坛紫菜凝集素的糖结合专一性和细胞凝集作用

坛紫菜的磷酸盐缓冲液浸取液,经硫酸铵沉淀和DEAE－Sepharose,SephadexG-100二步层析纯化,获得纯化的坛紫菜凝集素（PHL）。该凝集素能与3种单糖（阿拉伯糖,半乳糖,木糖）及麦芽糖专一性结合,其中与麦芽糖结合最强。细胞凝集实验结果显示,PHL能凝集兔,绵羊及鸡红细胞而不能凝集鸭,鸽子及人血红细胞,PHL还能凝集海洋微藻－绿色巴夫藻和淡水微藻－蛋白核小球藻,它们的凝集活性与藻细胞密度有关。不同状态的细菌和酵母细胞对PHL反应不同,表明随着细胞状态的改变,细胞表面的凝集素受体也随之发生变化。     

人胃癌结合β半乳糖苷凝集素对不同细胞的凝集作用

本文使用去唾液酸胎球蛋白柱从人溃疡型胃癌中分离纯化出一种对β半乳糖苷键有高亲和力的凝集素(LBP)。乳糖是其有效抑制剂。研究结果表明,LBP既能促进正常细胞间的凝集,又能促进或介导人胃癌细胞与正常细胞间的粘附;共价结合LBP的琼脂糖颗粒对红细胞的吸附能力增强。而这些作用都可以被乳糖完全或部分抑制。结果提示,LBP可能是在人胃癌细胞定向转移中起作用的一种重要分子。     

凝集素与细胞凝集 Ⅳ.肝癌细胞ConA“受体”的分析

用放射受体法测定正常鼠肝细胞和腹水型肝癌(HepA)细胞表面膜的ConA“受体”,两者的Scatchard 图形迥异,正常肝细胞为一直线,而HepA 细胞为一凹面向上的曲线。本文用加热、稀释及葡萄糖竞争解离试验,结果均不支持此凹形曲线是由于负协同效应所引起,而提示存在两类不同亲和力的“受体”。50℃加热处理后,高亲和力“受体”消失,仅留下低亲和力“受体”。加热前后细胞表面的ConA“受体”数基本不变。HepA 细胞凝集效应强度与高亲和力“受体”的丧失有平行关系。此外,温度对“受体”的影响有一骤变过程,48℃时尚保持有高亲和力“受体”,50℃处理后则全部消失,这一骤变类似膜脂质的相变。究竟是“受体”蛋白质的变性还是膜脂质的相变造成高亲和力“受体”的消失,尚需进一步研究。     

胆固醇在细胞膜中的作用

针对高中生物学教材对胆固醇在细胞膜中功能的认知,将细胞中非极性分子间相互作用的理论,与温度影响脂质体膜流动性的实验结果相结合进行分析,提出胆固醇并非细胞膜中单纯的"刚性"结构,而是对细胞膜的流动性起重要调节作用的分子。     

凝集素与细胞凝集——Ⅳ.肝癌细胞ConA“受体”的分析

用放射受体法测定正常鼠肝细胞和腹水型肝癌(HepA)细胞表面膜的ConA“受体”,两者的Scatchard图形迥异,正常肝细胞为一直线,而HepA细胞为一凹面向上的曲线。本文用加热、稀释及葡萄糖竞争解离试验,结果均不支持此凹形曲线是由于负协同效应所引起,而提示存在两类不同亲和力的“受体”。50℃加热处理后,高亲和力“受体”消失,仅留下低亲和力“受体”。加热前后细胞表面的ConA“受体”数基本不变。HepA细胞凝集效应强度与高亲和力“受体”的丧失有平行关系。此外,温度对“受体”的影响有一骤变过程,48℃时尚保持有高亲和力“受体”,50℃处理后则全部消失,这一骤变类似膜脂质的相变。究竟是“受体”蛋白质的变性还是膜脂质的相变造成高亲和力“受体”的消失,尚需进一步研究。     

