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非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种急性、热性、高度接触性动物传染病,其病原为非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV),临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征,易感猪群病死率高达100%。为了建立一种基于合成肽技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗体血清学检测方法。本研究根据ASFV p30、p54和p72三种重要抗原设计3条合成肽,以此为包被抗原建立了ASFV间接ELISA抗体检测方法,并验证其敏感性、特异性、稳定性以及与进口试剂盒的符合率。结果显示,建立的间接ELISA方法的敏感性为91.4%,特异性为98.1%,批内和批间变异系数分别为3.7%~10.1%和4.7%~14.9%。与进口试剂盒比较,符合率为92.9%。结果表明该方法检测结果准确性高、且稳定性好,可检测ASFV特异性抗体。 相似文献
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反向遗传学技术在猪瘟病毒研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
猪瘟目前在许多国家流行并对养猪业造成巨大损失。虽然常规疫苗(如中国猪瘟兔化弱毒疫苗,即C株)在猪瘟防控中发挥巨大作用,但近年来在猪瘟防控中出现的新情况,如非典型感染、持续性感染及免疫失败等;同时目前世界上许多国家正开展的猪瘟扑灭计划使得弱毒疫苗的应用受到很大限制。因此,加强猪瘟病毒在致病机理、传播机制等方面的研究以及加快新型猪瘟疫苗的开发是当务之急。近年来,反向遗传学技术的发展为猪瘟病毒基因功能研究和疫苗制备方面开辟了新思路。以下回顾了反向遗传操作技术在猪瘟病毒基因功能研究与标记疫苗株构建方面的研究进展,同时提出了该领域目前面临的问题,并对其未来发展方向进行了展望。 相似文献
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陶其敏 《中国生物工程杂志》1986,6(2):27-30
在过去几十年来,世界上用分子水平分析的方法来研究人的基因失调已有许多报告,增加了很多新的知识,这些知识是由于生化的重组基因技术而来,用在单独的分析特异的基因、基因产物以及核酸结构分析编码,基因表达的规律,从而用以检测某些疾病,例如早期妊娠时测定血清或羊水中的基因紊乱,可以及时治疗或预防。 相似文献
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利用抗淋球菌外膜蛋白的单克隆抗体(McAb)制备的淋球菌酶免疫试剂(GONO-EIA)检测实验室已知淋球菌的阳性低限值菌数为6.25×10~4/ml。对脑膜炎奈瑟氏菌、微黄色奈瑟氏菌、卡它布兰汉氏球菌、大肠埃希氏菌、绿脓杆菌和乳酸杆菌等无交叉反应。检测临床生殖泌尿系统标本484例,以淋球菌培养法对比,GONO-EIA的敏感性为81.43%,特异性为94.92%,,总符合率为92.97%。GONO-EIA方法简便,快速,整个实验不超过120分钟,是适用于临床实验诊断的理想方法。 相似文献
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ELISA检测技术在畜产品抗生素类药物残留检测中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
畜产品中药物残留主要包括抗生素类、磺胺药类、呋喃药类、抗球虫类、激素药类和驱虫药类药物.而抗生素类药物是一种应用最广、种类最多的药物,在畜产品中的残留更严重,目前对于畜产品中抗生素类药物残留的检测方法很多;ELISA检测技术因其灵敏度高,特异性强,仪器设备要求不高,测定成本低,方法快速、简便,试剂保存时间较长,自动化程度高,无放射性同位素污染等优点,成为畜产品中药物残留目前最理想的检测技术之一.就ELISA检测技术在畜产品中抗生素类药物残留检测中的应用和进展进行了归纳总结. 相似文献
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猪瘟病毒E2蛋白C端含有一段30多个疏水性氨基酸组成的跨膜区域(Transmembraneregion,TMR),用RTPCR和巢式PCR分别扩增了含不同长度TMR的猪瘟兔化弱毒E2基因,并克隆入pGEX4T1的MCS中,构建了原核表达载体pGEXTE2339(无TMR)、pGEXTE2355(1TMR)、pGEXTE2375(3TMR)。因E2基因含有大量大肠杆菌稀有密码子,选择了BL21CodonPlus(DE3)RP作为表达受体菌,结果表明pGEXTE2339、pGEXTE2355以包涵体的形式正确表达了目的蛋白,而pGEXTE2375没有明显表达。并利用pGEXTE2339、pGEXTE2355表达的融合蛋白初步建立了间接ELISA方法。 相似文献
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猪瘟兔化弱毒株E2基因的原核表达及间接ELISA的初步建立 总被引:2,自引:0,他引:2
