舒巴坦与亚胺培南对多重耐药鲍曼不动杆菌体外联合抗菌活性研究

目的评价舒巴坦与亚胺培南对临床分离的80株多重耐药鲍曼不动杆菌的体外联合抗菌活性,为临床治疗多重耐药鲍曼不动杆菌的感染提供实验依据。方法采用琼脂稀释、棋盘设计法测定舒巴坦与亚胺培南单用及联合应用对临床分离的80株多重耐药鲍曼不动杆菌的最小抑菌浓度（MIC）,并计算抑菌浓度指数（FIC）,判定联合效应：FIC≤0．5为协同作用,0．5〈FIC≤1．0为相加作用,1．0〈FIC≤2．0为无关作用,FIC〉2．0为拈抗作用。结果舒巴坦与亚胺培南联州后,两种药物对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC值均显著降低,FIC指数在0—0．5、0．5～1的百分率为12．5％、85．0％。结论舒巴坦与亚胺培南联用对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用主要呈现协同和相加作用,并以相加作用为主。     

单味中药对多重耐药鲍曼不动杆菌 体外抑菌作用的研究

目的研究鱼腥草等10种广谱抗菌中药对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用,为临床治疗多重耐药鲍曼不动杆菌的感染提供新的治疗思路和途径。方法采用药敏纸片琼脂扩散法和微量肉汤稀释法测定板蓝根、鱼腥草、黄芩、黄连、五倍子、金银花、苦参、连翘、乌梅和穿心莲等10种单味中药的抑菌效果和最低抑菌浓度(MIC)。结果五倍子对多重耐药鲍曼不动杆菌抑菌作用最强,抑菌圈直径为17~30mm,MIC值为0.975mg/mL;黄芩也有较好的抑菌效果,MIC值为15.63mg/mL;乌梅抑菌作用相对较弱;而黄连、鱼腥草、连翘、板蓝根、苦参、金银花和穿心莲的抑菌活性很弱甚至无抑菌效果。结论 10种单味中药中五倍子对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌效果最强,为临床用药提供有效指导。     

ICU鲍曼不动杆菌感染的流行状况及耐药性分析

目的对ICU住院患者鲍曼不动杆菌感染的流行状况及耐药情况进行调查,为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法对2012年7月至2013年12月ICU住院患者送检的693份各种临床标本进行病原菌的分离鉴定,对分离出的鲍曼不动杆菌采用K-B法做体外药敏试验。结果 693份临床标本共分离出110株鲍曼不动杆菌,其中多重耐药菌株有103株（93.6%）,感染的标本来源以痰液最为常见（86.4%）。鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药广泛,对氨苄西林、头孢唑啉100%耐药,对哌拉西林、头孢曲松、复方新诺明、氨曲南、环丙沙星、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦及庆大霉素等多种抗菌药物的耐药率大于80.0%。结论 ICU患者鲍曼不动杆菌感染多由多重耐药菌株引起,感染部位以下呼吸道为主,其对抗菌药物耐药情况相当严峻,加强耐药性监测及合理使用抗菌药物,对减少耐药菌株的产生具有重要意义。     

鲍曼不动杆菌体外诱导耐药及其诱导前后交叉耐药和呼吸耗氧率分析

【背景】鲍曼不动杆菌是院内感染的重要病原菌,因其耐药率高、治疗难度大而备受关注。然而,对于该菌的交叉耐药及耐药相关因素尚未完全阐明。【目的】通过体外诱导分别获得耐美罗培南或耐替加环素的鲍曼不动杆菌菌株,并研究其诱导前后的交叉耐药性和细菌呼吸耗氧率差异。【方法】采用多步法对鲍曼不动杆菌ATCC19606进行体外诱导耐药,PCR扩增诱导前后菌株的16S rRNA基因并测序鉴定,微量肉汤稀释法检测诱导前后鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南、替加环素、阿米卡星、头孢吡肟及左氧氟沙星等抗菌药物的最低抑菌浓度变化,Seahorse XF^e96细胞能量代谢实时测定仪对诱导前后菌株的耗氧率进行分析。【结果】通过88d的体外诱导实验,分别获得耐美罗培南或耐替加环素的鲍曼不动杆菌ATCC19606菌株。耐美罗培南鲍曼不动杆菌ATCC19606对替加环素、亚胺培南、阿米卡星、左氧氟沙星仍处于敏感状态,但是对头孢吡肟交叉耐药;耐替加环素鲍曼不动杆菌ATCC19606对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、左氧氟沙星及头孢吡肟仍处于敏感状态。鲍曼不动杆菌ATCC19606被美罗培南或替加环素诱导耐药...     

