重楼属植物的免疫血清学研究

以海南重楼(Paris dunniana),花叶重楼(P.marmorata),多叶重楼(P.polyphylla),凌云重楼(P.cronquistii),五指莲(P.axialis),滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)等六种重楼属植物的根茎为材料,提取分离其球蛋白组份作为抗原,免疫家兔得到相应的抗血清。通过免疫双扩散,聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳、免疫吸收试验以及酶标免疫等方法,研究了重楼属上述六个种和变种的血清学行为以及他们之间的相互关系。在此基础上,用不加权算术平均对群法(UPGMA)经成聚运算,得到基于平均吸收相似系数(Sabs.mean.)和Jaccard's结合系数的两种表相图,这两种表相图的结果是一致的。花叶重楼与多叶重楼有较大的血清反应相似性,五指莲与滇重楼有最大的血清反应相似性。多型种P.polyphylla在形态上的较大变异与血清反应分析的结果是一致的,而且血清反应相似性分析支持了从形态分析得出的假设:Paris dunniana在重楼属的系统发生中是一比较原始的种。     

重楼属两种植物种子及其附属结构的发育

重楼属两种植物(五指莲Paris axialis和滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis)种子发育的过程基本一致。双受精发生于授粉后10—15天。胚乳为沼生目型。种子发育延续的时间约为150—170天。胚胎发育终止于球形或稍有分化的阶段。种子具二层种皮。 二种重楼种子成熟时的外部形态显著不同。五指莲Paris axialis的种子呈浅棕黄色,长椭圆形,部分为绿白色海绵质假种皮所包裹。假种皮由珠柄发育而来,呈楔形。滇重楼Parispolyphylla var.yunnanensis的种子鲜红色,不规则圆形,外种皮肉质多浆。无假种皮。珠柄橙黄色,短而纤细。     

四川重楼属植物2新记录变种

报道了四川重楼属植物2新分布变种,分别是宽瓣球药隔重楼(Paris fargesii var. latipetala H. Li et V. G. Soukup)和红果五指莲(Paris axialis H. Li var. rubra H. H. Zhou, K. Y. Wu et R. Tao)。其中红果五指莲为贵州特有类群,且为孤点分布。四川新分布的发现对于重楼属植物的系统分类和迁徙演化研究具有重要意义。     

重楼属两个新种的染色体组型分析

五指莲(Paris axialis H.Li)和绿劝花叶重楼(Paris luquaensis H.Li)是新近发现的两个重楼属新种,分布于云南奕良和绿劝。这两个新种分别属重楼属的两个亚属,前者属中轴亚属,后者属侧膜亚属。这两个种的染色体组型结构与国内外已报道过的重楼属一些种的结构大体相似。五指莲是由3对中部着丝点型和两对端着丝点型的染色体组成;绿劝花叶重楼是由3对中部着丝点型、1对近中着丝点型和1对端着丝点型的染色体组成,这两个种的组型结构存在着明显差异。现将这两个新种的染色体组型报道如下。     

重楼属和延龄草核型的一致性

本文报道的重楼属3个种和变种与延龄草的核型基本一致,表明它们之间的亲缘关系很近,其核型简式为:延龄草(T. tschonoskii)2n=10=4m 2m(SAT) 2st(SAT) 2t(SAT) 1B;五指莲(Paris axialis)2n=10=6m 2t 2t(SAT) 2B;狭叶重楼(P. polyphylla var. stenophylla)2n=10=2m(SAT) 4m 2st 2t;小重楼(P.polyphylla var.minora)2n=10=4m 2sm 4t.     

重楼属两种植物小孢子和雄配子体的发育

重楼属两种植物(Paris axialis and Paris polyphylla var.yunnanensis)小孢子发生和雄配子体形成的过程及方式相同。小孢子母细胞减数分裂时胞质分裂为连续型;雄配子体为二胞型;药壁由五层细胞组成。绒毡层属腺质型。五指莲花粉群体中异常花粉发生的频率高于滇重楼,这或许与五指莲细胞内的超数染色体以及相应的减数分裂异常有一定相关性。     

