海边香豌豆胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生

将生长１４ｄ的海边香豌豆（Ｌａｔｈｙｒｕｓ ｍａｒｉｔｉｍｕｓ（Ｌ．）Ｂｉｇｅｌ）无菌苗下胚轴切成０．５ｃｍ左右的片段,置于含有１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ和０．５％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基中,２８ｄ后诱导出胚性愈伤组织。将其转入含有适当浓度２,４－Ｄ的ＭＳ培养基上,又２８ｄ后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚。诱导体细胞胚适合的２,４－Ｄ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ。较高浓度的２     

青扦胚性愈伤组织悬浮培养动力学及体细胞胚胎发生

在含１ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ,１ｍｌ／Ｌ,ＫＴ,３０ｇ／Ｌ蔗糖的５９液体培养基上建立了生长旺盛的瑶扦胚性愈伤组织悬浮系,并对胚性愈伤组织悬浮系生长,体细胞胚胎发生,底物消耗,ｐＨ值,电导率的动力学过程及各参数的相关性进行了研究。     

速生湿地松良种胚性愈伤组织诱导与增殖

为使速生湿地松良种快速大规模繁殖,对其胚性愈伤组织进行诱导和增殖优化研究.该文以1代湿地松种子园中10个速生湿地松优良无性系(基因型)的未成熟合子胚为外植体,系统研究基因型、合子胚发育阶段、基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度等不同因子对胚性愈伤组织诱导效率的影响,探讨胚性愈伤组织的增殖条件.结果表明:基因型、合子胚发...     

兴安落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究

以成熟和未成熟合子胚为外植体,研究影响兴安落叶松（Larix gmelinii）胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明兴安落叶松合子胚带胚乳培养有利于胚性愈伤组织的诱导;内蒙沙地种源成熟合子胚的诱导率显著（p<0.05）高于加格达奇山地种源;冷藏处理可以提高成熟合子胚胚性愈伤组织的诱导率;不同发育时期的未成熟合子胚的诱导率存在显著差别（p<0.05）,其中以子叶初期合子胚（7月5日）诱导率最高;2,4-D对胚性愈伤组织诱导的影响较大,且与BA、KT存在一定的协同作用;S培养基比DCR和MS培养基更有利于胚性愈伤组织的诱导;培养基中琼脂含量为4 g·L^-1时,诱导率较高。     

粗枝云杉胚性愈伤组织增殖后期的体细胞胚发生方式转变

粗枝云杉愈伤组织在增殖后期体细胞胚的分化能力显著降低,转变愈伤组织增殖方式和体细胞胚分化培养方式有利于体细胞胚发生能力的提高。采用液体悬浮增殖取代半固体增殖更有利于胚性的保持。在增殖后期,首选的体细胞胚发生方式为＂液体增殖-滤纸分化＂,其次为＂块状增殖-块状分化＂,最后是＂块状增殖-滤纸分化＂。     

生长调节剂对籼稻体细胞胚性愈伤组织发生的调控

早籼(Oryza sativa subsp indica)品种79106、珍鼎28、金早6号、87S2-3和IR_(29)的成熟种子去壳后,切下成熟胚接种于添加不同种类的生长调节剂的改良MS培养基(以MS为基本培养基,其中VitB,改为5.0mg/L、蔗糖为5.0％、琼脂固化,pH 5.8)上,恒温26±1℃、暗中诱导产生愈伤组织。每品种接种8瓶,每     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织、内含许多有分生能力的细胞团,当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力,ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其乙烯生成有关。     

红松胚性愈伤组织增殖的激素配比、糖源类型和增殖周期效应研究

为了解决红松（Pinus koraiensis）胚性愈伤组织增殖过程中生长状态差、体胚产量不高等问题,本研究利用红松胚性愈伤组织1-100细胞系为材料,通过调节红松增殖培养基中激素、碳源和增殖培养周期,探索其对红松体胚发生能力的影响及其生理生化特性变化。结果如下：①红松胚性愈伤组织最佳增殖条件激素浓度为 1 mg·L^-1 NAA+0.25 mg·L^-1 6-BA,最佳碳源为蔗糖,最佳增殖培养周期为14 d,在此条件下获得的体胚产量最多（166个·g^-1）;②在优化增殖培养过程中,储藏物质为红松体胚发生提供了能量来源;激素种类及其浓度、碳源种类、增殖培养周期之间可溶性蛋白质量分数没有显著差异;③红松愈伤组织中CAT活性过高不利于愈伤组织的体胚发生,可能是H₂O₂等代谢产物积累过多,产生毒害作用。     

