甜叶菊茎段腋芽诱导培养基和NaN3诱变条件筛选及诱变试管苗POD同工酶分析

以甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)茎段为外植体,采用L9(34)正交表对腋芽诱导培养基中的激素种类和浓度(0.0、0.1和0.2 ng·L-1NAA;0.0、0.5和1.0 mg·L-16-BA;0.000、0.005和0.010 mg·L-1TDZ)进行筛选;在此基础上对诱变过程中NaN3溶液的浓度(3、6和9 mmol·L-1)和处理时间(1、2、4和8h)进行比较,并初步筛选出最佳的NaN3诱变条件;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对经上述NaN3诱变处理后培养5、10和15 d的试管苗POD同工酶酶谱的变化进行了分析.结果表明:在添加了不同激素组合的培养基上均能诱导出腋芽,但腋芽数和苗高有差异;经综合比较后可确定适宜于甜叶菊腋芽诱导的培养基为添加1.0 mg·L-16-BA和0.1 mg·L-1NAA的MS培养基(含5.0g·L-1琼脂粉和30g·L-1蔗糖,pH 6.0).经NaN3诱变处理后,茎段在腋芽诱导培养过程中的死亡率随NaN3浓度提高和处理时间延长逐渐增加,平均腋芽数和苗高则下降,且多数处理组试管苗矮化;根据半致死剂量确定的最佳NaN3诱变处理方法为将甜叶菊茎段置于9 mmol·L-1 NaN3溶液中浸泡4h.PAGE分析结果表明:甜叶菊诱变试管苗的POD同工酶谱均可分为a、b和c区,但在不同培养时间各处理组POD同工酶的条带数和活性有所变化.在培养5和10 d后各处理组诱变试管苗POD同工酶的活性和条带数量有明显差异,而在培养15 d后各处理组诱变试管苗POD同工酶活性有差异,但条带数量没有明显变化,表明用适宜浓度的NaN3进行诱变处理可导致甜叶菊试管苗短期的应激效应.     

巴西橡胶成龄无性系茎段的试管微繁技术研究

巴西橡胶成龄无性系茎段组织培养在生产中有很大的潜在应用价值,但一直是橡胶树组织培养的难点,至今国内外鲜有成功的报道.本研究以在中国热带地区大面积推广种植的巴西橡胶树优良品种热研7-33-97不同生长时期成龄树茎段为外植体,进行无性系试管微繁技术研究.研究结果表明不同生长时期的茎段在自然条件中受污染程度不同,茎段真菌污染率为稳定期＞淡绿期＞古铜期,细菌污染率为淡绿期＞稳定期＞古铜期.不同生长时期的成龄树茎段需要通过不同的灭菌方法才能显著提高外植体的利用率,外植体灭菌方法显著影响橡胶成龄树茎段的组织培养效率;与稳定期相比,古铜期和淡绿期茎段在组织培养过程中诱导丛生芽萌芽快、萌芽多,是较优的外植体材料;古铜期和淡绿期茎段在激素配比为4.0～5.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L GA3的条件下能很好的诱导抽出丛生芽;丛生芽在激素配比为2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA,1.0 mg/t 6-BA+1.0 mg/L KT+0.5 mg/L NAA或0.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA的条件下能很好的诱导丛生芽抽出健壮的芽条;丛生芽抽出的健壮芽条在激素配比为0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA的条件下能较好的抽根成苗.外植体生长时期、激素种类和浓度配比都是影响巴西橡胶成龄无性系茎段的试管微繁的重要因素.     

外源激素对沙田柚茎尖微嫁接成活率的影响

外源激素可对沙田柚茎尖微嫁接成活率产生显著影响.若在培养基中加入一定浓度的GA3、6-BA或IBA,均会明显抑制微嫁接的成活率;若直接利用这三种激素以合适的浓度处理砧木和接穗,则会不同程度地提高微嫁接的成活率.三者之中以10mg/LGA3的促进作用最为明显,微嫁接的成活率可达45%,6-BA和IBA处理虽然也能提高微嫁接的成活率,但它们又同时增加了接穗的脱落死亡率.     