重楼属系统发育探讨

重楼属是延龄草科一个特征鲜明的属,共约17—18种,分布于欧洲和亚洲,以中国为分布中心。在区别重楼属下各级类群时,最为有效的指标为:1.花基数(3—)4—10,花辫或萼片数与心皮数目相同;2.雄蕊2—6轮,其数目为心皮数目(或萼片数,或花瓣数)的2—6倍;3.子房1室具(3—)4—10个侧膜胎座或数室而具中轴胎座,果为开裂的蒴果或不开裂的浆果;4.种子具多汁的假种皮、具不完全的假种皮或无假种皮;5.根状茎粗壮或细长匍匐。根据属内系统发育的趋势,可以确认:海南重楼Paris dunniana Levl.具粗厚根状茎、雄蕊4—6轮、子房1室具侧膜胎座、蒴果开裂、种子具完全的假种皮,是本属最原始的1个种。根据上述指标,本属划分为2个亚属7个组,其系统顺序如下:A.侧膜亚属subgen.Daiswa(Raf.)H.Li:1.海南组 sect.Dunniana H.Li;2.蚤休组 sect.Daiswa(Raf.)H.Li;3.花叶组sect.Marmorata H.Li;4.球药隔组sect.Fargesiana H.Li;B.中轴亚属sebgen Paris:5.五指莲组sect.Axiparis H.Li;6.日本重楼组sect.Kinugasa(Tatewaki et Suto)Hara;7.北重楼组sect.Paris。     

重楼属植物遗传多样性的SCOT标记

为评估重楼属植物的基因资源开发前景,初步探讨了SCOT标记技术在重楼属植物遗传多样性研究上的应用。采用目标起始密码子多态性(Start codon targeted polymorphism,SCOT)技术,对重楼属9个种40份材料进行基因组DNA多态性分析。结果表明:四川地区重楼属植物具有丰富的遗传多样性,40份供试材料可聚为4类:狭叶重楼单独聚为第一类;球药隔重楼、卵叶重楼、金线重楼及滇重楼聚为第二类;黑籽重楼与七叶一枝花聚为第三类;五指莲与毛重楼聚为第四类。说明SCOT标记能够对重楼属植物进行准确的分子鉴定,为重楼属植物的种类鉴定和种间的分类地位提供分子生物学依据,同时也为深入探究重楼皂苷合成关键酶基因定位研究提供重要参考。     

几种重楼的染色体核型研究

作者对重楼属(Paris)的几个种:球药隔重楼(P.fargesii),毛重楼(P.mairei),花叶重搂(P.marmorata),黑籽重楼(P.thibetica),海南重楼(P.dunniana),巴山重搂(P.bashanensis),以及多叶重楼(P.polyphylla)的两个变种狭叶重楼(var.stenophylla)和华重楼(var.chinensis)的染色体核型进行了研究,发现种间及种内不同居群(population)间的核型都存在不同程度的差别。核型简式为:球药隔重楼K(2n)=2x=10=6m+2t(SAT)+2t+3bs,毛重楼K(2n)=2x=10=6m+4t+1bs,花叶重楼K(2n)=2x=10=6m+4t,黑籽重楼K(2n)=2x=10=2m+4m(SAT)+4t,海南重楼K(2n)=2X=10=6m+2t(SAT)+2t,巴山重楼K(2n)=2x=10=6m+4st,狭叶重楼K(2n)=2x=10=6m+1st+3t,华重楼K(2n)=2x=10=6m+4t。     

五指莲重楼的甾体皂甙(2)

从五指莲重楼根中(Paris axialis)分离鉴定了七个甾体皂甙,其中有一新甙Ⅶ,经MS、~1H NMR、~(13)C NMR和化学降解方法证明其化学结构为:24α-羟基偏诺皂甙元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基1→2[α-L-阿拉伯呋喃糖基1→4]-β-D-葡萄吡喃糖甙。     

五指莲重楼一新变种

红果五指莲 新变种 Paris axialis H. Livar. rubra H. H. Zhou, K. Y. Wu et R. Tao, var. nov. A typo differt fructu maturo rubro, arillo luteo-rubro, segmentis interioribus perianthiorum ea exteriora subaequilongis. Guizhou (贵州): Shuicheng (水城), 1X1990, H.H. Zhou (周汉华) 9031 (Typus KUN); ib. 3 Ⅶ 1990, H. H. Zhou 9013; ib. 25 Ⅳ 1990, H. H. Zhou 9008.     

