无芽胞厌氧菌败血症42例临床分析

无芽胞厌氧菌败血症为内源性感染,占败血症总数10—20％,多在患有某种原发性疾病的基础上,免疫功能低下的患者中,由于广谱抗生素、激素的广泛应用,诱发此病。本文对42例厌氧菌败血症的临     

腹膜炎患者临床标本中无芽孢厌氧菌的分离和鉴定

120例急性腹膜炎患者临床标本中的无芽孢厌氧菌检出率高达65.8%(79/120),其中以脆弱类杆菌检出率最高(15.8%),检出率较高的其它无芽孢厌氧菌依次为产生消化链球菌(11.7%)、多毛类杆菌(10.8%)和不解糖消化链球菌(10.0%).实验结果表明,无芽孢厌氧菌是急性腹膜炎的重要病原菌.     

麻鸭肠道无芽胞厌氧菌定性、定量和定位研究

本研究采用气、液相色谱分析法(Gas-Liquid Chromatography,GLC)分析细菌代谢产物,结合微生物学鉴定和微量快速生化反应,在我国首次定量测定了麻鸭小肠、大肠每克内容物4种厌氧菌的菌数,初次确定在小肠有卵形类杆菌、发酵乳杆菌、两歧双歧杆菌、空肠弯曲杆菌4个种;在大肠有卵形类杆菌、多形类杆菌、解脲类杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、短双歧杆菌、空肠弯曲杆菌和粪弯曲杆菌9个种。类杆菌和乳杆菌等是麻鸭肠道正常微生物群。     

致病性大肠杆菌和蜡样芽胞杆菌的分离鉴定

【背景】猪只消化道疾病是养猪业上一大重要疾病,给养猪业带来一定的经济损失。大肠杆菌是引起猪腹泻的一种常见病原菌,可以引起不同日龄的猪腹泻,但主要以幼龄猪为主。【目的】旨在分离鉴定引起四川省眉山市一规模化养猪场病猪大规模腹泻的病原菌。【方法】采用常规细菌分离方法结合16S rRNA基因序列的分析方法从发病猪肝脏、胃以及污染的饲料分离鉴定细菌,并对分离株进行小鼠致病性试验、16S rRNA基因遗传进化树分析、毒力基因的检测、药物敏感试验。【结果】从腹泻猪肝脏中分离到一株致病性大肠杆菌,胃中分离到一株蜡样芽胞杆菌,并且追溯到传染源是该猪场饲料。通过检测这两株菌相应的毒力基因发现大肠杆菌不属于肠外致病性型,蜡样芽胞杆菌检测到了nheA、nheB、nheC、bceT、entFM 5种毒力基因;药敏试验表明常规的氨基糖苷类和头孢类抗生素对大肠杆菌抑菌效果较好,红霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢哌酮对蜡样芽胞杆菌抑菌效果较好,而蜡样芽胞杆菌对青霉素、阿莫西林等常规药物不敏感。【结论】饲料存在大肠杆菌和蜡样芽胞杆菌的混合污染。     

临床厌氧菌的分离和鉴定

我们从口腔、胸部、腹部和盆腔等处采集了110份临床感染标本,以自制的输送培养基立即送实验室,在厌氧手套箱(霍尔玛厌氧系统1029型)或Gas-pak罐中,行厌氧菌的分离和培养,其中64份标本检出厌氧菌,阳性率为58％。临床标本中牙周炎标本厌氧菌检出率高达100％,牙髓炎标本为85％,阑尾脓肿和腹膜炎标本为83％,胆道标本为39％,脓胸标本为57％,盆腔标本为33％,早期单纯性阑尾炎和甲状腺囊肿合并感染的标本各5份,都未检出厌氧菌。从64份阳性分离的标本中共分离到厌氧菌370株,经鉴定分别属于11个菌属32个菌种(未定种的有74株),其中类杆菌最多占45.9％(类杆菌属中脆弱类杆菌占37.6％),次为梭杆菌属和消化链球菌属,各占15.1％。革兰氏阳性无芽胞厌氧菌占8％左右,而梭菌属为8.9％,其余是二氧化碳噬纤维菌属(2.9％)、韦荣氏球菌属(1.3％)、链球菌属和纤毛菌属(1.5％)等。在厌氧菌鉴定中,我们使用了微量生化直接酶测定技术和代谢产物的气相色谱分析技术,这些方法在厌氧菌鉴定中比常规方法敏感且有较大的价值。     

