大花蕙兰组培快繁技术研究

选用大花蕙兰杂交新品种1053为外植体,采用1/2MS为基本培养基进行大花蕙兰组培快繁技术研究,结果表明：类原球茎诱导的最佳外植体为大花蕙兰鳞茎,培养基最佳激素浓度配比为0.5 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;类原球茎增殖与分化芽最佳激素浓度配比为1.0 mg/L 6-BA＋0.3 mg/L NAA;幼芽增殖的最佳激素浓度配比为2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA,最佳有机添加物为150 ml/L椰汁,幼芽增殖正交试验得出影响因素主次顺序：6-BA〉椰汁添加物〉NAA,优组合为2 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、添加物椰汁150 ml/L;诱导生根的最佳激素浓度配比为0.3 mg/L IBA＋0.2 mg/L NAA,添加香蕉泥100 g/L对幼苗根生长有显著的促进作用。优化后的大花蕙兰组培快繁技术参数,可为大规模工厂化生产提供参考。     

纳米碳对离体培养条件下几种植物生长及分化的影响

以食用百合、红掌、大花蕙兰及金昌枣的组培苗为材料,研究不同浓度的纳米碳对几种植物外植体生长及分化的影响。结果表明,MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L+纳米碳0.10 g/L,促进百合鳞茎增殖,当纳米碳为0.50 g/L时有利于百合苗的生长及生根;MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+纳米碳0.04-0.06 g/L适用于红掌腋芽外植体愈伤组织诱导和分化,诱导率达90%以上,分化率达97%;加入纳米碳1.0-2.0 g/L时能够明显抑制大花蕙兰原球茎继代培养中的褐化现象;MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+纳米碳0.05 g/L,利于金昌枣芽增殖,当纳米碳为0.15 g/L时,芽长势健壮。     

根癌农杆菌介导大花蕙兰遗传转化的研究

以大花蕙兰原球茎(PLBs)为外植体,采用EHA105和LBA4404 2种根癌农杆菌菌株与pCAMBIA1301质粒构建工程菌介导,以建立大花蕙兰遗传转化体系,并比较不同受体处理方式、菌液浓度和侵染方式等对大花蕙兰转化的影响.结果表明:(1)以切成3 mm左右的PLBs小块作为受体材料,用OD600值为0.6的LBA4404根癌农杆菌菌株,并用MS+1.0 mg/L BA+200μmol/L AS(乙酰丁香酮)的液体培养基将菌液等体积稀释侵染,转化率可达62.5%.(2)大花蕙兰对潮霉素(Hyg)十分敏感,5 mg/L Hyg对转化后的PLBs有较好的筛选效果,筛选后最高成活率为13.0%.(3)PCR检测初步证明,通过根癌农杆菌介导的方法获得了2株转基因大花蕙兰植株.     

紫花苞舌兰类原球茎诱导及植株再生

为建立紫花苞舌兰类原球茎离体再生体系,本研究以其腋芽为外植体,研究了不同激素浓度配比、添加剂对其类原球茎诱导、分化及生根诱导的影响。结果表明,外植体在1/2 MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC(活性炭)0.2 g/L+CW(椰汁)10%培养基上培养35 d后,获得无菌苗,其成活率达80%以上;无菌苗的顶端分生组织在1/2 MS+10 mg/L Picloram培养基上的类原球茎的诱导率最高,达75%;类原球茎在1/2 MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养基上培养45 d后分化出小苗,分化率为54%;小苗在1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+AC 0.2 g/L培养基上生根培养35 d后,生根率达85%以上;小苗驯化移栽成活率达95%,长势良好。     

兰属种间杂交胚拯救研究初报

取兰属大花蕙兰为母本、墨兰为父本进行种间杂交并进行杂种胚拯救研究。结果显示,子房离体培养明显优于胚珠离体培养,是胚抢救培养的有效手段。不同取材时间及在不同培养基中子房培养情况差异明显。在授粉后60 d子房离体培养即可获得成功,但以授粉后90 d子房离体培养最佳,萌发率高,达80%。子房培养的最适培养基为VW+BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蛋白胨3 g/L+水解酪蛋白500 mg/L+椰子汁10%。     

