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在体外进行了钝顶螺旋藻多糖(polysaccharides fromSpirulina platensis,PSP)抗单纯疱疹病毒活性的研究。以不同剂量的PSP分别作用于HSV-1及HSV-2病毒复制周期的各个环节,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成单位(PFU),MTT染色细胞保护率(MTT法)作为评价指标,判断PSP的抗病毒效果;FQ-PCR检测PSP抗病毒作用的时效关系。结果表明PSP对Vero细胞毒性极低(TC50为1750μg/mL),对HSV-1及HSV-2均无直接灭活作用,可阻滞HSV-1及HSV-2病毒吸附和抑制感染细胞内病毒的复制,但不影响病毒的释放;FQ-PCR结果显示随着PSP浓度及作用时间的增加,PSP对HSV-1病毒DNA的抑制作用明显增强,具有良好的剂量和时效关系。提示PSP抗HSV-1及HSV-2病毒作用的机制与抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的生物合成有关。 相似文献
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为了探讨影响红树林淡紫拟青霉胞外多糖提取的因素,确定最佳提取方案,设置不同的发酵液浓缩倍数、三氯乙酸用量等因素,设计单因素实验测定多糖提取最佳条件。然后设计正交试验,检测多糖在不同条件下的提取率,以获得最佳提取工艺。结果发现,发酵液浓缩3~5倍时多糖提取率最高,10%的三氯乙酸对蛋白质脱除效果最好;正交试验表明影响多糖提取的因素依次为乙醇用量、沉淀时间和温度,最优方案为3倍95%乙醇、4 ℃沉淀24 h。该条件下,多糖提取率可达57.835%±1.206%。研究结果为红树林淡紫拟青霉胞外多糖的提取研究提供了参考。 相似文献
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樟芝是台湾特有的珍稀药用真菌,具有抗癌、抗炎、抗病毒等多种功效。为了考察液体发酵樟芝菌丝体水提取物和乙醇提取物对单纯性疱疹病毒II型的抑制作用,本文采用MTT法测定樟芝提取物对细胞的毒性和对病毒的抑制作用。试验结果表明樟芝水提取物和乙醇提取物对Vero细胞有微弱毒性,但是1.5mg/mL的乙醇提取物和2.5mg/mL的水提取物对细胞基本无毒性,二者对单纯疱疹病毒Ⅱ型均有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为0.30mg/mL和1.32mg/mL。樟芝水提取物和乙醇提取物在体外对单纯疱疹病毒均有显著的抑制作用。 相似文献
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生命泉膏滋抗实验小鼠阴道单纯疱疹病毒2型感染的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究中药生命泉膏滋(FESOL)抗小鼠阴道HSV-2感染的药效学作用,方法:以不同剂量FESOL作用于阴道感染HSV-2实验小鼠,观察用药后动物的发病率,死亡率和病变发展速度及程度。结果:FESOL高,中剂量组,[8.33,1.67,0.34g/(kg.d)]能显著降低感染鼠的发病率,死亡率,同时显著减轻病变程度,减慢病变发展速度。结论:中药FESOL能有效抗小鼠阴道HSV-2感染。 相似文献
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妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染及其相关关系的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型(HerpesSimplesVirus2,HSV2)和人乳头瘤病毒(HumanPapilamavirus,HPV)的感染及其相关关系,我们应用聚合酶链反应(PCR)对48例患有性病、生殖道感染的妇女和39例正常妇女进行了下生道HSV2、HPV的检测。HSV2在实验组和对照组妇女中的感染率分别是729%和256%,两组有极显著性差异(P<001);HPV在实验组和对照组妇女中的感染率分别是533%和333%,两组无显著性差异(P>005);两组中HSV2、HPV双阳性率分别是458%(22/48)和231%(9/39),有显著性差异(P<005);在两组共87份标本中,HSV2和HPV双阳性者占31例,阳性率是356%。统计学分析表明:HSV2和HPV感染之间有极显著的相关性(X2=2408,P<001)。研究表明:患有生殖系感染和性病妇女其HSV2或HPV和HSV2混和感染的机率显著高于正常妇女,HSV2和HPV的感染具有协同作用。由于这两种病毒均与宫颈癌的发生有关,它们在生殖道中感染的相互作用机理有待于进一步研究。 相似文献
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青蒿提取物抗单纯疱疹病毒活性研究 总被引:4,自引:1,他引:4
