中华绒螯蟹同工酶的研究

中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)(Milne,Edwards)俗称河蟹,是我国重要的经济蟹类,有关河蟹同工酶的研究迄今为止国内外尚无报道,为了弥补这一空白,作者对中华绒鳌蟹的醋酶(EST)、谷氨酸草酞乙酸转氨酶(GOT)、苹果酸脱氢酶(MDH)三种同工酶进行了电泳分析,研究了同工酶的组织特异性并探讨其基因表达特点,以期为中华绒鳌蟹的种群遗传结构分析,品种的定向选育等提供生物化学指标.       

七种方蟹科蟹类的遗传关系

利用水平电泳方法对方蟹科方蟹亚科粗腿厚纹蟹,弓蟹亚科日本绒螯蟹、中华绒螯蟹、肉球近方蟹、绒螯近方蟹、平背蜞及斜纹蟹亚科齿突斜纹蟹进行遗传分析,计检测了９种同工酶,１２个位点。结果表明,七种蟹类的多态座位比例及平均杂合度分别为：０．１６７和０．００３,０．２５０和０．０３６,０．３３３和０．０６２,０．２５０和０．０１２,０．０８３和０．００２,０．０８３和０．０５９,０．０８３和０．００２。最小遗     

中华绒螯蟹水瘪子病不同发病阶段的病理变化特点

为了解中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)“水瘪子”病发生发展的过程, 揭示疾病的本质, 对病蟹进行了较全面的病理特点分析研究。根据病蟹肝胰腺颜色, 将病蟹划分为浅黄、浅粉、乳白和灰白4个发病阶段。研究结果表明, 随着病情的发展, 病蟹肝胰腺与蟹重比逐渐减少, 腔液与蟹重比逐渐增加, 肝胰腺管直径逐渐缩小, 各发病阶段病蟹的这些指标都与健康蟹有极显著差异(P<0.01), 病蟹肝胰腺与蟹重比除乳白阶段与灰白阶段之间和腔液与蟹重比除浅粉阶段与乳白阶段和乳白阶段与灰白阶段之间以及肝胰腺管直径除乳白阶段与灰白阶段之间的差异均不显著(P>0.05)和浅粉阶段与乳白阶段之间的差异显著(P<0.05)外, 其他各发病阶段之间这些指标均有极显著差异(P<0.01); 4个发病阶段病蟹6种组织器官中肝胰腺、鳃、肌肉组织和心脏组织病理变化具有相似性, 浅黄阶段主要是以组织器官水肿和萎缩为主, 是一种可逆的组织病理过程, 但在浅粉阶段肝胰腺和肌肉组织出现细胞坏死, 以后发病阶段更为严重, 鳃和心脏组织在乳白阶段出现细胞坏死, 坏死是一种不可逆的组织病理过程, 神经团和肠道组织病理变化不明显。根据不同发病阶段的病理特点, 在未来确定病因后通过消除病因等方法, 只有在病理变化处于可逆状态的浅黄阶段, 病蟹才有恢复的可能, 才有防控和挽救价值, 而浅粉阶段以后的病蟹由于主要器官组织细胞崩解坏死处于不可逆的病理过程, 即使病因消除病蟹已不可能恢复, 这样的病蟹应及时清除, 减少继续养殖造成进一步的经济损失。     

四H省四种淡水蟹中并殖吸虫囊蚴的发现

在开展四川省并殖吸虫病流行病学调查中,我们在并殖吸虫(Paragonimus)病流行区采集到七种淡水蟹,其中四种蟹类(威远华溪蟹 Sinopotamon weiyuanense,Dai ＆ Chen,1990;陕西华溪蟹巫山亚种Sinopotamon Shansiense wushanense,Dai ＆ Chen,1990;矮小华溪蟹 Sinopoysmon nanum,Dai＆ Chen,1990和屏山华溪蟹 Sinopotamon pinshanense,Dai ＆ Liu,1994)体内发现非殖吸虫囊蚴。     

三种蜘蛛酯酶同工酶的比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳对狼蛛科的拟水狼蛛、蟹蛛科的三突花蛛和肖蛸科的鳞纹肖蛸3种蜘蛛的酯酶同工酶进行了比较研究。结果表明,不同科的蜘蛛酯酶同工酶种问差异性大并有着明显的种簇特异性,推测它们的酯酶同工酶酶谱中的区带组受不同的基因位点控制,且各自的基因位点数不等;同种蜘蛛的雌蛛和雄蛛之间也有各自的酯酶同工酶谱型,但差异小,其控制基因位点大体相同。这样,我们从分子的水平上讨论了酯酶同工酶的差异性可以用来作为识别物种的附加指标。     