牛舌菌凝集素的分离、性质及细胞凝集活性

牛舌菌子实体经生理盐水抽提、硫酸铵沉淀、DEAE-Cellulose和Sephadex G-100柱层析纯化得到牛舌菌凝集素(Fistulina hepatica Lectin,FHL)。FHL经PAGE显示单一条带,SDSPAGE测得其亚基相对分子质量为63．6KD,Sephadex G-100凝胶过滤测得相对分子质量为63KD,FHL中性糖含量为9．7％,IEF-PAGE测得其等电点为5．36。该凝集素对人的A、B、AB和O型血细胞具有凝集作用,对兔红细胞的凝集作用可被乳糖和N-乙酰半乳糖胺所抑制。氨基酸组成分析表明,FHL含有16种氨基酸,其中天冬氨酸和谷氨酸含量较高。FHL对热、酸具有一定的稳定性,经60℃处理10min,仍有较高的活性,在pH3．0～6．0范围内较稳定,但在碱性pH环境中(pH7．0～10．8),FHL的凝集活性下降明显。β-消去反应测得其糖和蛋白质的连接键为O-型糖肽键。抗肿瘤活性测定表明,FHL对HeLa细胞具有明显抑制作用。     

凝集素与细胞凝集 Ⅰ.伴刀豆球蛋白A及植物血凝素对正常细胞、胚胎及肿瘤细胞的凝集效应

自从 J.C.Aub 于1963年报道麦胚凝集素(WGA)对正常及肿瘤细胞的凝集作用有显著差异之后,已在数十种肿瘤及病毒转化的细胞也得到类似的结果。近年来又发现胚胎及分裂细胞也像肿瘤细咆一样易被凝集素凝集。因此,对凝集素的凝集效应与细胞癌变、繁殖和分化的关系,受到高度重视。     

斑玉蕈Hypsizygus marmoreus凝集素的部分性质和细胞凝集活性分析

斑玉蕈子实体经生理盐水抽提、30%~60%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-Cellulose和SephadexG-100柱层析纯化得到斑玉蕈凝集素(HypsizygusmarmoreusLectin,简称HML)。HML经PAGE显示单一条带,SDS-PAGE测得亚基相对分子质量为34.2kD,SephadexG-100凝胶过滤测得相对分子质量为35kD,中性糖含量为7.2%,含有17种氨基酸,IEF-PAGE测得其等电点为8.15。该凝集素能凝集多种动物红细胞和人的A、B、AB和O血型红细胞,对兔红细胞的凝集作用可被甘露糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺和岩藻糖所抑制。HML对热较敏感,经50℃处理10min,凝集活性下降明显,但对酸碱具有一定的稳定性,在pH5.0~8.0范围内较稳定。β-消去反应测得其糖和蛋白质的连接键为O-型糖肽键。     

虎纹捕鸟蛛凝集素-I(SHL-I)的细胞凝集活性分析

采用人红细胞悬液在微量血凝板上测试了 1 1种单糖对虎纹捕鸟蛛凝集素 - I ( Selenocosmiahuwena lectin- I,SHL - I)的凝集活性的影响 .测试的糖类包括 D-半乳糖 ,甲基 -α- D甘露糖苷 ,D-甘露糖 ,D-甘露糖胺 ,D-葡萄糖 ,N-乙酰 - D-葡萄糖胺 ,D-葡萄糖胺 ,L -木糖 ,L-岩藻糖 ,N-乙酰神经氨酸 ,N-乙酰 - D-半乳糖胺 .测试结果表明 ,只有 D-甘露糖胺对 SHL- I的凝集活性表现出明显的抑制作用 .说明 D-甘露糖胺可能是与 SHL- I专一性结合的糖基 .温度适应性实验表明 SHL- I有较高的热稳定性 ,经 1 0 0℃处理 30 min,仍保持大部分凝集活性 .p H适应性实验表明 ,在碱性 p H环境下SHL- I的凝集活性明显下降 .     

