表达产物进行 了薄层层析(TLC)、光谱分析、高效液相色谱(HPLC)检测及含量测定。结果表明PSY基因已成功导入人参愈伤组织细胞基因组, 并已得到高效表达, 表达产物b-胡萝卜素含量为143 ug.g-1人参细胞干重。本研究利用转基因方法在人参愈伤组织细胞中成功地表达了八氢番茄红素合成酶基因, 为进一步提高人参的营养价值奠定了基础。     

首次产乳的重组牛

荷兰Gene Pharming Europe公司宣布,估计12月底或96年初重组牛就会产乳。这种重组牛导入了抗菌物质人乳铁蛋白基因,在牛奶中分泌生产蛋白。如果成功的话,将是世界首例由基因操作育种的牛产乳。用基因操作改良动物,在牛奶中生产人蛋白等有用物质的“动物工场”的研究开发发展迅速。1996年在EU     

一种新型的基因定点突变方法及其在DdsA突变研究中的应用

为了发展基因突变技术,介绍一种新型的基因定点突变方法.该方法巧妙利用了基因序列中广泛存在的不完整的平端酶切位点.与传统方法相比,可以迅速地在全基因的任何部位替换核苷酸,并可以在突变实验过程中直接将目的基因克隆到T载体上,便于测序及进一步克隆.利用该方法成功地获得了DdsA（decaprenyl diphosphate synthase,十聚异戊二烯焦磷酸合成酶）在4个氨基酸位点上的19个变体酶.这些位点分布在基因的不同区域内.证明这种新方法的高效性.     

通过根癌农杆菌介导法获得菊花转基因植株

以带叶茎段为外植体,通过根癌农杆菌介导法,将兔防御ＮＰ－１基因导入菊花品种“００１”中。经梯度卡那霉素（ｋａｎａｍｙｃｉｎ,Ｋｍ）筛选,获得了大量Ｋｍ抗性植株,其中部分Ｋｍ抗性植株经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定为转基因植株。从而成功地建立了菊花遗传转化系统,为菊花分子育种奠定了基础。     

转查耳酮合酶基因矮牵牛共抑制的研究

查耳酮合酶是花色素合成途径的一个关键酶. 将查耳酮合酶基因(chalcone synthase A, chsA)导入矮牵牛(Petunia hybrida)后, 转基因植株的外源与内源chsA基因一起发生共抑制, 导致花色改变. 将β-葡糖苷酸酶基因(uidA)连在chsA基因下游形成融合基因, 通过土壤农杆菌介导的途径转化矮牵牛. 利用GUS组织染色检测到共抑制的发生具有发育特异性, 在花组织发育时期开始发生, 发生的起始需要内源基因与外源基因的相互作用. RNA原位杂交实验表明, 共抑制的发生没有组织特异性, 且初步表明共抑制发生后, RNA可能是在细胞质中发生降解的.     

S-腺苷甲硫氨酸合成酶在大肠杆菌中的克隆与表达

目的:克隆与表达大肠杆菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的基因。方法:应用PCR技术从E.coliBL21(DE3)的总DNA中扩增出1.1kb的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,将其连接到PGEMT载体上,测序证明正确后再将目的基因插入大肠杆菌高表达载体PET28a中,含有目的基因的重组质粒在大肠杆菌中进行表达与分析。结果:SAM合成酶在E.coliBL21(DE3)中的表达量达到23.6%,酶活达到4.17μmol/h.ml。结论:大肠杆菌表达出了具有生物活性的S-腺苷甲硫氨酸合成酶。     

