蝴蝶兰的组织培养研究

探讨蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验表明：改良型M1培养基诱导原球茎有良好的效果,M1 BA5．0mg/L对花梗芽的诱导最合适,Ml BA3．0mg／L对茎尖诱导原球茎最合适。降低分裂素浓度后,原球茎可以分化成完整植株,壮苗阶段以改良型M2 BA0．1mg/L NAA0．5mg／L效果较佳。移栽基质选用水苔,成活率高。     

蝴蝶兰组织培养研究进展(综述)

本文从蝴蝶兰外植体的选择．不同基本培养基、激素及添加物对其增殖与分化的影响,外植体褐变的防治以及生根壮苗方法等,概述蝴蝶兰组培快繁方面的研究进展,为其组培技术研究提供参考。     

蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖

蝴蝶兰 ( Phalaenopsis)属热带气生兰 ,多产于热带亚州 ,其株型美观、色彩艳丽、花期持久 ,在热带兰中有“兰花皇后”之美称 ,是兰科植物中栽培最广泛、最普及的种类之一。它的原生种只有 2 0多种 ,观赏性较差。商业上用于大规模生产的品种多为杂交种 ,其品种繁多 ,易栽培 ,深受人们的喜爱。但由于蝴蝶兰是单茎性气生兰 ,很难进行分株繁殖 ,常规情况下种子发育不完全 ,极难萌发 ,因此世界上多采用组织培养来繁殖种苗。台湾及东南亚一些国家利用组织培养技术对蝴蝶兰进行了工厂化生产 ,并出口欧美获得了较大的经济效益〔1〕。近年来我国从国…     

铁皮石斛茎段诱导丛生芽的研究

以铁皮石斛Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.的茎段作外植体,比较不同的培养基、激素等因素对茎段分化丛生芽的影响,以及不同浓度的香蕉汁和活性炭对试管苗生根的影响。结果表明：1／2MS较好,BA作用优于KT、ZT,最适浓度为2．0mg/L;丛生芽培养于1／2MS 10％香蕉汁 0．5％AC的培养基上,生根效果最好。     

外部因子对蝴蝶兰叶片原球茎状体发生的影响

对影响蝴蝶兰叶片原球茎状体 (PL B,Protocorm - like- body)发生和植株再生的外部因子进行了研究。结果表明 :BA是决定原球茎状体发生的主要因子 ;苹果汁、香蕉汁和椰子汁明显促进原球茎状体的形成 ;在 MS+BA5mg/L+椰子汁 15%的培养基中 ,蝴蝶兰叶片原球茎状体的诱导率可达 6 0 %以上 ;活性炭可有效防止外植体叶块变褐死亡 ;多效唑 1.5mg/L可促进再生植株根的形成 ,使叶片变厚变短变绿 ,使试管苗移栽成活率达 95%以上     

文心兰试管苗丛生芽高效增殖体系的建立

分别采用细胞分裂素6-BA和Ad对文心兰试管苗增殖的作用进行研究,结果表明：在与0．2mg／L的NAA配合使用时,6-BA含量在2．0～4．0mg／L水平下的培养基较适合试管苗的增殖,最大增殖系数可达7．27,苗生长健壮,叶色鲜绿,适合进一步生根移栽;Ad在1．0～6．0mg／L的范围内增殖系数较小,苗生长缓慢、矮小。但有形成丛生苗的倾向;以2．0mg／L的6～BA和1．0mg／L的Ad组合使用,易形成丛生芽苗且苗体相对较小,增殖系数也较高;接种单株小苗较大苗易形成丛生芽苗;接种连体小芽苗,全部能形成丛生芽苗,增殖系数可达10．07,适合于进一步增殖使用。6-BA与Ad配合使用结合接种连体小芽苗可建立高效的丛生芽苗增殖体系,培养基最佳激素组合为MS 6-BA2．0mg／L Ad1．0mg／L NAA0．2mg／L 3％蔗糖 0．4％琼脂粉。     