不同波长的光对佛甲草离体茎段培养过程中生长发育的影响

植物的正常个体发育过程中都存在着一个受光控制的光形态建成过程。光作为植物组织培养中的一个调控因子,已有报道。本实验通过对佛甲草的不同波长的光处理,比较其形态发生及生理生化指标。佛甲草为一种药用植物,本实验为建立佛甲草茎段培养的理想诱导模式提供了初步的资料。     

葡萄试管苗热处理结合茎尖培养脱病毒效果的研究

对７个生食葡萄品种的试管苗热处理结合茎尖剥离培养脱除病毒的方法做了研究,结果表明,从热处理试管苗剥离的茎尖培养成活率为６１．２％,其中有１８．１％的成苗。各品种热处理试管苗剥离的茎尖分化再生能力不同：先形成愈伤组织的成苗率较低,而先分化芽的茎尖成苗率较高。这一方法对扇叶病毒和卷叶病毒的脱除率达９２％以上。     

怀山药的茎段培养和快速繁殖

StemCultureandRapidPropagationofDioscoreaoppositaLIMing－Jun,YANGJian－Wei,ZHANGJia－Baco(DepartmentofBiology,HenanNormalUniversity,Xinxiang453002）1植物名称怀山药（Dioscoreaopposita）,俗名铁棍山药。2材料类别无菌试管苗茎段。3培养条件培养基：（l）MS＋KT2mg·L‘（单位下同）＋PP3331～2＋NAA0．02;（2）MS＋6－BA2＋NAA0．02～2;（3）MS＋KT2＋NAA0．02～2;（4）MS＋IBA01～10;（5）MS＋KT0．1～10;（6）MS＋PP3330．1～1;（7）MS＋KT2＋PP3330．1＋NAA0．02。以上培养基均加蔗…     

甜樱桃新品系13-38茎尖无性系建立及试管苗嫁接研究

本文报告通过茎尖培养及试管苗嫁接快速繁殖甜樱桃新品系13—38苗木。取新品系母树休眠芽制备成无菌外植体,分别在MS附加6-BA 0.1-0.5mg／L,IAA 0.1mg／L培养基及MS附加ZTl-1.5 mg／L,IAA 0.1-0.25 mg／L培养基中进行微型扦插及茎尖分化培养,建立茎尖无性系。试管苗年扩繁量为48和108。以新品系试管苗为接穗,采用切接,皮接两种方法嫁接于四种砧木,成活率为20一70%不等。实验表明13—88试管苗与砧木新品系1090试管幼苗的亲和力较好。接合部位预先施用200ppm的NAA可提高嫁接成活率。     

甜樱桃新品系13-38茎尖无性系建立及试管苗嫁接研究

本文报告通过茎尖培养及试管苗嫁接快速繁殖甜樱桃新品系13-38苗木。取新品系母树休眠芽制备成无菌外植体,分别在MS附加6-BA 0.1-0.5mg/l,IAA 0.1mg/l培养基及MS附加ZT1—1.5mg/l,IAA 0.1—0.25mg/l培养基中进行微型扦插及茎尖分化培养,建立茎尖无性系。试管苗年扩繁量为4~8和10~3。以新品系试管苗为接穗,采用切接,皮接两种方法嫁接于四种砧木,成活率为20—70%不等。实验表明13-38试管苗与砧木新品系1090试管幼苗的亲和力较好。接合部位预先施用200ppm的NAA可提高嫁接成活率。     

西南金丝桃茎段的离体培养和植株再生

1　植物名称　西南金丝桃 (Hypericumhenryi)。2　材料类别　当年生茎段。3　培养条件　以MS为基本培养基。 ( 1 )腋芽诱导培养基 :MS + 6 BA 1 .0mg·L- 1 (单位下同 ) ;( 2 )芽增殖培养基 :MS + 6 BA 1 .0 +KT 1 .0 ;( 3)生根培养基 :1 /2MS。上述培养基均添加 3%蔗糖、0 .65 %琼脂 ,pH 5 .8～ 6.0。培养温度为 2 4℃ ,每日光照1 2～ 1 4h ,光照度 1 5 0 0lx。4　生长与分化情况4.1　芽的诱导　野外采集的茎段用常规法灭菌后 ,切成 2cm长的小段 (带 1个节 ) ,基部向下直插于 ( 1 )号培养基上。培养 5d后 ,腋芽开始萌动生长 ;1 5d后…     