镉在河蟹五种组织器官的积累及对酯酶同工酶的影响

以体腔注射法两次对中华绒螯蟹 (Eriocheirsiensises)给镉 ,处理一周后 ,测镉在蟹体内的积累及对酯酶同工酶的影响。结果表明 :镉在河蟹组织器官的积累具有选择性 ,且主要积累在肝胰腺中 ,其次是鳃、触角腺 ,而卵巢与肌肉几乎没有积累。镉对蟹体主要组织器官酯酶同工酶的影响不但有组织差异性 ,而且与积累量有很大关系 ,主要表现为应激性 ,即低剂量镉可诱导酶活性提高 ,同时应激性有一定范围。     

养殖梭子蟹血卵涡鞭虫感染的初步研究

2004年7—9月,浙江舟山人工养殖梭子蟹相继发生一种被当地渔民称为"牛奶病"的流行性疾病,并引起大量死亡。病蟹蟹体消瘦,肌肉白浊,蟹盖内可见大量乳白色液体。对带有典型病症的濒死病蟹进行细菌分离,未分离到细菌。组织病理学观察发现,病蟹血淋巴急剧下降,代之以大量的寄生原虫,该寄生虫在病蟹的肝胰腺、鳃、心脏、肌肉等部位大量侵袭,并引起这些组织发生以坏死为主的变质性病变,其病理特征主要表现为:细胞肿胀、变性、坏死,某些细胞的细胞核固缩、碎裂或崩解。电镜观察乳白色体液及病变组织,可见大量寄生原虫,该寄生虫大小约5—7μm,多数呈卵圆形,单核或多核,具有2根鞭毛。进一步通过分子生物学方法,确定该寄生虫为血卵涡鞭虫Hematodinium sp.,初步认定其是引起养殖梭子蟹"牛奶病"的一种重要病原。     

四种十足目甲壳动物遗传差异的RAPD分析

采用ＲＡＰＤ技术,对分类阶元不同的四种十足目甲壳动物：克氏原螯虾、汉水华溪蟹、日本绒螯蟹合浦亚种和中华绒螯蟹,进行了遗传多态性的研究。四个物种ＤＮＡ库的扩增结果表明,随着亲缘关系由近变远,物种间的相似率依次减小,由５６．１％下降至２２．３％．用ＵＰＧＭＡ方法作聚类分析构建出物种的系统树图、反映出四个物种对应的种、科间、科间以上遗传差异逐步增大,这与以形态标记为主的分类结果相一致。在同工酶分析难以揭     

四川省淡水蟹类的调查研究

近几年来,我们在四川省主要肺吸虫病流行地区采集了大量蟹类标本,现已初步鉴定出淡水蟹类7种,隶属于2属1科,其中有城口华溪蟹Sinopotamon chengkuense、峨边华溪蟹S.ebianense两个新种。四川西部为高原和高山峡谷区与成都平原和川中丘陵的交接和过渡地区,地形复杂,河流山溪纵横,海拔高度相差悬殊,地理隔离现象显著,为动植物种群繁多的地带,也是华溪蟹属种类分化较多的地区。这里除有峨边华溪蟹一个新种外,其他还有光泽华溪蟹、锯齿华溪蟹、雅安华溪蟹和灌县华溪蟹等共5种,约占四川蟹类总数的80%,它们都主要集中分布在岷江水系,除锯齿华溪蟹…     

异盘并殖吸虫发育过程同工酶谱分析

肺吸虫病是感染并殖吸虫属肺吸虫引起的一种食源性人畜共患寄生虫病。异盘并殖吸虫是在中国南方、东南亚和印度人群中引起肺吸虫病的主要病原体。通过同工酶谱分析了解异盘并殖吸虫在宿主体内不同发育阶段生物化学代谢变化变化规律,可为防治肺吸虫病提供科学依据。本研究采用浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳(CG-PAGSE)分析了异盘并殖吸虫五个虫龄期同工酶谱。结果表明在不同的发育时期,同工酶谱存在一定程度的变异,呈现生长发育的多态性。     