用细胞病变效应(CPE)法证明了青蒿水提物具有抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV—2)活性,通过初步分离纯化得到抗HSV—2活性的有效成分。用MTT法研究了青蒿水提物和有效成分的细胞毒性和抗HSV—2活性,CC50分别为5.29mg/ml和4,94mg/ml,IC50分别为1.45mg/ml和0.128mg/ml,TI分别为3.65和38.6。以0.5mg/ml的无环鸟苷(ACV)作为阳性对照,结果显示有效成分在体外可以明显抑制HSV—2的致细胞病变作用,效果与ACV相当。 相似文献
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用透射电镜对人类Ⅱ型单纯疱疹病毒(吴株)HSV-2(W)感染的兔婴肾细胞和豚鼠胚细胞进行了观察。对HSV-2在感染细胞内发育的某些形态特点作了描述和动力学解释。 1.病毒以吞饮方式进入细胞。2.病毒在吞饮泡内脱衣,当吞饮泡壁消失时,则在胞浆内进行,处于脱衣过程中的病毒颗粒不同于新形成的病毒,而呈现明显的退变现象,即整个颗粒肿胀,包膜和核壳体逐渐微粒化,形成不定形团块。J大量核壳体的形成见于核内:首先出现由太小20nm左右的致密颗粒及空心颗粒组成的积集物,对积集物及其周围物质共同形成核壳体的过渡形态进行了描述。Q.包膜装配不仅由核膜内层以出芽方式完成,而且还可由双层内质网膜和双层高尔基膜进行包围o,病毒以细胞溶解方式释放。 相似文献
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2型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)是引起生殖器疱疹的主要病原体。生殖器疱疹主要表现为生殖器和肛周皮肤黏膜疱疹或溃疡,是一种慢性、复发性、难以治愈的性传播疾病,临床治疗多以抑制病毒复制的核苷类药物阿昔洛韦及其衍生物更昔洛韦、喷昔洛韦等为主。这些药物对缓解症状、缩短病程有一定作用,但难以达到根治的目的,长期应用易产生耐药,且对其合并症基本无效。作用于HSV-2其他感染周期的药物成为人类探索的新领域。HSV-2感染宿主细胞是一个复杂的多阶段过程,包括黏附、穿入、核转运、基因组复制、衣壳组装、子代病毒释放等多个步骤,涉及多种细胞和病毒蛋白的活性。本文对HSV-2体外感染周期详细步骤及其分子机制作一综述,以期深入了解其感染机制,并为研制作用于不同感染阶段的抗HSV-2药物提供参考。 相似文献
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单纯疱疹病毒致病模型的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
对单纯疱疹病毒(HSV)感染小白鼠致病特点进行了观察。小白鼠感染HSV第4天后开始发病,感染后2h血液内可分离出病毒,第48小时病毒血症水平和病毒检出率较高。不同组织病毒分布不同,脑、神经节在感染后第72小时病毒滴度较高,心、肝组织在第5天达到高峰。结果说明所建立的HSV致病模型可用于评价抗HSV药物。 相似文献
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目的:探讨疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y的生物学效应。方法:病毒液接种SH-SY5Y细胞后,用相差和电子显微镜观察感染细胞的形态变化,RT-PCR检测病毒在细胞中的增殖,MTT法检测病毒感染对细胞增殖的影响,流式细胞仪测定感染后的细胞凋亡状况。结果:相差显微镜显示细胞病变,从24~72h,细胞变性、坏死的程度和数量随感染时间延长而增加;电镜结果显示感染24h后,细胞核染色质固缩,出现多核巨细胞,线粒体内嵴紊乱、断裂,出现不同程度的自噬化、溶酶体化、空泡化,并可见大量鹰眼样已包装成熟的病毒颗粒及正在包装的病毒粒子;HSV-2LAT基因RT-PCR扩增表明,病毒能在SH-SY5Y细胞中增殖;凋亡检测显示HSV-2在体外细胞感染中并未使细胞出现凋亡现象;感染后24、48及72h,SH-SY5Y细胞的抑制率分别为11.3%、31.2%和63.1%,与对照组相比均存在显著性差异(P〈0.05);分别用0.1、1、10MOI的病毒感染SH-SY5Y细胞,上述不同组在24、48、72h时细胞形态变化基本一致,感染结果相似,各组之间病毒毒力无明显差异(P〉0.05)。结论:初步在人神经母细胞瘤细胞株SH—SY5Y中建立了HSV-2感染的细胞模型,并研究了感染对细胞生物性状的影响,为探讨HSV-2的潜伏与激发机制、了解HSV-2的致病机制打下基础。 相似文献
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为了构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染细胞多肽27(ICP27)真核表达质粒,应用PCR技术从HSV-2 333株的基因组中扩增ICP27基因,并连接至真核表达载体pEGFPC2,对阳性克隆进行菌落PCR、酶切和测序鉴定后,成功构建了重组质粒pEGFPC2-ICP27。用X fect转染试剂盒将重组质粒pEGFPC2-ICP27转染至Vero细胞中,并用RT-PCR及W estern b lot-ting检测其表达情况。结果显示,ICP27基因在Vero细胞中得到正确表达。真核表达质粒pEGFPC2-ICP27的构建成功,为进一步研究ICP27对宿主细胞的影响奠定了基础。 相似文献
