能源上的应用

901113 用土壤分离菌从煤和油水乳浊液中除去有机硫[会,英]/Khalid, A. M.…∥Abstr. Annu. Meet. Am. Soc. Microbiol.-1989, 89 Meet.-314[译自DBA,1989,8(17),89-10331] 从受石油作用的土壤中分离出了能够降解硫芴(DBT)的细菌培养物(Oil-2)。这种细菌能利用DBT作为唯一能源。在以DBT为能源的装有2升无机盐溶液的烧瓶中进行培养,培养温度30℃。通过测定在A480时转-4-(2,3-(羟基)-苯并噻吩)-2-氧基-3-丁烯酸的特征吸收以及     

基于16S rRNA和HSP60基因序列分析粘细菌孢囊杆菌亚目形态分类的种属之间的亲缘关系

[目的]利用16S rRNA和HSP60基因分子标记分析鉴定形态分类特征不稳定的粘细菌种属.[方法]利用粘细菌的传统分离纯化方法从土壤中分离粘细菌,根据菌株的形态特征进行分类,PCR方法扩增菌株的16S rRNA和HSP60基因序列并进行系统发育关系分析.[结果]根据形态特征,分离得到的15株粘细菌菌株归入孢囊杆菌亚目(Cystobacterineae)的2个科3个属.其中11株粘细菌具有典型的所在种属的子实体结构,而菌株0085-4、0121-3、NM03和Myx9736的子实体结构发生了不同程度退化.15株粘细菌的16S rRNA基因序列的相似性在95.4%到99.5%之间.而HSP60基因序列差异较大.[结论]在属水平上,粘细菌形态分类特征和16S rRNA基因系统进化关系具有很好的一致性;在揭示粘细菌种间系统发育关系中,HSP60基因序列更为适用.     

PCR法快速识别Actinobacteria的五种模板制备方法的比较

放线细菌的23S rRNA基因序列具有较好的保守性和相对的可变性,被认为是快速筛选放线细菌的合适部位。能否快速有效地扩增特异性区间,聚合酶链反应(PCR)扩增前的模板制备质量是关键,故比较了基因组DNA作为PCR模板的5种制备方法。旨在寻找准确、快速、简便、经济的放线细菌筛选技术,为普通和极端环境放线细菌资源的研究和开发利用创造条件。     

医药其它

961403 设计一种开发生物药品的灵活性设备[会,英]/Petrossian,A.…//Abstr.Pap.Am.Chem.Soc.-1995,209Meet.Pt.1.-BIOT041[译自DBA,1995,14(22),95-13115] 讨论了适应一系列微生物(细菌和酵母)和动物细胞培养(哺乳类和昆虫系统)的灵活性发酵和纯化     

基因工程

951155模板转换扩增及优化[会,英1/Chan.Y.…,Ab—Str.Gell.Meet.Am.:Soc.Microbi01.一1994.94 Meet.一551E译fj DBA,1994,13(20),94—11412] 开发了称为链转换单引物扩增(SPA)的新系统。此方法需要引物和专门设计的与模板相同链杂交的寡核苷酸(阻遏物)。阻遏物的5’一末端含有与引物相同的序列。阻遇物的3L末端与模板上引发位点的下游片段杂交,留下5’非杂交性拖尾。利用Pyrocovcus,”riosus DNA一聚合酶的引物延伸在阻遏物杂交位点受到阻断。通过专门设计阻遏物以形成茎环产物,开发出从靶链判阻遏物5’非杂交性拖尾的模板转换。…     

基因工程

<正>851741DNA在酵母和动物细胞的寄主一载体系统中的分子克隆和表达[会,英]/ScottJF//Abstr.Pap.Am.Cliem.Soe-1984,287 Meet一CHED 76[译自DBA1984 ,3(19)-08940] 分子克隆技术及其应用的许多迅速进展是利用细菌系统实现的,但是将类似的方法用于真核寄主-载体系统是既定的目标。已研究出的这类系统(作为寄主细胞)使用各种低     

食品上的应用

901103 用高密度的嗜热芽孢杆菌MGA3细胞由甲醇生产L-赖氨酸[会,英]/Schendel, F. J.…∥Abstr. Annu. Meet, Am. Soc. Microbiol.-1989, 89 Meet.-316[译自DBA,1989,8(17),89-10299] 用能够利用甲醇的嗜热芽孢杆菌MGA3、Gr和NOA_2的高丝氨酸营养缺陷型和抗S-(2-氨乙基)-半胱氨酸突变株实现了有重要营养价值的氨基酸L-赖氨酸的生产。利用甲醇基本盐类培养基,并     