青Qian愈伤组织在继代培养中的分化能力及染色体稳定性研究

青Ｑｉａｎ胚性愈伤组织在改良５９附加２,４－Ｄ及Ｋｔ及１ｐｐｍ的培养基上继代３年（每月继代１次）,仍具有旺盛的增殖能力,在胚性愈伤组织转入１／２改良５９并附加ＡＢＡ１ ｐｐｍ的分化基上,约３个月左右可分化出大量体细胞胚,体细胞胚分化率达０％以上,经继代３年的胚性愈伤组织细胞的染色体倍性十分稳定,其染色体数及核型为２ｎ＝２４＝１６ｍ（６ｓｃ）＋８ｓｍ＋２Ｂ。这一结果与由实生苗根尖压片所得结果基本一致     

石刁柏胚乳愈伤组织内胚胎发生的组织细胞学观察

石刁柏(Asparagus officinalis L.)的幼嫩胚乳接种于MS+NAA 5ppm+6-BA 1ppm和MS+NAA 1ppm+6-BA 0.5ppm的培养基上诱导产生愈伤组织。将愈伤组织转移到MS+6-BA 1ppm+NAA 0.5ppm的分化培养基上,培养30天后即可形成胚状体,组织细胞学观察表明:胚状体起源于愈伤组织内或近表层的单个胚性细胞。在胚状体发生的早期阶段,观察到与柳叶菜型和藜型胚胎发育大致相似的细胞分裂方式,从而出现了T型或线型的四个细胞的原胚。在多细胞原胚及球形胚期具有单列或不规则排列的多细胞胚柄。石刁柏胚乳愈伤组织中的胚胎发生是不同步的,在同一块愈伤组织的切片中可以观察到不同发育阶段的胚状体。在外形上还可以观察到一个子叶、两个子叶或四个子叶等多种不同形态的胚状体。一部份胚状体能发育成完整小植株。     

柑橘愈伤组织生长速度与体细胞胚胎发生的关系

为了探讨柑橘愈伤组织不能再生的原因,试图寻找柑橘愈伤组织生长速度与其体细胞胚胎发生之间的关系,对7种柑橘类型的29种基因型的愈伤组织的生长速度进行了测定,并对愈伤组织生长速度与体细胞胚胎发生之间的相关性进行了统计分析。结果表明,柑橘愈伤组织生长速度与体细胞胚胎发生之间的相关系数为r=-0.3683。由此推断在这两者之间还存在其它影响因素。     

外源腐胺对石刁柏愈伤组织胚性能力的影响

石刁柏胚性愈伤组织继代过程中,添加浓度为10 mg·L^-1的外源腐胺能有效地保持愈伤组织的胚胎发生能力,并减少愈伤组织的褐化,但不能提高愈伤组织的体细胞胚的诱导率.腐胺处理过的胚性愈伤组织的内源腐胺含量明显提高.这可能是外源腐胺保持细胞胚性、降低褐化程度的原因.     

陆地棉胚性愈伤组织的变异及高频胚胎发生

陆地棉（Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｌ．）胚性愈伤组织在两年多的继代培养过程中,由淡绿或灰色疏松状转变成灰黄色致密团块状,胚胎发生能力经历了一个由低到高再到低的过程。培养两年半后,从中分离出３种不同的愈伤组织系。第一种可产生大量的胚状体;第二种可产生少量胚状体;而第三种失去了胚胎发生能力。第一种团块颗粒小,后两种团块颗粒大。通过选择培养第一种愈伤组织系,建立了３ 个陆地棉栽培品种的高频体细胞胚胎发生系。染色体观察显示：其变异频率随愈伤组织培养代数的增加而升高;３ 种不同的愈伤组织系中,二倍体细胞的频率大小依次为：第一种＞ 第二种＞ 第三种。此外,第一种含有较多的超二倍体细胞,而后两种含较多亚二倍体细胞     

