N—acetylserotonin对肝缺血再灌注小鼠氧化应激损伤的保护作用

目的探讨NAS对肝缺血再灌注所诱导的脂质过氧化损伤产生的保护作用。方法采用夹闭肝蒂法30min、再灌注6h制作肝缺血再灌注模型,冰冻切片,HE染色,光学显微镜下观察肝细胞形态结构的变化;比色法检测损伤后血清中谷丙转氨酶（ALT）水平及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的含量。结果夹闭肝蒂30min、再灌注6h后,肝小叶结构紊乱、肝血窦淤血,其间有白细胞浸润、肝细胞出现变性、坏死;血清中ALT水平升高,肝组织中s0D和GSH—Px的含量降低,MDA升高;NAS可减少缺血再灌注后血清ALT的释放,使肝组织中SOD和GSHPx的含量升高,MDA的含量降低;NAS＋Luz可逆转NAS的这一作用。结论NAS对肝缺血再灌注小鼠的氧化应激损伤具有保护作用。     

异丙酚对家兔肝缺血/再灌注后抗氧化能力改变的影响

目的: 探讨氧自由基(OFR)在肝缺血/再灌注损伤(HI/RI)中的作用及异丙酚对其的影响.方法: 实验兔随机分为假手术对照组、肝缺血/再灌注组和肝缺血/再灌注加异丙酚治疗组,分别在肝缺血前、缺血45 min、再灌注45 min共3个时相点,检测血浆及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、黄嘌呤氧化酶(XO)活性、丙二醛( MDA)浓度及谷丙转氨酶(ALT)值,并行肝组织电镜观察.结果: 肝缺血/再灌注期间,血浆XO、MDA及ALT显著高于、SOD明显低于假手术对照组(P<0.05和P<0.01);肝组织XO及MDA显著高于、SOD明显低于假手术对照组(P<0.05和P<0.01);肝组织超微结构发生异常改变.异丙酚可逆转上述指标的异常变化,与肝缺血/再灌注组相比有显著性差异(P<0.05和P<0.01).结论: OFR在HI/RI发生发展中起介导作用;异丙酚可通过降低氧自由基水平(增强SOD活性、减弱XO活性),拮抗脂质过氧化反应(降低MDA浓度),从而减轻HIRI.     

血流阻断的缺血预处理技术在肝癌切除术中的临床应用价值

目的:探讨血流阻断的缺血预处理技术在肝癌切除术中的临床应用价值。方法:选取2010年4月至2013年7月我院收治的96名原发性肝癌并采用肝脏部分切除术进行治疗的患者,将患者随机分为观察组和对照组,每组各48例,观察组在肝脏部分切除术阻断肝门血流前先分别给予1个5 min缺血和再灌注的处理。对照组不采取任何干预措施。术前、术后1天、3天、7天时分别进行生化检查,并于术前及术后1h对Fas-mRNA表达、Caspasc-3活性及AI进行测定,观察记录患者术后的并发症情况、手术时间、术中出血量以及住院时间。结果:术后1天、3天、7天时两组间的AST、ALT、TBIL等生化指标的含量情况相比,观察组均显著优于对照组(P0.05);术后l d,两组患者ALB均有不同程度的降低,对照组低于观察组(P0.05);术后住院时间观察组为13.28±3.85天,对照组为19.48±4.92天,观察组明显低于对照组(P0.05);术后1h,两组患者的Fas-mRNA表达、Caspasc-3活性相比于阻断前均显著提高,但观察组提高幅度明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组阻断前均未见肝细胞凋亡,术后l h时,两组组均可见肝细胞凋亡,且对照组明显高于观察组组(P0.05)。结论:血流阻断的缺血预处理技术具有操作简便、副作用小的重要特点,应用于肝癌切除术中在保护肝功能方面具有显著的优势。     

内源性一氧化氮对肝缺血／再灌注损伤保护作用的实验研究

近年来 ,肝移植的开展及肝门阻断术的临床应用越来越广泛 ,但在肝移植或肝门阻断再开放过程中始终存在着缺血 /再灌注损伤 ,而且是导致术后肝功能不全的一个重要因素。以往实验证实 ,氧自由基 (ｏｘｙｇｅｎｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓ,ＯＦＲ)在肝缺血 /再灌注损伤 (ｈｅｐａｔｉｃｉｓｃｈｅｍｉａ /ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ ,ＨＩＲＩ)中起重要的介导作用。而一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ,ＮＯ)在ＨＩＲＩ中起何作用 ,目前国外尚无一致的意见 :国内未见详细报道。本研究采用家兔ＨＩＲＩ模型 ,检测血浆、肝组织中一氧化氮…     

