大肠埃希菌耐药性监测及耐药质粒的研究

为了解医院内感染大肠埃希菌的耐药情况,探讨其耐药发生、流行及传播机制,对从临床分离的32株大肠埃希菌进行了药敏试验、质粒图谱分析以及质粒接合、转化试验,结果表明大肠埃希菌对氨苄青霉素的耐药率＞88%,对庆大霉素的耐药率＞75%,其中28株大肠埃希菌检出质粒,均含有一条分子量为5.66 Mu的质粒带,是医院内感染大肠埃希菌的流行质粒.质粒的接合、转化试验证实了质粒具有横向传播的特点,是细菌产生耐药的主要原因.     

2921株大肠埃希菌的临床分布与耐药分析

目的了解近五年来本院分离的大肠埃希菌(ECO)的临床分布和耐药性变化,为临床合理治疗大肠埃希菌引起的感染提供参考。方法采用VITEK-32全自动微生物分析系统,对2009-2013年分离的大肠埃希菌进行菌株鉴定和药物敏感试验,用WHONET 5.4软件进行耐药统计分析。结果 2009-2013年本院共分离出2 921株ECO,2009-2012年大肠埃希菌主要分离自尿液,平均占29.4%,2013年大肠埃希菌主要分离自血液,占27.6%;2011-2013年产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌平均检出率为70.1%,高于2009-2010年的平均检出率64.1%(P0.05);主要来源于普外科和ICU,分别占22.1%、18.4%;非产ESBLs大肠埃希菌对头孢替坦、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南的耐药率高于产ESBLs大肠埃希菌(P0.05),对本研究其他药物的耐药率,非产ESBLs大肠埃希菌低于产ESBLs大肠埃希菌(P0.05);产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均90%,非产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率70%。结论大肠埃希菌是临床常见致病菌,本市产ESBLs大肠埃希菌的分离率非常高,耐药问题十分严重,应加强合理使用抗菌药物管理,定期监测,控制耐药菌的产生,预防医院感染暴发流行。     

金双歧去除肠道产ESBLs大肠埃希菌定植效果的临床观察

目的 探索和研究金双歧对肠道产ESBLs大肠埃希菌的除菌作用,为临床利用金双歧辅助治疗多重耐药菌引起的感染性疾病提供依据.方法 在重症医学科患者采集肛拭子标本进行产ESBLs大肠埃希菌定菌筛查,选取40例产ESBLs大肠埃希菌患者随机分成试验组和对照组,试验组口服金双歧进行肠道内去定植.结果 试验组21例产ESBLs大肠埃希菌患者口服金双歧3～7d后,再次取肛拭子进行筛查,17例未再检出产ESBLs大肠埃希菌,4例再次检出,金双歧去除肠道产ESBLs大肠埃希菌定植有效率为87.5％;对照组19例,3～7d后,再次取肛拭子进行筛查,14例再次检出产ESBLs大肠埃希菌,5例未检出,肠道自行清除产ESBLs大肠埃希菌清除率为26.3％.结论 金双歧具有去除肠道产ESBLs大肠埃希菌定植的效果.     

伤寒沙门菌耐药质粒体内接合转移的研究

目的研究伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌的接合转移,比较质粒在体内、外接合转移的异同。方法由于伤寒沙门菌是一种只对人类致病的病原菌,因此将伤寒沙门菌的耐药质粒pRST98导入遗传背景明确的鼠伤寒沙门菌低毒株RIA中,用接合子pRST98/RIA口饲BALB/c小鼠进行体内接合转移。结果在体外伤寒沙门菌很容易将pRST98转移给大肠埃希菌E.coliK12W1485(F-)RifrLac+,该接合子又可将pRST98转移给鼠伤寒沙门菌RIA,但在不同宿主菌中耐药标志的表达有差异。未经人工感染小鼠肠道分离的大肠埃希菌耐药情况严重,口饲pRST98/RIA后出现了部分耐药标志与pRST98耐药谱相同的大肠埃希菌,但有些抗生素的耐药标记未能表达。质粒检测显示体内形成的接合子均含耐药质粒pRST98。结论伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在动物体内、外均可转移给大肠埃希菌,但同一质粒在体内、外大肠埃希菌株中耐药标志表达有差异,即使在同一小鼠体内分离的不同接合子,pRST98/E.coli菌株耐药性亦有不同,显示耐药质粒表达的多样性和复杂性。     

新生儿大肠埃希菌败血症耐药性分析

目的 探讨新生儿败血症的大肠埃希菌耐药情况,为早期诊断和合理治疗提供依据.方法 对2002年8月至2011年8月确诊的64例大肠埃希菌败血症新生儿的药敏结果进行回顾性分析,并对早、晚发型新生儿败血症的大肠埃希菌分离株耐药率进行比较.结果 64株大肠埃希菌分离株中,产ESBLs 29株,检出率为45.31％.其中晚发型败血症ESBLs检出率明显高于早发型(56.41％ vs 28.00％,P＜0.05).早、晚发型新生儿败血症的大肠埃希菌分离株均对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低,均小于26.00％;早、晚发型新生儿败血症的大肠埃希菌分离株对多种抗生素的耐药率不同,差异具有统计学意义(均P＜0.05).结论 新生儿早发型与晚发型败血症的大肠埃希菌分离株对药物的耐药率有差异,建议临床在抗感染治疗时,应根据药敏结果,合理使用抗菌药物.     