苏云金芽胞杆菌6618杀虫菌株的分离和鉴定

从我国不同地区采集118份土样,利用温度筛选法分离获得一株苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)6618,镜检观察发现该菌株能产生典型的菱形晶体,PCR分析表明其含有cry1类杀虫基因。采用SDS-PAGE和质谱分析发现该菌株主要产生130 k D原毒素,其组分由Cry1Ae和Cry1Ac原毒素组成。基因序列分析表明该菌株的cry1Ac基因为已知的cry1Ac1,而cry1Ae为新型杀虫基因。毒力生测表明该菌株对棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫具有显著的杀虫效果。筛选获得的高毒力Bt菌株6618为丰富我国苏云金芽胞杆菌储备和研发新型高效生物杀虫剂提供了菌株资源。     

间隙感染和冠周炎标本中厌氧菌的分离鉴定和体外药效学的研究

本文报告１７０例间隙感染和２１０例冠周炎标本中厌氧菌分离鉴定及体外药效学试验的结果。８９．４％间隙感染标本中检出的厌氧菌,以产黑色素类杆菌、具核梭杆菌和衣氏放线菌较为多见。８４．３％冠周炎标本中检出的厌氧菌,以消化链球菌、韦荣球菌和具核梭杆菌较为多见。纸片扩散法药敏试验和ＭＩＣ测定结果表明替硝唑和克林霉素抗厌氧菌作用明显较甲硝唑和乙酰螺旋霉素为强（ｘ~＞１０．７４,Ｐ＜０．０１）;替硝唑与克林霉素的抗菌谱有差异,时Ｇ~-厌氧菌,替硝唑抑菌活性明显优于克林霉素,对Ｇ~＋厌氧菌,替硝唑抑菌活性不如克林霉素（ｘ~２＞２５．１９,ｐ＜０．０１）。     

胃癌患者胃粘膜无芽胞厌氧菌分析及药物敏感试验

对98例具有消化不良症状的患者做胃镜检查,取胃粘膜组织进行细菌分离培养,结果表明,不同的消化道疾病,胃粘膜微生物群均发生不同的改变,其中胃癌患者改变最明显,胃内微生物检出率最高,无芽胞厌氧菌检出率87.88％（29／33）,其中产亚硝酸优杆菌检出率为57.60％（19／33）,硝酸盐还原试验阳性菌株占72.70％（24／33）。这些细菌和胃癌的关系有待深入研究。对19株产亚硝酸优杆菌做药物敏感试验,结果显示,该菌对青霉素类药物均耐药,对氯霉素,红霉素,庆大霉素敏感。     

无芽胞厌氧菌、Fas蛋白表达与胃癌相关性的研究

目的探讨无芽胞厌氧菌、Fas蛋白在胃癌及癌旁组织的表达情况及其临床意义。方法无芽胞厌氧菌的检测采用微生物分类鉴定系统中API20A测定方法,Fas蛋白的检测采用免疫组化SP法,分别检测了57例胃癌组织,57例癌旁组织,20例正常胃黏膜组织中微生物的变化及Fas蛋白表达。结果胃癌组织与癌旁组织的无芽胞厌氧菌检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰阳性无芽胞厌氧菌(优杆菌、丙酸杆菌和消化链球菌等),占检出菌株的6486%(48/74),其中硝酸盐还原试验阳性菌株为5946%(44/74)。癌旁组织检出的主要为革兰阴性无芽胞厌氧菌(类杆菌、梭杆菌、紫单胞菌和韦荣球菌),占检出细菌的5714%(24/42),硝酸盐还原试验阳性菌株为1667%(7/42)。胃癌组织中Fas蛋白表达的阳性率为3509%(20/57),癌旁组织为7018%(40/57),正常胃黏膜为8500%(17/20),胃癌组织与癌旁组织、正常胃黏膜组织Fas蛋白的表达比较,差异均有非常显著性(P<001)。结论胃癌组织与癌旁组织的无芽胞厌氧菌检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰阳性无芽胞厌氧菌。胃癌组织Fas蛋白水平的表达与癌旁组织、正常胃黏膜组织Fas蛋白的表达比较,差异均有非常显著性(P<001),对阐明胃癌的发生机制、预后和转移均有重要意义。     

新疆盐碱地土壤耐盐芽胞杆菌的分离和鉴定

为了开发利用新疆盐碱地的耐盐菌资源,从该盐碱地土样中分离并纯化出11株耐盐能力较高的菌株,并从形态特征和16S rDNA序列分析对这些菌株进行鉴定。结果表明,11个菌株均为产芽胞,革兰氏阳性细菌。通过对这11个菌株的16S rDNA进行测序和同源性比较,发现它们与芽胞杆菌的相似性均达到99%。因此,这些菌株被鉴定为Bacillus sp.。11株菌均不能在NaCl质量浓度大于220 g/L条件下生长,属于中度耐盐菌株。耐盐基因的PCR扩增结果表明,只有NYT21、23、25、27、29等5株菌株含有pro耐盐基因,暗示这些耐盐芽胞杆菌具有不同的耐盐机制。     