光质对石刁柏愈伤组织培养中生长和过氧化物酶的影响

报道了在石刁柏愈伤组织培养中,采用５种不同光质处理,对愈伤组织生长及其过氧化物酶（ＰＯＤ）活性及同工酶的影响,实验表明,不同光质处理对生长有不同的效应,蓝光、红光下的培养物生长较快。不同光质对培养物质的ＰＯＤ活性亦有不同效应,ＰＯＤ同工酶谱亦有不同,蓝光、红光下的培养物,ＰＯＤ活性较高。ＰＯＤ活性变化与愈伤组织生长呈正相关。     

烟草叶组织培养中光与激素对形态发生的调节作用

我们在烟草叶的组织培养中,研究了光与激素对形态发生所起调节作用的相互关系。在培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比例都取得最佳值,而浓度绝对值则取两组不同数值。在这两组实验条件下,分别考察了不同波段,不同强度的光照射对于不定芽的发生和愈伤组织增重的影响。用不同波段的光照射,改变光强,光促进生长的效应都有一极大值。用蓝光照射,极大值的数值最高。激素浓度低时光的效应较大;浓度高时,除蓝光外,其他波段的光效应都很微弱。     

不同激素浓度及光质对烟草叶片不定芽发生的效应

植物激素能调控形态发生已被人们所承认,光在植物形态发生中所起的作用也正在被人们所重视。本文简要报道不同激素浓度及光质对烟草叶片不定芽发生的效应。实验材料为普通烟草(Nicotiana tabacum.L.)试管苗,取7×8 mm的叶子,切去叶柄作为外植体,每瓶接3片,每组重复8瓶,取平均值。MS培养基附加BA和NAA,激素浓度配比(BA/NAA)分别为0/0,0.50/0.05,1.00/0.10,2.00/0.20,单位均为毫克/升(mg/1)。光源选择复旦大学电光源研究所特制的荧光灯附加滤光装置,应用先进的自动光谱辐射     

石刁柏胚乳愈伤组织内胚胎发生的组织细胞学观察

石刁柏(Asparagus officinalis L.)的幼嫩胚乳接种于MS+NAA 5ppm+6-BA 1ppm和MS+NAA 1ppm+6-BA 0.5ppm的培养基上诱导产生愈伤组织。将愈伤组织转移到MS+6-BA 1ppm+NAA 0.5ppm的分化培养基上,培养30天后即可形成胚状体,组织细胞学观察表明:胚状体起源于愈伤组织内或近表层的单个胚性细胞。在胚状体发生的早期阶段,观察到与柳叶菜型和藜型胚胎发育大致相似的细胞分裂方式,从而出现了T型或线型的四个细胞的原胚。在多细胞原胚及球形胚期具有单列或不规则排列的多细胞胚柄。石刁柏胚乳愈伤组织中的胚胎发生是不同步的,在同一块愈伤组织的切片中可以观察到不同发育阶段的胚状体。在外形上还可以观察到一个子叶、两个子叶或四个子叶等多种不同形态的胚状体。一部份胚状体能发育成完整小植株。     

石刁柏花粉离体培养及再生植株的研究

对石刁柏花粉粒进行离体培养,用ＭＳ基本培养基,激素ＮＡＡ０．５ｐｐｍ／Ｌ,花粉粒开始启动,形成细胞团,产生了愈伤组织,经去分化而形成单倍体植株（ｎ＝１０）。同时对花药壁,植物激素在花粉粒发育中的作用及再生植物染色体倍性问题进行研究。本文为选育超雄株在理论与实践方面均进行了探讨。     