几种植物生长调节物质对大花蕙兰组培原球茎增殖的影响

采用KC 培养基, 分别添加不同浓度的BA、KT、NAA 及KT+NAA 组合, 对大花蕙兰初代培养已分化出的原球茎进行了继代培养。结果发现:①BA 可加快原球茎的增殖速度, 但浓度超过0.5 mg/L 后增殖速度有所下降, 且原球茎变小呈暗绿色。②KT 的促进增殖效果好于BA, 但浓度超过1.0 mg/L 时, 增殖速度也有所下降, 原球茎变小。③NAA 促进原球茎增殖的效果明显好于BA、和KT, 但浓度大于1.0 mg/L 后增殖不再加快, 而且部分原球茎有变褐现象。④在KT 0.5~0.7 mg+NAA 0.7~1.0 mg/L 范围组合的KC 培养基上, 大花蕙兰原球茎增殖的速度和质量是比较理想的。考虑到较低的细胞分裂素和植物生长素有利于植物增殖过程中遗传性的稳定, 选择KT0.5 mg+NAA 0.7 mg/L 的KC 培养基作为大花蕙兰原球茎增殖培养基。     

兰属植物种间杂交亲和性研究

以10个中国兰品种和8个大花蕙兰品种为材料开展了兰属植物间的杂交试验,比较不同组合的杂交亲和性。结果表明:(1)54个杂交组合,共授粉582朵,获得杂交果实131个,平均结实率为22.51%;中国兰与大花蕙兰正交结实率(23.19%)高于反交结实率(9.27%)。(2)墨兰与大花蕙兰无论正交或反交均可获得较高的结实率,其亲和性高于春兰、建兰与大花蕙兰杂交的亲和性。(3)中国兰种间杂交亲和性较高,3类组合结实率均大于30%,但不同品种间杂交亲和性不一,春兰‘绿萼’,墨兰‘企黑’、‘白墨’,建兰‘金荷’,大花蕙兰‘黄金岁月’比较适宜做母本;春兰‘大富贵’,墨兰‘富贵’、‘白墨’,大花蕙兰‘月影’、‘日本绿’和‘黑珍珠’比较适宜做父本。     

大花蕙兰茎尖组织培养及其形态建成的研究

以大花蕙兰(Cymbidium grandi,lorium)茎尖为外植体,在改良的Vacin和Went培养基上诱导形成了原球苹,并且在添加有1 mg/1BA的‘Vacin和Went培养基上获得了快速繁殖无性系,将原球茎转移到加有香蕉匀浆汁的Knudson c培养基上,很快长出叶片和根,形成完整的再生植株。较高浓度的BA(1.O mg/1)能促进原球茎的增殖;较低浓度的BA(O.4mg/1)能促进原球茎的分化。形态发生的显微观察表明原球茎来源于体细胞胚,它的发育过程与合子胚十分相似。     

中药材铁皮石斛组培苗不同培养基的筛选与优化

铁皮石斛组培苗在生长各个阶段对营养物质的需求不一样,培养条件不同组培苗生长结果也不一样。本研究以铁皮石斛种子为材料,通过无菌播种进行原球茎诱导、增殖、分化、生根试验,对各阶段培养基进行比较,以期筛选出最佳培养基条件,为将来铁皮石斛走向工厂化、标准化生产提供思考和借鉴。结果表明,种子萌发以及原球茎诱导的最佳培养基配方是1/2 MS培养基,35 d后萌发率达93.1%。原球茎增殖最佳培养基配方组合是MS+6-BA(1.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),增殖系数达14.8。原球茎分化成苗的最佳培养基配方组合是MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L),分化率达92.1%,且长势良好。组培苗生根的最佳培养基配方组合是1/2 MS+NAA(1.5 mg/L),生根率达97.7%,根系健壮发达。     

铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定。结果表明：（1）实验室的‘花自 2’株系为纯合同源四倍体。（2）茎段扩繁最佳增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L KT,诱导率达到76.66%;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6 BA+20%马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70%;生根最佳培养基为1/2 MS＋0.5 mg/L NAA＋15%香蕉汁,生根率达到92.77%。（3）原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传。（4）瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5 d,移栽成活率达92.30%。该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础。     

Effect of ABA on the in Vitro Induction of Floral Buds of Dendrobium candidu Wall.ex Lindl.