主动外排机制在鲍曼不动杆菌耐药性中的作用

目的探讨细菌主动外排机制在临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性中的作用。方法琼脂稀释法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药性,测定经外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙（CCCP）处理前后鲍曼不动杆菌对抗生素最小抑菌浓度（MIC）的变化,以聚合酶链反应（PCR）、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测多重耐药主动外排基因以出及其表达水平。结果临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗生素耐药率高且具有多重耐药性,并存在药物的主动外排。所有临床分离的菌株均能检测到adeB基因,但多重耐药株表达水平明显高于敏感株（P〈0．01）。结论临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性尤其是多重耐药性与外排泵介导的耐药机制密切相关。     

黄酮化合物对耐药性鲍曼不动杆菌抑菌作用研究

为探索中药黄酮化合物对耐药性鲍曼不动杆菌的抑菌效果。研究通过微量肉汤稀释法,考察40种中药及天然来源的黄酮化合物对三株耐药性鲍曼不动杆菌菌株的体外抑菌作用,测试其最低抑菌浓度与最低杀菌浓度;采用结晶紫染色法进一步测定目标化合物对鲍曼不动杆菌生物被膜形成的能力;探索黄酮联合头孢哌酮/舒巴坦对鲍曼不动杆菌的抑菌效果。研究表明,黄酮单体对于鲍曼不动杆菌具有不同程度的体外抑菌作用。其中部分具有轻微作用,其最小抑菌浓度仅为0.5 mg/mL;黄芩素和汉黄芩苷具有显著的抑菌作用,其最小抑菌浓度分别为0.062 5和0.125 mg/mL;同时,黄芩素对鲍曼不动杆菌生物被膜形成具有明显的抑制作用。此外,黄芩素和头孢哌酮/舒巴坦联合作用于耐药鲍曼不动杆菌与单用黄芩素或头孢哌酮/舒巴坦比较,浓度有所降低。综上,黄芩素对耐药性鲍曼不动杆菌有较好的体外抑菌效果,这为治疗耐药性鲍曼不动杆菌引发的感染的治疗提供新思路和方向。     

鲍曼不动杆菌的临床分布特点及耐药性分析

调查鲍曼不动杆菌的临床分布及其对抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供依据。将哈尔滨医科大学第一附属医院临床各种来源的鲍曼不动杆菌1582株采用K-B法进行药敏试验,并对结果进行统计分析。2008至2010年共检出鲍曼不动杆菌1582株,临床分布以ICU最多(484株,占54.5%)。对抗菌药物的耐药率逐年增高,ICU抗菌药物的耐药率明显高于非ICU病区。该菌株对临床常用抗菌药物高度耐药和多重耐药,对亚胺培南和美罗培南耐药率高达90.9%和90.3%。鲍曼不动杆菌耐药情况相对严重,临床须重视鲍曼不动杆菌的感染,加强院內感染的控制及耐药性的监测,根据药敏结果选择合适抗生素,延缓耐药性进程。     

多重耐药鲍曼不动杆菌同源性分析

目的研究台州医院中心重症监护病房（ICU）及脑外重症监护病房（SICU）2006年1月出现的多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）的耐药性、碳青霉烯酶基因型及同源性。方法运用VITEK-60全自动微生物仪对分离自2006年1月ICU和SICU患者多重耐药鲍曼不动杆菌8株进行菌种的重新鉴定,采用微量板稀释法测定β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹喏酮类等17种抗菌药物的体外最低抑菌浓度（MIC）（其中头孢哌酮／舒巴坦、美洛配能采用K-B法测定耐药性）。采用PCR对8株菌株进行OXA型碳青霉烯酶基因型检测,运用脉冲场凝胶电泳分析菌株的同源性。结果8株菌株仅对头孢哌酮／舒巴坦敏感,对头孢菌素类、氨基糖苷类、氟喹喏酮类和碳青霉烯类等抗菌药物均显示出较高水平的耐药;8株菌株均产OXA-23型碳青霉烯酶;脉冲场凝胶电泳证实其为同一克隆。结论本组鲍曼不动杆菌为多重耐药株,同一克隆株在不同感染个体的相互传播,导致了这次院内感染的流行。     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性分析及抗菌治疗