石刁柏胚乳愈伤组织的诱导及植株的再生

石刁柏已形成细胞的幼嫩胚乳,接种在附加有不同浓度的生长素(NAA)和细胞分裂素(BA)的 MS 培养基上,获得了愈伤组织。愈伤组织的诱导频率随生长素的浓度不同而异,可达65.9—83.1%。将胚乳愈伤组织转移到降低了生长素浓度或只含有低浓度生长素的分化培养基上,可陆续分化芽、根、芽丛和少量胚状体,个别的芽和胚状体能发育成小植株。切取1.5—5cm 长的芽,接种在诱导根的培养基上,或在 IBA50ppm 溶液中浸泡2小时,转移到 MS 基本培养基上,部分芽能生根形成完整植株。     

外源激素在诱导风信子花被外植体不同部位细胞再生花芽中的作用

外源激素诱导风信子（Ｈｙａｃｉｎｔｈｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓＬ．）同一发育时期花被外植体不同部位细胞再生花芽的实验表明∶１． 诱导花被外植体细胞再生花芽,外源激素是必需的;２． 仅有细胞分裂素就可以诱导花芽再生,生长素并不是必需的;３． 花被外植体上的不同部位的细胞再生花芽时,需要不同浓度的外源激素． 单独加６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ可以诱导花被下部的细胞再生花芽;６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ和２,４－Ｄ ０．１ ｍ ｇ／Ｌ的组合有利于花被中部的细胞再生花芽;６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ和２,４－Ｄ １．０ ｍ ｇ／Ｌ的组合能促进花被上部的细胞分化花芽     

甲状腺激素对胸腺上皮细胞CK19蛋白表达的影响

目的探讨甲状腺激素对胸腺的发育的影响及可能的机制。方法将12只怀孕4d的大鼠随机分成A组和B组,A组正常饮水,B组孕鼠供以含有0．02％甲巯咪唑的饮水制备仔鼠甲状腺功能低下动物模型,将A组的仔鼠随机分成对照组和甲状腺素钠组,将B组的仔鼠随机分成甲低组和甲低＋甲状腺素钠组。甲状腺素钠组和甲低＋甲状腺素钠组于出生后15d给予腹腔注射甲状腺素钠（0．5mg／kg体重,1次／d）,连续给药25d。所有动物于出生后40d麻醉处死,测定仔鼠的胸腺重量及脏器指数;采用放射免疫技术测定仔鼠血清中三碘甲状腺原氨酸（triiodothyronine,T3）、四碘甲状腺原氨酸（tetraiodothyronine,T4）、促甲状腺激素（thyroid—stimulating hormone,TSH）水平,免疫组织化学技术检测胸腺上皮细胞细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）蛋白的表达量。结果与对照组比较,甲状腺素钠组仔鼠血清中T3、T4显著升高,TSH减少,胸腺重量增大;甲低组仔鼠血清中T3、T4明显降低,TSH显著增高,胸腺重量降低,胸腺上皮细胞CK19蛋白表达减少。与甲低组比较,甲低＋甲状腺素钠组仔鼠血清中T3、T4升高,TSH降低,胸腺指数增大,胸腺上皮细胞CK19蛋白的表达明显增多。结论甲状腺激素可以通过影响胸腺上皮细胞CK19的表达量,使胸腺发育或退化。     

石刁柏愈伤组织形态发生能力及器官发生的研究

石刁柏愈伤组织可分为4种类型。淡绿色、紧实、块状的愈伤组织(A)为典型的器官发生型愈伤组织,根和芽分化率高;绿白色、紧实、瘤状的愈伤组织(B)形态发生能力低;淡黄色、松散、颗粒状的愈伤组织(C)为典型的胚胎发生型愈伤组织,胚状体分化率高;而黄褐色、较松散、团块状的愈伤组织(D)无形态发生能力。器官原基起源于愈伤组织中具单极性的分生细胞团。芽的发生多为外起源,亦有内起源;根的发生多为内起源,亦有外起源。