应用PCR进行水稻染色体末端区域作图

利用RAPD引物介寻的不对称复性温度PCR的方法（RM－PCR）,发展了一种基于端粒重复序列的新型分子标记。并在一个籼粳杂交来源（窄叶青8号×京系17）的水稻双单倍体群体中进行了端粒重复相关顺序的遗传定位。在23个定位位点中,有12个定位在水稻8个染色体臂的最远端,并将所在染色体分别向外延长了7．7～22．6cM。其中有些可能是定位在亚端粒区。有5个位点被定位在着丝粒区,另外6个位点定位于染色体内其他区域。     

水稻染色体的长度顺序和编号问题

水稻染色体形体较小, 很难从形态上区分各别染色体。尽管有许多学者报道了水稻核型的研究结果, 但不同学者之间的分歧依然存在。本文对不同学者所作核型进行了分析, 从而对现行的水稻染色体编号系统提出了新的看法。 Abstract　As rice chromosome is very small, it is difficult to identify morphologically the individual chromosome from rice chromosome complement. Although many studies have been conducted on the karyotype of rice, controversies still exist among different researchers. The present paper summerized the data of rice karyotype given by different researchers, and some suggestions were also proposed on rice chromosome numbering system.     

水稻染色体的长度顺序和编号问题

水稻染色体形体较小,很难从形态上区分各别染色体。尽管有许多学者报道了水稻核型的研究结果,但不同学者之间的分歧依然存在。本文对不同学者所作核型进行了分析,从而对现行的水稻染色体编号系统提出了新的看法。     

日本增加水稻染色体分析的研究经费

农林水产省1991年关于生物技术的概算要求额比前一年增加310.0%,达到了86.9亿日元.“水稻·染色体解析研究”是1991年新的重要课题.概算要求额为6亿日元.设想在7年计划中确保近300亿日元的预算.1991年的6.01亿日元中,制作基因图等实际的染色体分析费用为3.3亿日元(委托民间企业),仪器整备费为1亿日元,生物资源研究所等国立试验研究机关进行染色体分析方法的研究为1.55亿日元,建立DNA库的调查费为1600万日元.以人工进行染色体解析都委托给农林水产尖端技术产业振兴中心(STAFF).目前正在改进生物资源研究的现有设施,现有研究人员为30人,为加速研究,将增加到50人的规模,打算在筑波设立水稻染色体研究的专门研究所.     

关于水稻染色体组型分析的研究

本文使用一种植物有丝分裂染色体际本制备的新方法——去壁低渗火焰干燥法,对水稻染色体组型及水稻染色体Giemsa染色区进行了初步研究。     

利用粗线期染色体和DNA纤维的FISH分析水稻端粒序列

利用粗线期染色体和DNA纤维的荧光原位杂交(FISH)技术分析了水稻广陆矮四号(Oryzasativassp.indicacv.GuangluaiNo.4)的端粒序列。粗线期染色体荧光原位杂交结果表明,大多数染色体的末端都有端粒串联重复,但信号的强度在不同染色体上是不同的。伸展DNA纤维荧光原位杂交结果显示,端粒最长的线状信号长度为6.55μm,最短的为1.82μm,依据2.51kb/μm的标准,它们分别相当于16.44kb和4.56kb。端粒的平均信号长度为3.62±1.32μm,相当于9.09±3.31kb。由此可以估计,最长的、最短的和平均长度的端粒拷贝数约为2349、651和1298±473。     

美国在5年内提供4800万美元进行植物染色体研究

《日经生物技术》2 0 0 0年 10月 9日号 16页报道 :美国ＮａｔｉｏｎａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ(ＮＳＦ) 9月 2 2日宣布 ,今后在 5年内将提供总额 4 80 0万美元的研究经费进行 16种植物染色体研究。目的是促进包括玉米、小麦、水稻等主要粮食作物基因构造和基因分析。ＮＳＦ的ＡｓｓｉｓｔａｎｔＤｉｒｅｃｔｏｒｆｏｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＭａｒｙＣｌｕｔｔｅｒ说 :重点集中在“以全染色体为研究对象 ,进行参与在叶绿体生物发生过程、植物营养、寄生、环境胁迫的植物反应等基因机能的研究。该研究项目最大…     

利用水稻成套端三体进行DNA序列快速染色体臂定位

以水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．ｓｓｐ．ｉｎｄｉｃａ）“中籼３０３７”成套端三体为材料,通过制备不同染色体两个端三体的等量ＤＮＡ膜,并与等定位的分子标记或ＤＮＡ序列杂交,成功地将严重偏分离的零等位标记多拷贝标记０７３的不同片段,以及着丝点相关重复序列ＲＣＳ１定位互相应的染色体臂上。说明在水稻中,不同染色体臂的端三体可以弥补连锁定位方法的一些不足。     