大鼠肢体缺血预处理对肝缺血/再灌注损伤的保护作用

目的：研究肢体缺血预处理对大鼠肝缺血/再灌注损伤是否具有保护作用。方法：雄性SD大鼠32只,随机分为对照组（S组）;缺血/再灌注组（I/R组）;经典缺血预处理组（IPC组）;肢体缺血预处理组（远端缺血预处理组,RPC组）。S组仅行开腹,不作其他处理;IPC组以肝缺血5min作预处理;RPC组以双后肢缺血5min,反复3次作预处理,2个预处理组及I/R组均行肝缺血1h再灌注3h。取血用于血清谷丙转氨酶（ALT）与血清谷草转氨酶（AST）检测。切取肝组织用于测定湿干比（W/D）、中性粒细胞（PMN）计数及观察显微、超微结构的变化。结果：与I/R组比较,IPC组,RPC组ALT,AST,W/D值,及PMN计数均明显降低（P〈0.01）,肝脏的显微及超微结构损伤减轻。结论：肢体缺血预处理对大鼠肝脏I/R损伤有明显的保护作用,强度与经典缺血预处理相当,其机制可能与抑制肝脏炎症反应、减轻肝脏水肿、改善肝组织微循环有关。     

大豆皂苷对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：观察大豆皂苷（soyasaponins,SS）对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：建立S180荷瘤小鼠模型,随机分为模型对照组、环磷酰胺组（CTX）组（20mg／kg）、SS低、中、高剂量组（10、20、30mg／kg）,每组12只。连续给药15天后处死小鼠,测量小鼠免疫器官指数、淋巴细胞转化率（采用MTT法）、溶血空斑数（采用Jeme改良玻片法）、巨噬细胞吞噬功能（采用半体内法）以及NK细胞活性（采用乳酸脱氢酶法）。结果：SS中、高剂量组提高小鼠脾脏指数、脾淋巴细胞转化率、溶血空斑数、巨噬细胞吞噬率及吞噬指数、NK细胞活性,与模型对照组比较有显著性差异（P〈0．05）。与模型对照组比较,SS各剂量组胸腺指数无明显差异（P〉0．05）。结论：一定剂量的SS具有增强荷瘤小鼠免疫功能的作用,从而发挥抗肿瘤作用。     

选择性入肝血流阻断应用于肝癌合并门脉高压手术中的疗效观察

目的：探究选择性入肝血流阻断（SPVE 法）在肝癌合并门脉高压手术中的临床应用效果。方法：选择我院2009 年10 月 ~2014 年10 月期间确诊为肝癌合并门脉高压的患者80 例,按照随机数字数表法分为观察组和对照组各40 例,观察组行SPVE 法进行血流阻断,对照组行全入肝血流阻断法（Pringle 法）进行血流阻断。对比两组手术时间、阻断血流时间、手术中出血量、输血 量、手术前后患者肝功能相关指标及术后并发症发生率。结果：两组手术时间和血流阻断时间对比差异无统计学意义（P>0.05）,而 观察组术中出血量及输血量均小于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;术后观察组血液中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶 （AST）和总胆红素（TB）水平均低于对照组,而血清蛋白（ALB）和血红蛋白（Hb）水平高于对照组,差异均有统计学意义（均P<0. 05）;观察组并发症发生率为22.5%,明显低于对照组的37.5%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：SPVE法应用在肝癌合并门脉 高压手术中,可以显著减少术中的出血量和输血量,有利于术后肝功能的恢复,有效地降低术后并发症的发生。     

局部热应激预处理对肝脏缺血/再灌注损伤的防护作用的机制

目的:探讨热应激预处理诱导产生的热休克蛋白70对肝脏缺血/再灌注损伤的保护作用的机制.方法:应用pringle,s法制备肝脏缺血/再灌注损伤模型及热应激预处理模型.将实验大鼠随机分为热应激预处理(HP I/R)组与非预处理(I/R)组,对比观察两组动物肝脏缺血/再灌注后0、4、8、12、24 h时肝脏HSP70的表达、SOD活力和MDA的产生量及大鼠血清门冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST),丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)的活性与肝脏病理组织学改变.结果:热应激预处理组各时间点肝脏HSP70的表达及SOD的活力均比非预处理组同一时间点高,而血清AST、ALT酶活性及MDA的产生量较非预处理组低,病理损伤也比非预处理组减轻.结论:热应激预处理诱导产生的热休克蛋白70可能通过促进SOD的产生,从而降低氧自由基对肝脏的损害,起到保护肝脏缺血/再灌注损伤的作用.     