18-26S rDNA在4种重楼属植物中的定位

为探讨rDNA在重楼属Paris L.中的分布规律,利用荧光原位杂交（FISH）对4种重楼属植物 的18-26S rDNA进行了定位。所有植物均为二倍体,基因组由A、B、C、D和 E5条染色体构成。（1）滇重楼P.polyphylla var.yunnanensis:2n=10=6m+4t,C和D染色体的 短臂上各有1个18-26S rDNA位点;（2）长柱重楼P.forrestii:2n=10=6m+4t,B染色体的长臂 、C和D染色体的短臂上各有1个位点;（3）五指莲P.axialis:2n=10=6m（2sat）+4t（2sat） +1-2B,C和D染色体的短臂上各有1个位点;在有1个B染色体的细胞中,B染色体没有信号点, 而有2个B染色体的细胞中,只有1个B染色体上有信号点,表明B染色体上有基因存在且其分裂 不均等;（4）大理重楼P.daliensis:2n=10=4m+2sm+2st+2t,C染色体的短臂上有1个位点。1 8-26S rDNA位点不仅出现在染色体的次缢痕上,也出现在非次缢痕位点。另外,4个种中C染 色体短臂末端均有18-26S rDNA。     

重楼属一新种

禄劝花叶重楼 新种(南重楼组)图1 Paris luquanensis H.Li,sp.nov.Sect.Euthyra(Salisb.)Franchet Proxima P.violaceae Leveille,a qua differt foliis latioribus,obovatis veloblanceolatis,3.2—5cm longis et 2—     

重楼属系统发育探讨

重楼属是延龄草科一个特征鲜明的属,共约17—18种,分布于欧洲和亚洲,以中国为分布中心。在区别重楼属下各级类群时,最为有效的指标为:1.花基数(3-)4—10,花辫或萼片数与心皮数目相同;2.雄蕊2—6轮,其数目为心应数目(或萼片数,或花瓣数)的2—6倍;3.子房1室具(3-)4—10个侧膜胎座或数室而具中轴胎座,果为开裂的蒴果或不开裂的浆果;4.种子具多汁的假种皮、具不完全的假种皮或无假种皮;5.根状茎粗壮或细长匍匐.根据属内系统发育的趋势,可以确认:海南重楼Paris dunniana Levl．具粗厚根状茎、雄蕊4—6轮、子房1室具侧膜胎座、蒴果开裂、种于具完全的假种皮,是本属最原始的1个种。根据上述指标,本属划分为2个亚属7个组,其系统顺序如下.     

重楼属植物的细胞地理学研究

重楼属Paris有19种,分布于欧亚大陆。根据对本属所有种的染色体研究,重楼属染色体基数为5,核型的基本结构有两种形式：热带核型K2n＝2x=10=6m十4t和温带核型K2n=2x=10＝6m+4st或 6m+2st十2t。 热带核型的种(13种)分布在亚洲大陆的热带和亚热带;温带核型的种(6种)则出现在欧亚大陆的温带地域。重楼属的多倍体种的核型属温带核型,为本属的边陲种。四倍体种四叶重楼Paris quadrifolia分布在本属分布区的西端(欧洲);日本重楼P.japonica是八倍体种,局限在属分布区的东端(日本)。全部热带核型的种都是二倍体种。其中海南重楼P.dunniana等较原始种类都集中在华南和中南半岛北部。作者认为,亚洲大陆北纬18°至北回归线的热带地域是重楼属的起源地,云贵高原至邛崃山地域拥有14种重楼和9种核型结构式(全属有13种核型结构式),是重楼属的多样化中心,即现代分布中心。     

重楼属的细胞分类研究

本文报道5种重楼植物的核型:凌云重楼(P. cronquistii);南重楼(P. vietnamensis);金线重楼(P. delavayi);长柱重楼(P. forrestii);和平伐重楼(P. vaniotii)。讨论了重楼属植物的核型结构和倍性的变异,以及杂合性、多态性、B染色体等染色体的结构变异。并将重楼属植物的核型归纳成三个主要的基本类型。1. 4t型,基本核型为2n=2x=10=6m+4t,分布于南部热带亚热带的多叶重楼P. polyphylla等13种的核型属于这一类型;2.2st型,基本核型为2n=2x=10=6m+2st+2t,分布于北温带的P. verticilata等5种属于这一类型;3.4st型,核型为2n=2x=10=6m+4st,仅有巴山重楼P. bashanensis的核型属这一类型。每个类型中各个种之间在染色体的结构上又表现出一定的差异。根据植物的染色体核型的演化规律,对三个类型核型的演变作了探讨。     