安祖花胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

为构建安祖花(Anthurium andreanum)胚性愈伤组织再生体系,以3个盆栽品种幼嫩叶片和叶柄为外植体,分析了基本培养基、植物生长调节剂组合和培养条件等因素的影响。结果表明,安祖花胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS3+1.5 mg L–1 2,4-D+0.5 mg L–1 KT+4%蔗糖+2%葡萄糖+0.25%Phytagel,且胚性愈伤组织诱导能力差异显著,表现为?粉冠军??罗宾奴??冠军?和叶片叶柄,其中?粉冠军?叶片的胚性愈伤组织诱导率可达57.9%。胚状体分化的最佳培养基为1/2改良MSa+2%蔗糖+0.25%Phytagel,其中?粉冠军?叶片诱导的胚状体分化率可达31.6%,且在光、暗下分化率的差异不显著。分化苗移栽后的成活率可达100%。     

柑橘愈伤组织倍性变化及其与体细胞胚胎发生能力的关系

柑橘愈伤组织是细胞融合、遗传转化等生物技术研究的良好材料。本实验室通过近20年的工作,先后诱导和保存了近80份不同种类和品种的柑橘愈伤组织。这些愈伤组织在MT基本培养基上继代保存。在长期保存过程中,部分材料仍然保持较好的胚胎发生能力。为研究愈伤组织在继代过程中的染色体变异趋势以及这种变异对胚胎发生能力的影响,本文选择有代表性的35份材料作为试材,在4年中连续3次使用流式细胞仪,对细胞DNA含量进行测定。结果发现,待测的35种愈伤组织均存在部分细胞DNA含量加倍的现象,而且,随着时间的推移,除佩奇橘柚、沙漠蒂甜橙、鲁斯脐橙、印度酸橘等4种愈伤组织的DNA含量加倍的细胞有减少的趋势外,其他愈伤组织的DNA含量加倍的细胞均有增加的趋势。数据分析表明,在待测的35种愈伤组织中,有71．4％的基因型的愈伤组织细胞出现了多倍体细胞增加的趋势。对这35种柑橘愈伤组织进行体细胞胚诱导,发现只有9种愈伤组织具有不同程度的胚胎发生能力,其他26种愈伤组织不能再生。相关性分析表明,柑橘愈伤组织细胞DNA含量增加的细胞比例与体细胞胚胎发生能力之间的相关性较小,相关系数为忙-0．10（P〈0．01）,未达到显著水平。另外,柑橘胚性愈伤组织继代时间与体细胞胚胎发生能力之间的相关性也不显著。     

多胺对宁夏枸杞愈伤组织器官发生和体细胞胚发生的影响

利用已建立的宁夏枸杞（Lycium barbarumL.)愈伤组织器官发生和体细胞胚发生体系,对多胺在其离体形态发生中的作用进行研究。通过检测内源多胺含量发现,在所研究的三种多胺中,Put是器官发生途径的主要多胺,而在体细胞胚发生途径Spd含量占优势。Put含量变化在两条途径中相似：在愈伤组织分化的早期迅速积累不仅又下降,随着芽原基和球形胚的形成含量又进一步上升。器官发生中Spd最高含量仅在培养的第一天后,Spd含量才开始上升,到第十天时达到最高值。三种外源多胺的添加均有有效地促进两种离体分化途径的形态建成：Spd(100 μmol/L）能显著增加不定芽数,而体细胞胚发生中Spd(100μmol/L）而Put（100μmol/L）的单独处理能最好地促进体细胞胚形成和进一步发育成苗;尽管Spm在离体形态发生中含量较低,但添加外源Spm也促进了不定芽形成和体细胞胚形成然后成苗。多胺生物合成抑制剂CHA处理阻碍不定芽形成和和体细胞胚的进一步发育;但是MGBG对器官发生途径中的形态建成没有影响,即降低体细胞胚的发生频率及再生苗数。添加Spd(50μmol/L)能部分逆转CHA、MGBG的抑制效应。以上结果表明,多胺对宁夏枸杞器官发生和体细胞胚发生途径的离体形态建成有一定影响。     