缺血预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

通过建立C57/B6雄性小鼠心肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)模型,探讨缺血预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。首先,将36只6~8周C57/B6雄性小鼠随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)及缺血预处理组(Ipost组)。然后,利用苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色、脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(Td T-mediated d UTP-biotin nick end labeling,TUNEL)染色、免疫组化及蛋白质印迹方法,对比3组小鼠的心肌病理学改变、心肌细胞凋亡情况、梗死心肌边缘区微血管密度(microvessel density,MVD)的变化,以及肿瘤相关蛋白质PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,即人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因的编码产物)、自噬相关蛋白质LC3I/II和腺苷酸活化蛋白激酶(5-AMP activated protein kinase,AMPK)的表达水平。结果显示,I/R组心肌组织细胞水肿、炎症细胞浸润等组织病理学变化情况较Sham组明显,而Ipost组中的情况相比I/R组有明显改善;同时,Ipost组心肌凋亡率高于Sham组,但显著低于I/R组(P0.01);Ipost组梗死心肌边缘区域的微血管密度显著高于I/R组(P0.01)。此外,缺血预处理后,PTEN的表达水平降低,AMPK磷酸化水平以及LC3I/II蛋白的表达水平均增强。由此可见,缺血预处理可减轻I/R损伤,减少心肌梗死面积,减轻心肌水肿,对心肌细胞有明显的保护作用,其机制可能与梗死心肌中PTEN表达下调、AMPK磷酸化水平增强、心肌细胞自噬增强和凋亡减少有关。     

异丙酚麻醉对肝叶切除术患者肝功能与炎症细胞因子的影响

目的:探讨异丙酚对肝叶切除术患者肝功能与炎症因子水平的影响.方法:选择79例在我院接受肝叶切除的患者为研究对象并随机分为对照组和实验组,对照组予常规麻醉,实验组在对照组基础上加用异丙酚,比较两组患者肝功能与炎症因子的变化.结果:肝门阻断末,两组患者的血清ALT、AST、IL-1、IL-10、TNF-α水平均较肝门阻断前明显增加,实验组患者ALT、AST、IL-1及TNF-α水平均较对照组显著降低(P＜0.05),IL-10水平较对照组显著升高(P＜0.05).术后第4天,两组患者的血清ALT、AST、IL-1、1L-10、TNF-α水平比较均无显著差异(P＞0.05),与肝门阻断前比较亦无显著差异(P＞0.05).结论:异丙酚应用于肝叶切除术可有效减轻肝功能的损害,抑制促炎细胞因子的释放,促进抗炎细胞因子的生成,这可能是其保护肝功能的机制之一.     

半肝阻断联合肝静脉阻断在复杂肝癌精准肝切除中的应用

目的:探讨半肝血流阻断联合肝静脉阻断技术在精准肝切除中的应用价值。方法:回顾性分析我科2013年1月至2014年12月共120例行半肝血流阻断联合肝静脉阻断的精准肝切除病例,作为治疗组。另选单用第一肝门阻断的复杂肝癌半肝切除患者318例为对照。结果:治疗组在控制术中出血和输血量方面优于单用半肝血流阻断的对照组,治疗组术中平均出血量为650±46 m L,平均输血量为410±76 m L,差别有统计学意义(P0.05);治疗组在平均手术时间和平均住院时间方面均少于对照组,但两组差别无统计学意义(P0.05)。结论:半肝血流阻断联合肝静脉阻断技术在复杂肝癌的精准肝切除术中合理使用能有效的减少术中出血,提高了手术安全,降低了术中输血量,最大限度保留剩余肝细胞体积,减少了缺血再灌注的损失。     