西畴重楼生物学特征补述及其系统位置

西畴重楼(Paris cronquistii var.xichouensis)为云南省特有物种,野外调查发现了广西(田林、那坡)的省级新分布,针对该新分布居群,观测并描述西畴重楼植物形态学特征,记录物候学特征,野外观测其地理分布特征,综上对其生物学特性进行补述,并结合前人基于细胞核ITS、叶绿体psbA-trnH和trnL-trnF等序列的分子系统学研究结果探讨其系统关系。结果表明:西畴重楼叶背面无紫色斑块,花瓣较宽而显著区别于凌云重楼(P.cromquistii var.cromquistii),但西畴重楼部分植株沿叶脉有紫色斑纹,表明与凌云重楼存在形态过渡,二者雄蕊数量均以3轮为主,而且变化范围一致;西畴重楼的物候期与同域分布的凌云重楼相近,同南重楼(P.vietnamensis)差异显著;西畴重楼多条序列的分子系统学研究显示西畴重楼和凌云重楼始终聚为一支,证实二者高度的亲缘关系。该研究结果完善了西畴重楼的生物学特性描述,首次报道了西畴重楼与凌云重楼形态特征存在过渡类型,物候学特征较一致,地理分布中心重叠,分子系统学位置相邻,仍支持李恒系统将西畴重楼作为凌云重楼的一变种。     

海拔对滇重楼种子大小和数量的影响

种子大小和数量关系是植物繁殖对策研究的重要问题之一。为了解不同海拔下滇重楼(Pairs polyphylla var.yunnanensis)种子数量和大小的差异及其关系,以云南省普洱地区滇重楼为研究对象,对该地区景东(海拔1984 m)和镇沅(海拔1025 m)2个不同海拔点滇重楼种子数量与大小进行比较研究。结果表明:不同海拔下滇重楼果实内种子总数差异不显著(P0.05),但景东县滇重楼果实内饱满种子数量显著高于镇沅县(P0.05),败育种子数显著低于镇沅县(P0.01),种子百粒重以镇沅县高于景东县(P0.05);不同海拔下滇重楼种子败育与种子数量和大小的关系不一致,低海拔试验点种子败育率与种子数量呈极显著正相关关系(P0.01),而高海拔试验点种子败育率则与种子大小呈显著正相关关系(P0.05);不同海拔下滇重楼果实内种子数量与大小呈显著或极显著负相关,即滇重楼果实内种子数量与大小在不同海拔下均存在权衡关系,但海拔1025 m试验点的回归斜率显著低于海拔1984 m试验点(P0.05),表明滇重楼种子数量和大小之间的权衡关系对海拔的响应具有敏感性。     

大萼球药隔重楼,湖南重楼属(黑药花科)一新变种北大核心CSCD

报道了湖南重楼属(Paris L.)一新变种:大萼球药隔重楼(Paris fargesii Franch.var.macrosepala H.X.Yin&W.X.Rao&L.Zhao),其与原变种球药隔重楼(P.fargesii Franch.var.fargesii)区别在于外轮花被片极为宽大,长6.5~11.0 cm,宽2.5~4.0 cm,叶-萼长度比常小于2.0(平均1.91),叶-萼宽度比普遍小于3.0(平均2.86),内轮花被片较短,2.0~5.3 cm,常平展于外轮花被片之上,药隔凸出部分呈扁平状,具明显裂痕,顶面观呈蝶形或双肾形。     

湖南重楼属植物小志

通过多年的调查、标本采集和分类研究,初步查明湖南产重楼属植物5种、6变种和1变型。其中有2种（凌云重楼Paris cronquistii,北重楼Paris verticillata)、3变种（滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis,卵叶重楼Paris delavayi var.petiolata,长药隔重楼Paris polyphylla var.pseudothibetica)和1变型（宽叶重楼Paris polyphlla var.stenophylla f.latifolia)为湖南新纪录。同时,还记录了各种、变种和变型的简要特点、分布和生境,并列出了它们的检索表。