An in vitro flowering system of Dendrobium candidurn Wall. ex Lindl., a wild species of orchid, was established. Callus was induced from seeds and protocorms formed on MS agar medium supplemented with 0.3 mg/L NAA under diffused light. Floral buds were induced when protocorms were cultured on MS agar medium supplemented with 2 mg/L 6-BA and 0.5 mg/L NAA, the frequency of floral bud induction being 27.0%. When protocorms were precultured on MS medium supplemented with 0. 5 mg/L ABA for 15 days and then transfered onto MS medium supplemented with 2 mg/L 6-BA, the frequency of floral bud induction increased greatly reach 84.0 % during a period of 5 months. Meanwhile the number of branches and floral buds also increased and in some instances inflorescence appeared. Never the less, no floral bud was formed if protocorms continued to be cultured on the ABA-containing MS medium.     

石斛离体培养中ABA对诱导花芽形成的影响

由兰科植物铁皮石斛（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌｌ．ｅｘ Ｌｉｎｄｌ．）种子诱导形成的愈伤组织,在光照下置于ＭＳ附加０．３ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 的培养基上繁殖,可以形成原球茎。将原球茎转入ＭＳ含２ ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ 和０．５ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 的培养基上,花芽形成频率为２７．０％ 。原球茎先在０．５ ｍ ｇ／ＬＡＢＡ的培养基上预培养１５ ｄ,再转入含２ ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ 的ＭＳ培养基上培养,花芽形成频率明显提高,可达８４．４％ ,而且每株植株花的数目增加;但是在仅有ＡＢＡ 的ＭＳ培养基上培养的原球茎再生的植株未见花芽形成     

紫花三叉白芨快繁技术研究

为建立白芨(Bletilla striata)高效实用的组织培养快繁体系,以紫花三叉白芨成熟未开裂的蒴果、块茎、叶片为外植体,筛选最佳外植体材料,并研究不同生长调节剂浓度培养基对原球茎萌发、丛生芽诱导以及生根影响。结果表明,白芨种子为最佳外植体材料;培养基 KC + NAA 0.5 mg·L^–1有利于白芨原球茎丛生芽诱导;培养基 MS + 6-BA 2.0 mg·L^–1+ NAA 0.2 mg·L^–1 + 10%椰汁有利于丛生芽增殖及成苗;将 2 cm 高幼苗转入生根培养基 1/2MS + NAA 0.5 mg?L^–1中,其生根效果最好,生根率达 98.67%。     

鱼腥草组织培养研究

以鱼腥草带侧芽茎段为外植体进行组培快繁研究。结果表明,初代培养以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L为最佳,30d侧芽诱导率可达66.7%;MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.2mg/L+NAA 0.2mg/L对芽苗的继代增殖效果最好,40d芽苗的增殖倍数可达7.4,且芽苗较高;以MS+6-BA3.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L+NAA0.1mg/L对芽苗的继代增重效果最好,40d芽苗鲜重为7.358g;以沙和蛭石(1:1)为基质瓶外生根效果最好,30d芽苗生根率可达84%。     