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌耐药谱和临床特点。方法分析2004年12月-2005年9月分离自住院患者标本的鲍曼不动杆菌耐药性资料及其治疗情况。结果从163株标本中分离出156株多重耐药鲍曼不动杆菌,对头孢哌酮／舒巴坦耐药率最低（20．51％）,其次是亚胺培南（38．46％）;临床常用6种抗菌药物治疗差异有显著性。结论对多重耐药鲍曼不动杆菌感染的患者应以亚胺培南／西司他丁和β-内酰胺酶抗菌抑制剂作为第一线抗菌药物。病情严重尤其是全耐药时可联合用药,可提高效果。     

重症监护病房呼吸机相关性肺炎中鲍曼不动杆菌耐药性的动态分析

目的探讨重症监护病房呼吸机相关性肺炎(VAP)中鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)的分布特点和耐药性,为临床防治鲍曼不动杆菌感染提供依据。方法对机械通气>48 h的79例患者的气管抽吸物(ETA)进行细菌定量培养和药敏测定。结果回顾性分析79例VAP患者ETA培养出病原菌214株,其中鲍曼不动杆菌79株(36.9%)。鲍曼不动杆菌对常见抗菌药物的耐药率呈上升趋势,出现较多多重耐药和泛耐药菌株。头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别是55.6%和68.4%,均呈上升趋势。结论鲍曼不动杆菌是VAP常见病原菌之一,鲍曼不动杆菌的耐药性呈上升趋势,特别是多重耐药和泛耐药菌株,应引起高度重视。     

外排泵抑制剂对阴沟肠杆菌耐药表型影响

目的探讨主动外排泵在临床分离阴沟肠杆菌多重耐药的作用。方法收集、分离及鉴定阴沟肠杆菌,采用琼脂稀释法测定多重耐药泵抑制剂氰氯苯腙(carbonyl cyanldem-chlorophenylhydrazone,CCCP)应用前后,阴沟肠杆菌对头孢他啶、阿米卡星、阿奇霉素、左氧氟沙星和四环素5种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)的变化。结果以上述5种抗生素为底物8,3株阴沟肠杆菌中,分别有303、61、9、32和28株在10μg/mL CCCP条件下MIC值降低4倍或4倍以上,其中有19株同时对3种及以上抗生素有明显外排作用。外排泵存在于耐药株和非耐药株中,但对耐药株的影响较大。结论主动外排系统广泛存在于临床分离阴沟肠杆菌中,是引起阴沟肠杆菌多重耐药的重要机制。外排泵抑制剂CCCP可增加阴沟肠杆菌对抗菌药物的敏感性。     

2008-2012年484株肺炎克雷伯菌耐药性分析及耐药机制的初步研究

目的回顾性分析近五年来医院住院及门诊病原菌感染患者中肺炎克雷伯菌的分离趋势,探讨其对常规抗菌药物的耐药性变迁和相关耐药机制。方法采用法国梅里埃公司的Vitek-2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,部分菌株采用微量生化管鉴定,部分药敏试验采用琼脂扩散法（KB）,药敏结果判读按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）制定的标准判读,纸片法表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,EDTA双纸片法检测金属酶表型。结果五年间484株肺炎克雷伯菌部分药物耐药率正逐年上升,其常见药物平均耐药率如下：阿米卡星（3.0%）,复方新诺明（31.1%）,头孢三嗪（14.5%）,环丙沙星（18.7%）,氯霉素（21.6%）,特治星（6.3%）,头孢他啶（22.0%）,头孢噻肟（23.6%）,舒普深（4.2%）,呋喃妥英（26.9%）,美罗培南（2.1%）,ESBLs阳性99株（20.4%）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型阳性5株,EDTA双纸片法检测金属酶表型阳性2株。结论部分药物耐药率逐年上升的有复方新诺明、环丙沙星、头孢他啶、头孢噻肟;耐药率较低的有美罗培南、阿米卡星、舒普深、特治星、头孢三嗪。应加强细菌耐药性监测,以及耐碳青霉烯酶筛查试验,为临床提供用药参考。     