木立芦荟丛生芽诱导与植株再生

取木立芦荟带节的嫩茎作外植体,培养于附加不同种类和激素浓度的MS培养基上,在附加6－BA2．0mg/L KT1.0mg/L NAA0.4mg/L时,丛生芽诱导效果最佳,数量最多;在附加6－BA1．0mg/L NAA0.2mg/L时,丛生芽长势最好,芽长且健壮,在附加NAA0．4mg／L时,生根效果最佳,当苗高3．0cm以上,根长达2．0cm以上时,打开瓶盖锻炼3d后,移栽于蛭石,河砂,腐叶土＝2：2：1的混合基质土壤中,成活率达93．2％。     

蝴蝶兰原球茎液体增殖培养的研究

以茎尖诱导形成的原球茎为外殖体,采用液体培养方式探讨了不同浓度的激素配比、蔗糖浓度和添加不同量的新鲜液汁对蝴蝶兰原球茎增殖的影响,并比较了液体和固体两种培养方式的原球茎增殖特征.结果表明:不同浓度的外源激素及其配比对蝴蝶兰原球茎增殖影响不明显,但对原球茎生长影响较大,6-BA 2.0 mg/L+Ad 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的激素浓度组合比较适合蝴蝶兰原球茎增殖,蔗糖浓度对蝴蝶兰原球茎增殖和生长影响较大,适合蝴蝶兰PLBs增殖的蔗糖浓度为20 g/L,添加10 % ～40 %的新鲜椰汁对蝴蝶兰原球茎增殖生长有明显促进作用;原球茎液体增殖培养的时间不宜超过4周,5周内连续培养增殖曲线呈倒"V"字形;液体增殖培养的原球茎分化成苗的时间相对较晚.     

蝴蝶兰原球茎增殖分化影响因子探讨

采用3个月胚龄的种胚播种形成的原球茎,初代培养时间在2.5~3个月之间换瓶转接,原球茎生长状况较好,分化形成的芽苗生长健壮;以1/2MS为基本培养基培养30d,原球茎增殖率达332%,MS培养基更有利于分化,培养2个月分化发芽率达90.6%;附加不同细胞分裂素原球茎的增殖率为6-BA >KT >Ad+KT >Ad;NAA浓度在0~1.0mg/L,对原球茎增殖分化影响不明显。     

版纳蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖

1植物名称 版纳蝴蝶兰（Phalaenopsis mannii Rchb．F．）。 2材料类别 种子。 3培养条件 种子萌发培养基：（1）MS;（2）MS＋椰子乳100mL·L^-1;（3）1／2MS;（4）1／2MS＋椰子乳100mL·L^-1;（5）1／4MS;（6）1／4MS＋椰子乳100mL·L^-1;（7）1／2MS＋苹果汁100mL·L^-1;     

羧化壳聚糖在蚊净香草组培中的应用研究

本文研究羧化壳聚糖在蚊净香草组培中的应用。试验结果表明,在诱导培养基中附加2 g/L羧化壳聚糖,有利于提高蚊净香草诱导率;附加4 g/L羧化壳聚糖,试管苗增殖率达6倍,且根系发达。     

蝴蝶兰组培快繁及热激处理抑制褐变的研究

以9个蝴蝶兰品种的花梗和无菌苗叶片为试材,研究了不同品种间不定芽诱导率及增殖系数的差异,并选出增殖系数高、中、低的3个代表性品种‘内山姑娘’、‘梦幻兄弟’和‘万花筒’,对不定芽增殖条件进行优化,并对培养过程中褐变严重的品种‘内山姑娘’进行了热激处理抑制褐变的研究。结果表明:(1)相同条件下,不同蝴蝶兰品种间不定芽诱导率和增殖(分化)系数存在显著差异,且花梗芽诱导率和繁殖系数高的品种,其叶片的不定芽诱导率和分化系数也较高。(2)6-BA是影响蝴蝶兰不定芽增殖的主要因素,椰汁次之。培养基1/2MS+7.0mg.L-16-BA+0.2mg.L-1 NAA+100mL.L-1椰汁适于‘内山姑娘’和‘梦幻兄弟’品种的不定芽增殖,1/2MS+5.0mg.L-1 6-BA+0.2mg.L-1 NAA+50mL.L-1椰汁适合‘万花筒’品种的不定芽增殖。(3)40℃热激处理9min恢复48h后再切割接种能够显著减轻蝴蝶兰‘内山姑娘’叶片的褐变程度,热激处理后叶片组培过程中的褐变指数、总酚含量以及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著低于对照,且三者的两两之间均具有极显著正相关关系,证明短时间的热激处理可降低酚合成酶PAL的活性,减少酚类化合物的积累,从而减轻组培过程中的褐变伤害。     