北京棒杆菌DAHP合成酶Ⅰ基因的克隆、序列分析及表达

[目的]从北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中克隆DAHP合成酶(EC 2.5.1.54,3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase,DS)Ⅰ基因,对其进行功能验证;并将DAHP合成酶Ⅰ基因在C.pekinensePD-67进行同源表达,研究该酶的比活力与生长的相关性.[方法]分别以C.pekinense野生株ASl.299和突变株PD-67的基因组为模板,用PCR方法扩增了DAHP合成酶Ⅰ的全基因序列aro Ⅰ和前端控制序列;通过pAK6载体提高DAHP合成酶Ⅰ基因在C.pekinen-sePD-67中的拷贝数实现其同源表达.[结果]核苷酸序列分析结果表明,C. pekinense野生株AS1.299与突变株PD-67相比较,DAHP合成酶Ⅰ基因序列完全一样;通过PCR方法得到的DAHP合成酶Ⅰ基因结构功能完整,能与DAHP合成酶完全缺陷的E.coli 3257实现异源互补.突变株PD-67来源的DAHP合成酶Ⅰ基因在重组菌PD-67(pAD1)中进行了表达,在稳定期初期重组菌PD-67(pAD1)的DAHP合成酶Ⅰ的酶比活力比同期的对照菌株PD-67(pAK6)中的该酶酶比活力提高了约5倍.[结论]本工作首次证实了C. pekinense 1.299和PD-67中存在DAHP合成酶Ⅰ基因,异源互补试验证明扩增得到的DNA片段编码DAHP合成酶Ⅰ,酶学性质研究表明DAHP合成酶Ⅰ基因在C. pekinensePD-67中的同源表达将有助于提高该菌的色氨酸积累.     

人参愈伤组织的PSY基因遗传转化

将八氢番茄红素合成酶基因（PSY）重组于植物双元表达载体pBin438,得到重组质粒pBin438-PSY。用冻融法将其导入农杆菌EHA101中,采用叶盘法转化人参愈伤组织,对所获得的抗性细胞系进行PCR和Southern检测,并对表达产物进行了薄层层析（TLC）、光谱分析、高效液相色谱（HPLC）检测及含量测定。结果表明PSY基因已成功导入人参愈伤组织细胞基因组,并已得到高效表达,表达产物β-胡萝卜素含量为143μg·g^-1人参细胞干重。本研究利用转基因方法在人参愈伤组织细胞中成功地表达了八氢番茄红素合成酶基因,为进一步提高人参的营养价值奠定了基础。     

北京棒杆菌DAHP合成酶Ⅰ基因的克隆﹑序列分析及表达

摘要：【目的】从北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中克隆DAHP合成酶 (EC 2.5.1.54,3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase, DS)Ⅰ基因,对其进行功能验证;并将DAHP合成酶Ⅰ基因在C. pekinensePD-67进行同源表达,研究该酶的比活力与生长的相关性。【方法】分别以C. pekinense野生株AS1.299和突变株PD-67的基因组为模板,用PCR方法扩增了DAHP合成 酶Ⅰ的全基因序列aroⅠ和前端控制序列;通过pAK6载体提高DAHP合成酶Ⅰ基因在C. pekinen-sePD-67中的拷贝数实现其同源表达。【结果】核苷酸序列分析结果表明,C. pekinense 野生株AS1.299与突变株PD-67相比较,DAHP合成酶Ⅰ基因序列完全一样;通过PCR方法得到的DAHP合成酶Ⅰ基因结构功能完整,能与DAHP合成酶完全缺陷的E.coli 3257实现异源互补。突变株PD-67来源的DAHP合成酶Ⅰ基因在重组菌PD-67( pAD1)中进行了表达,在稳定期初期重组菌PD-67( pAD1)的DAHP合成酶Ⅰ的酶比活力比同期的对照菌株PD-67( pAK6)中的该酶酶比活力提高了约5倍。【结论】本工作首次证实了 C. pekinense 1.299和PD-67中存在DAHP合成酶Ⅰ基因,异源互补试验证明扩增得到的DNA片段编码DAHP合成酶Ⅰ,酶学性质研究表明DAHP合成酶Ⅰ基因在C. pekinensePD-67中的同源表达将有助于提高该菌的色氨酸积累。     

开发转基因新作物

合作是成功的策略 加拿大的Akkadix Corp.(La Jolla)是一家国际性的生物技术公司,今年年初与菲律宾国际水稻研究所(PhilRice)建立了合作关系,进行水稻基因的开发.     