猪瘟病毒E2蛋白C端含有一段30多个疏水性氨基酸组成的跨膜区域(Transmembrane region,TMR),用RT-PCR和巢式PCR分别扩增了含不同长度TMR的猪瘟兔化弱毒E2基因,并克隆入pGEX-4T-1的MCS中,构建了原核表达载体pGEXTE2-339(无TMR)、pGEXTE2-355(1TMR)、pGEXTE2-375(3TMR).因E2基因含有大量大肠杆菌稀有密码子,选择了BL21-CodonPlus(DE3)-RP作为表达受体菌,结果表明pGEXTE2-339、pGEXTE2-355以包涵体的形式正确表达了目的蛋白,而pGEXTE2-375没有明显表达.并利用pGEXTE2-339、pGEXTE2-355表达的融合蛋白初步建立了间接ELISA方法. 相似文献
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Mengeling WL Pirtle EC Torrey JP 《Canadian journal of comparative medicine and veterinary science》1963,27(10):249-252
In the absence of detectable cytologic changes in hog cholera virus-infected tissue culture cells, hog cholera viral antigen was readily detected by immunofluorescence. The ability to detect hog cholera viral antigen by this method allowed for determination of infectivity titers and also for titration of homologous antibody. Immunofluorescence made possible the identification, in tissue culture, of hog cholera virus from blood, serum, and spleen extracts of experimentally infected swine. Further applications of this method and its limitations are being investigated. 相似文献
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Effects of Oxyamylose and Polyacrylic Acid on Foot-and-Mouth Disease and Hog Cholera Virus Infections 总被引:2,自引:0,他引:2 下载免费PDF全文
Two interferon-inducing polycarboxylates were tested for antiviral activity on foot-and-mouth disease (FMD) virus infections in mice, guinea pigs, and swine. Polyacrylic acid, given intraperitoneally, had a protective effect on infection by FMD virus administered in the peritoneal cavity of mice and in the foot pad of guinea pigs. Chlorite-oxidized oxyamylose (COAM) was effective in mice at a dosage of 2 mg/kg. Swine were not protected against naturally transmitted FMD by 120 mg/kg of COAM nor by polyacrylic acid. Swine were not totally unresponsive to COAM since it delayed symptoms of hog cholera. Interferon was not detected in the serum of COAM-treated swine. With FMD virus, an example was found of activity of interferon inducers in experimental hosts and lack of activity in a natural host. 相似文献
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我国猪瘟病毒兔化弱毒株囊膜糖蛋白E0基因的克隆及序列测定 总被引:3,自引:0,他引:3
采用异硫氰酸胍一步法从480代猪瘟病毒兔化弱毒株(HCLV)脾毒中提取总RNA,以该RNA为模板,进行反转录,然后采用套式PCR扩增出HCLV的囊膜糖蛋白E0基因,琼脂糖凝胶电泳表明其大小与预计相符.将扩增出的E0基因克隆到pGEM-T载体中,用自动序列分析仪对其进行序列测定.将测得的序列及推导的氨基酸序列与国外测得的C株相应序列进行比较,结果发现,它们之间核苷酸序列同源性为99.08%,氨基酸序列同源性为98.42%. 相似文献