ROS与细胞自噬在Ⅱ型糖尿病中的生物学作用

Ⅱ型糖尿病发病因素复杂,长期高血糖和高血脂刺激所产生的氧化应激反应能调节葡萄糖刺激的胰岛素分泌,促进胰岛β细胞凋亡、导致胰岛功能障碍,是糖尿病及其并发症发生发展中的一个重要因素;同时,细胞自噬作为一种分解代谢途径,在维持胰岛细胞内环境稳态中发挥重要作用。活性氧族(Reactive Oxygen Species,ROS)的产生是氧化应激的基本环节,同时与细胞自噬存在复杂密切的关系,ROS既有一定的细胞毒性损伤作用,同时还作为重要的细胞内分子,活化许多信号转导通路,特别是参与自噬的信号转导。本文就ROS与细胞自噬在糖尿病中的生物学作用进行综述,旨在探讨糖尿病的发生机制,为糖尿病的防治寻找新策略。     

猪精子凝集素在精卵结合中的作用机制

猪精子凝集素（ＢＳＬ）位于精子头部,既与精子蛋白结合,亦与透明带糖蛋白ＺＰ３结合。并且ＢＳＬ自身分子间亦会聚合。与ＺＰ３结合的片段亦结合于岩藻素－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和柱,但不与胎球蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱结合。该片段具有较强的抑制精卵结合的活性。ＢＳＬ经ＮＢＳ修饰后,血凝活力大大下降,同时推动与精子结合的活性,但不影响它与ＺＰ３的结合。修饰后的ＢＳＬ亦显著抑制精卵结合。表明ＢＳＬ以两个不同的部     

稻胚凝集素对稻胚等细胞的凝集效应及其在稻胚发育过程中的出现时间与分布位置

稻胚凝集素(RGL)对稻胚、稻苗叶、根细胞,以及稻幼胚胚芽、胚根愈伤组织悬浮细胞都有凝集作用,RGL对元麦及烟草叶原生质体也能凝集。N-L酰葡萄糖胺(GlcNAc)有抑制RGL对细胞的凝集作用,但对胚根愈伤组织细胞的抑制效应不明显。水稻等细胞表面具有能与RGL专一结合的位点,只是胚根和胚芽愈伤组织细胞表面的糖蛋白分子有一定差异。RGL对水稻、元麦及烟草的细胞或原生质体的凝集效应不存在种间的专一性。RGL含量随胚的分化发育而不断增加,成熟中后期胚内RGL含量达到成熟时程度;胚芽鞘细胞中RGL分布广泛,胚芽、胚根的外层细胞显色深于内层,早期的胚乳细胞、子房内层、珠被、珠心细胞中均有RGL显色反应,但它的糖结合专一性与成熟胚RGL可能不同。     

斑玉蕈Hypsizygus marmoreus凝集素的部分性质和细胞凝集活性分析

斑玉蕈子实体经生理盐水抽提、30%~60%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-Cellulose和SephadexG-100柱层析纯化得到斑玉蕈凝集素(HypsizygusmarmoreusLectin,简称HML)。HML经PAGE显示单一条带,SDS-PAGE测得亚基相对分子质量为34.2kD,SephadexG-100凝胶过滤测得相对分子质量为35kD,中性糖含量为7.2%,含有17种氨基酸,IEF-PAGE测得其等电点为8.15。该凝集素能凝集多种动物红细胞和人的A、B、AB和O血型红细胞,对兔红细胞的凝集作用可被甘露糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺和岩藻糖所抑制。HML对热较敏感,经50℃处理10min,凝集活性下降明显,但对酸碱具有一定的稳定性,在pH5.0~8.0范围内较稳定。Β-消去反应测得其糖和蛋白质的连接键为O-型糖肽键。     