ISEcp1B介导铜绿假单胞菌CTX—M型ESBLs传播的分子机制研究

目的了解CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在铜绿假单胞菌传播的分子机制。方法用Kirby-Bauer（K-B）药敏法分析26株铜绿假单胞菌的耐药性;用多重聚合酶链式反应（PCR）扩增ESBLs、ISEcp1B插入序列及Ⅰ类整合子;用套式PCR在Ⅰ类整合子寻找β-内酰胺酶基因盒。结果26株多重耐药铜绿假单胞菌对下列抗生素的耐药率为：（1）头孢噻肟（69．23％）、哌拉西林（65．38％）、替卡西林／克拉维酸（65．38％）、头孢他啶（57．69％）、头孢吡肟（46．15％）、环丙沙星（50．00％）、氨曲南（46．15％）、阿米卡星（34．62％）、亚胺培南（30．77％）、头孢哌酮／舒巴坦（23．08％）;（2）11株铜绿假单胞菌中检出CTX-M-G1,其中4株同时检出TEM、SHV、CTX-M-G1、ISEcp1B及Ⅰ类整合子,Ⅰ类整合子内未扩增出β-内酰胺酶;（3）ISEcp1B下游均连接CTX-M型ESBLs,ISEcp1B右端有一个反向重复序列,为转位酶提供作用位点;-35及-10位点各有一个启动子,对下游不同的CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。结论ISEcp1B可能对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。     

呼吸科住院患者耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌抗菌药物敏感性及其分子特征

目的调查深圳市人民医院呼吸科住院患者耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌（CRAB）的抗菌药物敏感性和耐药分子机制,以及克隆流行情况。方法收集2010年深圳市人民医院呼吸科住院患者临床分离CRAB29株,琼脂稀释法测定亚胺培南等15种抗菌药对CRAB的最低抑菌浓度（MIC）,PCR和DNA测序分析CRAB碳青霉烯酶基因型,脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性。结果多粘菌素B对29株CRAB抗菌活性最强,敏感性100％,MIC50／MIC90为1／1μg/mL,其次米诺环素,敏感性96．6％,MIC50／MIC90为4／4μg/mL,替加环素中介率高达96．6％,MIC50／MIC90为4／4μg/mL。96．6％（28／29）CRAB携带ISAba1—blaOXA-23-like,对亚胺培南和美罗培南高度耐药,亚胺培南和美罗培南的MIC集中分布在32—64μg／mL;1株携带ISAba1—blaOXA-51-like CRAB,对亚胺培南和美罗培南中度耐药,亚胺培南和美罗培南的MIC分别为4μg/mL和8μg/mL。29株CRAB未发现blaOXA-24-like、blaOXA-143-like、金属酶基因及KPC酶基因。29株CRAB经PFGE分型共分2型,以A型28株（96．6％）为主要流行克隆,均携带ISAba1-blaOXA-23-like。结论2010年我院呼吸科临床分离CRAB主要携带ISAba1—blaOXA-23-like基因,并以克隆播散流行。     