不同肝血流阻断方式肝切除手术对原发性肝癌合并肝硬化患者肝功能及肠黏膜屏障的影响

目的:探讨肝切除手术运用Pringle法阻断、半肝血流阻断(HVC)后对原发性肝癌合并肝硬化患者肝功能及肠黏膜屏障的影响。方法:选取2016年4月～2019年9月期间我院收治的原发性肝癌合并肝硬化患者93例,根据随机数字表法将患者分为A组(n=46,Pringle法阻断)和B组(n=47,HVC),比较两组患者围术期指标、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及总胆红素(TBIL)]、肠黏膜屏障指标[D-乳酸,内毒素]及并发症发生情况。结果:两组阻断时间、术中失血量、手术时间比较无差异(P0.05);B组住院时间短于A组(P0.05)。两组术前、术后3 d、术后7 d ALT、AST、TBIL呈升高后降低趋势,且B组低于A组(P0.05)。两组患者术后并发症发生率比较无差异(P0.05)。两组术前、术后3 d、术后7dD-乳酸、内毒素呈升高后降低趋势,且B组低于A组(P0.05)。结论:与Pringle法阻断相比,原发性肝癌合并肝硬化患者在肝切除手术中运用HVC,可有效缩短住院时间,减轻肝功能及肠黏膜屏障损害,且不增加并发症发生率,临床应用价值较高。     

H22腹水型肝癌荷瘤小鼠耐受性的性别差异

目的:观察性别对小鼠H22腹水型肝癌生长情况的影响,研究不同性别动物对肝癌耐受性的差异。方法:取30只8周龄昆明鼠,雌雄各半,随机分为四组,实验组每组10只,对照组每组5只,腹腔接种小鼠H22肝癌细胞,建立小鼠H22腹水型肝癌模型。每天测量小鼠体重并记录生存时间,直至实验组小鼠全部死亡,比较性别因素对小鼠H22腹水型肝癌的生存期是否存在差异。结果:小鼠接种瘤细胞后,逐渐产生腹水,体重增加。雌性小鼠的体重增加比雄性小鼠显著,P=0.049。雄性小鼠生存后期体重出现下降,呈明显恶液质状态。雌性小鼠的体重、腹水增加虽然较雄性动物明显,但生存期却并不少于雄性鼠,反而比雄性小鼠略长,P=0.1567。结论:性别对小鼠H22腹水型肝癌的生长有一定的差异,雌性小鼠的耐受性优于雄性小鼠。     

黄芪多糖对乙型肝炎小鼠肝脏脂肪变性的作用及机制

目的:探讨黄芪多糖对乙型肝炎相关的肝脏脂肪变性的治疗作用及机制。方法:选取5-6周龄的SPF雄性小鼠共20只作为研究对象,随机分为研究组和对照组,各10例,研究组小鼠进行黄芪多糖溶液灌胃,对照组小鼠采用同样剂量的生理盐水灌胃。分别于用药前后测量体重(BW)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)。结果:研究组小鼠用药后BW和TG明显低于对照组,数据经统计学比较具有显著差异(P<0.05)。用药前两组小鼠ALT和AST比较无显著差异,用药后研究组ALT和AST明显下降,与对照组用药后比较具有显著差异(P<0.05)。结论:黄芪多糖可有效降低乙型肝炎小鼠BW和血脂TG,减少ALT和AST,促进肝脏的排毒与修复,从而改善肝脏脂肪变性,缓解和治疗HBV的毒性和侵害性,提高治疗效果。     

丹参酮IIA磺酸钠对肝门阻断术后血流动力学及流变学影响

目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对行肝门阻断术患者血流动力学及血液流变学影响。方法:选取我院肝胆外科收治的原发性肝癌患者92例,随机数字表达法分为2组,其中对照组46例,全麻行肝癌根治术治疗;实验组46例,在手术前7 d予以丹参酮ⅡA磺酸钠注射液,80 mg注入150 m L 0.9%氯化钠注射液中,日一次静滴,连续治疗7 d。分别观察两组患者肝门阻断前及阻断后1 min,5 min,10 min,20 min和解除阻断后30 min血流动力学及血液流变学。结果:1实验组患者肝门阻断后10 min和阻断20 min两个时间段的心率(Heart rate,HR)明显低于对照组同时间段HR,平均动脉压(Mean arterial pressure,MAP)、心排出量(Cardiac output,CO)、左室做功指数(The left ventricular work index,LCWI)明显高于对照组同时间段,差异有统计学意义(P0.05)。2实验组患者肝门阻断后10 min和阻断20 min两个时间段的全血高切粘度、全血低切粘度、血浆比粘度和纤维蛋白定量明显低于对照组同时间段,差异有统计学意义(P0.05)。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能够明显改善肝门阻断术引起的血流动力学及血液流变学各项指标,从而保证原发性肝癌手术过程中肝脏的供血量,防止血液凝聚导致的血栓形成。     

