大球盖菇的室内和室外栽培技术

大球盖菇（Stropharia rugosoannulata）是一种具有营养价值和保健功能的优质食用菌,具有广阔的发展前景。本文介绍了大球盖菇的室内与室外栽培的方法和结果,包含液体一级菌种的制备、菌包二级菌种的制备、室内栽培、室外栽培、采收、栽培结果等内容,为大球盖菇栽培技术的推广提供依据。     

大球盖菇原生质体制备与再生条件研究

研究了大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)菌丝原生质体制备和再生条件,结果表明:在30℃、pH5.5、0.6mol/L甘露醇、1.5%溶壁酶条件下对培养3d的菌丝体酶解2.5h,原生质体产量达到1.36×107个/mL。原生质体适宜再生培养基为马铃薯200g,蔗糖20g,蛋白胨2g,酵母粉2g,KH2PO41.5g,K2HPO41.5g,MgSO4.7H2O 1.5g,维生素B10.1g,维生素B60.1g,0.6mol/L甘露醇。采用上述培养基,双层平板法进行再生试验,再生率达到0.96%。为大球盖菇原生质体技术深入研究和应用奠定了基础。     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生程度极快,涂布平板3d后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在PGPM再生培养基上再生率为0．97－2．0％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养1－2d,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达77．6％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为1。     

大球盖菇硒多糖体内抗氧化能力检测

采用液体发酵的方法对大球盖菇菌丝进行富硒培养,提取硒多糖进行抗氧化能力测定.结果表明,大球盖菇硒多糖能明显提高小鼠血中SOD、GSH-Px的含量,能在一定程度上显著降低血中MDA的含量,具有显著的抗氧化功能.     

大球盖菇“山农球盖3号”品种的选育

本研究收集了国内外28株大球盖菇菌株,通过SRAP分子标记技术和耐高温递进式循环驯化选择出2株适合的实验材料,采用原生质体融合、原生质体再生技术进行耐高温菌株初选,筛选出2株性状优良的耐高温菌株（S20菌丝耐高温、产量高;R10 I级菇比例高、子实体耐高温）,收集2菌株出菇后的孢子进行单孢杂交,在高温条件下通过多次继代培养和栽培实验,最终确定出J8L4（山农球盖3号）为最优耐高温高产菌株。该菌株能连续7d在最高料温达27-34℃、最高气温达40-47℃条件下生长良好,无杂菌污染,40d出菇,其产量达到14.56kg/m ²,生物转化率为91.03%,优质菇比例为66.21%。研究结果表明,通过多层次的驯化筛选和多项育种技术的综合使用,使得所选菌株的优良性状更显著,遗传稳定性更好。     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究*

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生速度极快,涂布平板３ｄ后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在ＰＧＰＭ再生培养基上再生率为０．９７～２．０％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养１～２ｄ,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达７７．６％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为１。     

基质氮素对大球盖菇生长及亚硝酸盐含量的影响

目的探索氮源对大球盖菇生长及亚硝酸盐、硝酸盐含量的影响。方法在培养基中添加不同含氮化合物,培养菌丝,定时测定生长量,并采用重氮偶合分光光度法测定其亚硝酸盐、硝酸盐含量。结果添加亚硝酸盐的基质,菌丝生长速度比对照慢。尿素、硫酸铵、硝酸铵和硝酸钾四处理之间差异无显著性,其生长速度最快。各处理间亚硝酸盐、硝酸盐含量差异均存在非常显著性。亚硝酸钾处理,亚硝酸盐含量高达402.03 mg/kg,不宜食用。硝酸钾处理,亚硝酸盐含量为30.87 mg/kg,食用100 g,就会超出亚硝酸盐日限量;硝酸铵处理,硝酸盐含量远远超过日常蔬菜,也不宜食用。结论在栽培大球盖菇时氮源不宜使用亚硝酸盐、硝酸盐,应使用尿素或硫酸铵,有机氮源也可以。     

毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落特征的影响

为了解毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落特征的影响,以套种大球盖菇不同年限(0、1、2和3 a)的毛竹林为研究对象,采用Tullgren干漏斗法和Baermann湿漏斗法对土壤中小型动物群落组成及分布进行调查。试验共捕获中小型土壤动物89511只,隶属于8纲13类。土壤动物类群数和密度均随种植年限的增加呈先升高后降低趋势,以种植1 a最高(P<0.05)。各处理土壤动物类群数和密度均随土层加深而逐渐减少,呈现表聚性特征。Shannon多样性指数、Pielou均匀度指数、Margalef丰富度指数和密度-类群指数均随着种植年限的增加呈先升高后降低趋势,且均以种植1 a最高,而Simpson优势度指数呈先降低后升高趋势,种植1 a显著低于其他处理(P<0.05)。种植0和3 a、2和3 a的相似性指数为中等相似,其余各处理间的相似性指数均为极相似。综上表明,毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落结构具有明显影响,种植1 a后毛竹林地具有更高的土壤动物类群数、密度和多样性。随着种植时间的延长,中小型土壤动物的数量逐渐恢复到种植前水平,但群落组成可能发生改变。     

大球盖菇产胞外多糖液体优化培养条件初探

以菌丝生物量及胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)含量为指标对大球盖菇产胞外多糖液体培养基组成和发酵条件进行了优化。结果表明,最适碳源是麦芽糖,最适氮源是酵母膏,正交试验确定最佳培养基组成为马铃薯150 g/L,麦芽糖20 g/L,酵母膏1 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4.7H2O 2.5 g/L。最佳发酵条件为28℃,摇床转速160 r/min,起始pH值6.5,装液量100 mL/250 mL、接种量10%,发酵时间6 d。在此条件下,大球盖菇菌丝生物量及EPS含量分别比对照增加了31.8%和51.6%。     

不同碳氮营养源和培养温度对大球盖菇菌丝生长的影响

研究了碳源、氮源和温度对大球盖菇菌丝生长的影响,结果表明碳源中蔗糖对大球盖菇的菌丝生长最有利,其次为可溶性淀粉. 氮源中尿素最好,其次为蛋白胨和酵母膏;经温度梯度试验得出大球盖菇菌丝生长温度在 5～35 ℃,适宜生长温度为 25～30 ℃.经生料栽培发现大球盖菇适于麦秸、稻草上生长.     

Preliminary research of the RAPD molecular marker-assisted breeding of the edible basidiomycete Stropharia rugoso-annulata

Summary The average RAPD molecular genetic distance was proposed as a criterion in selecting monokaryotic parents for cross breeding and predicting the performance of hybrids of the mushroom Stropharia rugoso-annulata. Three groups of cross pairs or hybrids were recognized based on the average RAPD genetic distance of the monokaryotic parental population. The RAPD-based molecular genetic distance significantly correlated with hybrid mycelial growth rate and mycelial growth heterosis, and their determination coefficients were 0.9237 and 0.8464 respectively. One of the hybrids in group I showed more vigorous mycelial growth in different pH conditions, incubation temperatures, carbon and nitrogen sources, and higher mushroom yield compared with its dikaryotic parent. These results suggested that RAPD-based molecular genetic distance of the monokaryotic parents might be a suitable criterion for selecting monokaryotic parents and predicting the performance of hybrids in mushroom cross breeding.     

基于基因组数据解析大球盖菇交配型系统

大球盖菇Stropharia rugosoannulata是一种具有较强木质纤维素降解能力以及高营养的重要食用菌。此菌属于四极性异宗结合担子菌,但是交配型位点结构仍未被解析。本研究利用基因组数据通过生物信息学方法进行大球盖菇的A和B交配型位点解析,并与其他大型真菌进行比较。结果显示大球盖菇的A交配型位点包含了一对保守的HD1和HD2基因,位点上下游基因的共线性较高,与Galerina patagonica和砖红韧黑伞Hypholoma sublateritium相似度最高,A位点结构上也较为保守,在上下游具有保守的MIP、Sec61蛋白、甘氨酸脱氢酶和β侧翼蛋白。B位点包含5个信息素受体和3个信息素前体基因,与其他真菌相比较发现,B位点及上下游基因的共线性较差,表明在不同的真菌中B位点变异性较大。本研究所获得的结果将有助于诠释大球盖菇交配型位点结构,为今后的遗传育种提供了理论依据。     