细胞工程

900914 生产对里氏木霉的内葡聚糖酶-Ⅰ和纤维二糖水解酶Ⅱ特异的单克隆抗体[会,英]/Nieves, R. A.…∥Abstr. Annu. Meet. Am. Soc. Microbiol.-1989, 89 Meet.-305[译自DBA,1989,8(17),89-10405] 里氏木霉(Trichoderma reesei)的纤维素酶系统由纤维二糖水解酶、内葡聚糖酶和β-葡糖苷酶组成。通过这些酶的协同作用可使纤维素降解为可利用的底物。生产     

激素和活性多肽

941 902人胰岛素样生长因子Ⅱ的表达、纯化及与其受体的结合[英]/Miyagishima,T.…∥ Biochim.Biophys.Acta P.一1993,1203(1)..155～161[译自DBA,1994,13(4),94一01912] 用聚合酶链反应扩增成熟的胰岛素样生长因子一2(IFG2)cDNA。所用的引物是为扩增IGF2编码序列而设计的,该序     

聚合酶链反应在牛血清支原体检测中的应用

为了探讨聚合酶链反应在牛血清支原体检测上的应用价值,以支原体高度保守的rRNA操纵子(支原体基因组中16SrRNA的编码区序列)设计引物,采用碱裂解法提取牛血清中支原体DNA作为模板进行聚合酶链反应。结果表明,阳性、阴性和内控对照都扩增出了预期的条带,聚合酶链反应与支原体培养法比较,有灵敏、快速、特异性高的特点,可用于牛血清中支原体的常规检测。     

南极普利兹湾夏季海冰不同层次细菌丰度及多样性

[目的]为了解南极普利兹湾夏季海冰不同层次中细菌群落丰度及组成.[方法]利用荧光原位杂交技术对海冰不同层次中细菌进行定量研究,通过构建16S rRNA基因文库对海冰不同层次中细菌进行多样性分析,并结合环境因子进行相关性分析.[结果]荧光原位杂交结果表明,细菌占海冰总细胞数比例随着海冰层次下降呈现上升趋势,初步推断可能受海冰中总有机碳,总有机氮以及磷酸盐影响所致.16SrRNA基因文库分析结果表明,上、中、底3个海冰分层样品获得的16S rRNA基因序列归属于γ-变形细菌纲(γ-Proteobacteria),α-变形细菌纲(α-Proteobacteria)以及拟杆菌门(Bacteroidetes),多数16S rRNA基因序列与分离培养自海洋环境、南北极海冰菌株的16S rRNA基因序列相似性较高(90％-99％);在海冰底部样品中未检测到拟杆菌门;海冰不同层次中,细菌组成呈现些微的差异性,可能由铵离子在海冰不同层次的分布造成.[结论]海冰底部细菌数量最丰富.在海冰中,γ-变形细菌纲为优势类群.     

中国典型冻土区土壤可培养细菌多样性

[目的]对比分析中国典型高纬度冻土区和高海拔冻土区土壤可培养细菌的多样性.[方法]采用NM、TSA 、R2A 3种培养基分离培养不同冻土区土壤可培养细菌,用通用引物扩增分离的细菌16S rRNA基因,根据系统发育分析进行鉴定.[结果]从6个样品中得到冻土土壤可培养细菌的菌落数量为4.70×103 -2.57×105 cfu/g(土壤干重),根据不同的菌落形态分离出144株可培养细菌.纯培养物的16S rRNA基因部分序列分析表明:我国高纬度冻土区土壤样品中的细菌分别属于Firmicutes分支(59.52％)、Gammaproteobacteria 分支(38.10％)、Betaproteobacteria分支(2.38％),其中假单胞菌属(Pseudomonas)、芽胞杆菌属(Bacillus)、类芽胞杆菌属(Paenibacillus)的菌株为该区域的三大优势菌群.我国高海拔冻土区土壤样品中分离细菌属于Gammaproteobacteria分支(89.22％)、Firmicutes分支(8.82％)和Bacteroidetes分支(1.96％)o优势菌群为假单胞菌属( Pseudomonas).[结论]我国高纬度冻土区和高海拔冻土区土壤具有较高的可培养细菌多样性;不同类型冻土区土壤可培养细菌群落组成不同.本文研究结果将为我国冻土区土壤细菌资源研究与利用提供理论依据.     