西藏土壤中耐辐射阿氏芽胞杆菌T61的分离和鉴定

【目的】对分离自西藏土样的菌株T61进行分离、鉴定和UV辐射抗性分析。【方法】对菌株T61进行形态和生理生化鉴定;对16S r RNA基因进行克隆和测序,构建系统进化树;测定脂肪酸成分和GC含量,将T61与最相近种进行DNA-DNA杂交;测定T61的UV辐射抗性曲线。【结果】T61细胞杆状,长度约为2μm,直径约为1μm,革兰氏阳性,可产生内生孢子。G+C含量为38.02%。脂肪酸主要成分是C14:0 iso、C15:0 iso和C15:0 anteiso。16S r RNA基因与阿氏芽胞杆菌B8W22T和巨大芽胞杆菌IAM13418T相似度最高,分别达到99.93%和99.53%。DNA-DNA杂交分析表明,T61与阿氏芽胞杆菌B8W22T的相似度为81.4%,而与巨大芽胞杆菌IAM13418T的相似度只有50.3%。UV辐射抗性分析显示,T61 D10为100 J/m2,远高于辐射敏感的大肠杆菌K12和枯草芽孢杆菌等菌株。【结论】菌株T61是一株阿氏芽胞杆菌,命名为Bacillus aryabhattai T61,其对UV辐射具有较强的抗性。     

鸡肠源芽胞杆菌的分离、鉴定和抗菌活性

从人工饲养的健康三黄肉鸡的盲肠和大肠中分离出10株芽胞杆菌,对其进行菌落形态观察、革兰染色、芽胞染色和生理生化特性鉴定,确定为枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌。同时测定了它们对动物病原性大肠埃希菌和链球菌的抑菌活性。其中有9株芽胞杆菌对大肠埃希菌有抑制作用,8株芽胞杆菌对链球菌有抑制作用。结果表明芽胞杆菌分离株Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8具有作为益生菌开发的潜力。     

不常见的革兰氏阴性无芽胞杆菌的鉴定

<正> 能够在营养琼脂上生长并且通常在麦康克(Macconkey)琼脂上也生长的需氧革兰氏阴性无芽胞杆菌,经常可从人类和动物的材料以及食物,外环境的标本中分离出来。这些细菌的一部分被确定是致病菌;过去认为是非致病菌的另一部分,目前认为在某种情况下能够引起人类疾病,即在用化学疗法和免疫抑制剂之后的“医院感染”;还有一部分是共栖菌,很多菌还有经济上的重要性。 在革兰氏阴性无芽胞杆菌中,由于肠杆菌和一些弧菌在人类疾病的重要地位而得到详细的记述其特征,此外其它细菌在分类学上的位置和种的命名都还未确定,现在还没有满意的鉴定表解。因此我们承认表1所列     

水产源芽胞杆菌的分离鉴定及生物学功能分析

筛选具有较好生物学功能的芽胞杆菌(Bacillus),用以改善池塘养殖过程饲料等有机物降解、抑制水体中的病原菌,对从健康养殖鱼虾塘水体中分离的菌株,进行生化试验和16S rDNA序列分子鉴定;通过产酶、耐酸、耐高温试验,抑菌试验以及安全性试验研究分离菌株的生物学功能。试验共筛选出8株细菌,经生化试验及16S rDNA序列的分子鉴定,确定菌株ZHX17、ZHX18、ZHX31为贝莱斯芽胞杆菌（Bacillus velezensis）,菌株ZHX14、ZHX15为地衣芽胞杆菌（Bacillus licheniformis）、菌株NSX4、NSX7、NSX9为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。试验结果表明,8株芽胞杆菌均具有较强的耐酸、耐高温特性,其中3株贝莱斯芽胞杆菌具有较强的分泌淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶的能力,抑菌效果好于其他5株芽胞杆菌。安全性试验结果表明,8株芽胞杆菌对草鱼、罗非鱼相对安全。8株芽胞杆菌同时具备分泌淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶3种胞外酶的能力,其中贝莱斯芽胞杆菌具有较强的病原菌抑菌能力,可以作为病原拮抗益生菌做进一步研究。     

1株产细菌纤维素芽胞杆菌的分离及鉴定

从残次水果中分离出1株菌株ZF-7,其产物经纤维素特异性染色反应、红外光谱分析及纤维素酶水解实验后,被确定为细菌纤维素。在对ZF-7菌株常规形态学及生理生化特性鉴定的基础上,对部分长度的16S rDNA同源性进行了分析,发现ZF-7菌株与解淀粉芽胞杆菌相似度可达99.5%,现命名为Bacillus amyloliquefaciens ZF-7。对ZF-7菌株在振荡培养和静置培养条件下的发酵性能进行了初步考察,得到细菌纤维素产率分别为6.6和6.2 g/L。     