大肠埃希菌耐药性水平传播实验研究

目的研究重症监护病房（ICU）患者标本中分离的大肠埃希菌的耐药情况以及耐药性水平传播的实验研究。方法采取双纸片法（K-B）检测细菌的耐药性;产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌为供体菌,耐利福平大肠埃希菌（对其他抗生素敏感）作为受体菌进行接合实验;采用聚合酶链反应（PCR）技术扩增整合子和耐药基因。结果30株大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为46．7％;接合培养后,接合菌携带23kb和25kb大质粒,而无供体菌中一系列小质粒;供体菌和接合菌均携带I型整合子。结论大肠埃希菌耐药性严重,且呈多重耐药性;产ESBLs菌株可通过质粒和整合子将耐药基因转移给敏感菌,导致耐药性传播。     

佳木斯地区女性泌尿系统感染大肠埃希菌耐药性分析

目的分析女性患者泌尿系统感染大肠埃希菌的耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法采用全自动微生物鉴定系统对女性泌尿系统感染患者分离出的病原菌进行鉴定和药敏分析。结果大肠埃希菌非产ESBLs株对氨苄西林、第一、二代头孢菌素类药品高度耐药。大肠埃希菌非产ESBLs株对碳青霉烯类药物美罗培南无耐药,对第三代头孢菌素敏感率高,耐药率低。产ESBLs大肠埃希菌,仅碳青霉烯类抗生素美罗培南敏感。结论女性泌尿系统感染大肠埃希菌的多重耐药性日趋严重,需加强对抗生素使用的规范化管理,合理使用抗菌药物,控制耐药菌的传播和流行。     

合肥地区动物源性大肠埃希菌的血清型分布与耐药性分析

目的了解安徽省合肥地区动物源性大肠埃希菌的血清型分布和耐药状况,以期筛选出菌苗株和指导临床合理用药。方法对46份疑似大肠埃希菌病病料进行细菌分离培养、生化编码鉴定和致病性测定。采用玻片凝集试验对分离到的46株致病性大肠埃希菌进行血清型鉴定。同时分别采用K-B纸片琼脂扩散法和双纸片增效法检测致病性大肠埃希菌的耐药性和ESBLs阳性菌株。结果46株致病性大肠埃希菌中,除7株细菌未能定型外,其余39株细菌分布于10个血清型,O127：K63血清型为优势血清型,占定型菌株的33．33％。46株致病性大肠埃希菌对21种抗菌药物均呈现不同程度的耐药性,15个ESBLs阳性菌株表现为多重耐药,对各种抗菌药物的耐药率均高于ESBLs阴性菌株。结论O127：K63血清型为优势血清型,可作为菌苗株。合肥地区动物源性大肠埃希菌耐药性较为严重,尤其是产ESBLs大肠埃希菌多重耐药更为突出。     

中型滇丁香抑菌及抗耐药菌株作用的研究

采用平板法 ,对中型滇丁香乙醇浸膏抑菌和抗耐药菌株的活性进行研究 ,发现其对金黄葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌敏感菌株具有抑制或杀菌作用 ;对金黄葡萄球菌、大肠埃希菌的耐药菌株没有抑菌或杀菌的作用 ;以青霉素为对照 ,发现其对大肠埃希菌和白色念珠菌的抑菌作用比青霉素明显。     

病原菌多重耐药与生物膜表型和毒力因子的相关性

本文旨在研究导尿管相关尿路感染病原菌多重耐药与生物膜表型和毒力因子的相关性。选取2018年1月至2019年12月于沈阳市第四人民医院住院期间出现导尿管相关尿路感染的患者为研究对象,收集尿液培养标本,使用全自动微生物鉴定仪和纸片扩散法进行菌株鉴定和药敏试验。根据药敏试验结果,将大肠埃希菌分为多重耐药组和非多重耐药组。紫外分光光度法测定多重耐药组和非多重耐药组大肠埃希菌的生物膜附着力。PCR法分析多重耐药组和非多重耐药组参与大肠埃希菌4种毒力因子(黏附素、保护素、细胞毒素、铁载体)编码的16种基因表达水平。 共收集156例患者的尿液,并从尿液培养标本中分离出病原菌172株,其中大肠埃希菌97株（56.7%）占比最多。药敏试验结果显示,多重耐药组大肠埃希菌对各类抗菌药物的耐药率均超过60%。与非多重耐药组相比,多重耐药组大肠埃希菌生物膜阳性率差异有统计学意义（P<0.05）,附着力强度等级差异也有统计学意义（P<0.05）。多重耐药组大肠埃希菌与黏附素相关4种毒力基因fimH、sfa、afa、iha表达明显高于非多重耐药组,差异具有统计学意义(P<0.05)。导尿管相关尿路感染病原菌的多重耐药与毒力因子参与产生强附着力生物膜表型有关。