应用RAPD技术辅助蝴蝶兰辐射育种

应用RAPD技术对蝴蝶兰辐射诱变苗进行分析。结果表明,对蝴蝶兰5种不同形态的诱变苗和对照苗进行PCR扩增,13个引物所产生的RAPD谱带大小为200~3 000 bp,共扩增77条带,多态性带61条,多态率79.22%。13个引物平均扩增的带数为5.92,引物S0036最多,为9条带。比较诱变苗与对照苗谱带,两者有差异,表明诱变苗是由基因突变引起。     

蝴蝶兰胚性愈伤组织诱导的氧化还原动态

离体培养蝴蝶兰（Phalaenopsis spp.）类原球茎切块诱导胚性愈伤组织,在培养第11～18 d时出现胚性细胞,第25～32 d观察到幼嫩的球形胚。在培养第0～11 d,外植体.OH相对含量波动不大,O2.生成速率持续提高并达到高峰,H2O2水平明显提高,抗氧化能力在低位波动,推测外植体可能经受较强的氧化胁迫,以利细胞脱分化和获得胚性潜能。此外,此期间SOD活性持续提高,POD和CAT活性达到一个高峰。在愈伤组织诱导全过程中,总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、H2O2水平基本上都持续提高,与SOD活性均极显著正相关,SOD是影响培养物清除自由基能力和提高抗氧化水平的主要因素。综合分析实验结果表明,在蝴蝶兰胚性愈伤组织诱导过程中,SOD、O2.和H2O2起到关键的作用。     

蝴蝶兰无菌萌发技术的研究

研究了蝴蝶兰的种子无菌萌发技术。结果表明120d的蒴果已达生理上的成熟,在KC、1/2MS、花宝1号基本培养基上分别附加香蕉汁、苹果汁、胰蛋白胨能较好地萌发,萌芽率为85%。9g·L-1琼脂、pH5.2～5.4、不添加植物生长调节剂有利于种子萌发。附加1mg·L-1KT+0.1mg·L-12,4-D有利于类原球茎状体PLB的诱导,附加1mg·L-1NAA+1～3mg·L-1KT或3～5mg·L-1BA有利于PLB的增殖。1/2MS、花宝1号基本培养基上附加香蕉汁、苹果酸、胰蛋白胨和活性炭有利于生根和幼苗生长。     

决明组织培养的研究

以草决明无菌苗子叶为外植体,接种于７类诱导愈伤组织的培养基上：Ａ．ＭＳ＋２．０２,４－Ｄｍｇ／Ｌ（以下单位省略）＋０．３ＢＡ＋０．２ＮＡＡ．Ｂ．ＭＳ＋０．２２,４－Ｄ十０．２ＢＡ＋２．０ＮＡＡ．Ｃ．ＭＳ＋１．０２,４－Ｄ＋０．５ＢＡ＋０．２ＫＴ．Ｄ．ＭＳ＋０．７ＢＡ＋１．５ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｅ．ＭＳ＋１．５２,４－Ｄ＋０．７ＢＡ十０．２ＭＡＡ．Ｆ．ＭＳ＋０．４２．４－Ｄ＋１．０ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｇ．ＭＳＢ（ＭＳ的无机成份和Ｂ５有机成分）＋０．１５ＮＡＡ＋ＢＡ,ＫＴ和ＺＴ各０．５。８～１５天后分别有９０～９９．６％的子叶片被诱导出愈伤组织,并且Ｆ．与Ｃ．类培养基对诱导愈伤组织比较理想,放于Ｇ培养基上的愈伤组织有９．２～３０．２％的芽分化率。芽在生根培养基１／２ＭＳ＋０．２ＩＢＡ中、９８％生根,形成完整的再生植株。