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单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)潜伏感染期间LATs的活跃转录可能与其启动子与增强子两侧的CTCF结合序列有关。本研究对位于UL56下游与LAT启动子上游之间并与CTCF结合序列重叠存在的一个新开放读码框(本研究中命名为UL57)进行了鉴定。首先利用HSV-1(F)细菌人工染色体(HSV-BAC)系统构建重组病毒HSV-EGFP-UL57,将EGFP序列插入UL57 5’端;然后分别通过Northern Blot和Western Blot检测EGFP标记的UL57的转录和表达;同时构建敲除UL57的重组病毒HSV-ΔUL57,观察UL57对病毒增殖的影响。结果显示,重组病毒HSV-EGFP-UL57感染HEp-2细胞17h后,EGFP探针检测到两条转录产物,其中1.8kb转录产物与预测大小相符;使用放线菌酮(Cycloheximide,CHX)阻断病毒即刻早期蛋白/早期蛋白合成后,UL57转录受到明显抑制。重组病毒HSV-EGFP-UL57感染Vero细胞后,9h可见融合蛋白表达,24h表达明显;融合蛋白分子量与预测大小(58kD)一致。病毒生长曲线显示,重组病毒HSV-EGFP-UL57及HSV-ΔUL57在Vero细胞中的增殖水平与HSV-1(F)基本一致。本研究表明,在HSV-1基因组(GenBank:GU734771.1)UL56下游与LAT启动子上游之间存在一个新开放读码框UL57(116 921bp~117 799bp),UL57可以进行转录,且其转录受病毒即刻早期蛋白/早期蛋白调控;转录产物可以翻译出融合蛋白,但表达水平较低。删除UL57对病毒增殖无明显影响。 相似文献
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Hiroko Minagawa Ying Liu Tetsuhiko Yoshida Yasufumi Hidaka Yasushi Toh Ryoichi Mori 《Microbiology and immunology》1997,41(7):545-551
A clinical isolate of herpes simplex virus 1 (TN-1) from a stromal keratitis patient was found to be defective in the glycoprotein C (gC) gene (UL44), thus resulting in the production of truncated gC upon infection. To study the pathogenetic role of truncated gC, we prepared a recombinant LTN-8 derived from TN-1 with deletions of the 1.5 kilobase pairs of the gC gene including the initiation codon. A penetration assay revealed LTN-8 to be less efficient in its penetration ability than TN-1, the laboratory strain KOS and RTN-1-20-3, a recombinant derived from TN-1 with the KOS gC gene. The penetration of LTN-8 was facilitated by the addition of TN-1-infected culture medium. TN-1 virus preparations had no hemagglutinating activity. However, the animals infected with TN-1 did develop hemagglutination inhibition (HI) antibodies. The LTN-8-infected animals did not develop HI antibodies. The pathogenicity in BALB/c mice following either corneal, intraperitoneal or intracerebral inoculation did not significantly differ among TN-1, RTN-1-20-3 or LTN-8. Our results indicate that truncated gC was sufficient for the induction of HI antibodies and was also able to facilitate penetration in vitro. Although truncated gC might be a virulence factor acting as a decoy, both truncated gC and intact gC had little effect on the outcome following intracerebral, intraperitoneal or corneal inoculation. 相似文献