生物防治

931716苏云金芽孢杆■6一内毒素片段的基因扩■槭达[英]/Roy,P./Biochem.Biophys.Res.Commun.-1992,187(2).-641--,64T[译自D:l}A,1992,11(23),92-13064] 用两种合成的寡核苷酸作为扩增晶体蛋白CryIA(b)基因N一端部分聚合酶链反应的楱板,这两种合成的寡核苷酸分别对苏云金芽孢杆菌HD一1变种kurstaki~体蛋白基因5,端和630氯基陵区有特异性。蛋白的N。端部分负责蛋白的昆虫特异性和毒性。用整个细菌作模板,得到一个1.9kb的DNA,r段,将之克隆到质粒pUCl9中。枉大肠杆菌DH一5口转化体中没有测到免疫活性晶体蛋白的表达。将扩增的基因转…     

固氮作用

<正> 854499 大豆根瘤菌中的定位 Tn5诱变[会,英]/Hahn,M.…//Adv.Nitrogen Fix-ation Res.-1984.5 Meet.-683[译自DBA,1984.3(24),84-11724]大豆根瘤菌(Rhizobium japonicum)     

029 用多探针定量聚合酶链反应法进行病原菌的检测和鉴定

目前临床上对病原细菌的标准检出方法仍为分离培养，此法耗时且可能出现假阴性。聚合酶链反应(PCR)由于其快速、灵敏的特点而被推荐用于病原菌的检出。针对细菌保守的16S rRNA设计引物……     

辽宁省番茄细菌性斑疹病的病原鉴定

[目的]对在辽宁部分地区采集的番茄细菌性病害病原菌进行鉴定.[方法]对病原菌进行革兰氏染色、培养性状、生理生化特性、16S rRNA基因序列测定以及hrpZpst基因特异性扩增.[结果]鉴定该病原菌为丁香假单胞杆菌番茄致病变种[Pseudomonas syringae pv.tomato (Okabe) Young,Dye & Wilkie].[结论]利用hrpZpst基因特异性扩增可以快速鉴定病原菌.     

基因工程

961211 利用脉冲场毛细管电泳分离DNA大分子[会,英]/Sudor, J.…//Abstr. Pap. Am. Chem. Soc. -1995,209Meet.,Pt.1.-ANYL003[译自DBA,1995,14(22),95-12943] 利用复杂聚合物溶液脉冲场毛细管电泳研究了ds DNA大分子的电迁移特性。研究了输入交替电场的2种不同形式(正弦波和方波输入信号)。以输     

野生大鲵肠道细菌多样性及产酶活性研究

[目的]纯培养分离大鲵肠道细菌并研究其多样性及产酶活性。[方法]分离大鲵肠道细菌并进行胞外淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶活性研究,并应用16S rRNA系统发育分析对菌落进行分子鉴定。[结果]纯培养分离得到65株细菌,产酶活性结果表明:62株产蛋白酶、46株产淀粉酶、61株产纤维素酶、2株产脂肪酶。将65株细菌16S rRNA序列扩增并进行RFLP分析后选取33株进行测序,可划分为2个门5个属:变形菌门(Proteobacteria)占总数的54.5%,分为普罗维登斯菌属(Providencia)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter);厚壁菌门(Firmicutes)占总数的45.5%,分为漫游球菌属(Vagococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)。[结论]大鲵肠道细菌产酶活性,分离出的细菌多样性丰富进行测序的肠道细菌可分为2门5属。     

体外培养和遗传育种

<正> 854014柿的微繁殖[会、英]/Cooper,P.A.//Proc.Austr,Plant Tissue cultu- re conf.-1983,2 Meet.-28[译自DBA,1984,3(23),84-11229]研究了日本国果柿(Diosgpros kaki)     

石油污染对土壤细菌结构特征的影响

[目的]探究准东油田地区石油污染对土壤细菌结构特征的影响。[方法]提取准东油田的背景土和油污土中的细菌DNA并进行PCR扩增,利用Miseq平台对其16S r DNA进行测序统计。[结果]总共得到93 033个细菌16S rRNA有效序列,划分为371个OTU单元;样品中优势菌群是放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)及变形菌门(Proteobacteria),厚壁菌门在背景样本中总数为29 732个,污染样本中为8 097个,数量剧减;变形菌门和放线菌门在石油污染土样中数目分别增长70%和47%;污染样品中多样性shannon指数平均为3.77,高于背景样品的2.77。[结论]证明了石油污染物对环境中的细菌结构影响显著,石油污染土壤中细菌结构多样性高于背景土壤,环境中能降解利用石油烃的菌种可能属于放线菌门和变形菌门。