水稻中期染色体和DNA纤维的高效制备技术

水稻中期染色体和DNA纤维制备是水稻分子细胞遗传学研究中的关键技术。目前,这两个技术还有很多不足,该研究建立了高效制备水稻中期染色体和DNA纤维的方法。该方法制备的染色体,分裂相多、杂质少、背景清晰、染色体分散且形态好,水稻根尖分生组织细胞的分裂指数高达25％。植物细胞的细胞壁是制备DNA纤维的最大障碍,所以必须先提取细胞核,然后裂解细胞核释放出DNA纤维。在这个研究中,还建立了一个用刀切法分离细胞核,进而用SDS裂解核膜,用载玻片拖出DNA来制备水稻DNA纤维的方法。该方法制备的DNA纤维多呈平行的细线,背景清晰,伸展的程度均匀,适合于原位杂交。     

Glaxo和Gilead合作进行基因靶向研究

Glaxo Group Research Ltd.(Greenford,米德尔塞克斯,英国)和Gilead Sciences(Foster City,加拿大)已同意合作研究基因靶向技术.Glaxo将投资二亿美元,得到Gilead的少量股份.协议包括一个五年的研究项目.与缺陷基因的基因治疗或诊断不同,基因靶向是用合成的分子阻滞产生致病蛋白的基     

应用显微操作和PCR技术进行基因的染色体定位

介绍了一种将染色体显微操作和ＰＣＲ技术结合起来进行基因染色体定位的方法,具有简便易行,特异性和敏感性很高等特点。分析了这种定位方法的技术特点,以及ＳＳＣＰ和ＤＮＡ序列分析等方法在排除错误结果中的运用。     

水稻等作物组份I蛋白大小亚基的等电聚焦分析

组份I蛋白广泛存在于植物界,分子量ft 为55万道尔顿［[10a。该蛋白具有核酮搪-1,,一二 磷酸毅化酶／加氧酶的活性,是光合作用以及 光呼吸作用中重要的酶类〔3,。它由8个大亚基 （分子量为55,000）和s个小亚基（分子量戈 15,000）构成。大亚基由叶绿体DNA编码,并在 叶绿体内合成;而小亚基则由核DNA编码,并 在细胞质中合成［[7]。组份I蛋白经接甲基化后, 在育材,一尿素中进行等电二聚焦电泳,大亚基可分 出3条电泳带,而小亚基可分出1--4条电泳带, 电泳带的位置因品种不同而异。因此,被用作 核基因和细胞质基因的表型标记闭,是研究进 化、遗传、核质关系以及体细胞杂交等方面十分 有用的指标山。     

水稻同源盒序列的扩增、分析及染色体定位

广泛存在的同源盒基因家族与生物的发育控制过程有关 .用特异PCR扩增获得同源盒保守序列 ,并通过LM PCR方法获得保守序列的侧翼序列 ,进而对克隆的扩增片段进行序列分析和Southern分析 ,并在水稻的分子连锁遗传图上定位了 6个同源盒序列 .它们分别被定位在水稻第 3 ,4和第 7染色体上 ,在第 3染色体上共定位了 4个同源盒序列 .值得注意的是水稻同源盒序列定位的结果与玉米已知的同源盒基因的定位结果相当符合 .     

Calgene和Pfizer食品科学小组宣布进行合作研究

Calgene,Inc.和Pfizer的食品科学小组已经宣布了进行合作研究的方案,包括利用植物遗传工程生产对人体健康和营养具有重要意义的食物配料。 Calgene是遗传改良植物方面最主要的开发者。该公司的专利产品月桂酸盐(laurate canola)已于1994年11月获得了美国农业部的批准。如今,几千英亩的laurate conola生产于佐治亚。此外Calgene还拥有6项包括植物油改良的专利,以及大量欧洲专利,包括canola植物家族芸苔属(Brassica)植物的转化和特异于种子的启动子,该启动子是调控基因在植物中表达所必需的。     

水稻盐胁迫应答cDNA的克隆、表达和染色体定位

从150 mmol/L盐胁迫3 h和没有胁迫的耐盐水稻(Oryza sativa L.)品种特三矮2号叶片中提取mRNA,构建cDNA文库.通过示差筛选,得到3个盐胁迫应答cDNA克隆Ts1、Ts2和Ts3.Northerd分析表明,3 h的盐胁迫可使Ts1、Ts2和Ts3的转录水平明显上升;3～24 h期间,Ts1和Ts2的转录水平继续上升,而Ts3的转录水平则下降.序列分析表明,这3个cDNA克隆与已知功能的基因没有同源性.利用特三矮2号的耐盐亲本ZYQ8和粳稻JX1 7组合构建了DH群体和分子标记连锁图谱,将Ts1、Ts2和Ts3分别定位在第1、3和7染色体上.值得注意的是,Ts1、Ts2和Ts3与用同一群体定位的主效和微效耐盐QTL位于同一或相邻区域.     

水稻45S rDNA和5S rDNA的染色体定位研究

45SrDNA和5SrDNA是水稻中与核糖体RNA合成有关的2个功能片段,有关这2个序列在水稻染色体上的位置,不同研究者的研究结果不尽相同,在获得水稻染色体清晰制片的基础上,通过FISH确定了45SrDNA序列位于水稻的第9号和第10号染色体的短臂末端,并且第9号染色体上的拷贝数多于第10号染色体,5SrDNA序列位于第11号染色体短臂靠近着丝点处。