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为了得到一种可以包装AAV2/5和表达绿色荧光蛋白的重组单纯疱疹病毒,设计并构建了一个由AAV2rep基因和AAV5cap基因嵌合而成的rep2cap5基因,然后,利用一套携带HSV1基因组的粘粒系统(cos6、cos28、cos14、cos56、cos48),将rep2cap5基因插入cos6粘粒上HSV1基因组片段的UL2基因中,而将EGFP的表达单位插入cos56粘粒上HSV1基因组片段的UL44基因中,用这2个重组粘粒与其它3个粘粒(cos14、cos28、cos48)共转染BHK-21细胞获得了重组病毒HSV1-r2c5-EGFP并进行了空斑纯化。HSV1-r2c5-EGFP病毒能够在BHK-21细胞连续传代,并且可以观察到几乎所有的感染细胞都能产生绿色荧光。用PCR方法以及Southern杂交方法表明所获得的HSV1-r2c5-EGFP中携带有rep2cap5基因,用HSV1-r2c5-EGFP感染携带报告基因LacZ的AAV载体细胞株,获得了具有感染性的重组AAV2/5-LacZ。结果表明,所获得的重组单纯疱疹病毒HSV1-r2c5-EGFP可提供AAV2/5载体包装所需的全部辅助功能,是一种能简便、高效制备重组AAV2/5病毒的通用性辅助病毒。 相似文献
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Zhe REN Chuan-hai ZHANG Lian-jun WANG Yun-xia CUI Ren-bin QI Chong-ren YANG Ying-jun ZHANG Xiao-yi WEI Da-xiang LU** Yi-fei WANG ** 《Virologica Sinica》2010,(2)
Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) is a commonly occurring human pathogen worldwide. There is an urgent need to discover and develop new alternative agents for the management of HSV-1 infection. Tripterygium hypoglaucum (level) Hutch (Celastraceae) is a traditional Chinese medicine plant with many pharmacological activities such as anti-inflammation, anti-tumor and antifertility. The usual medicinal part is the roots which contain about a 1% yield of alkaloids. A crude total alkaloids extract was prepared ... 相似文献
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Masahiro Noda Yuji Inaba Masato Seno Yasuo Kanamoto Shizuyo Tokumoto 《Microbiology and immunology》1993,37(12):979-981
Heparin inhibited the hemagglutinin activity of herpes simplex virus (HSV) type 1. The minimal inhibitory concentration of heparin required to inhibit 8 hemagglutination (HA) U of HSV ranged from 0.005 to 0.01 U/ml. Mouse erythrocytes failed to combine with the HA inhibitory factor of heparin. On the other hand, mouse erythrocytes treated with heparinase had greatly reduced agglutinability by HSV. Virus-heparin complex formation was observed by sedimenting heparin with the virus particles. 相似文献