培养基中添加海藻糖对大球盖菇、斑玉蕈菌丝生长的影响

【背景】大球盖菇和斑玉蕈是食药兼用且具有开发潜力的珍稀食用菌,培养基对菌丝生长及子实体发育具有重要作用,优化培养基显得尤为重要。【目的】筛选出最适合培养大球盖菇、斑玉蕈的新型培养基。【方法】使用添加海藻糖的新型培养基,对不同培养基培养的大球盖菇及斑玉蕈菌株的菌丝生长状况、生长速度和生物量及纤维素酶、漆酶活性进行测定与分析。【结果】相较于PDA培养基,添加海藻糖的培养基能够提高菌丝生长速度、增加生物量,海藻糖添加的比例对纤维素酶和漆酶的影响较大,对大球盖菇及斑玉蕈菌丝的生长产生显著的促进作用,但不会改变其蛋白质的组成。【结论】大球盖菇最适合选用PTA-5培养基,斑玉蕈的最佳培养基是PDTA培养基。     

硒对镉胁迫下大球盖菇菌丝生长的影响

选用大球盖菇Stropharia rugosoannulata为试验材料,分析在镉胁迫处理下（2mg/L）添加不同浓度硒（0、6、15、20mg/L）对大球盖菇菌丝生长的影响,初步研究了施加硒对镉胁迫下大球盖菇菌丝生长抑制的缓解效应和作用机制。结果表明：镉对大球盖菇生长速度和生物量具有明显抑制作用,镉造成了大球盖菇渗透调节物质、过氧化氢和丙二醛含量显著增加;添加硒后,镉对大球盖菇菌丝的生长速度、生物量抑制作用均有所改善,且增加了渗透调节物质,促进镉胁迫下大球盖菇渗透调节能力;硒诱导抗氧化酶的活性上调,提高活性氧清除能力,降低了菌丝中丙二醛和过氧化氢的含量,缓解细胞膜过氧化程度,增强了大球盖菇对镉的耐受性。本研究重点探讨外源添加硒对镉胁迫下大球盖菇菌丝生长、生理特性及抗氧化胁迫能力的影响,为进一步研究硒在食用菌抗镉栽培中的应用奠定了一定的理论基础。     

我国主栽皱环球盖菇菌株遗传多样性及栽培特性

对我国皱环球盖菇Stropharia rugosoannulata 20个主栽菌株进行了ISSR标记遗传多样性分析,使用的28个ISSR引物中22个具有多态性,UPGMA聚类分析显示遗传相似性水平在0.68-0.86之间,在0.72时可将菌株分为6个类群,类群间遗传差异较大.在PDA培养基上,除菌株Sr-03和Sr-0...     

Characterization of protoplasts prepared from the edible fungus, Stropharia rugoso-annulata

Protoplast preparation and regeneration conditions of the edible fungus, Stropharia rugoso-annulata Farlow apud Murrill were studied, and the regenerated progenies were characterized in this study. The optimal condition for protoplast preparation was incubation of young mycelia with gentle shaking in 1.5%(w/v) Lywallzyme at 30 °C for 3 h. PGPM (potato/glucose/peptone/mannitol) was the most suitable regeneration medium. Served as osmotic stabilizer, sugars (mannitol and sucrose) were better than inorganic salts (MgSO₄) for clone development and growth. Pre-incubation of protoplasts in liquid regeneration medium resulted in a significantly decreased regeneration rate. Both dikaryotic isolates and monokaryotic isolates could be identified from protoplast-regenerated progenies, with a much higher frequency of monokaryotic isolates identified from the early-developed and fast-growing regenerated clones. Two parental mating types were also identified from protoplasted monokaryotic isolates, but not segregated by 1:1. The mycelial growth rate of protoplasted monokaryotic isolates showed a mating type-dependent model when cultured at different incubation temperatures and pH values, with A2B2 mating type monokaryotic isolates growing faster than those of A1B1 mating type monokaryotic isolates.