异源表达CiRS基因拟南芥的黄酮代谢及抑菌能力研究

白藜芦醇合成酶(resveratrol synthase,RS)是查耳酮合酶基因家族的一个重要酶,在植物体内催化白藜芦醇的生成。白藜芦醇是植物产生的一种非黄酮多酚类代谢产物,是植物在受到生物和非生物胁迫时产生的植物抗毒素,已证实具有多种生理活性。从转录组数据库中筛选获得注释为CHS基因的CDS序列,以中间锦鸡儿cDNA为模板,克隆得到基因全长。序列分析、系统进化分析和转该基因拟南芥研究结果表明,该基因为RS基因,因此将其命名为CiRS(GenBank登录号MF678590)。qRT-PCR检测分析发现,中间锦鸡儿CiRS基因的表达受到干旱、NaCl、紫外线等胁迫诱导。异源表达CiRS基因抑制了拟南芥自身At CHS基因的表达。同时转CiRS基因拟南芥的抑菌活性强于野生型。这些结果均证实了中间锦鸡儿CiRS基因在转基因拟南芥中发挥了相应的功能。     

克隆化抗真菌剂1,3-D-葡聚糖合成酶

日本罗氏研究所小组成功地克隆了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞壁60%的葡聚糖合成酶——1.3-D-葡聚糖合成酶(GLS)。这种酶特异性抑制剂很可能成为有效且副作用小的抗真菌剂。在12月13日～16日神户市召开的日本分子生物学会上发表了该研究的详情。 该公司从酵母中纯化部分GLS后,以此为抗原制备单克隆抗体获得成功。进一步纯化了GLS酶(分子量20万)。用以部分肽序列为基础合成的DNA探针从酵母中克隆出GLS基因。获得了两种基因(GLS_1、GLS_2),其氨基酸序列的同源性为88%。     

英国科学家已着手用基因工程手段来改造酶

迄今为止,大多数生物工程学者只是在增加蛋白质的数量方面下功夫,例如,通过基因工程在细菌中生产胰岛素和干扰素。而今已有人在着手于提高蛋白质产量的同时,还注意改造酶的结构。英国一研究小组最近极其成功地通过基因工程的方法,将一种酶的催化活力提高了25倍。 他们所用的材料是酪氨酰tRNA合成酶,是细菌细胞中蛋白质合成所必需的许多种     

拟南芥CHS基因表达的实时荧光定量PCR检测

在简要介绍实时荧光定量PCR反应和定量原理的基础上,采用TaqMan荧光定量PCR技术,研究了UV-B辐射对拟南芥(Arabidopsis thaliana)CHS(查耳酮合成酶基因)表达的诱导,获得了与传统Northern杂交一致的结果.实时荧光定量PCR用于基因表达的定量检测,具有特异性强、自动化程度高、高效快捷,避免使用放射性同位素,能同时对多个样品中的起始模板进行准确定量等特点,因此该方法已逐渐被广泛用于基因表达的定量分析.     

帝斯曼公司与罗盖特公司将共同建设生物琥珀酸中试装置

2008年1月,荷兰帝斯曼（DSM）公司和法国罗盖特（Roquette）公司宣布共同开发发酵法可再生琥珀酸生产技术并实现商业化生产。DSM公司是荷兰的一家以生命科学为重点的综合性特殊化学制品公司,年销售额约为90亿欧元。Roquette公司是法国的一家以生产淀粉及其诱导体而著称的公司．是世界知名的糖酒精生产厂家,年销售额约为20亿欧元。     

可溶性淀粉合成酶SSⅢ基因对马铃薯的遗传转化

马铃薯是淀粉生产中重要的农作物之一,而可溶性淀粉合成酶SSⅢ是可溶性淀粉合成酶的主要活性成分,通过基因工程的手段来研究SSⅢ基因在淀粉合成中的功能可以用于改良马铃薯淀粉的品质.本研究采用根癌农杆菌介导法将强组成型表达启动子CaMV 35S驱动的可溶性淀粉合成酶SSⅢ基因的RNA干扰表达载体导入马铃薯栽培品种克新1号和克新4号中,获得了65株卡那霉素抗性植株.对抗性植株PCR检测结果表明,SSⅢ基因的干扰片段已整合到马铃薯基因组中,RT-PCR检测表明SSⅢ基因在转录水平上受到了明显抑制.该研究为马铃薯淀粉品质的改良奠定了基础.