宽叶韭种内分化的同工酶及可溶性蛋白的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）对宽叶韭的３个代表居群内不同植株间的过氧化物酶、酯酶和１６个居群间的酯酶（ＥＳＴ）、过氧化物酶（ＰＯＸ）、葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤＨ）、苹果酸酶（ＭＥ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、天冬氨酸转移酶（ＡＡＴ）、腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）８种同工酶系统以及可溶性蛋白进行了分析。结果发现：居群内不同植株的酶谱无差异;居群间的酶谱存在多态性,酶谱差异明显,且各居群均有其特征酶谱。采用“排序”方法和聚类分析,对宽叶韭１６个居群酶谱的相似系数和酶谱距离进行了研究。同工酶谱表型差异彼此显著的３个代表居群的可溶性蛋白双向电泳图谱也表现出明显差异,印证了同工酶的分析结果。结合细胞学的最新核型证据,从生物化学角度确定了这１６个居群间的亲缘关系和彼此的分化程度。结果表明：宽叶韭明显分为两大类,即冬季不倒苗和冬季倒苗两类,在同一类型中各居群之间彼此近缘,且冬季不倒苗的类型分化程度较高。本研究首次将多种同工酶的综合分析与聚类分析及可溶性蛋白双向电泳用于葱属植物的种内分化研究,为植物分子进化和系统学研究提供了科学依据     

云南高背鲫鱼不同组织同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了滇池中云南高背鲫鱼(Carassius auratus)的脑、眼睛、肝脏、心脏、肌肉5种组织中的酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)3种同工酶的表达模式,并对各种酶的同工酶酶谱表型进行了分析。结果表明,云南高背鲫鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性,且同工酶的种类与活性变化与其功能相适应。     

复合四倍体异育银鲫个体间遗传异质性的研究

用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,分析比较了４个不同的银鲫雌核发育系,红鲤和复合四倍体异育银鲫鳍的５种不同的同工酶及蛋白表型的差异,表明复合四倍体异育银鲫表型上的差异主要是来自银鲫种内的遗传差异（不同的雌核发育系）。来源于同一个银鲫雌核发育系的复合四倍体异育银鲫,个体间的ＥＳＴ同工酶出现差异,并与父体红鲤的ＥＳＴ同工酶的多态性相关,因此,复合四倍体异育银鲫个体间的异质性也包含了来自父本的遗传影响。在所检测     

黄鳝性逆转过程中同工酶的分析研究 Ⅰ．雌雄个体不同组织的同工酶分析

作者采用三种垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对雌雄黄鳝６种组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酯酶（ＥＳＴ）进行了研究。结果表明ＬＤＨ同工酶谱为细带型,可分为３区８条带,其迁移率为Ａ＞Ｂ＞Ｃ,其中Ｃ＿４仅出现在心、脑和肌肉中。ＬＤＨ在肝中表达甚微。ＥＳＴ同工酶显示３区７条带。黄鳝的同工酶有明显的组织特异性,在两性中的表达也存在一定的差异,这种差异ＥＳＴ比ＬＤＨ明显;肝、肾和性腺比其它组织较明显。这两种同工酶在雌性中的表达均比在雄性中强。以上反映了差别的基因活性。本文还讨论了黄鳝同工酶的遗传基础,亚基的组成以及ＬＤＨ迁移率和黄鳝演化地位的关系。     

文心兰原球茎形态发生与可溶性物质及抗氧化酶的关系

以文心兰切花品种'南茜'无菌苗为材料,取其茎尖通过组织培养诱导形成原球茎和幼苗,观察并分析了原球茎各形态发生阶段的特征及其可溶性糖和蛋白质含量、抗氧化酶(POD、CAT和SOD)活性以及相关同功酶(POD、EST和SOD)的变化.结果显示:(1)文心兰原球茎形态发生可分为外植体期、外植体膨大期、愈伤组织期、原球茎形成期、原球茎成熟期、叶鞘伸展期、顶端腋芽发育期及幼苗期8个阶段.(2)可溶性糖和蛋白质含量均在叶鞘伸展期出现最大峰值;POD活性在外植体膨大期、CAT和SOD活性在愈伤组织期分别出现最大峰值.SOD同工酶的2条酶带在愈伤组织期到幼苗期交替出现;EST同工酶在原球茎形成期有2条特异酶带.研究表明,可溶性糖和蛋白质的含量以及POD、CAT、SOD活性的特异变化与文心兰茎尖脱分化及原球茎再分化的实现密切相关,不同类型的同工酶在原球茎同一发生阶段表现出较大差异,EST同工酶的2条特异酶带可作为原球茎形成的标志.     