不同生长调节剂对狗肝菜愈伤组织诱导和离体快繁的影响

目的 :研究不同生长调节剂对狗肝菜愈伤组织诱导和离体快繁的影响。方法 :狗肝菜不同外植体在附加不同生长调节剂的培养基上诱导愈伤组织 ,比较愈伤组织的诱导率 ;用 3因子 5水平的正交实验 ,比较不同生长调节剂对丛生芽诱导的影响 ;在附加不同生长调节剂的培养基上比较芽增殖倍数 ;附加不同浓度NAA的培养基上比较生根效果。结果 :愈伤组织诱导率相对以叶片最高 ,茎段次之 ,最后为叶柄 ;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 6-BA0 .5 NAA1 .5 ;不同激素对茎段芽诱导的影响次序为 6-BA>KT >NAA ,芽诱导的最佳培养基为MS 6-BA2mg/L KT1mg/L NAA0 .5mg/L ;芽继代增殖的最佳激素组合是MS 6-BA2mg/L NAA2mg/L ,增殖倍数达 3.0 0 ,影响芽继代增殖的因素次序为 6-BA >NAANAA0 .5mg/L的生根效果较好。结论 :附加一定的生长调节剂能提高狗肝菜愈伤组织的诱导率和离体快繁的效率。     

达摩兰组织培养适宜培养基的研究

以达摩兰的原种苗茎段为外植体进行组织培养研究,筛选出最适培养基(1)原球茎诱导:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+香蕉肉250 g/L;(2)丛生芽诱导:1/2 MS+6-BA 3 mg/L+NAA 2.0 mg/L+AC 2.5 g/L+蔗糖3%+香蕉肉200 g/L;(3)芽增殖:1/2 MS+6-BA 3 mg/L+NAA 2.0 mg/L+AC 2.5 g/L+蔗糖3%+香蕉肉150 g/L;(4)根诱导:1/2 MS+6-BA 0.3 mg/L+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AC 2.5 g/L+蔗糖3%。采用珍珠岩、细石与树皮的混合物为培养基质,移栽成活率达95%以上。     

猕猴桃高频直接再生体系的建立

为了建立猕猴桃高频再生体系,以MS为基本培养基,猕猴桃(Actinidia deliciosaQinmei)茎及叶片为外植体,研究了2,4-D、6-BA和NAA在美味猕猴桃愈伤组织形成及分化过程中的作用。方差分析结果表明,6-BA能够显著促进愈伤组织形成,6-BA和NAA可以显著促进愈伤组织形成和分化,而2,4-D抑制愈伤组织形成。附加2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L NAA和600 mg/L水解酪蛋白的MS培养基是茎段培养的最佳培养基,在该培养基上,以再生的无菌苗为起始材料,一个月时叶圆盘的直接再生频率达到100%,平均每个叶圆盘产生9.33个芽,其中23.21%芽高度超过0.5 cm。     

激素水平对84 K杨组培快繁的影响

本实验以84K杨腋芽和叶片为外植体,研究不同激素水平对84K杨组织培养的影响,探讨84K杨快速繁殖试管苗的有效途径。研究结果表明：84K杨腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA2．0mg／L NAA0．5mg/L;叶片不定芽诱导初期的最佳培养基为MS 6-B1．0mg／L NAA0．5mg/L,MS KT1．0mg／L NAA0．1mg,L为不定芽壮苗的最佳培养基;从生根和移栽成活率上看不添加任何激素的1／2MS基本培养基和1/2MS NAA0．2mg/L IBA0．5mg/L为84K杨最佳生根培养基。     

NAA与PP_(333)对茉莉新梢部分生理生化作用的影响

在茉莉开花前期分别使用不同浓度NAA(20、50、100mg/L)与PP333(100、300、500mg/L)溶液均匀喷施于植株茎、叶片等生长部位,研究其对茉莉开花的影响,分析测定植株新梢生长部位的可溶性蛋白质、游离氨基酸含量以及保护酶活性等生理生化指标。结果表明:NAA处理使新梢徒长;PP333处理的茉莉,花蕾盛开期比对照提早4d,浓度以300mg/L为宜,其产量比对照增加12.95%,明显提高花蕾产量。茉莉经PP333处理后,新梢可溶性蛋白质和游离氨基酸含量在整个花芽生长过程中趋于相对稳定,而NAA处理后则使可溶性蛋白质和游离氨基酸含量变化幅度大。NAA与PP333处理后新梢中POD活性在花芽生长过程中稍有下降,NAA处理高于对照,而SOD活性则有上升趋势。经NAA和PP333处理后,其效应各不相同,而适宜浓度的PP333处理可以提高茉莉花蕾产量。