细胞膜分子在表达Fas配体的小鼠胸腺树突状细胞诱导凋亡中的作用

通过TUNEL方法证明在小鼠胸腺组织中 ,有凋亡的胸腺细胞存在 ,但胸腺微环境对胸腺细胞的凋亡的调控机理一直不明 .研究发现Fas配体 (FasL)阳性细胞主要分布在胸腺的髓质区 .小鼠胸腺树突状细胞系 (MTSC4)表达FasL ,在体外介导34 %的单阳性细胞的消除 ,其中使Fas阳性的胸腺细胞的比率减少 6 0 % .MTSC4促细胞凋亡的作用 ,可被单糖GalNAc完全阻断 ,被抗胸腺基质细胞TSC表面分子的单抗PF1 8- 3和 (D + )半乳糖部分阻断 .这说明胸腺树突状细胞直接参与对胸腺细胞凋亡的调节 ,其作用机理中包括多种膜分子的相互作用     

凝集素在植物中的生理功能

本文介绍了近年来凝集素在豆科植物—根瘤菌共生结瘤固氮、植物防御和生长发育中所起作用的一些研究进展,并讨论了凝集素在植物体内的一些可能的生理功能。     

内源凝集素与细胞分化和细胞恶化

动物细胞中的凝集素叫内源凝集素,介导蛋白和糖的相互作用,是细胞-细胞识别、细胞粘附和细胞分化中的重要因素。在胚胎形成和器官发育过程中内源凝集素有发育调节作用。近年来又发现内源凝集素和细胞恶化、肿瘤恶性程度以及肿瘤转移都有关,是个值得研究的问题。     

线粒体在细胞凋亡中的变化与作用

要在各种凋亡信号的诱导下,线粒体会发生显著的结构与功能性的变化,包括各种促凋亡蛋白(如细胞色素c,凋亡诱导因子等）的释放,线粒体膜电位的丢失,电子传递链的变化,以及细胞内氧化还原状态的变化;核转录因子以线粒体为中介也参与了细胞凋亡的调控。线粒体在哺乳动物细胞凋亡中具有核心地位和作用,昆虫细胞凋亡的研究表明,线粒体与昆虫细胞凋亡也有密切的关系。线粒体在细胞凋亡中的作用可能具有普遍意义。     

凝集素与细胞凝集 Ⅲ.放射受体法测定正常鼠肝及腹水型肝癌细胞的ConA受体

近年来,用放射受体法研究激素与受体的相互作用取得不少进展。用同位素标记的凝集素测定细胞表面膜的凝集素受体,文献也有不少报道,其中尤以ConA为材料者较多,但多数结果不能说明受体与凝集素强度之间有对应关系。不过,这些数据都是用饱和分析法测定细胞与ConA的最大结合量,而未作受体与ConA间结合常数(Ka)的测定,可是Ka是受体分析中最关重要的一项数据。因为专一     

丹参酮Ⅱ-A在RAW264.7细胞系中的抗炎症作用机制

目的:丹参酮Ⅱ-A是丹参的一种重要成分。研究丹参酮Ⅱ-A的抗炎症机制。方法:以小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7作为药物刺激靶细胞,使用不同浓度的分析纯丹参酮Ⅱ-A对RAW264.7细胞系进行刺激,在细胞被刺激24、48h后,使用MTT比色法和半定量RT-PCR法对刺激后的细胞进行检测。结果:通过MTT比色法检测,发现丹参酮Ⅱ-A抑制炎症细胞的增殖,初步计算出丹参酮Ⅱ-A的半抑制浓度(IC50)为43.2μmol/L;在半定量RT-PCR实验中发现,在发生炎症后,丹参酮Ⅱ-A通过抑制磷脂酶A2来减轻炎症。结论:在炎症发生后,丹参酮Ⅱ-A通过抑制磷脂酶A2来达到其抗炎症的作用。