海洋中分离的抗白念珠菌芽胞杆菌性状特征及系统鉴定

对筛选自中国南海、黄海、渤海4个地区近海海水样品的7株有抗白念珠菌活性,且稳定性较强的芽胞杆菌的形态特征、培养特征及生理生化试验等进行系统分析比较,结果表明,LU-B02为凝结芽胞杆菌(Bacillus coagulans),LU-B13为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),其他各菌株为短小芽胞杆菌(Bacillius pumilus),除LU-B02耐盐度5%外,其他耐盐度达10%以上。它们均属于芽胞杆菌的第一群。16S r DNA基因同源性序列比较进一步证实LU-B02为凝结芽胞杆菌,它与凝结芽胞杆菌标准菌株ATCC15950在鉴定特征上虽然相同,但与后者相比,最高生长温度较低,耐盐性较强,可以利用阿拉伯糖、木糖、甘露醇等碳源,可水解酪素,并可稳定地产生抗白念珠菌活性物质,将其命名为Bacillus coagulans subsp.heishijiaosis。尚未见抗白念珠菌的凝结芽胞杆菌菌株的有关报道。     

解淀粉芽胞杆菌分离鉴定及培养优化的研究进展

解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是芽胞杆菌属的一个种,广泛存在于自然界,具有丰富的生境多样性,其芽胞具有抗逆性,可抵抗不良环境,同时能产生多种抗菌物质,如脂肽、抗菌蛋白和多种酶类,能抗植物病原真菌和有害细菌,该菌能形成生物膜,定植于植物根系,促进植物生长,因此对该菌进行分离鉴定以及培养优化具有重要意义。截至目前,已经从各种生境中分离、鉴定了多种有应用价值的解淀粉芽胞杆菌,通过不同策略对该菌的培养基和培养条件进行优化,使该菌相关功能得以提高。本文综述了近年来对解淀粉芽胞杆菌的生境多样性、分离鉴定及培养基和培养条件优化的策略,简要归纳了国内外关于解淀粉芽胞杆菌重要的工业和商业产品,为更好地研究和应用解淀粉芽胞杆菌提供必要的参考和借鉴。     

牙周炎患者龈下厌氧菌群的分离和鉴定

从34例成年人牙周炎和18例青少年牙周炎患者及24例正常人的龈下菌斑中分离并鉴定了26种共311株革兰氏阴性无芽胞厌氧菌,其中产黑素类杆菌、牙龈类杆菌、伴放线嗜血杆菌、具核梭杆菌、衣氏放线菌和梅氏放线菌是牙周炎患者龈下优热菌群,小韦荣氏球菌的检出率与正常人比较无显著性差异。实验结果提示牙周炎为非单一的病原体所引     

解淀粉芽胞杆菌BaX030的分离鉴定及抗菌功能

摘要:【目的】芽胞杆菌是微生物活性物的重要来源,从全国各地采集的72份土壤样品中分离出339株芽胞杆菌,研究各菌株抑菌活性,分离纯化抑菌活性物,为丰富芽胞杆菌菌种资源和微生物次级代谢物的挖掘奠定实际应用基础。【方法】采用水浴加热和稀释平板涂布等方法从河南花生地采集的土壤中筛选得到一株具有很强抑菌活性的芽胞杆菌,结合形态观察、生理生化特征和16S rRNA基因序列同源性比对分析,对该菌株进行鉴定。丙酮沉淀、葡聚糖凝胶柱层析、C18反相柱层析得到Bacillus amyloliquefaciens X030抑菌活性物,LC-MS/MS鉴定其分子量。利用滤纸片扩散法和平板对峙培养法测定抑菌谱及拮抗性质。【结果】筛选分离得到一株解淀粉芽胞杆菌,归类并命名为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens X030。BaX030对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、白色念珠菌(Candida albicans)、酵母菌( Saccharomycetes)有较强抑制效果,对水稻稻瘟病菌(Pyriculariaoryzae)、辣椒尖胞炭疽病菌(Chili pointed cell anthrax)、枇杷炭疽病菌(Gloeosporium eriobotryae speg)、烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica)有良好拮抗活性。初步确定BaX030产生的抑菌活性物为多肽类化合物。【结论】分离得到的B． amyloliquefaciens X030产生了一个对病原细菌具有较强抑制作用的多肽,同时该菌株在拮抗植物病原真菌方面也有明显的效果。     

竹菌中松胞菌素D的分离和鉴定

在筛选抗癌药的过程中,从肉球菌属(Engletomyces)的竹菌(Engleromyces goetzii Henn.)中分离到一种对皮肤癌有一定疗效的化合物。经紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱及质谱的鉴定,证实与已知的松胞菌素D(Cytocrhalashala D)是同一种物质。讨论了松胞菌素的分布及其在细胞生物学等方面的应用。