乳酸脱氢酶与酯酶同工酶同板染色法

介绍一种在同一块凝胶板上染乳酸脱氢酶(LDH)与酯酶(EST)的染色方法. 该同板染色法利用两种同工酶显色反应互不干扰和颜色不同的特点, 先染LDH, 后染EST, 可以在同一块胶板上得到两种同工酶清晰的酶带, 每一种酶的酶带与单板染色的酶带完全一样. 这种染色法, 能节省同工酶分析所需的试剂、时间和经费, 也便于样品的鉴定与比较, 是一种经济有效的方法. 此方法, 同样适用于苹果酸脱氢酶(MDH)与酯酶等同工酶的同板染色.     

香果树体细胞胚胎发生过程中4种同工酶的研究

用非变性聚丙烯凝胶电泳技术对香果树体细胞胚胎发生及形态建成过程中过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、淀粉酶(AMY)和超氧化物歧化酶(SOD)4种同工酶进行分析.结果表明:香果树体细胞胚胎发生及形态建成过程中,POD、EST、AMY和SOD活性变化与胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生发育密切相关.非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织酶谱差异明显,胚性愈伤组织中EST和AMY同工酶酶带多且活性高,非胚性愈伤组织中缺乏EST和AMY同工酶表达,AMY同工酶可作为胚性细胞分化和发育的重要标志.香果树体细胞胚形态建成过程中,球形胚时期的AMY、POD、EST同_T酶活性最强,表明这一时期生理代谢旺盛,是体细胞胚形态建成的关键时期;POD、AMY和SOD 3种同工酶的酶谱及表达强弱在形态建成的不同时期呈现有规律的变化,可作为香果树体细胞胚发生发育特定时期的参考标记. 与胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生发育密切相关.非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织酶谱差异明显,胚性愈伤组织中EST和AMY同工酶酶带多且活性高,非胚性愈伤组织中缺乏EST和AMY同工酶表达,AMY同工酶町作为胚性细胞分化和发育的重要标志.香果树体细胞胚形态建成过程 ,球形胚时期的AMY、POD、EST同_T酶活性最强,表明这一时期生理代谢旺盛,是体细胞胚形态建成的关键时期;POD、AMY和SOD 3种同工酶的酶谱及表达强弱在形态建成的不同时期呈现有规律的变化,可作为香果树体细胞胚发生发育特定时期的参考标记. 与胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生发育密切相关.非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织     

社鼠组织器官同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法,分析了社鼠的肝、肾、心肌、骨骼肌、肺、脾和脑等多种组织器官的ＬＤＨ、ＡＤＨ、ＥＳＴ、和ＳＯＤ４种同工酶,对各组织器官的酶带数目和分布,以及酶活性进行了比较研究。结果表明,社鼠的ＬＤＨ同工酶、ＡＤＨ同工酶和ＥＳＴ同工酶具有比较明显的组织特异性,而ＳＯＤ同工酶的组织特异性较低。肺和脾除ＥＳＴ同工酶活性较高外,脑除ＬＤＨ同工酶活性较高外,其它３种同工酶的活性均较低;而肝和肾中４种同工酶的活性普遍很高。心肌和骨骼肌因氧张力不同而使ＬＤＨ同工酶酶谱存在明显差异,但其它３种同工酶酶谱却非常相似。同工酶的组织特异性与各组织器官所执行的生理功能是相一致的     

雌核发育草鱼同工酶分析

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了雌核发育草鱼尾鳍中LDH、EST、SOD三种同工酶的酶谱。研究结果表明雌核发育草鱼各个体间及与普通草鱼与LDH、EST同工酶谱上表达是一致的。雌核发育草鱼中SOD酶谱与普通草鱼存在有明显差异。在雌核发育草鱼SOD酶谱区段1中检测到一条特殊的酶带(暂称之为SOD-G),SOD-G在所检测的6尾雌核发育草鱼中普遍存在,但在普通草中未检测到,初步认为SOD-G可以作为雌核发育草鱼群体的生化遗传标记。     

连翘叶提取物对力竭及恢复小鼠脑组织抗氧化酶活性和LDH同工酶的影响

为研究连翘叶提取物(FSE)对力竭及恢复小鼠脑组织SOD、POD、MDA和LDH同工酶的影响,用分光光度法测定小鼠脑组织MDA含量及SOD和POD活性,用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析LDH同工酶。结果表明,FSE可以提高力竭状态下小鼠脑组织SOD和POD活性,降低力竭及恢复状态下小鼠脑组织MDA的含量;FSE还可以降低力竭状态下脑组织LDH活性,提高恢复状态下小鼠脑组织LDH4-5的活性;FSE对对力竭运动状态下的脑组织有保护作用,对延缓运动中枢疲劳有积极的作用。