鲍曼不动杆菌感染分布及耐药性动态变迁

目的了解鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物耐药性的动态变迁以及感染病例分布情况,为临床治疗鲍曼不动杆菌提供参与。方法 2007年1月至2009年12月从患者不同标本分离的鲍曼不动杆菌（ATB Expression细菌鉴定系统鉴定到种）,采用CLSI/NCCLS标准K-B法对临床常用抗菌药物进行耐药性分析。结果鲍曼不动杆菌2007年至2009年检出率分别为6.5%、8.9%和17.6%;标本主要来源于痰（78.4%）,病区集中于中心ICU（33.3%）、呼吸内科（22.8%）和消化内科（13.0%）;该菌耐药现象严重,除亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦保持较高的敏感性,其他药物耐药性均〉60%,而且耐药性逐年上升。结论鲍曼不动杆菌的耐药问题日趋严重,加强其耐药性监测可指导临床治疗,为临床提供最新的流行病学和耐药性变迁资料;泛耐药菌株感染主要发生在长期应用抗菌药物及长时间住院的患者,因而应加强医院环境和人员消毒,控制鲍曼不动杆菌在医院内的定值与播散。 更多还原     

院内感染新生儿肺炎病原菌分布特点及干预对策

目的了解院内感染新生儿肺炎病原菌分布的特点,并分析原因和探讨干预对策。方法回顾性分析义乌市中心医院新生儿监护病房（NICU）2012年6月至2013年6月发生的60例院内感染新生儿肺炎患儿的痰液标本细菌培养及药敏资料,了解病原菌分布的特点,分析引起院内感染新生儿肺炎的原因,并采取相应的干预对策。结果60例患儿样本共培养出病原菌72株,其中革兰阳性菌20株,占27．8％,主要是金黄色葡萄球菌、草绿色链球菌与表皮葡萄球菌,革兰阴性菌52株,占72．2％,主要是肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌。金黄色葡萄球菌中6株为耐甲氧西林金葡菌（MRSA）,占50％,肺炎克雷伯菌中13株为多重耐药菌,占56．5％,大肠埃希菌中6株为多重耐药菌,占46．2％,鲍曼不动杆菌中4株为多重耐药菌,占66．7％,铜绿假单胞菌中2株为多重耐药菌,占50％,嗜麦芽类单胞菌与阴沟肠杆菌均为多重耐药菌。结论院内感染新生儿肺炎病原菌分布以革兰阴性菌为主,多重耐药菌比例较高,通过有效的干预措施,可以降低院内感染新生儿肺炎的发病率。     

黑大蒜提取物联合抗生素对金黄色葡萄球菌和肠埃希菌的体外抗菌作用研究

评价黑大蒜提取物分别与头孢唑林或庆大霉素联合应用,对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的体外抗菌效应。采用液体稀释法分别测定黑大蒜提取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最低抑菌浓度（MIC）。采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定黑大蒜提取物联合头孢唑林或庆大霉素对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的MIC,并计算部分抑菌浓度（FIC指数）。测定黑大蒜提取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的时间-杀菌曲线。黑大蒜提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为256μg/mL,黑大蒜提取物对大肠埃希菌的MIC为256μg/mL。时间-杀菌曲线结果显示黑大蒜提取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌作用呈现较强的浓度依赖性。黑大蒜提取物联合头孢唑林后对金黄色葡萄球菌的FIC指数为0.75;黑大蒜提取物联合庆大霉素后对大肠埃希菌的FIC指数为0.5。黑大蒜提取物与头孢唑林或庆大霉素联合用药,可明显降低抗生素对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的MIC,表现为相加和协同效应。     

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及其基因的分析

目的研究23株鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药情况及对耐药基因分析,为临床用药提供依据。方法用珠海迪尔DL-96鉴定系统进行细菌鉴定及K-B法进行药敏试验,用碳青霉烯酶4种基因的特异性引物对其进行聚合酶链反应(PCR)扩增和基因型分析,并通过网上GenBank进行比对以确定编码酶基因的类型。结果 23株鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、多黏菌素B的耐药率分别为80%、45%、30%、10%,对其他抗生素的耐药率均在90%以上。携带D类碳青霉烯酶OXA-23基因有18株(78%),携带OXA-51基因有15株(65%),OXA-24、OXA-58基因引物PCR扩增为阴性,随机各抽取3株OXA-23基因阳性株进行测序后通过在网上GenBank比对与OXA-23标准株99%同源,OXA-51基因阳性株与OXA-51标准株98%同源。结论耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌对多黏菌素的耐药率最低,其次是丁胺卡那霉素,其中以携带OXA-23型碳青霉烯酶基因为主,应引起临床高度关注,防止在院内广泛传播。