多胺对宁夏枸杞愈伤组织器官发生和体细胞胚发生的影响

利用已建立的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)愈伤组织器官发生和体细胞胚发生体系,对多胺在其离体形态发生中的作用进行研究.通过检测内源多胺含量发现,在所研究的三种多胺中,Put是器官发生途径的主要多胺,而在体细胞胚发生途径Spd含量占优势.Put含量变化在两条途径中相似在愈伤组织分化的早期迅速积累不久又下降,随着芽原基和球形胚的形成含量又进一步上升.器官发生中Spd最高含量仅在培养的第一天出现;而从诱导愈伤组织发生体细胞胚的第一天后,Spd含量才开始上升,到第十天时达到最高值.三种外源多胺的添加均能有效地促进两条离体分化途径的形态建成Spd(100μmol/L)能显著增加不定芽数,而体细胞胚发生中Spd(10μmol/L)或Put(100μmol/L)的单独处理能最好地促进体细胞胚形成和进一步发育成苗;尽管Spm在离体形态发生中含量较低,但添加外源Spm也促进了不定芽形成和体细胞胚形成然后成苗.多胺生物合成抑制剂CHA处理阻碍不定芽形成和体细胞胚的进一步发育;但是MGBG对器官发生途径中的形态建成没有影响,却降低体细胞胚的发生频率及再生苗数.添加Spd(50μmol/L)能部分逆转CHA、MGBG的抑制效应.以上结果表明,多胺对宁夏枸杞器官发生和体细胞胚发生途径的离体形态建成有一定影响.     

拟南芥胚愈伤组织诱导和植株再生

CullusInductionandPlantletRegenerationinEmbryoExplantsofAra－bidopsisthalianaLIXiU-Ru(BeijingAgriculturalCollege,Beijing102206)##D1植物名称拟南芥（Arabidopsisthaliana）。2材料类别胚。3培养条件（1）愈伤组织诱导培养基：B5或1／2MS＋2,4－D0．5mg·L－1（单位下同）＋BA0．05十2％蔗糖或葡萄糖;（2）诱导生芽培养基：B5、MS或1／2MS＋2,4-D0．05＋BA0．5＋3％蔗糖;（3）诱导生根培养基：1／2MS＋2,4-D1．0。将种子表面消毒后,接种在B5培养基上,1天后剥胚,将胚接种在培养基（1）上进行愈伤组织诱导。…     

金花茶花药愈伤组织的体细胞减数分裂

金花茶的小孢子单核期花药,经培养的继代培养６个月后的愈伤组织中,发现有少量体细胞进行减数分裂。在减数第一和第二次分裂中,同源染色体的配对和分离基本正常,最后形成四分体。该愈伤组织经石革切片和压片观察,发现其主要由大量的液化细胞和贮藏细胞所组成,此外,还有少部分分生细胞。没有发现进一步的分化。其染色体数目,２ｎ＝３０者占７１．７％,其余则为非整倍体。     

低温胁迫下甘肃黄花烟草愈伤组织的抗氰呼吸

继代培养的ｉｃｏｔｉｏｎｏ ｒｕｓｉｔｏａ Ｌ．ｃｖ．Ｇａｎｓｕ Ｙｅｌｌｏｗ Ｆｌｏｗｅｒ）愈伤组织经低温（４℃）处理后,交替途径容量９Ｖａｌｔ）和实际运行量（ρＶａｈ）均被显著地诱导,同时其电子传递途径也在发生交替变化。低温胁迫开始时以细胞色素途径为主,至第２天时则以交替途径为主,并一直持续到第５天,以后则又转为经细胞色素途径为主,而对照却始终以细胞色素途径为主。经放红菌酮或氯霉素处理后,受低