肝硬化肝癌切除使用不同麻醉方式对免疫功能的影响

目的:观察不同麻醉方式对肝硬化及肝癌手术患者细胞免疫功能的影响.方法:选取我院64例肝硬化、肝癌接受手术的患者随机分为静吸复合麻醉组32例和单纯静脉麻醉组32例,两组患者分别接受异氟醚静吸复合麻醉和靶控输注异丙酚静脉麻醉.分别于麻醉前、术毕和手术后72h应用细胞流式技术检测患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞数量.结果:麻醉前两组患者一般资料、Child分级及外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞数量比较无统计学差异(P＞0.05).术毕两组患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞数量较麻醉前均有所降低(P＜0.05);组间比较无统计学差异(P＞0.05).术后72 h两组患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞数量均恢复术前水平(P＞0.05).结论:静吸复合麻醉和单纯静脉麻醉均可影响肝癌和肝硬化患者的细胞免疫功能,但对患者免疫功能均为一过性,术后72 h可恢复.     

不同血瘀造模对B_(16)荷瘤鼠肝转移模型的影响

目的比较不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型的影响。方法取60只6周龄雌性C57BL/6J小鼠,随机分为正常对照组、单纯荷瘤组、BS1(利血平法)组、BS2(游泳复合高分子右旋糖酐法)组、BS3(寒凝复合肾上腺素法)组和BS4(地塞米松复合肾上腺素法)组,首先根据中医理论用不同造模方法形成血瘀模型,然后经脾接种B16黑色素瘤建立肝转移模型。用激光多普勒观察小鼠耳廓微循环变化,并在接种后第15天小鼠眼眶取血,检测红细胞免疫功能和血清唾液酸酶(SA)含量的变化,并麻醉处死动物,观察肝转移情况。结果①单纯荷瘤组和各血瘀荷瘤组小鼠的耳廓微循环血流均明显减少(P0.01),以BS2组降低显著。②单纯荷瘤组和各血瘀荷瘤组小鼠的红细胞免疫功能亦明显降低(P0.01),血清SA含量显著升高(P0.05,P0.01),以BS2和BS3组变化明显。③肝转移发生率:单纯荷瘤组、BS2组和BS3组均为100%,BS1组为80%,BS4组为60%,肝转移抑制率:BS2组、BS3组、BS1组和BS4组分别为-71.76%、3.90%、16.42%、100.6%。④荷瘤鼠肝转移的肝重与其耳廓微循环血流、红细胞免疫功能和唾液酸酶含量具有显著的相关性(P0.05,P0.01)。结论不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型肝转移发生程度具有明显的影响,应注意血瘀模型的选择,且其与红细胞免疫功能低下有关。     

p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏病理学研究

目的观察p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏病理学改变.方法分别选取2、6、12、18、24月龄的SPF级p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠和p21+/+野生型小鼠,剖检进行大体观察,取肝脏及肝脏肿瘤组织,进行组织学HE染色及电镜超微结构观察.结果 p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏大体、光镜和电镜下均有明显病理改变.随着月龄的增加,肝脏色暗质硬,表面有结节和肿瘤形成;光镜下,肝细胞浊肿,炎症细胞浸润,脂肪变性,点状、灶状和碎屑状坏死,非典型增生,肝细胞癌.癌细胞分化良好,类似肝细胞,形成索状和腺泡状结构.癌细胞核深染,具核分裂像.电镜下,癌细胞核变形,核膜曲折凹陷,线粒体肿胀,数目增多,嵴减少.4例18月龄转基因小鼠发生肝细胞癌(4/10),6例24月龄的转基因小鼠发生肝细胞癌(6/10),其中2例发现远处转移.结论 p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏出现明显病理损害,18月龄小鼠开始发展成高分化的肝细胞癌,高龄小鼠形成的肝细胞癌能够转移.     

胰岛素小鼠皮下注射的降血糖作用研究

目的:了解胰岛素皮下注射后不同时间对小鼠血糖的影响。方法:采用正规胰岛素制剂0.5U/ml予小鼠按0.054ml/10g皮下注射后,观察在注射后30分钟、60分钟、90分钟、120分钟和150分钟后血糖的变化,并在注射150分钟后予10%葡萄糖灌胃,观察小鼠30分钟和60分钟后的血糖变化。结果:皮下注射各剂量的胰岛素均能引起小鼠血糖降低,其中以注射90分钟后血糖下降最为明显,高剂量胰岛素降血糖作用最明显。给予葡萄糖水灌胃后血糖有所升高,但是高剂量恢复比较慢。结论:0.5U/ml胰岛素按0.108ml/10g皮下注射会引起小鼠血糖过低,不利于实验数据的收集,0.027ml/10g和0.054ml/10g剂量比较合适。